三年高考（2019-2021）生物試題分項(xiàng)匯編-專題20 現(xiàn)代生物科技專題（教師版）

專題20現(xiàn)代生物科技專題1.（2021·6浙江月選考）采用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)可將增強(qiáng)型綠色熒光蛋白（EGFP）基因定點(diǎn)插入到受精卵的Y染色體上，獲得轉(zhuǎn)基因雄性小鼠。該轉(zhuǎn)基因小鼠與野生型雌性小鼠交配，通過(guò)觀察熒光可確定早期胚胎的性別。下列操作錯(cuò)誤的是（）A.基因編輯處理的受精卵在體外培養(yǎng)時(shí)，不同發(fā)育階段的胚胎需用不同成分的培養(yǎng)液B.基因編輯處理的受精卵經(jīng)體外培養(yǎng)至2細(xì)胞期，須將其植入同期發(fā)情小鼠的子官，才可獲得表達(dá)EGFP的小鼠C.分離能表達(dá)EGFP的胚胎干細(xì)胞，通過(guò)核移植等技術(shù)可獲得大量的轉(zhuǎn)基因小鼠D.通過(guò)觀察早期胚胎的熒光，能表達(dá)EGFP的即為雄性小鼠胚胎【答案】B【解析】B受精卵經(jīng)體外培養(yǎng)至囊胚期，須將其植入同期發(fā)情小鼠的子官2．（2021·1月浙江選考）下圖為動(dòng)物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程示意圖。下列敘述正確的是（）A．步驟①的操作不需要在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行B．步驟②中用鹽酸溶解細(xì)胞間物質(zhì)使細(xì)胞分離C．步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理D．步驟④培養(yǎng)過(guò)程中不會(huì)發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化【答案】C【分析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。【詳解】A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程需要無(wú)菌操作，故步驟①的操作需要在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行，A錯(cuò)誤；B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動(dòng)物組織，分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液，B錯(cuò)誤；C、傳代培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，再分瓶培養(yǎng)，C正確；D、步驟④為傳代培養(yǎng)過(guò)程，該過(guò)程中部分細(xì)胞可能發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化，核型改變，D錯(cuò)誤。故選C。3．（2021·湖南高考真題）M基因編碼的M蛋白在動(dòng)物A的肝細(xì)胞中特異性表達(dá)?，F(xiàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過(guò)核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物A，流程如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過(guò)程中，切割質(zhì)粒DNA的工具酶是_________，這類酶能將特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的_________斷開(kāi)。（2）在無(wú)菌、無(wú)毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動(dòng)物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時(shí)，需要定期更換培養(yǎng)液，目的是_________。（3）與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率更低，原因是_________。從早期胚胎中分離獲得的胚胎干細(xì)胞，在形態(tài)上表現(xiàn)為_(kāi)________（答出兩點(diǎn)即可），功能上具有_________。（4）鑒定轉(zhuǎn)基因動(dòng)物：以免疫小鼠的_________淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，篩選融合雜種細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體。簡(jiǎn)要寫(xiě)出利用此抗體確定克隆動(dòng)物A中M基因是否失活的實(shí)驗(yàn)思路_________。【答案】（1）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）磷酸二酯鍵（2）清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害（3）動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易，動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難細(xì)胞體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯（任選兩點(diǎn)作答）發(fā)育的全能性（4）B用特定抗原刺激小鼠，然后取出已免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，看篩選出雜交瘤細(xì)胞能否產(chǎn)生M蛋白的單克隆抗體，如果不能產(chǎn)生，說(shuō)明M基因在克隆動(dòng)物A中已失活【分析】1、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)，個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。