在腫瘤學研究中的應用

在腫瘤學研究中的應用第1頁/共370頁應用范圍實體腫瘤DNA倍體的FCM分析腫瘤病理的FCM分析腫瘤分子生物標志物的FCM分析細胞增殖和凋亡的FCM分析第2頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析理論依據(jù)G0期不參與增殖周期循環(huán)的一群細胞，

即為靜止期細胞，其細胞DNA含量為較恒定的2C值（一）細胞周期第3頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析理論依據(jù)G1期細胞具有增殖活性，參與細胞周期循環(huán)的一群細胞G1期細胞值與

G0

期細胞DNA值相同，均為二倍體DNA含量（一）細胞周期第4頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析理論依據(jù)S期細胞DNA含量值逐漸增加，從2C

值~4C值直到細胞DNA倍增結(jié)束（一）細胞周期第5頁/共370頁G2/M期在M期分裂為兩個子細胞之前，G2和M期細胞的DNA

含量均為恒定的4C值，即為四倍體細胞群實體腫瘤DNA倍體的FCM分析理論依據(jù)（一）細胞周期第6頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析理論依據(jù)（二）熒光染料與細胞DNA的關系熒光染料可與細胞DNA特異性結(jié)合，并有一定的量效關系1DNA含量的多少與熒光染料的結(jié)合成正比2熒光強度與DNA吸收熒光分子多少成正比第7頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析理論依據(jù)（二）熒光染料與細胞DNA的關系3熒光脈沖與組方圖的通道值成正比因此，F(xiàn)CMDNA定量分析一個細胞群時，可將二倍DNA含量分布組方圖分為三部分，即G0/G1，S，G2/

M。G0/G1和G2/

M細胞峰DNA的分布均成正態(tài)分布。S期可以認為是一個加寬的正態(tài)分布

第8頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析G1SphaseG2MG112

1DNAcontentTheCellCycleG0/1G2/MS第9頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析DNA含量的計算方法1FCM定量分析一個細胞群，其DNA含量值是以DNA指數(shù)(DNAindex:DI)表示其相對DNA含量的

實驗樣品細胞G0/1峰的均道值

DI=---------------------------------------

正常細胞G0/1峰的均道值第10頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析DNA含量的計算方法2一個正常的二倍體細胞峰，其G0/G1期細胞DNA含量為2C，DI值為1.0，G2/

M期細胞DNA含量為4C，DI值為2.0第11頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析DNA含量的計算方法例如如果一個未知DNA含量的細胞群G0/G1期細胞峰的均道值在60道，正常二倍體標準細胞G0/G1峰均道值也在60道，那么，這個未知DNA含量的細胞群DI=1.0。如果一個未知DNA含量的細胞群G0/Gl峰均道值在90道，DI=1.50第12頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析DNA倍體的判定標準DNA倍體的判定是根據(jù)所測細胞群DNA含量分布組方圖G0/G1峰的DNA相對含量值，即DNA指數(shù)值進行判定的，從理論上講，二倍體的DI值應為1.0，四倍體的DI值應為2.0第13頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析DNA倍體的判定標準以二倍體參考標準細胞G0/G1期細胞DNA含量定為2C值,DI=1.0，基于標準二倍體細胞的CV值在5%，判定標準即：

DNA二倍體＝2C士2CV值

DNA異倍體≠2C士2CV值第14頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析DNA倍體的判定標準

即DI＝1.0士0.1(0.9－1.10)為二倍體

DI＝1.0士0.15(0.85－1.15)為近二倍體

DI=2.0士2CV(1.90－2.10)為四倍體

DI>2.10多倍體

其余DI值均為非整倍體在計算DNA異倍體時，把近二倍體，多倍體，四倍體，非整倍體劃為異倍體(Heteroploidy)的范疇第15頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體的組方圖類型自FCM被引入腫瘤研究以來,已經(jīng)對各類型新鮮腫瘤組織和石蠟包埋腫瘤組織進行DNA倍體的定量分析,為研究腫瘤DNA含量的分布狀態(tài),提供了非常直觀的參考信息第16頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體的組方圖類型DNA組方圖常見的類型以單一DNA干系多見,說明腫瘤的發(fā)生多以單一細胞克隆發(fā)生而來。我們對3050例惡性腫瘤DNA倍體分析結(jié)果顯示,單一DNA干系的組方圖占80-90%左右,雙干系或多干系的DNA組方圖較少見

第17頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體的組方圖類型第18頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體的組方圖類型第19頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體的組方圖類型第20頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體的組方圖類型第21頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體的組方圖類型第22頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體的組方圖類型第23頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體的組方圖類型第24頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析DNA含量檢測結(jié)果報告報告中至少應包含以下信息:(1)DNA倍體,包括所有群體的DI(2)主要G1峰的CV(3)S期比例(4)必要的簡單評價：如細胞數(shù)的不足、碎片較多、CV太高等

第25頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌㈡腎細胞癌㈢前列腺癌

第26頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌

FCM與膀胱癌的診斷

FCM在膀胱癌術(shù)后隨訪的作用

FCM在判定膀胱癌的惡性程度中的作用

FCM在預測膀胱癌的復發(fā)和預后中的作用FCM在指導膀胱癌的治療中的作用第27頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌膀胱癌是泌尿系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，其癌細胞的分裂增殖能力異?；钴S，細胞的DNA含量多有不同程度的增高第28頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌

