生物技術制藥實驗課程教學大綱

生物技術制藥實驗課程教學大綱課程編號：10051050課程名稱：生物技術制藥/BiotechnologicalPharmaceutics課程屬性：選修實驗屬性：非獨立設課開課學期：5學時：18適用專業(yè)：生物工程學分：0.5開課部門：化學與生物工程學院考核要求：考查課程簡介：本課程實驗的目的是使學生掌握生物技術制藥中的基因工程制藥、抗體制藥、細胞工程制藥、酶工程制藥、微生物工程制藥的基本原理、主要方法和技術，從而使學生能夠將理性知識與感性認識有機地結合起來，在實驗中更深地理解基礎理論，提高學生的綜合能力與創(chuàng)新意識以及分析問題和解決問題的能力。同時通過實驗，培養(yǎng)學生觀察、思考、分析問題和解決問題的能力，實事求是，嚴肅認真的科學態(tài)度，以及勤儉節(jié)約、愛護公物的良好作風。一、實驗項目設置及學時分配項目編號實驗項目名稱實驗類型開出要求學時分配菊花組織培養(yǎng)與快速繁殖驗證必做6黃秋葵胚性懸浮細胞培養(yǎng)驗證選做3胡蘿卜的細胞懸浮培養(yǎng)驗證必做3金霉素鏈霉菌的培養(yǎng)及定向發(fā)酵驗證必做6四環(huán)素、金霉素的薄層層析鑒定驗證選做3產(chǎn)纖溶酶菌篩選及纖溶酶活性的測定設計性選做6青霉素抑菌圈的觀察驗證必做3學時總計18二、實驗內容及教學要求實驗項目1：菊花組織培養(yǎng)與快速繁殖教學內容采用組織培養(yǎng)的方法，對菊花莖尖進行培養(yǎng)，誘導其產(chǎn)生側芽，并不斷繼代，直至產(chǎn)生大量叢生芽，誘導生根，可獲得健康的試管苗。本實驗的重點和難點是要求學生掌握植物組織培養(yǎng)過程中使用的無菌技術。2、教學目標（1）了解菊花等藥用植物退化原因及組織培養(yǎng)的必要性（2）熟悉植物細胞工程培養(yǎng)原理（3）掌握利用莖尖作為外植體進行無性繁殖的方法實驗項目2：黃秋葵胚性懸浮細胞培養(yǎng)1、教學內容將黃秋葵疏松愈傷組織用鑷子夾碎，轉入液體培養(yǎng)基在100r/min,25~28℃條件下，進行振蕩培養(yǎng)，經(jīng)6~10天培養(yǎng)后，觀察分散懸浮培養(yǎng)物生長情況，沒有被污染的培養(yǎng)物用金屬網(wǎng)篩過濾后放置在倒置顯微鏡下觀察。重點和難點是植物組織培養(yǎng)過程中使用的無菌技術。2、教學目標（1）了解植物細胞懸浮培養(yǎng)的基本原理（2）進一步熟悉和鞏固無菌操作技術（3）掌握植物細胞懸浮培養(yǎng)的方法和技術實驗項目3：胡蘿卜的細胞懸浮培養(yǎng)1、教學內容將胡蘿卜肉質根疏松愈傷組織用鑷子夾碎，轉入液體培養(yǎng)基在100r/min,25~28℃條件下，進行振蕩培養(yǎng)，經(jīng)6~10天培養(yǎng)后，觀察分散懸浮培養(yǎng)物生長情況，沒有被污染的培養(yǎng)物用金屬網(wǎng)篩過濾后放置在倒置顯微鏡下觀察。重點和難點是植物組織培養(yǎng)過程中使用的無菌技術。