2、核移植：（1）概念：將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物；（2）原理：動(dòng)物細(xì)胞核的全能性；（3）動(dòng)物細(xì)胞核移植可分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。原因：動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易，動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難。【詳解】（1）基因工程中切割DNA的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶），故在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過(guò)程中，切割質(zhì)粒DNA的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）。限制性內(nèi)切核酸內(nèi)切酶是作用于其所識(shí)別序列中兩個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵。不同的限制酶可以獲得不同的末端，主要分為黏性末端和平末端。（2）在無(wú)菌、無(wú)毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動(dòng)物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時(shí)，需要定期更換培養(yǎng)液，目的是清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。（3）由于動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易，動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難，故與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率低。胚胎干細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為細(xì)胞體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造。（4）先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體；若要利用此抗體確定克隆動(dòng)物A中M基因是否失活，如果M基因已經(jīng)失活，則克隆動(dòng)物A中無(wú)法產(chǎn)生M蛋白的單克隆抗體，則可利用抗原—抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。用特定抗原刺激小鼠，然后取出已免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，看篩選出雜交瘤細(xì)胞能否產(chǎn)生M蛋白的單克隆抗體，如果不能產(chǎn)生，說(shuō)明M基因在克隆動(dòng)物A中已失活?！军c(diǎn)睛】本題結(jié)合圖示考查基因工程、核移植、胚胎移植、單克隆抗體的相關(guān)知識(shí)，涉及知識(shí)點(diǎn)較多，但難度不大，要求考生掌握基礎(chǔ)知識(shí)，屬于考綱中識(shí)記與理解層次。4．（2021·全國(guó)乙卷高考真題）用DNA重組技術(shù)可以賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人類需要的生物產(chǎn)品。在此過(guò)程中需要使用多種工具酶，其中4種限制性核酸內(nèi)切酶的切割位點(diǎn)如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）常用的DNA連接酶有E.coliDNA連接酶和T4DNA連接酶。上圖中__________酶切割后的DNA片段可以用E.coliDNA連接酶連接。上圖中___________酶切割后的DNA片段可以用T4DNA連接酶連接。（2）DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學(xué)鍵是____________。（3）DNA重組技術(shù)中所用的質(zhì)粒載體具有一些特征，如質(zhì)粒DNA分子上有復(fù)制原點(diǎn)，可以保證質(zhì)粒在受體細(xì)胞中能___________；質(zhì)粒DNA分子上有______________，便于外源DNA插入；質(zhì)粒DNA分子上有標(biāo)記基因（如某種抗生素抗性基因），利用抗生素可篩選出含質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞，方法是______________。（4）表達(dá)載體含有啟動(dòng)子，啟動(dòng)子是指__________________?！