標本來源經(jīng)膀胱鏡或尿管沖洗膀胱脫所獲標本含細胞數(shù)較多，可提供良好的FCM檢測標本，但需受器械檢查之苦，尤其在隨訪中需多次留取標本，病人往往難于接受，所以，唯新鮮尿標本才是真正的非侵入性檢查方法第29頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌

標本來源應用尿液作FCM檢測診斷膀胱癌是否可獲得滿意結(jié)果尚有爭議White等曾報告86例膀脫腫瘤患者的尿液和膀脫沖洗液作FCM檢測，94%的尿液標本和97%的膀脫沖洗液得到了滿意的圖形

第30頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌

標本來源Pritchete等亦采用新鮮尿與膀脫沖洗液標本，發(fā)現(xiàn)兩者在圖形顯示及腫瘤檢出率方面無明顯差異第31頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌

標本來源本研究室曾對l01例膀脫腫瘤患者作FCM檢測，其中78例取300-500ml新鮮尿液，23例取膀胱鏡沖洗液，結(jié)果發(fā)現(xiàn)腫瘤檢出率分別為84.61%和86.95%，兩組數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學處理無明顯差異第32頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌

標本來源所以我們認為，新鮮尿標本適用于做FCM標本，對標本細胞數(shù)少，圖形不滿意者，可取膀脫沖洗液

第33頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌膀胱沖洗液的收集方法經(jīng)膀脫鏡或尿?qū)Ч芟虬蛎搩?nèi)加壓注入生理鹽水100-200ml，反復抽吸3-4次，收集的沖洗液應立即放入4℃冰箱內(nèi)冷藏，存放時間不應超過24小時。若標本中含紅細胞，可采用加蒸餾水的低滲方法去除第34頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌

膀胱沖洗液的收集方法將收集到的尿液或膀脫沖洗液離心后，PBS緩沖液沖洗2次，用細尼龍網(wǎng)過濾以去除標本中雜質(zhì)或細胞團塊，離心棄上清液后用70%酒精固定，放－10℃冰箱貯存，最長貯存時間可達6個月第35頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌

FCM與膀胱癌的診斷

FCM在膀胱癌術(shù)后隨訪的作用

FCM在判定膀胱癌的惡性程度中的作用

FCM在預測膀胱癌的復發(fā)和預后中的作用FCM在指導膀胱癌的治療中的作用第36頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（FCM對膀胱癌的診斷）

FCMDNA倍體分析診斷膀胱癌的標準：①出現(xiàn)與正常二倍體峰明顯分離的異倍體或近二倍體波型②高倍體細胞比值<15%伴明顯四倍體細胞組成的波型③G0/l波型變異系數(shù)<9%凡出現(xiàn)上述標準之一者為FCM腫瘤陽性第37頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（FCM對膀胱癌的診斷）

FCMDNA倍體分析診斷膀胱癌的標準：可疑：無明顯異倍體細胞群，超二倍體細胞群大于10－15%之間陰性：二倍體分布，超二倍體細胞<10%

注：異倍體波型包括非整倍體、多倍體和高四倍體。近二倍體是指DI在1.11－1.15范圍內(nèi)的G0/1期細胞組成的異常波型第38頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（FCM對膀胱癌的診斷）

FCMDNA倍體分析診斷膀胱癌的結(jié)果：FCM診斷膀胱癌有較高的敏感性和特異性，其陽性率與腫瘤的病理分級和浸潤深度呈正相關。Klein對194例膀胱癌沖洗液作FCM測定，F(xiàn)CM平均腫瘤檢出率93%第39頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（FCM對膀胱癌的診斷）

FCMDNA倍體分析診斷膀胱癌的結(jié)果：我室曾對101例膀胱癌新鮮尿液和膀胱沖洗液作FCM測定。表淺癌組織58例(TA)，其中異倍體24例(41.38%)，F(xiàn)CM檢出陽性率79.3I%，浸潤癌組織43例(T1-T4)，其中異倍體37例(86.04%)，F(xiàn)CM陽性率95.34%第40頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（FCM對膀胱癌的診斷）

FCMDNA倍體分析診斷膀胱癌的結(jié)果：由此可見，低分期膀胱癌，F(xiàn)CM異倍體率低，而高分期腫瘤，F(xiàn)CM腫瘤檢出率及異倍體率明顯增高第41頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（FCM對膀胱癌的診斷）

FCMDNA倍體分析的特點：1FCM能夠?qū)⒓毎螒B(tài)尚沒有特征性改變而核內(nèi)

DNA含量有異常增加的瘤細胞檢測出來

2發(fā)生變性的瘤細胞由于形態(tài)改變,在尿細胞學檢查不能得也確診，但其細胞核DNA分子尚無降解破壞，因此，F(xiàn)CM仍能測得第42頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（FCM對膀胱癌的診斷）

FCMDNA倍體分析的特點：3FCM通過細胞DNA含量和細胞動力學等多種指標對腫瘤細胞進行判斷，具有客觀性強，靈敏度高等優(yōu)點第43頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（FCM對膀胱癌的診斷）

FCMDNA倍體分析的特點：4FCM及尿細胞學兩種方法都有一定比率的假陰性和假陽性病例，F(xiàn)CM出現(xiàn)假陰性常由一些二倍體腫瘤，對于假陽性的病例，常由于一些嚴重感染的泌尿道炎癥，但仍要做認真的隨訪第44頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（FCM對膀胱癌的診斷）雙參數(shù)分析：

