培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動態(tài)變化

培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動態(tài)變化（必修3P68）探究當前1頁，總共19頁。酵母菌出芽生殖酵母菌的新陳代謝類型：兼性厭氧型無氧呼吸C6H12O6＋6H2O＋6O2

6CO2＋12H2O＋能量酶有氧呼吸C6H12O6

2C2H5OH＋2CO2＋能量酶當前2頁，總共19頁。一、實驗?zāi)康?．通過探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化，嘗試建構(gòu)種群增長的數(shù)學(xué)模型。2．用數(shù)學(xué)模型解釋種群數(shù)量的變化。3．學(xué)會使用血球計數(shù)板進行計數(shù)。當前3頁，總共19頁。二、實驗原理1、酵母菌可以用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的酵母菌種群的增長情況與培養(yǎng)液中的成分、空間、PH、溫度等因素有關(guān)，我們可以根據(jù)培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量和時間為坐標軸做曲線，從而掌握酵母菌種群數(shù)量的變化情況。

2、利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)是一種常用的細胞計數(shù)法，這種方法可以直接測定樣品中全部的細胞數(shù)目，所以一般用于單細胞微生物數(shù)量的測定，由于血球計數(shù)板上的計數(shù)室蓋上蓋玻片后的容積是一定的，所以可根據(jù)在顯微鏡下觀察到的細胞數(shù)目來計算單位體積的細胞的總數(shù)。

當前4頁，總共19頁。是由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四條下凹的槽，構(gòu)成三個平臺。中間的平臺較寬，其中間又被一短橫槽隔為兩半，每半邊上面，刻有一個方格網(wǎng)。當前5頁，總共19頁。XB-K-25為計數(shù)板的型號和規(guī)格，表示此計數(shù)板分25個中格；0.1mm為蓋上蓋玻片后計數(shù)室的高；1/400mm2表示計數(shù)室面積是1mm2，分400個小格，每小格面積是1/400mm2。血細胞計數(shù)板的使用原理方格網(wǎng)當前6頁，總共19頁。方格網(wǎng)上刻有9個大方格，其中只有中間的一個大方格為計數(shù)室，供微生物計數(shù)用。這一大方格的長和寬各為1mm，深度為0.1mm，其體積為0.1mm3。當前7頁，總共19頁。每個大方格中有16個中格或25個中格計數(shù)室通常有兩種規(guī)格。

一種是大方格內(nèi)分為16中格，每一中格又分為25小格；另一種是大方格內(nèi)分為25中格，每一中格又分為16小格。當前8頁，總共19頁。

25*16規(guī)格的，通常數(shù)五個中方格的總菌數(shù)（五點取樣），然后求得每個小方格的平均值，再乘上400，就得出一個大方格中的總菌數(shù)，然后再換算成10ml菌液中的總菌數(shù)。16*25數(shù)四個中方格（對角線）每1ml菌液中所含的酵母菌個數(shù)：酵母細胞數(shù)/ml=80小格內(nèi)酵母細胞個數(shù)/80×400×104×稀釋倍數(shù)（25×16）酵母細胞數(shù)/ml=100小格內(nèi)酵母細胞個數(shù)/100×400×104×稀釋倍數(shù)（16×25）當前9頁，總共19頁。例1、檢測員將1mL水樣稀釋10倍后，用抽樣檢測的方法檢測每毫升藍藻的數(shù)量，已知每個計數(shù)室由25×16＝400個小格組成，容納液體的總體積為0．1mm3?，F(xiàn)觀察到圖中該計數(shù)室所示a、b、c、d、e5個中格80個小格內(nèi)共有藍藻n個，則上述水樣中約有藍藻

個／mL。（參考答案：5n×105

）當前10頁，總共19頁。1．鏡檢計數(shù)室。在加樣前，先對計數(shù)板的計數(shù)室進行鏡檢。若有污物，則需清洗，吹干后才能進行計數(shù)；血細胞計數(shù)板使用的方法步驟2．加樣品。將清潔干燥的血球計數(shù)板的計數(shù)室上加蓋專用的蓋玻片，用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入，一次性充滿計數(shù)室，防止產(chǎn)生氣泡，充入細胞懸液的量以不超過計數(shù)室臺面與蓋玻片之間的矩形邊緣為宜。多余培養(yǎng)液可用濾紙吸去；當前11頁，總共19頁。3．計數(shù)稍待片刻（約5min），待酵母菌細胞全部沉降到計數(shù)室底部后，將計數(shù)板放在載物臺的中央，先在低倍鏡下找到計數(shù)室所在位置后，再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察、計數(shù)并記錄。當前12頁，總共19頁。三、實驗探究過程（一）提出問題：培養(yǎng)一種酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時間變化的？（二）作出假設(shè)：環(huán)境中的資源和空間有限的條件下，酵母菌種群的數(shù)量呈S型增長。（三）設(shè)計實驗①全班同學(xué)分成甲、乙、丙等若干實驗組。②分別用等量培養(yǎng)液，在相同適宜環(huán)境中培養(yǎng)等量酵母菌。③每天用血球計數(shù)板，采用抽樣檢測的方法計數(shù)一個小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量并作記錄，連續(xù)7天。④7天后，各組向全班匯報本小組7天的數(shù)據(jù)，算出每一天數(shù)據(jù)的全班平均值，根據(jù)平均值畫出酵母菌種群數(shù)量的增長曲線。當前13頁，總共19頁。（四）實驗過程1、材料用具：

