蛋黃中卵磷脂的提取

第五組組長(zhǎng)：組員：指導(dǎo)教師：生化分離工程三級(jí)項(xiàng)目—蛋黃中卵磷脂的分離純化當(dāng)前1頁(yè)，總共18頁(yè)。01實(shí)驗(yàn)原理02實(shí)驗(yàn)材料及主要儀器01什么是卵磷脂？02卵磷脂有哪些功效？第一部分背景—卵磷脂03卵磷脂的分布及蛋黃中的卵磷脂？第二部分實(shí)驗(yàn)部分04提取卵磷脂的方法有哪些？03原始數(shù)據(jù)及數(shù)據(jù)處理04結(jié)果分析與討論05改進(jìn)與優(yōu)化當(dāng)前2頁(yè)，總共18頁(yè)。01PARTONE卵磷脂

當(dāng)前3頁(yè)，總共18頁(yè)。卵磷脂卵磷脂被英美科學(xué)家喻之為“健腦的黃金，養(yǎng)心的極品”，被日本營(yíng)養(yǎng)學(xué)家稱為“本世紀(jì)最偉大的保健品”。確切的卵磷脂是磷脂酰膽堿Pc，但商業(yè)“卵磷脂”是一類含磷酸根脂質(zhì)的總和，包括磷脂酸PA、磷脂酰膽胺(腦磷脂)PE、磷脂酰膽堿(卵磷脂)PC、磷脂酰絲胺酸PS、磷脂酰甘油PG和磷脂酰肌醇PI6種。1844年法國(guó)人Gohley從蛋黃中發(fā)現(xiàn)卵磷脂，并以希臘文命名為L(zhǎng)ecithos（卵磷脂），通用藥品名稱為L(zhǎng)ecithin，也自此揭開(kāi)了其神秘的面紗。卵磷脂是磷脂的一種，又名磷脂酰膽堿，簡(jiǎn)稱PC。磷脂酰膽堿由甘油基，脂肪酸基和膽堿構(gòu)成。當(dāng)前4頁(yè)，總共18頁(yè)。卵磷脂的功效當(dāng)前5頁(yè)，總共18頁(yè)。對(duì)人體有什么好處呢？肝臟的保護(hù)神卵磷脂不但可預(yù)防脂肪肝，還能促進(jìn)肝細(xì)胞再生，防止肝硬化并有助于肝功能的恢復(fù)。糖尿病患者的營(yíng)養(yǎng)品不足會(huì)使胰臟機(jī)能下降，無(wú)法分泌充分的胰島素，不能有效地將血液中的葡萄糖運(yùn)送到細(xì)胞中。血管的“清道夫”卵磷脂具有乳化分解油脂的作用，對(duì)高血脂和高膽固醇有顯著的功效，可預(yù)防和治療動(dòng)脈硬化。胎、嬰兒神經(jīng)發(fā)育的必需品嬰幼兒時(shí)期是大腦形成發(fā)育最關(guān)鍵時(shí)期，卵磷脂可以促進(jìn)大腦神經(jīng)系統(tǒng)與腦容積的增長(zhǎng)、發(fā)育。柔潤(rùn)皮膚能分解體內(nèi)過(guò)多的毒素，并經(jīng)肝臟和腎臟的處理排出體外，可消除青春痘、雀斑。可預(yù)防老年癡呆的發(fā)生人記憶力減退，其原因與乙酰膽堿含量不足有一定關(guān)系。人腦能直接從血液中攝取磷脂，并很快轉(zhuǎn)化為乙酰膽堿。能有效地化解膽結(jié)石膽結(jié)石90％是由膽固醇組成，卵磷脂可以將多余的膽固醇分解、消化及吸收。良好的心理調(diào)和劑補(bǔ)充卵磷脂，可使大腦神經(jīng)及時(shí)得到營(yíng)養(yǎng)，改善因神經(jīng)緊張而引起的急躁、易怒、失眠等癥。當(dāng)前6頁(yè)，總共18頁(yè)。卵磷脂的分布卵磷脂存在于每個(gè)細(xì)胞之中，更多的是集中在腦及神經(jīng)系統(tǒng)、血液循環(huán)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)以及肝、心、腎等重要器官。存在于油料作物種子和蛋黃中，尤其在蛋黃中含量最高。牛奶、動(dòng)物的腦、骨髓、心臟、肺臟、肝臟、腎臟以及大豆和酵母中都含有卵磷脂。卵磷脂在體內(nèi)多與蛋白質(zhì)結(jié)合，以脂肪蛋白質(zhì)(脂蛋白)的形態(tài)存在著，所以卵磷脂是以豐富的姿態(tài)存在于自然界當(dāng)中，所以建議人們盡量攝取足夠多種類的食物。當(dāng)前7頁(yè)，總共18頁(yè)。