有作者對抗膀胱癌單克隆抗體和瘤組織DNA成分行雙標記染色，并作FCM檢測，根據(jù)DNA含量及腫瘤相關抗原的出現(xiàn)對腫瘤的生物學性質(zhì)進行評估第45頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（FCM對膀胱癌的診斷）由于單抗僅與腫瘤細胞相結(jié)合，特異性高，故此法完全去除標本中混雜的炎性細胞對檢測結(jié)果的影響使一些少量的異倍體細胞(用FCMDNA單染色法可忽略)能夠檢測出來，使腫瘤診斷率明顯提高第46頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（FCM對膀胱癌的診斷）

FCMDNA倍體分析的特點：將尿細胞學檢查與FCMDNA倍體分析兩種方法聯(lián)合應用，相輔相成，可望使診斷率進一步提高第47頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌

FCM與膀胱癌的診斷

FCM在膀胱癌術(shù)后隨訪的作用

FCM在判定膀胱癌的惡性程度中的作用

FCM在預測膀胱癌的復發(fā)和預后中的作用FCM在指導膀胱癌的治療中的作用第48頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（FCM對膀胱癌術(shù)后隨訪的作用）

FCM特別適用于膀胱腫瘤的術(shù)后隨訪，膀胱鏡檢和尿細胞學均陰性者，F(xiàn)CM仍可顯示腫瘤陽性第49頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（FCM對膀胱癌術(shù)后隨訪的作用）

Klein等觀察21例此類患者，除FCM檢出腫瘤陽性外，其他方法均未發(fā)現(xiàn)腫瘤，隨訪2-I2個月，有11例出現(xiàn)肉眼可見腫瘤。該作者認為FCM能在出現(xiàn)肉眼可見膀胱腫瘤之前12-18個月測出異常

第50頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（FCM對膀胱癌術(shù)后隨訪的作用）

王澤等應用FCM對膀胱癌術(shù)后病人進行檢測，發(fā)現(xiàn)在FCM陽性而膀胱鏡檢查陰性者，約78%的病例經(jīng)過3－25個月后作膀脫鏡證實腫瘤復發(fā)，而FCM和膀胱鏡檢查均陰性的病例，再次膀胱鏡檢查診斷為腫瘤復發(fā)者僅3.7%

第51頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（FCM對膀胱癌術(shù)后隨訪的作用）

這提示膀脫沖洗液FCM檢測，在診斷膀胱腫瘤復發(fā)上明顯優(yōu)于膀胱鏡檢查，是膀胱癌術(shù)后監(jiān)測較為理想的方法

第52頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌

FCM與膀胱癌的診斷

FCM在膀胱癌術(shù)后隨訪的作用

FCM在判定膀胱癌的惡性程度中的作用

FCM在預測膀胱癌的復發(fā)和預后中的作用FCM在指導膀胱癌的治療中的作用第53頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（判定膀胱癌的惡性程度）

膀胱癌異倍體發(fā)生率與膀胱癌的分級和分期均顯著相關，即隨著腫瘤病理分期或分級的進展，異倍體腫瘤的檢出率逐漸增高第54頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（判定膀胱癌的惡性程度）

Lemblomions等發(fā)現(xiàn)病理分化Ⅱ級DNA二倍體組五年生存率為85%，接近分化I級膀胱癌。而病理Ⅱ級異倍體組5年生存率僅為50%，兩者有顯著差異第55頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（判定膀胱癌的惡性程度）

有作者對142例FCM結(jié)果分析，42例病理分期為T0和T1腫瘤中，81%為二倍體，而98例T2、T3和T4期腫瘤，77%表現(xiàn)為異倍體，特別是T4期腫瘤全部為異倍體第56頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（判定膀胱癌的惡性程度）

隨著病理分期的增高，不但異倍體腫瘤的檢出率增加，而且異倍體腫瘤的DNA倍體類型也發(fā)生明顯變化，四倍體腫瘤的檢出率逐漸下降，非整倍體的檢出率逐漸上升第57頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（判定膀胱癌的惡性程度）

上述現(xiàn)象提示腫瘤在其發(fā)生、發(fā)展過程中DNA倍體可能存在一種特定的變化規(guī)律，即腫瘤細胞DNA倍體類型按照二倍體→四倍體→單異倍體→多異倍體的生物模式發(fā)生變化第58頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（判定膀胱癌的惡性程度）

小結(jié)：

1FCMDNA倍體分析可作為一種有較高價值判定膀胱腫瘤惡性程度的手段2低分級、表淺癌者多為二倍體，惡性程度較低，瘤細胞生長緩慢3幾乎所有的高分級膀胱癌為異倍體，具有較高的惡性程度，腫瘤細胞增殖旺盛第59頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌

FCM與膀胱癌的診斷

FCM在膀胱癌術(shù)后隨訪的作用

FCM在判定膀胱癌的惡性程度中的作用

FCM在預測膀胱癌的復發(fā)和預后中的作用FCM在指導膀胱癌的治療中的作用第60頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（預測膀胱癌的復發(fā)和預后）

FCM可用來監(jiān)測膀胱癌患者術(shù)后情況，并根據(jù)瘤細胞DNA含量的變化對預后作出推斷，與腫瘤的分期和分級互為補充，成為重要的預后指標之一第61頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（預測膀胱癌的復發(fā)和預后）

