醫(yī)學分子生物學實驗課程教學大綱

醫(yī)學分子生物學實驗課程教學大綱課程編號：12031200課程名稱：醫(yī)學分子生物學(MedicalMolecularBiology)課程屬性：必修實驗屬性：非獨立設課開課學期：3學時：12適用專業(yè)：五年制本科臨床醫(yī)學學分：2開課部門：12考核要求：考試課程簡介：分子生物學實驗是一門年輕的學科，發(fā)展日益月新，是目前醫(yī)學領域中最為活躍的學科。它廣泛應用于臨床的檢驗，疾病的預測和治療，同時醫(yī)學各領域研究的開展必不可少。分子生物學實驗課程教學以理論課教學為基礎，理論與實踐相結合，使學生更加牢固地掌握基礎知識，掌握分子生物學實驗設備的操作方法，培養(yǎng)學生的動手能力和科學研究能力，同時也使學生具備分子生物學基本的實驗技能，學會發(fā)現(xiàn)問題和解決問題的能力，為畢業(yè)后從事生物學相關的科研和教學工作奠定基礎。一、實驗項目設置及學時分配項目編號實驗項目名稱實驗類型開出要求學時分配1PCR基因擴增驗證必做42感受態(tài)細胞的制備及轉化綜合必做43質粒DNA的提取及酶切檢測綜合必做4學時總計12二、實驗內容及教學要求實驗項目1：PCR基因擴增1、教學內容講授PCR的原理和實驗設計，讓學生學會PCR儀器的操作，并且得到基因擴增的結果。2、教學目標（1）了解PCR的發(fā)明歷史和原理（2）熟悉PCR儀器的操作（3）掌握PCR的實驗步驟實驗項目2：感受態(tài)細胞的制備及轉化1、教學內容以CaCl2制備E.coliDH5α感受態(tài)細胞，利用pMD18-T載體與實驗二擴增的目的片段連接，轉化DH5a菌株，用α-互補現(xiàn)象和抗性篩選初步篩選轉化子。2、教學目標（1）了解感受態(tài)細胞制備的原理（2）熟悉感受態(tài)細胞的制備過程（3）掌握質粒向感受態(tài)細胞的轉化實驗項目3：質粒DNA的提取及酶切檢測1、教學內容在轉化平板上挑取單菌落進行培養(yǎng)，用堿裂解法從大腸桿菌細胞中快速小量提取質粒DNA并進行瓊脂糖凝膠電泳，用凝膠成像系統(tǒng)檢測。通過對本實驗，掌握堿裂解法小量提取純化質粒的方法，利用酶切進一步鑒定轉化子。2、教學目標（1）了解質粒的各個構件的功能（2）熟悉質粒DNA的提取過程（3）掌握質粒酶切和DNA電泳的步驟三、考核方式及要求本學科開設的3個實驗課都有比較客觀的實驗結果，可以用儀器拍照。要求學生撰寫實驗報告，并將結果照片貼上?？己烁鶕?jù)實驗操作過程和實驗報告，每個實驗占5分，總分為15分。四、主要儀器設備及實驗材料項目編號實驗項目名稱主要儀器設備及臺（套）數(shù)實驗材料備注1PCR基因擴增PCR儀1臺，移液器4套PCRmix，槍頭2感受態(tài)細胞的制備及轉化水浴鍋2臺，離心機2臺感受態(tài)細胞，LB培養(yǎng)基3質粒DNA的提取及酶切檢測離心機4臺，電泳設備2套質粒提取試劑盒，瓊脂糖，內切酶五、教材及參考書1．彭少君《生物化學與分子生物學實驗指導》