敬鸢浮浚?）EcoRI、PstIEcoRI、PstI、SmaI和EcoRV（2）磷酸二酯鍵（3）自我復(fù)制一至多個(gè)限制酶切位點(diǎn)用含有該抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)宿主細(xì)胞，能夠存活的即為含有質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞（4）位于基因首端的一段特殊DNA序列，是RNA聚合酶識(shí)別及結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程【分析】基因工程至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體?！驹斀狻浚?）限制酶EcoRI和PstI切割形成的是黏性末端，限制酶SmaI和EcoRV切割形成的是平末端，E.coliDNA連接酶來(lái)源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來(lái)，而T4DNA連接酶來(lái)源于T4噬菌體，可用于連接黏性末端和平末端，但連接效率較低。因此圖中EcoRI和PstI切割后的DNA片段（黏性末端）可以用E.coliDNA連接酶連接，除了這兩種限制酶切割的DNA片段，限制酶SmaI和EcoRV切割后的DNA片段（平末端）也可以用T4DNA連接酶連接。（2）DNA連接酶將兩個(gè)DNA片段連接形成磷酸二酯鍵。（3）質(zhì)粒是小型環(huán)狀的DNA分子，常作為基因表達(dá)的載體，首先質(zhì)粒上含有復(fù)制原點(diǎn)，能保證質(zhì)粒在受體細(xì)胞中自我復(fù)制。質(zhì)粒DNA分子上有一個(gè)至多個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)，便于目的基因的導(dǎo)入。質(zhì)粒上的標(biāo)記基因是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，具體做法是用含有該抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)宿主細(xì)胞，能夠存活的即為含有質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞。（4）啟動(dòng)子是一段特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得需要的蛋白質(zhì)?！军c(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。5．（2021·廣東高考真題）非細(xì)胞合成技術(shù)是一種運(yùn)用合成生物學(xué)方法，在細(xì)胞外構(gòu)建多酶催化體系，獲得目標(biāo)產(chǎn)物的新技術(shù)，其核心是各種酶基因的挖掘、表達(dá)等。中國(guó)科學(xué)家設(shè)計(jì)了4步酶促反應(yīng)的非細(xì)胞合成路線（如圖），可直接用淀粉生產(chǎn)肌醇（重要的醫(yī)藥食品原料），以期解決高溫強(qiáng)酸水解方法造成的嚴(yán)重污染問(wèn)題，并可以提高產(chǎn)率?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）研究人員采用PCR技術(shù)從土壤微生物基因組中擴(kuò)增得到目標(biāo)酶基因。此外，獲得酶基因的方法還有___________。（答出兩種即可）（2）高質(zhì)量的DNA模板是成功擴(kuò)增出目的基因的前提條件之一。在制備高質(zhì)量DNA模板時(shí)必須除去蛋白，方法有___________。（答出兩種即可）（3）研究人員使用大腸桿菌BL21作為受體細(xì)胞、pET20b為表達(dá)載體分別進(jìn)行4種酶的表達(dá)。表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí)，首先應(yīng)制備___________細(xì)胞。為了檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá)出酶蛋白，需要采用的方法有___________。（4）依圖所示流程，在一定的溫度、pH等條件下，將4種酶與可溶性淀粉溶液混合組成一個(gè)反應(yīng)體系。若這些酶最適反應(yīng)條件不同，可能導(dǎo)致的結(jié)果是___________。在分子水平上，可以通過(guò)改變___________，從而改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，實(shí)現(xiàn)對(duì)酶特性的改造和優(yōu)化?！敬鸢浮浚?）基因文庫(kù)中獲取、人工合成法（2）鹽析法、酶解法或高溫變性（3）感受態(tài)抗原-抗體雜交技術(shù)（4）有的酶失活而使反應(yīng)中斷基因的堿基序列【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。簭幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）分析題意，研究人員從土壤微生物基因組中擴(kuò)增得到目標(biāo)酶基因采用了PCR技術(shù)，此外獲得酶基因的方法還有從基因文庫(kù)中獲取和人工合成法。（2）高質(zhì)量的DNA模板是成功擴(kuò)增出目的基因的前提條件之一。在制備高質(zhì)量DNA模板時(shí)必須除去蛋白，可根據(jù)DNA和蛋白質(zhì)的溶解性、對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性去除蛋白質(zhì)，方法有鹽析、酶解法或高溫變性法等。