有作者對165例膀胱癌行FCM檢測，發(fā)現(xiàn)75例二倍體腫瘤中有14例腫瘤復發(fā)(18%)，90例異倍體腫瘤中有69例腫瘤復發(fā)（76.7%），后者為前者的4.1倍第62頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（預測膀胱癌的復發(fā)和預后）

對上述165例膀胱癌患者隨訪，在75例二倍體腫瘤中，死亡者10例(33%)，平均存活時間為42個月，90例異倍體腫瘤死亡61例(67.8%)，其中四倍體腫瘤死亡14例，占其總數(shù)的50%，平均存活時間為21.3個月，多異倍體腫瘤11例全部死亡，平均存活時間為13.4個月第63頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（預測膀胱癌的復發(fā)和預后）

Gustafson等對222例表淺性膀胱癌作FCM分析，根據(jù)瘤細胞DNA含量不同將病人分為2組，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：異倍體組的腫瘤復發(fā)率比二倍體組高出2倍Tribukait的研究結(jié)果表明，二倍體腫瘤、四倍體腫瘤、單異倍體腫瘤和多倍體腫瘤的五年生存率分別為91%、83%、59%和30%以上第64頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（預測膀胱癌的復發(fā)和預后）

小結(jié)：

二倍體膀胱癌患者的預后明顯優(yōu)于異倍體腫瘤患者，異倍體的出現(xiàn)預示腫瘤復發(fā)率高最終將發(fā)展為浸潤性病變，是預后不良的征象。在異倍體腫瘤中，四倍體腫瘤患者的預后相對較好，非整倍體腫瘤患者的預后較差，尤其多異倍體患者的預后最差第65頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌

FCM與膀胱癌的診斷

FCM在膀胱癌術(shù)后隨訪的作用

FCM在判定膀胱癌的惡性程度中的作用

FCM在預測膀胱癌的復發(fā)和預后中的作用

FCM在指導膀胱癌的治療中的作用第66頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（指導膀胱癌的治療）

FCM可以監(jiān)測膀胱內(nèi)灌注化療藥物的治療效果，治療有效時膀脫癌的異倍體腫瘤消失，二倍體細胞重新出現(xiàn)第67頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（指導膀胱癌的治療）一組36例膀胱癌化療資料表明：未經(jīng)膀胱內(nèi)化療者異倍體率為100%，而治療組僅47%可測出異倍體第68頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（指導膀胱癌的治療）

Habjis-stirous等對24例多發(fā)性表淺膀胱癌采用絲裂霉素C膀胱內(nèi)灌注，并于用藥前后多次取尿液或膀胱沖洗液行FCM連續(xù)測定，19例無復發(fā)者，細胞內(nèi)DNA含量由治療前的異倍體轉(zhuǎn)變?yōu)槎扼w分布，而5例6個月內(nèi)復發(fā)者，則呈持續(xù)異倍體第69頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌（指導膀胱癌的治療）

FCMDNA倍體的異常變化早于能觀察到復發(fā)跡象的任何其他方法，因而可篩選出對膀胱內(nèi)化療無效者并及早改行根治性治療。FCM靈敏度較高，可根據(jù)測定結(jié)果確定有效藥物，調(diào)整用藥劑量和選擇化療最佳時機第70頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌㈡腎細胞癌㈢前列腺癌

第71頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用（二）腎細胞癌腎細胞癌的預后很差，根治性腎切除后仍有50%的患者死于轉(zhuǎn)移。腫瘤的分期、分級雖為重要的預后指標，但尚不能反映腎腫瘤的生物學行為第72頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用（二）腎細胞癌

Ljungherg對55例腎細胞癌研究，33例腎切除術(shù)后生存10年以上者，32例DNA含量為二倍體或近二倍體，22例術(shù)后4年內(nèi)死亡，全部為異倍體。另23例已有轉(zhuǎn)移的，10例二倍體或近二倍體者9例生存，13例異倍體者僅1例生存。第73頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用（二）腎細胞癌

Otto對68例Ⅰ~Ⅲ期腎癌患者行FCM測定，其中33例DNA二倍體者，7例出現(xiàn)轉(zhuǎn)移（21%）。35例異倍體中，31例在1~4年內(nèi)出現(xiàn)轉(zhuǎn)移（89%）第74頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用（二）腎細胞癌腎細胞癌的臨床分期和病理分級與DNA倍體具有相關性。二倍體或近二倍體患者多為局限于腎臟早期病變，病理分級較低(Ⅰ-Ⅱ級)，轉(zhuǎn)移發(fā)生少，存活時間長。呈異倍體分布者，常為高分級腫瘤(Ⅲ-Ⅳ級)，較早出現(xiàn)轉(zhuǎn)移，存活時間短第75頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用（二）腎細胞癌原發(fā)性腎癌和轉(zhuǎn)移性腎癌的DNA倍體特別令人注目，在轉(zhuǎn)移性腎癌中約40%的DNA倍體特性不同于原發(fā)性腫瘤第76頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用（二）腎細胞癌Tribuhit指出轉(zhuǎn)移性腎癌細胞DNA倍體特性也具有判斷患者預后的意義，故建議對轉(zhuǎn)移性腎癌開展DNA倍體檢測。該作者認為，對二倍體轉(zhuǎn)移性腎癌除進行腎切除外，應盡量清除肉眼可見的轉(zhuǎn)移灶，對異倍體轉(zhuǎn)移性腎癌患者則不必考慮腎切除術(shù)第77頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用（二）腎細胞癌