提取卵磷脂的方法超臨界CO2-乙醇夾帶劑萃取法優(yōu)點(diǎn)萃取物無(wú)溶劑殘留，雜質(zhì)含量較低,卵磷脂含量高缺點(diǎn)對(duì)儀器及反應(yīng)條件要求較嚴(yán)格微波輔助萃取法優(yōu)點(diǎn)提取用時(shí)短，溶劑用量少，提取率高，節(jié)能缺點(diǎn)對(duì)儀器要求高，操作較復(fù)雜丙酮提取法優(yōu)點(diǎn)提取效率較高，工藝成熟，成本較低√缺點(diǎn)產(chǎn)品中容易有化學(xué)溶劑丙酮的殘留低溫超濾法優(yōu)點(diǎn)無(wú)化學(xué)溶劑殘留缺點(diǎn)工藝要求高、產(chǎn)量較低，因此成本較高配位吸附柱層析法優(yōu)點(diǎn)分離系統(tǒng)可循環(huán)使用，成本低廉。較為環(huán)保，分離周期短，毒性小缺點(diǎn)對(duì)所用儀器要求高當(dāng)前8頁(yè)，總共18頁(yè)。02PARTTWO實(shí)驗(yàn)部分

當(dāng)前9頁(yè)，總共18頁(yè)。實(shí)驗(yàn)原理卵黃中的甘油三酸酯占全部脂類的60%，磷脂約占28%,甾醇脂及其他約占6%。磷脂易溶于乙醚、苯、氯仿，部分溶于乙醇，極難溶于丙酮；卵磷脂溶于乙醇、甲醇、氯仿等有機(jī)溶劑，但不溶于丙酮；丙酮能夠溶解油脂和游離脂肪酸、甘油三酯等。因此本實(shí)驗(yàn)采用化學(xué)試劑從蛋黃中提取卵磷脂時(shí)，先采用丙酮脫水去其他脂類，再用乙醇對(duì)丙酮粉進(jìn)行溶解，抽濾濃縮干燥最終獲得卵磷脂。當(dāng)前10頁(yè)，總共18頁(yè)。實(shí)驗(yàn)材料和儀器實(shí)驗(yàn)材料：雞蛋、無(wú)水乙醇、丙酮儀器：電子天平、真空抽氣機(jī)、干燥箱、恒溫水浴鍋、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、抽濾漏斗、厚壁燒瓶、磨口瓶當(dāng)前11頁(yè)，總共18頁(yè)。實(shí)驗(yàn)步驟0504030201蛋黃的分離：將雞蛋打人培養(yǎng)皿中用小燒杯分離成蛋白和蛋黃。稱量蛋黃重量（G）及小燒杯重量（G0）丙酮脫水去油：選用分析純的丙酮，丙酮的體積與蛋黃的克數(shù)(mL／g)比例為3：1靜置15min后真空抽濾，水分和溶于丙酮的其它脂質(zhì)在濾液中，而蛋黃卵磷脂則留于濾渣即蛋黃粉中。稱量濾渣重量（G1)。乙醇溶解丙酮粉提取卵磷脂:用分析純的無(wú)水乙醇配制出99.7%的乙醇溶夜,將丙酮粉溶于其中（每克丙酮粉加9.5ml乙醇），在40℃下靜置（水浴鍋），再用真空抽濾裝置過(guò)濾至殘?jiān)^干不粘手。濃縮：水浴的溫度控制在80-85℃為宜。濃縮至冷凝管口不再滴出乙醇，圓底燒瓶中的物液泛起細(xì)小較密的泡沫時(shí)去除熱源，繼續(xù)在水浴中存放半小時(shí)后即可。干燥：濃縮后所得的物液流動(dòng)性很強(qiáng)，含有較多水分?？紤]其抗熱性較差，故放在不高60℃的烘箱中，至其不再呈流動(dòng)性，具有粘稠感時(shí)取出。稱量干燥后質(zhì)量（G2）并計(jì)算得率。當(dāng)前12頁(yè)，總共18頁(yè)。當(dāng)前13頁(yè)，總共18頁(yè)。數(shù)據(jù)原始數(shù)據(jù)記錄蛋黃重量G（g）小燒杯重量G0（g）干燥后燒杯重量G2（g）35.402111.077127.965得率計(jì)算卵磷脂得率=（127.965-111.077）/35.402*100%=47.7035％>11%當(dāng)前14頁(yè)，總共18頁(yè)。結(jié)果分析與討論卵磷脂得率高于一般水平11%左右，可能原因如下：1.在最初蛋黃與蛋白的分離過(guò)程中，蛋白去除不徹底。2.丙酮脫脂時(shí)間不足導(dǎo)致提取物中含有大量雜質(zhì)。其他產(chǎn)生誤差原因：