（3）研究人員使用大腸桿菌BL21作為受體細(xì)胞、pET20b為表達(dá)載體分別進(jìn)行4種酶的表達(dá)。表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí)，首先應(yīng)制備感受態(tài)細(xì)胞，即利用鈣離子處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，使其易于接受外來(lái)的DNA分子?；蚬こ讨?，酶基因（目的基因）成功表達(dá)的產(chǎn)物酶蛋白的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，常用抗原-抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。（4）依圖所示流程，在一定的溫度、pH等條件下，將4種酶與可溶性淀粉溶液混合組成一個(gè)反應(yīng)體系。由于酶的作用條件較溫和，若這些酶最適反應(yīng)條件不同，則可能導(dǎo)致有的酶失活而使反應(yīng)中斷。在分子水平上，可以通過(guò)改變基因的堿基序列，從而改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，實(shí)現(xiàn)對(duì)酶特性的改造和優(yōu)化?！军c(diǎn)睛】本題考查基因工程、DNA的粗提取和鑒定的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生把握知識(shí)間的聯(lián)系、理論與實(shí)際相結(jié)合解決實(shí)際問(wèn)題的能力，難度中等。6．（2021·全國(guó)甲卷高考真題）PCR技術(shù)可用于臨床的病原菌檢測(cè)。為檢測(cè)病人是否感染了某種病原菌，醫(yī)生進(jìn)行了相關(guān)操作：①分析PCR擴(kuò)增結(jié)果；②從病人組織樣本中提取DNA；③利用PCR擴(kuò)增DNA片段；④采集病人組織樣本?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）若要得到正確的檢測(cè)結(jié)果，正確的操作順序應(yīng)該是_________（用數(shù)字序號(hào)表示）。（2）操作③中使用的酶是_________，PCR反應(yīng)中的每次循環(huán)可分為變性、復(fù)性、________三步，其中復(fù)性的結(jié)果是_______。（3）為了做出正確的診斷，PCR反應(yīng)所用的引物應(yīng)該能與_______特異性結(jié)合。（4）PCR（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)是指_______。該技術(shù)目前被廣泛地應(yīng)用于疾病診斷等方面。【答案】（1）④②③①（2）Taq酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）延伸Taq酶從引物起始進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成（3）兩條單鏈DNA（4）一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)【分析】PCR是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。通過(guò)這一技術(shù)，可以在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提，是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物?！驹斀狻浚?）PCR技術(shù)可用于臨床的病原菌檢測(cè)，若要得到正確的檢測(cè)結(jié)果，正確的操作順序應(yīng)該是④采集病人組織樣本→②從病人組織樣本中提取DNA→③利用PCR擴(kuò)增DNA片段→①分析PCR擴(kuò)增結(jié)果。（2）在用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí)，DNA的復(fù)制過(guò)程與細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制類似，操作③中使用的酶是Taq酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶），PCR反應(yīng)中的每次循環(huán)可分為變性、復(fù)性、延伸三步，其中復(fù)性的結(jié)果是Taq酶從引物起始進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成。（3）DNA復(fù)制需要引物，為了做出正確的診斷，PCR反應(yīng)所用的引物應(yīng)該能與兩條單鏈DNA特異性結(jié)合。（4）據(jù)分析可知，PCR（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)是指一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。該技術(shù)目前被廣泛地應(yīng)用于疾病診斷等方面?！军c(diǎn)睛】本題考查PCR技術(shù)及應(yīng)用，難度較小，解答本題的關(guān)鍵是明確PCR技術(shù)的原理，具體反應(yīng)過(guò)程，以及在臨床病原菌檢測(cè)中的應(yīng)用。7．（2021·河北高考真題）采礦污染和不當(dāng)使用化肥導(dǎo)致重金屬鎘（Cd）在土壤中過(guò)量積累。利用植物修復(fù)技術(shù)將土壤中的Cd富集到植物體內(nèi)，進(jìn)行后續(xù)處理（例如，收集植物組織器官異地妥善儲(chǔ)存），可降低土壤中Cd的含量。