小結(jié)：瘤細胞DNA倍體與腎癌的病理分級、臨床分期、細胞類型、轉(zhuǎn)移和預后有密切關系，可作為一項穩(wěn)定的腫瘤生物學指標，作為一種獨立的預后參數(shù)或與其他臨床或病理形態(tài)參數(shù)相結(jié)合來估價腎癌預后。倍體水平所具有的作用是其他參數(shù)不能代替的第78頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用㈠膀胱癌㈡腎細胞癌㈢前列腺癌第79頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用（三）前列腺癌Frankfurt對45例前列腺癌癌患者作FCM分析，發(fā)現(xiàn)腫瘤限于包膜內(nèi)（B期）11例均為二倍體，腫瘤擴散至包膜外(C期）15例，7例（47%）為異倍體，盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（D1期)8例，5例（63%）為異倍體，而存在遠處轉(zhuǎn)移（D2期）11例，8例（73%）為異倍體，分化不良者18例，10例（56%）為異倍體第80頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用（三）前列腺癌Forhom等采用FCM分析了72例前列腺癌患者，發(fā)現(xiàn)異倍體腫瘤37例，無論采用何種治療均死于3年隨訪期間(平均生存32.4個月),二倍體腫瘤35例，除3例死于3年內(nèi)，其余患者均生存8年以上。Tribukait觀察80例前列腺癌骨轉(zhuǎn)移者，76%的病人為異倍體第81頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在泌尿系腫瘤中的應用（三）前列腺癌以上結(jié)果表明：前列腺癌DNA倍體與腫瘤的分期、分級和預后有重要關系。二倍體前列腺癌多為局限于前列腺包膜內(nèi)的腫瘤，轉(zhuǎn)移發(fā)生率低，預后良好，異倍體前列腺癌，提示腫瘤已浸出前列腺包膜之外，且2/3已存在盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，因而預后不良

第82頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（一）宮頸癌（二）子宮內(nèi)膜癌（三）滋養(yǎng)葉細胞腫瘤（四）卵巢腫瘤第83頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（一）宮頸癌

FCM在子宮頸癌早期診斷中的作用

FCM在判定子宮頸癌預后中的作用第84頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（一）宮頸癌（有助子宮頸癌早期診斷）子宮頸癌的早期診斷方法，常規(guī)以細胞學作為初篩方法，然后借助陰道鏡取材，以病理學作為最后診斷第85頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（一）宮頸癌（有助子宮頸癌早期診斷）鮑氏等對取自患者陰道檢查脫落細胞樣品34例，分別作細胞學、病理學及FCM檢查。按細胞學結(jié)果分為三組。Ⅰ組：巴氏I-Ⅱ級，Ⅱ組：巴氏Ⅲ級，Ⅲ組：巴氏Ⅳ－Ⅴ級第86頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（一）宮頸癌（有助子宮頸癌早期診斷）Ⅰ、Ⅱ組29例的DNA含量均為二倍體其DI和S+G2M值在正常范圍，炎癥和不典型增生之間有交叉現(xiàn)象第87頁/共370頁FCM數(shù)據(jù)的分析DNA含量的定量分析DNA含量以DNA指數(shù)（DNAIndex，DI)來表示，公式為

實驗樣品細胞G0/1峰的均道值

DI=------------------------------------------

正常細胞G0/1峰的均道值第88頁/共370頁FCM數(shù)據(jù)的分析細胞增殖活性的分析

在細胞增殖周期中S和G2M期細胞的多少代表著一個細胞群體所處的增殖狀態(tài)和活性，表示的方法常用增殖指數(shù)（ProliferationIndex,PI)

S+G2MPI=-----------------------×100%G0/1+S+G2M第89頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（一）宮頸癌（有助子宮頸癌早期診斷）Ⅲ組經(jīng)病理診斷為鱗狀細胞癌，DNA倍體均為非整倍體Ⅲ組宮頸癌DI或S+G2M值均無交叉，細胞增殖指數(shù)PI顯著增高，Ⅲ

組PI值比I組高2.3倍，比Ⅱ組高2.8倍，比I組高6.5倍，差異有顯著性第90頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（一）宮頸癌（有助子宮頸癌早期診斷）

資料表明，非整倍體及細胞增殖指數(shù)增高是宮頸惡性病變的標志。FCM測定宮頸脫落細胞DNA含量是宮頸癌早期診斷的一個新方法第91頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（一）宮頸癌

FCM在子宮頸癌早期診斷中的作用FCM在判定子宮頸癌預后中的作用第92頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（一）宮頸癌（有助于判定子宮頸癌預后）

早期宮頸癌預后良好，主要治療手段為放療和/或手術(shù)切除。其預后與臨床分期、病理分級及處理方法有關。然而，仍有少數(shù)患者為早期且經(jīng)過適度治療仍復發(fā)死亡第93頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（一）宮頸癌（有助于判定子宮頸癌預后）

Strang等對159例宮頸鱗狀細胞瘤患者進行FCM分析表明，非整倍體及S%升高與具有浸潤性組織病理特征的腫瘤相符，從臨床分期和DNA含量來看，隨著臨床分期的增加，高倍體(Highploidy)腫瘤的比例也增加。腫瘤大小、病理類別和DNA指數(shù)的關系，未見到其間有明顯的相關性第94頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析DNA倍體的判定標準