2、教學目標（1）了解植物細胞懸浮培養(yǎng)的基本原理（2）進一步熟悉和鞏固無菌操作技術（3）掌握植物細胞懸浮培養(yǎng)的方法和技術實驗項目4：金霉素鏈霉菌的培養(yǎng)及定向發(fā)酵1、教學內容金霉素鏈霉菌工業(yè)上用以生產(chǎn)金霉素、四環(huán)素和土霉素等四環(huán)素類抗生素，本實驗首先配置培養(yǎng)金霉素鏈霉菌的培養(yǎng)基并進行滅菌，然后采用定向發(fā)酵的方法，利用溴離子在生物合成過程中對氯離子有競爭性抑制劑作用的原理，以及加入2-硫醇基苯并噻唑抑制氯化酶的作用，從而增加四環(huán)素的產(chǎn)量。重點和難點是四環(huán)素的定向發(fā)酵辦法。2、教學目標（1）了解定向發(fā)酵四環(huán)素的原理（2）熟悉培養(yǎng)基的配制及滅菌方法（3）掌握定向發(fā)酵四環(huán)素的基本操作實驗項目5：四環(huán)素、金霉素的薄層層析鑒定1、教學內容本實驗以四環(huán)素、金霉素標準品溶液作為對照采用薄層層析對發(fā)酵液進行鑒定。重點難點是薄層層析的原理和操作。2、教學目標（1）了解薄層層析的原理（2）熟悉薄層層析的基本操作（3）掌握四環(huán)素族抗生素的定性鑒定方法實驗項目6：產(chǎn)纖溶酶菌篩選及纖溶酶活性的測定1、教學內容本實驗采用生理鹽水浸提實驗菌固體發(fā)酵的大豆制備纖溶酶粗酶，通過纖維蛋白平板法篩選具有較高纖溶活性的產(chǎn)酶菌株，并進一步對菌株的菌落形態(tài)、菌體特征和生理生化特征進行鑒定。同時采用加熱纖維蛋白平板法測定其纖溶酶活性。重點和難點是對菌株的篩選和鑒定以及酶活性測定。2、教學目標（1）了解產(chǎn)纖溶酶菌株篩選的原理（2）熟悉產(chǎn)纖溶酶菌株篩選的方法（3）掌握纖維蛋白平板法測定纖溶酶活性的方法實驗項目7：青霉素抑菌圈的觀察1、教學內容在固體培養(yǎng)基上均勻涂布培養(yǎng)37℃過夜培養(yǎng)的金黃色葡萄球菌、芽孢桿菌等，用槍頭在平皿中央打孔；取0.1mL青霉素鉀鹽溶液于孔中，將平皿放置于30℃左右培養(yǎng)箱中培養(yǎng)并觀察抑菌圈的形態(tài)。2、教學目標（1）了解青霉素的作用機制（2）熟悉抑菌圈的觀察和判斷（3）掌握平板鑒別青霉素的方法三、考核方式及要求采取靈活多樣的方式進行考核，在所有課程實驗項目結束后，根據(jù)每個實驗項目考核的成績，得到該學生該門課程實驗的成績，成績考核采用百分制。評分辦法：實驗態(tài)度（10%）、實驗理論（30%）、操作技能（40%）、實驗報告（20%）四、主要儀器設備及實驗材料項目編號實驗項目名稱主要儀器設備及臺（套）數(shù)實驗材料備注菊花組織培養(yǎng)與快速繁殖超凈工作臺1臺、高壓滅菌鍋1臺、天平、pH計、光照培養(yǎng)箱等帶頂芽的菊花黃秋葵胚性懸浮細胞培養(yǎng)超凈工作臺1臺、搖床、倒置顯微鏡、恒溫培養(yǎng)室黃秋葵胚性愈傷組織胡蘿卜的細胞懸浮培養(yǎng)超凈工作臺1臺、搖床、倒置顯微鏡、恒溫培養(yǎng)室松軟的胡蘿卜愈傷組織金霉素鏈霉菌的培養(yǎng)及定向發(fā)酵超凈工作臺1臺、高壓滅菌鍋1臺、天平、pH計、恒溫震蕩培養(yǎng)箱等金霉素鏈霉菌四環(huán)素、金霉素的薄層層析鑒定玻璃層析缸、層析板、通風櫥、手提式紫外燈金霉素標準品、四環(huán)素標準品產(chǎn)纖溶酶菌篩選及纖溶酶活性的測定恒溫培養(yǎng)箱、水浴鍋、離心機、冰箱、分光光度計等纖維蛋白原、凝血酶、牛血清白