為提高植物對(duì)Cd污染土壤的修復(fù)能力，研究者將酵母液泡Cd轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（YCF1）基因?qū)胧茉囍参铮z測(cè)了相關(guān)指標(biāo)。回答下列問(wèn)題：（1）為獲取YCF1基因，將酵母細(xì)胞的全部DNA提取、切割后與載體連接，導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存，這個(gè)群體稱為_(kāi)_________。（2）將DNA序列插入Ti質(zhì)粒構(gòu)建重組載體時(shí)，所需要的兩種酶是__________。構(gòu)建的重組基因表達(dá)載體中必須含有標(biāo)記基因，其作用是______________________________。（3）進(jìn)行前期研究時(shí)，將含有YCF1基因的重組載體導(dǎo)入受試雙子葉植物印度芥菜，采用最多的方法是__________。研究者進(jìn)一步獲得了轉(zhuǎn)YCF1基因的不育楊樹(shù)株系，采用不育株系作為實(shí)驗(yàn)材料的目的是______________________________。（4）將長(zhǎng)勢(shì)一致的野生型和轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)苗移栽到Cd污染的土壤中，半年后測(cè)定植株干重（圖1）及不同器官中Cd含量（圖2）。據(jù)圖1可知，與野生型比，轉(zhuǎn)基因植株對(duì)Cd具有更強(qiáng)的__________（填“耐性”或“富集能力”）；據(jù)圖2可知，對(duì)轉(zhuǎn)基因植株的__________進(jìn)行后續(xù)處理對(duì)于緩解土壤Cd污染最為方便有效。（5）已知YCF1特異定位于轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞的液泡膜上。據(jù)此分析，轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)比野生型能更好地適應(yīng)高Cd環(huán)境的原因是____________________。相較于草本植物，采用楊樹(shù)這種喬木作為Cd污染土壤修復(fù)植物的優(yōu)勢(shì)在于___________（寫(xiě)出兩點(diǎn)即可）?！敬鸢浮浚?）基因組文庫(kù)（2）限制酶和DNA連接酶便于目的基因的篩選和鑒定（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法避免目的基因在自然界中的擴(kuò)散（4）耐性莖葉（5）YCF1可通過(guò)主動(dòng)運(yùn)輸將Cd離子運(yùn)到液泡中，提高了細(xì)胞液的濃度，有利于植株吸水楊樹(shù)具有發(fā)達(dá)的根系和高大的樹(shù)冠，更適應(yīng)污染礦區(qū)等不良環(huán)境，同時(shí)可充分吸收土壤中的Cd，木材也方便運(yùn)輸、利用【分析】1、基因文庫(kù)包括基因組文庫(kù)和cDNA文庫(kù)，基因組文庫(kù)包含該物種的全部基因，cDNA文庫(kù)是部分基因文庫(kù)。2、據(jù)圖1可知，與野生型比，轉(zhuǎn)基因植株地上部分、地下部分和整株干重均增加；據(jù)圖2可知，轉(zhuǎn)基因植株的莖、葉中Cd含量高于野生型。【詳解】（1）為獲取YCF1基因，將酵母細(xì)胞的全部DNA提取、切割后與載體連接，導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存，這個(gè)群體含有酵母菌的全部基因，稱為基因組文庫(kù)。（2）將DNA序列插入Ti質(zhì)粒構(gòu)建重組載體時(shí)，需要用限制酶切割供體DNA和質(zhì)粒，以產(chǎn)生相同的黏性末端，然后用DNA連接酶進(jìn)行連接。基因表達(dá)載體中的標(biāo)記基因可用于目的基因的篩選和鑒定。（3）農(nóng)桿菌容易侵染雙子葉植物，其質(zhì)粒中的T-DNA可轉(zhuǎn)移并插入到受體細(xì)胞DNA中，將含有YCF1基因的重組載體導(dǎo)入受試雙子葉植物印度芥菜，采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法?？紤]轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性，采用不育株系作為實(shí)驗(yàn)材料，可避免目的基因在自然界中的擴(kuò)散。（4）根據(jù)分析可知，與野生型比，轉(zhuǎn)基因植株地上部分、地下部分和整株干重均增加，說(shuō)明轉(zhuǎn)基因植株在Cd污染的土壤中生長(zhǎng)較好，即對(duì)Cd具有更強(qiáng)的耐性；據(jù)圖2分析，轉(zhuǎn)基因植株的莖、葉中Cd含量高于野生型，因此對(duì)轉(zhuǎn)基因植株的莖、葉進(jìn)行后續(xù)處理，可使轉(zhuǎn)基因植株持續(xù)發(fā)揮富集Cd的作用，對(duì)于緩解土壤Cd污染最為方便有效。（5）YCF1特異定位于轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞的液泡膜上，可通過(guò)主動(dòng)運(yùn)輸將Cd離子運(yùn)到液泡中，提高了細(xì)胞液的濃度，有利于植株吸水，所以轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)比野生型能更好地適應(yīng)高Cd環(huán)境。