即DI＝1.0士0.1(0.9－1.10)為二倍體

DI＝1.0士0.15(0.85－1.15)為近二倍體

DI=2.0士2CV(1.90－2.10)為四倍體

DI>2.10多倍體

其余DI值均為非整倍體在計算DNA異倍體時，把近二倍體，多倍體，四倍體，非整倍體劃為異倍體(Heteroploidy)的范疇第95頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（一）宮頸癌（有助于判定子宮頸癌預后）

Jakobsen對DNA倍體與宮頸癌預后的關系作了研究。結(jié)果提示，DI值與生存期顯著相關。DI大于1.5治療易失敗，DI小于1.5存活率高第96頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（一）宮頸癌（有助于判定子宮頸癌預后）吳愛茹等研究結(jié)果指出，在DI≤1.5的60例中，僅8例死于癌；而DI>1.5的18例中則有5例死于癌，兩組有顯著性差異第97頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（一）宮頸癌（有助于判定子宮頸癌預后）

FCM測定宮頸癌DNA含量顯示，在I期子宮頸癌患者中，腫瘤細胞DNA含量與其復發(fā)率，生存率密切相關。但臨床分期、腫瘤大小、病理分類、淋巴轉(zhuǎn)移與腫瘤細胞的DNA含量無明顯相關性第98頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（一）宮頸癌（有助于判定子宮頸癌預后）

Davis等對56例宮頸癌病人的FCM研究資料顯示，異倍體與預后無關。DI大于或小于1.5時治療失敗率均等第99頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（一）宮頸癌（有助于判定子宮頸癌預后）

由于FCM測定標本來源不同，新鮮活檢標本與存檔石蠟塊不同，儀器基礎參數(shù)不同，光源不同等因素，所得研究資料不太一致，尚待進一步研究證實第100頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（一）宮頸癌（二）子宮內(nèi)膜癌（三）滋養(yǎng)葉細胞腫瘤（四）卵巢腫瘤第101頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（二）子宮內(nèi)膜癌子宮內(nèi)膜癌FCMDNA倍體分析子宮內(nèi)膜癌DNA倍體與臨床分期子宮內(nèi)膜癌DNA倍體與組織分級第102頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（二）子宮內(nèi)膜癌的（DNA倍體分析）

Atkin和Hastin等用FCM分析57例宮內(nèi)膜癌病人，38例(73%)是二倍體，14例(27%)是非整倍體，DI值在1.65-2.34。8例轉(zhuǎn)移癌中5例(63%)是非整倍體，其中2例伴有腹水，在腹水中的腫瘤細胞DI值和原發(fā)癌相一致。據(jù)此，他們認為，大多數(shù)宮體腺癌為DNA二倍體第103頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（二）子宮內(nèi)膜癌的（DNA倍體分析）

Moberger對37例存活8年以上和34例生存期低于2年的宮體癌進行DNA分析，發(fā)現(xiàn)2年內(nèi)死亡的病例中，82%是非整倍體第104頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（二）子宮內(nèi)膜癌（DNA倍體分析）

預示：非整倍體病人預后差，生存期短，中等分化和分化良好的腫瘤非整倍體者死亡率高于同級別的DNA二倍體病人第105頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（二）子宮內(nèi)膜癌

子宮內(nèi)膜癌FCMDNA倍體分析

子宮內(nèi)膜癌DNA倍體與臨床分期子宮內(nèi)膜癌DNA倍體與組織分級第106頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（二）子宮內(nèi)膜癌（DNA倍體與臨床分期）

Iversen認為Ⅰ期和Ⅱ期宮體癌中，非整倍體的頻率沒有顯著差異。39個I期病人中8個(12%)是非整倍體，而10例Ⅱ－Ⅳ期患者中，5個是非整倍體，這些差異并不大第107頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（二）子宮內(nèi)膜癌

子宮內(nèi)膜癌FCMDNA倍體分析子宮內(nèi)膜癌DNA倍體與臨床分期

子宮內(nèi)膜癌DNA倍體與組織分級第108頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（二）子宮內(nèi)膜癌（DNA倍體與組織分級）

Iversen報道30例中，Ⅰ級分化腺癌至Ⅲ級分化的腺癌，其DI值從1.1增加到1.47-1.69，差異是顯著的。而Ⅰ級和Ⅱ級，Ⅱ級和Ⅲ級之間的差異則不太顯著第109頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（二）子宮內(nèi)膜癌（DNA倍體與組織分級）據(jù)報道，約1/3的子宮內(nèi)膜癌具有非整倍體。與卵巢癌、宮頸癌相比發(fā)生非整倍體率要低，轉(zhuǎn)移癌的非整倍體發(fā)生率高于無轉(zhuǎn)移病例。而非整倍體患者的死亡率明顯高于二倍體第110頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（二）子宮內(nèi)膜癌（DNA倍體與組織分級）

提示：DNA含量值可做為子宮內(nèi)膜癌的一項重要指標。這項檢查將在子宮內(nèi)膜癌的預后方面更有意義第111頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（二）子宮內(nèi)膜癌（DNA倍體與組織分級）

提示：DNA含量值可做為子宮內(nèi)膜癌的一項重要指標。這項檢查將在子宮內(nèi)膜癌的預后方面更有意義第112頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（一）宮頸癌（二）子宮內(nèi)膜癌（三）滋養(yǎng)葉細胞腫瘤（四）卵巢腫瘤第113頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）滋養(yǎng)葉細胞腫瘤