1.丙酮去油抽濾后在棄去殘夜液的過(guò)程中存在樣品損失。2.乙醇溶液配制濃度存在誤差當(dāng)前15頁(yè)，總共18頁(yè)。改進(jìn)與優(yōu)化一、蛋黃粉丙酮脫脂效果優(yōu)化方案丙酮與卵磷脂料液比優(yōu)化1、嘗試各種不同料液比情況下的脫脂效果，分為1:3、1:6、1:9、1:12、1:152、嘗試脫脂時(shí)間下的脫脂效果：0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h(考察指標(biāo)：丙酮不溶物質(zhì)量，越小表示除雜越多，效果越好)二、丙酮不溶物乙醇萃取效果優(yōu)化方案1、試驗(yàn)不同乙醇濃度下的萃取效果分成四組進(jìn)行單因素試驗(yàn)來(lái)進(jìn)行驗(yàn)證乙醇濃度分別為50%、60%、70%、80%、90%、100%（料液比1:7，水浴時(shí)間1.5h，水浴溫度35%）2、試驗(yàn)不同萃取時(shí)間下的萃取效果分成八組進(jìn)行單因素試驗(yàn)來(lái)進(jìn)行驗(yàn)證萃取時(shí)間分別為0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h、3.5h、4.0h(料液比1:7，乙醇濃度選取已優(yōu)化參數(shù)，水浴溫度35℃)3、試驗(yàn)不同萃取溫度下的萃取效果分成八組進(jìn)行單因素試驗(yàn)來(lái)進(jìn)行驗(yàn)證萃取溫度分別為15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40℃、45℃、50℃（前兩個(gè)因素選用已優(yōu)化參數(shù)，；料液比1:7）當(dāng)前16頁(yè)，總共18頁(yè)。[參考文獻(xiàn)][1]張珍.雞蛋黃中提取卵磷脂的最佳操作工藝[J].甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué),2003.[2]郁軍,裘愛(ài)泳,劉元法.磷脂的研究進(jìn)展[J].西部糧油科技,2002,25(1):26-29.[3]遲玉杰.加快禽畜中高附加值天然產(chǎn)物高效提取與產(chǎn)品開(kāi)發(fā)[J].食品科學(xué)1992,13(4):349-364.[4]宋國(guó)安.磷脂的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用前景[J].遼寧化工，1999，258(4):235-237[5]李亞琴，吳守一.乙醇溶劑與CO2相結(jié)合提取高純度卵黃磷脂的研究[J].農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào)，2001,17(2):144-149[6]常皓,王二雷,宮新統(tǒng),劉靜波.蛋黃卵磷脂研究概況[J].食品工業(yè)科技,2010,05:414-416+420.[7]吳曉英,林影,葉倩君,李晶晶.蛋黃卵磷脂的制備研究[J].食品科學(xué),2004,05:115-119.[8]遲玉杰,林淑英.卵黃卵磷脂提取與應(yīng)用的研究進(jìn)展[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2002,05:50-53.[9]李濤,王天志.卵磷脂的研究進(jìn)展[J].中藥材,2002,10:752-756.[10]馬雙雁.大豆卵磷脂的制備方法及其應(yīng)用前景[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技,2009,01:225-227.[11]黃素芬.鴨蛋黃卵磷脂提取技術(shù)研究[D].浙江大學(xué),2004.[12]常皓.蛋黃卵磷脂的提取、分析及氧化穩(wěn)定性研究[D].吉林大學(xué),2012.[13]袁江蘭,康旭,黃紅霞.雞蛋黃卵磷脂提取方法的比較研究[J].食品科學(xué),2009,02:25-28.[1