相較于草本植物，楊樹(shù)具有發(fā)達(dá)的根系和高大的樹(shù)冠，更適應(yīng)污染礦區(qū)等不良環(huán)境，同時(shí)可充分吸收土壤中的Cd，木材也方便運(yùn)輸、利用，作為Cd污染土壤修復(fù)植物更具有優(yōu)勢(shì)。【點(diǎn)睛】本題結(jié)合圖示考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求學(xué)生掌握基因工程的工具、步驟，難度適中，意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，要求能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決生活中的一些實(shí)際問(wèn)題，或運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解釋生活中的一些現(xiàn)象。8.（2021·6浙江月選考）（15分）回答下列（二）小題：（二）斑馬魚(yú)是一種模式動(dòng)物，體外受精發(fā)育，胚胎透明、便于觀察，可用于水質(zhì)監(jiān)測(cè)，基因功能分析以及藥物毒性與安全性評(píng)價(jià)等。（1）由于人類活動(dòng)產(chǎn)生的生活污水日益增多，大量未經(jīng)處理的污水直接排入河流、湖泊會(huì)引起水體__________，導(dǎo)致藻類大量繁殖形成水華。取水樣喂養(yǎng)斑馬魚(yú)，可用斑馬魚(yú)每周的體重和死亡率等指標(biāo)監(jiān)測(cè)水體污染程度。（2）為了研究某基因在斑馬魚(yú)血管發(fā)育過(guò)程中的分子調(diào)控機(jī)制，用DNA連接酶將該基因連接到質(zhì)粒載體形成__________，導(dǎo)入到大腸桿菌菌株DH5α中。為了能夠連接上該目的基因、并有利于獲得含該目的基因的DH5α陽(yáng)性細(xì)胞克降，質(zhì)粒載體應(yīng)含有__________________________________________________（答出2點(diǎn)即可）。提取質(zhì)粒后，采用__________法，將該基因?qū)氲桨唏R魚(yú)受精卵細(xì)胞中，培養(yǎng)并觀察轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)胚胎血管的發(fā)育情況。（3）為了獲取大量斑馬魚(yú)胚胎細(xì)胞用于藥物篩選，可用__________分散斑馬伍囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，取分散細(xì)胞作為初始材料進(jìn)行__________培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加成纖維細(xì)胞作為_(kāi)_________，以提高斑馬魚(yú)胚胎細(xì)胞克隆的形成率。（二）（1）富營(yíng)養(yǎng)化（2）重組DNA分子限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列、抗生素抗性基因顯微注射（3）胰蛋白酶原代飼養(yǎng)層細(xì)胞9．（2021·1月浙江高考真題）回答下列（二）小題：（二）三葉青為蔓生的藤本植物，以根入藥。由于野生三葉青對(duì)生長(zhǎng)環(huán)境要求非?？量蹋约吧鷳B(tài)環(huán)境的破壞和過(guò)度的采挖，目前我國(guó)野生三葉青已十分珍稀。（1）為保護(hù)三葉青的________多樣性和保證藥材的品質(zhì)，科技工作者依據(jù)生態(tài)工程原理，利用________技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了三葉青的林下種植。（2）依據(jù)基因工程原理，利用發(fā)根農(nóng)桿菌侵染三葉青帶傷口的葉片，葉片產(chǎn)生酚類化合物，誘導(dǎo)發(fā)根農(nóng)桿菌質(zhì)粒上vir系列基因表達(dá)形成________和限制性核酸內(nèi)切酶等，進(jìn)而從質(zhì)粒上復(fù)制并切割出一段可轉(zhuǎn)移的DNA片段（T-DNA）。T-DNA進(jìn)入葉片細(xì)胞并整合到染色體上，T-DNA上rol系列基因表達(dá)，產(chǎn)生相應(yīng)的植物激素，促使葉片細(xì)胞持續(xù)不斷地分裂形成________，再分化形成毛狀根。（3）剪取毛狀根，轉(zhuǎn)入含頭孢類抗生素的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行多次________培養(yǎng)，培養(yǎng)基中添加抗生素的主要目的是________。最后取毛狀根轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基、置于搖床上進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，通過(guò)控制搖床的________和溫度，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基成分中的________，獲得大量毛狀根，用于提取藥用成分?！敬鸢浮浚ǘ?）遺傳間種（2）DNA聚合酶愈傷組織（3）繼代殺滅發(fā)根農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)速營(yíng)養(yǎng)元素以及生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的種類和濃度【解析】（二）（1）生物多樣性包括遺傳多樣性、物種多樣性和生態(tài)系統(tǒng)多樣性，為保護(hù)三葉青的遺傳多樣性和保證藥材的品質(zhì)；三葉青的林下種植，是利用間種技術(shù)。