絨癌和侵蝕性葡萄胎（惡葡）在我國和東南亞一些國家發(fā)病率較高。葡萄胎是一種良性病變，文獻報道惡變率為10%-20%第114頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）滋養(yǎng)葉細胞腫瘤

絨癌來自葡萄胎者占50%，而惡葡則100%由葡萄胎惡變而來。依據(jù)目前的治療水平，絨癌的死亡率高達20%-30%第115頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）滋養(yǎng)葉細胞腫瘤

在葡萄胎中檢出高危病人，及早診斷治療，則有可能使絨癌和惡葡的治療時間縮短，減少化療的次數(shù)和副反應，同時可有效提高患者的生存率和生存時間第116頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）滋養(yǎng)葉細胞腫瘤

監(jiān)測葡萄胎

DNA倍體與預后第117頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）滋養(yǎng)葉細胞腫瘤（DNA倍體監(jiān)測葡萄胎）

以往對葡萄胎的監(jiān)測從幾個方面考慮：患者年齡、子宮增大程度、水泡粒的大小以及病理診斷滋養(yǎng)細胞增生程度等，還要根據(jù)同位素檢測血中絨毛膜促性腺激素（HCG)綜合診斷。第118頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）滋養(yǎng)葉細胞腫瘤（DNA倍體監(jiān)測葡萄胎）

目前，對于高危葡萄胎患者缺乏統(tǒng)一的劃分標準，所以對于預防性化療多不支持。如果有方法能對高危葡萄胎患者及時檢出，及時治療，則具有十分重要的意義第119頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）滋養(yǎng)葉細胞腫瘤（DNA倍體監(jiān)測葡萄胎）莊桂霞等對64例葡萄胎(惡性及未惡變者各32例)用FCM測定DNA含量，結(jié)果如下表：第120頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）滋養(yǎng)葉細胞腫瘤（DNA倍體監(jiān)測葡萄胎）第121頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）滋養(yǎng)葉細胞腫瘤（DNA倍體監(jiān)測葡萄胎）由表中可以看出未惡變與惡變者非整倍體率分別為34.4%和59.4%，差異有顯著意義。若以DNA非整倍體作為一項指標來判斷葡萄胎惡變，符合率為59.4%。趙彩彥等檢測12例葡萄胎，其中3例非整倍體中2例惡變，符合率為66.7%第122頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）滋養(yǎng)葉細胞腫瘤（DNA倍體監(jiān)測葡萄胎）在上組病人中，惡變者32例只有2例病理為滋養(yǎng)細胞重度增生。因此從滋養(yǎng)細胞增生程度來考慮有無惡變可能并不完全可靠第123頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）滋養(yǎng)葉細胞腫瘤（DNA倍體監(jiān)測葡萄胎）由此認為，DNA非整倍體預示葡萄胎的惡變傾向，DNA定量分析可以作為其惡變的一項監(jiān)測指標第124頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）滋養(yǎng)葉細胞腫瘤（DNA倍體監(jiān)測葡萄胎）有作者用FCM分析成功38例臨床樣本，其中絨癌14例、惡葡12例、良葡12例。所有樣品DNA直方圖均為單蜂分布第125頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）滋養(yǎng)葉細胞腫瘤（DNA倍體監(jiān)測葡萄胎）第126頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）滋養(yǎng)葉細胞腫瘤（DNA倍體監(jiān)測葡萄胎）由表顯示，絨癌和惡葡的異倍體發(fā)生率無顯著差異(P>0.05)，二者均明顯高于良葡

第127頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）滋養(yǎng)葉細胞腫瘤

監(jiān)測葡萄胎

DNA倍體與預后第128頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）滋養(yǎng)葉細胞腫瘤（DNA倍體與預后）14例絨癌中12例異倍體，平均生存期<60個月。2例二倍體者均存活120個月以上。惡葡中2例生存期少于60個月者為異倍體第129頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）滋養(yǎng)葉細胞腫瘤（DNA倍體與預后）表明DNA異倍體表現(xiàn)的絨癌和惡葡的惡性程度高。目前這方面的資料尚不多，有待今后進一步積累第130頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）滋養(yǎng)葉細胞腫瘤小結(jié)：FCM測定滋養(yǎng)細胞腫瘤DNA含量，可以預測葡萄胎的惡變傾向。判斷絨癌、惡葡預后及生存期的長短。為及時發(fā)現(xiàn)葡萄胎惡變和治療絨癌、惡葡提供奮價值的資料，以便適度掌握化療療程、減少并發(fā)癥，提高生存率第131頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（一）宮頸癌（二）子宮內(nèi)膜癌（三）滋養(yǎng)葉細胞腫瘤（四）卵巢腫瘤第132頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤卵巢腫瘤是婦科常見腫瘤之一，發(fā)生率居女性生殖器惡性腫瘤的第三位，死亡率居婦科腫瘤之首，其5年生存率僅為30-40%第133頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤卵巢腫瘤預后與臨床分期、組織類型和組織學級別、腹水存在與否，以及殘存瘤大小等因素有關，但各種預后參數(shù)的相對重要性不清楚。目前治療主要依據(jù)臨床分期，但臨床分期往往不確切，故亟待尋求新的客觀指標評價預后第134頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤自從應用FCMDNA含量分析以來，關于卵巢腫瘤預后與倍體關系的研究日趨活躍。許多研究表明，DNA倍體狀態(tài)是卵巢癌重要的預后參數(shù)第135頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤（DNA倍體與卵巢腫瘤的關系）應用FCM研究發(fā)現(xiàn)卵巢良性腫瘤均為二倍體Barlogic研究大量人體各部位良性病變均為二倍體第136頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤（DNA倍體與卵巢腫瘤的關系）Fridiander分析44例卵巢交界性上皮瘤，其中42例為二倍體且預后良好；2例為異倍體，其中1例于初診7個月死于腫瘤播散第137頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤（DNA倍體與卵巢腫瘤的關系）卵巢癌的DI大多位于3-4倍體范圍，卵巢癌的異倍體率在52-81%間不等有研究者報道，人體各部位惡性實體瘤的異倍體率在61-91%之間眾多資料表明，異倍體多出現(xiàn)于惡性腫瘤，為惡性腫瘤的一項重要標志第138頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤（DNA倍體的穩(wěn)定性）有作者對卵巢癌原發(fā)瘤多點取材，結(jié)果DNA含量無變化對照分析卵巢癌原發(fā)瘤與轉(zhuǎn)移瘤的DNA含量，不隨取材部位變化第139頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤（DNA倍體的穩(wěn)定性）一些作者分析化療復發(fā)腫瘤的DNA含量，并未受化療藥物的影響。也表明倍體具有時間上的穩(wěn)定性。同時也說明這類腫瘤對化療不敏感，預后不良第140頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤（DNA倍體的穩(wěn)定性）