探究所需要的菌種和無菌馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液、試管、血球計數(shù)板（1mm×1mm×0．1mm方格）、滴管、顯微鏡等。2、方法步驟和記錄：（1）取相同試管若干支，分別加入5ml肉湯培養(yǎng)液，塞上棉塞。（2）用高壓鍋進行高壓蒸汽滅菌后冷卻至室溫，標記甲、乙、丙等（3）將酵母菌母液分別加入試管各5ml，搖勻后用血球計數(shù)板計數(shù)起始酵母液個數(shù)，做好記錄。（4）將各試管送進恒溫箱，25℃下培養(yǎng)7天。3、現(xiàn)象觀察每天同一時間，各組取出本組的試管，用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌個數(shù)，并作記錄，連續(xù)觀察7天。當前14頁，總共19頁。培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量7天中的變化記錄表

菌數(shù) 時間當前15頁，總共19頁。（五）實驗結(jié)論1、根據(jù)表格平均值，以時間為橫坐標，酵母菌的數(shù)量為縱坐標，繪制出培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量7天中的變化曲線（種群增長曲線）。2、培養(yǎng)液酵母菌種群數(shù)量隨時間呈S型增長變化。當前16頁，總共19頁。四、實驗討論2．從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前，建議你將試管輕輕震蕩幾次。這是為什么？

－－使酵母菌在試管里分布均勻，提高計數(shù)的代表性和準確性。3．本探究需要設(shè)置對照嗎？如果需要，請討論說明怎樣設(shè)計；如不需要，請說明理由。

－－不需要，該實驗在時間上形成前后對照。只要分組重復(fù)實驗，獲得平均數(shù)值，求得準確即可。4．需要做重復(fù)實驗嗎？

－－需要，提高數(shù)據(jù)的準確性。5．怎樣記錄結(jié)果？記錄表怎樣設(shè)計？（見上表）每天同一時間，各組取出本組的試管，用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌個數(shù)，并作記錄，連續(xù)觀察7天。記錄表（見上表）6．如果一個小方格內(nèi)酵母菌過多，難以數(shù)清，應(yīng)當采取怎樣的措施？

－－增加稀釋的倍數(shù)。7．對于壓在小方格界線上的酵母菌，應(yīng)當怎樣計數(shù)？

－－應(yīng)計數(shù)同側(cè)相鄰兩邊上的菌體數(shù)，另兩邊不計數(shù)。當前17頁，總共19頁。練習(xí)：某生物興趣小組開展探究實驗，課題是：“培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量與時間的變化關(guān)系”。實驗材料、用具：菌種和無菌培養(yǎng)液、試管、血球計數(shù)板（2mm×2mm方格）、滴管、顯微鏡等。酵母菌的顯微計數(shù)方法：①血球計數(shù)板：是帶有微小方格刻度的玻璃片，用于在顯微鏡下對微生物的計數(shù)。②將含有酵母菌的培養(yǎng)滴在計數(shù)板上，計算一個小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量，再以此為根據(jù)，估算試管中的酵母菌總數(shù)。連續(xù)觀察7d，并記錄每天的數(shù)量。根據(jù)以上敘述回答下列問題：當前18頁，總共19頁。（1）根據(jù)所學(xué)知識，該課題的實驗假設(shè)是：開始一段時間酵母菌呈“J”型增長，隨著時間的推移，＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，酵母菌呈“S”型增長。（2）本實驗沒有設(shè)置對照實驗，原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。該實驗是否需要重復(fù)實驗？＿＿＿＿，試解釋原因＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。（3）在吸取培養(yǎng)液計數(shù)前，要輕輕振蕩幾次試管，原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。該如果一個小方格內(nèi)酵母菌過多，難以數(shù)清，應(yīng)當采取的措施是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。（4）請你設(shè)計表格處理實驗數(shù)據(jù)。（5）在該實驗的基礎(chǔ)上，根據(jù)你對影響酵母菌種群生長的因素的推測，進一步確定一個探究實驗的課題：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