（2）分析題意可知，從質(zhì)粒上復(fù)制并切割出一段可轉(zhuǎn)移的DNA片段（T-DNA），DNA復(fù)制需要DNA聚合酶，故可知，酚類化合物誘導(dǎo)發(fā)根農(nóng)桿菌質(zhì)粒上vir系列基因表達(dá)，形成DNA聚合酶和限制性核酸內(nèi)切酶等。根據(jù)植物組織培養(yǎng)技術(shù)過(guò)程可知，相應(yīng)植物激素可以促使葉片細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，再分化形成毛狀根。（3）剪取毛狀根，轉(zhuǎn)入含頭孢類抗生素的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行多次繼代培養(yǎng)，培養(yǎng)基中添加抗生素的主要目的是殺滅發(fā)根農(nóng)桿菌。最后取毛狀根轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基、置于搖床上進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，通過(guò)控制搖床的轉(zhuǎn)速和溫度，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基成分中的營(yíng)養(yǎng)元素以及生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的種類和濃度，獲得大量毛狀根，用于提取藥用成分。10．（2020年山東省高考生物試卷（新高考)·13）兩種遠(yuǎn)緣植物的細(xì)胞融合后會(huì)導(dǎo)致一方的染色體被排出。若其中一個(gè)細(xì)胞的染色體在融合前由于某種原因斷裂，形成的染色體片段在細(xì)胞融合后可能不會(huì)被全部排出，未排出的染色體片段可以整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上而留存在雜種細(xì)胞中。依據(jù)該原理，將普通小麥與耐鹽性強(qiáng)的中間偃麥草進(jìn)行體細(xì)胞雜交獲得了耐鹽小麥新品種，過(guò)程如下圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A．過(guò)程①需使用纖維素酶和果膠酶處理細(xì)胞B．過(guò)程②的目的是使中間偃麥草的染色體斷裂C．過(guò)程③中常用滅活的病毒誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合D．耐鹽小麥的染色體上整合了中間偃麥草的染色體片段【答案】C【解析】【分析】從圖中看出①是去掉植物細(xì)胞壁，②是用紫外線誘導(dǎo)染色體變異，③融合形成雜種細(xì)胞?！驹斀狻緼、過(guò)程1是獲得植物細(xì)胞的原生質(zhì)體，需要用纖維素酶和果膠酶將細(xì)胞壁分解，A正確；B、根據(jù)題干信息“將其中一個(gè)細(xì)胞的染色體在融合前斷裂，形成的染色體片段在細(xì)胞融合后可能不會(huì)被全部排出，未排出的染色體片段可以整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上而留存在雜種細(xì)胞中，將普通小麥與耐鹽性強(qiáng)的中間偃麥草進(jìn)行體細(xì)胞雜交獲得了耐鹽小麥新品種，”故過(guò)程②通過(guò)紫外線照射是使中間偃麥草的染色體斷裂，B正確；C、滅活的病毒誘導(dǎo)是動(dòng)物細(xì)胞融合特有的方法，誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合常用物理法、化學(xué)法，C錯(cuò)誤；D、實(shí)驗(yàn)最終將不抗鹽的普通小麥和抗鹽的偃麥草整合形成耐鹽小麥，說(shuō)明耐鹽小麥染色體上整合了中間偃麥草的染色體片段，D正確。故選C?！军c(diǎn)睛】本題的難點(diǎn)是對(duì)過(guò)程②的分析，考生需要結(jié)合題干中的信息作答。11．（2020年山東省高考生物試卷（新高考)·14）經(jīng)遺傳改造的小鼠胚胎干細(xì)胞注入囊胚，通過(guò)胚胎工程的相關(guān)技術(shù)可以獲得具有不同遺傳特性的實(shí)驗(yàn)小鼠。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A．用促性腺激素處理雌鼠可以獲得更多的卵子B．體外受精前要對(duì)小鼠的精子進(jìn)行獲能處理C．胚胎移植前要檢查胚胎質(zhì)量并在囊胚或原腸胚階段移植D．遺傳改造的小鼠胚胎干細(xì)胞可以通過(guò)轉(zhuǎn)基因等技術(shù)獲得【答案】C【解析】【分析】1、胚胎移植的基本程序主要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體，供體和受體是同一物種。并用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理。②配種或人工授精。③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存。配種或輸精后第7天，用特制的沖卵裝置，把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來(lái)（也叫沖卵）。對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段。直接向受體移植或放入-196℃的液氮中保存。④對(duì)胚胎進(jìn)行移植。⑤移植后的檢查。對(duì)受體母牛進(jìn)行是否妊娠的檢查。2、體外受精主要包括：卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精?！