Dobash應用計算機圖象分析儀研究，發(fā)現(xiàn)卵巢癌化療后DNA含量呈下降趨勢，而且DNA含量下降明顯的患者預后較好第141頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤（DNA倍體與臨床及組織學間的關系）卵巢癌DNA倍體與臨床期別的關系有兩種結(jié)果。一種認為無關，一種認為有關。即晚期癌的異倍體明顯高于早期第142頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤（DNA倍體與臨床及組織學間的關系）卵巢癌異倍體的出現(xiàn)與患者年齡、腹水及瘤體大小的關系尚不明確第143頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤（DNA倍體與臨床及組織學間的關系）卵巢癌的倍體分布與組織學類型無關，但與組織學分級顯著相關。高分化癌多為二倍體，低分化癌多為異倍體，中分化癌的倍體分布占于中間第144頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤（DNA倍體與預后的關系）目前普遍認為卵巢癌的預后與臨床分期、組織類型、組織學分級、腹水存在與否，術(shù)后殘余瘤大小等因素有關。但各種因素的相互關系不清楚。而應用FCM對卵巢癌的研究，可為預后提供新的參數(shù)第145頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤（DNA倍體與預后的關系）許多研究應用多變量分析表明DNA倍體狀態(tài)是卵巢癌的重要預后參數(shù)。即二倍體卵巢癌的預后明顯優(yōu)于異倍體第146頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤（DNA倍體與預后的關系）卵巢癌中多克隆異倍體的出現(xiàn)預示高度惡性，其預后與單克隆異倍體明顯不同。其原因可能由于多個幼稚細胞系的存在及抗藥細胞克隆的發(fā)展第147頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤（S期細胞比率與腫瘤的關系）

DNA含量隨細胞周期不斷變化，G0/Gl

期DNA含量為2C，G2/

M期為4C，S期核DNA含量介于2C-4C之間，快速進行細胞周期分析，標準細胞群分為G0/Gl、S、G2/

M期三部分。其中S期細胞比率(S-PharefactionSPF)常用于實體瘤來表示腫瘤細胞的增殖特性第148頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤（S期細胞比率與腫瘤的關系）卵巢癌異倍體的SPF明顯高于二倍體，與大量實體瘤的FCM周期分析一致。卵巢癌二倍體SPF明顯高于良性腫瘤二倍體。卵巢原發(fā)瘤與轉(zhuǎn)移瘤的SPF無明顯差異第149頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤（S期細胞比率與腫瘤的關系）

SPF與卵巢癌的臨床分期無明顯關系，與卵巢癌組織類型也無關系，但與組織學分級、細胞分化顯著相關第150頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤（S期細胞比率與腫瘤的關系）低SPF的卵巢癌預后明顯好于高SPF的卵巢癌，這表明腫瘤由于增殖率的加快而呈高度惡性進展。細胞動力學的研究有助于選擇合理的化療方案?；熕幬飳毎鲋掣叨然钴S的卵巢癌療效明顯第151頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤（S期細胞比率與腫瘤的關系）研究表明SPF為卵巢癌重要的預后參數(shù)。SPF與倍體狀態(tài)結(jié)合起來綜合評價卵巢癌預后，較兩項指標單獨應用更能反映其生物學行為第152頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤（S期細胞比率與腫瘤的關系）Kauionicmi依據(jù)SPF和DI將卵巢癌病人分為三組：高危組：多克隆異倍體或超四倍體，同時SPF>16%低危組：二倍體，同時SPF﹤9%中危組：其余

第153頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤（非整倍體在交界性腫瘤的診斷價值卵巢交界性腫瘤的組織學標準難以統(tǒng)一，近年來學者們重點探討了細胞DNA含量的診斷方法第154頁/共370頁實體腫瘤DNA倍體的FCM分析FCMDNA倍體檢測在婦科腫瘤中的應用（三）卵巢腫瘤（非整倍體在交界性腫瘤的診斷價值大量研究資料表明，多數(shù)惡性腫瘤都有異常的DNA含量，DNA非整倍體則是惡性腫瘤的一個標志。卵巢的