驹斀狻緼、促性腺激素可以使雌鼠超數(shù)排卵，獲得更多的卵子，A正確；B、精子只有獲能后才能完成受精，故體外受精前要對(duì)小鼠的精子進(jìn)行獲能處理，B正確；C、胚胎移植通常選擇囊胚期之前的階段，如桑椹胚或囊胚階段，C錯(cuò)誤；D、轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以定向改造小鼠的基因，所以遺傳改造的小鼠胚胎干細(xì)胞可以通過(guò)轉(zhuǎn)基因等技術(shù)獲得，D正確。故選C?！军c(diǎn)睛】本題考查胚胎工程的基本知識(shí)，考生需要識(shí)記基本操作，D項(xiàng)中需要結(jié)合基因工程的目的進(jìn)行解答。12．（2020年江蘇省高考生物試卷·23）小鼠胚胎干細(xì)胞經(jīng)定向誘導(dǎo)可獲得多種功能細(xì)胞、制備流程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．為獲得更多的囊胚，采用激素注射促進(jìn)雄鼠產(chǎn)生更多的精子B．細(xì)胞a和細(xì)胞b內(nèi)含有的核基因不同，所以全能性高低不同C．用胰蛋白酶將細(xì)胞a的膜白消化后可獲得分散的胚胎干細(xì)胞D．胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)出的各種細(xì)胞都需在CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)【答案】ABC【解析】【分析】1、胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞，來(lái)源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)）。2、ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中，能夠維持不分化的狀態(tài)．在培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，如牛黃酸、丁酰環(huán)腺苷酸等化學(xué)物質(zhì)時(shí)，就可以誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化，這為揭示細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡機(jī)理提供了有效的手段。【詳解】A、為了獲得更多的囊胚，可以采用激素促進(jìn)成熟雌性個(gè)體超數(shù)排卵，然后將卵細(xì)胞從母體內(nèi)取出，在試管內(nèi)與人工采集的精子進(jìn)行體外受精，培育成胚胎，A錯(cuò)誤；B、細(xì)胞a和細(xì)胞b是由同一個(gè)受精卵經(jīng)過(guò)有絲分裂形成的，故核基因相同，B錯(cuò)誤；C、運(yùn)用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以從哺乳動(dòng)物的早期胚胎中獲得胚胎干細(xì)胞，首先必須用胰蛋白酶處理內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，分解細(xì)胞間的膠原蛋白等，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要在5%CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，以維持培養(yǎng)液的pH，D正確。故選ABC。13．（2020年天津高考生物試卷·1）在克隆哺乳動(dòng)物過(guò)程中，通常作為核移植受體細(xì)胞的是去核的（）A．卵原細(xì)胞B．初級(jí)卵母細(xì)胞C．次級(jí)卵母細(xì)胞D．卵細(xì)胞【答案】C【解析】【分析】體細(xì)胞核移植過(guò)程：【詳解】在克隆哺乳動(dòng)物過(guò)程中，通常選擇減數(shù)第二次分裂中期的去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，即次級(jí)卵母細(xì)胞。故選C。14．閱讀下列材料，回答下列小題。在應(yīng)用基因工程改變生物遺傳特性，進(jìn)而利用種間關(guān)系進(jìn)行生物防治方面，中國(guó)科學(xué)家取得了許多重要進(jìn)展。資料一：人類使用化學(xué)農(nóng)藥防治害蟲(chóng)，致使環(huán)境不斷惡化。王成樹(shù)等從黃肥尾蝎中克隆出一種神經(jīng)毒素基因AalT，將其導(dǎo)入能寄生在許多害蟲(chóng)體內(nèi)的綠僵菌中，增強(qiáng)綠僵菌致死害蟲(chóng)的效應(yīng)，可有效控制蟲(chóng)害大規(guī)模爆發(fā)。資料二：小麥赤霉病是世界范圍內(nèi)極具毀滅性的農(nóng)業(yè)真菌病害。王宏偉、孔令讓等從長(zhǎng)穗偃麥草中克隆出抗赤霉病主效基因Fhb7。將Fhb7導(dǎo)入小麥，其表達(dá)產(chǎn)物可減輕赤霉菌對(duì)小麥的感染，從而避免小麥赤霉病大規(guī)模爆發(fā)。資料三：瘧疾由受瘧原蟲(chóng)感染的雌按蚊通過(guò)叮咬在人群中傳播。王四寶等從幾種微生物中克隆出5種不同抗瘧機(jī)制的基因，將它們導(dǎo)入按蚊的腸道共生菌AS1中。在按蚊腸道內(nèi)，AS1工程菌分泌的基因表達(dá)產(chǎn)物可殺滅瘧原蟲(chóng)。因AS1可在按蚊親代和子代種群中擴(kuò)散，所以在含AS1工程菌按蚊的群落中，瘧疾傳播一般可被阻斷。11．（2020年天津高考生物試卷）目的基因是基因工程的關(guān)鍵要素。關(guān)于上述資料中涉及的目的基因，下列分析正確的是（）A．來(lái)源：必須從動(dòng)物、植物或微生物的基因組文庫(kù)中直接獲取B．作用：上述基因表達(dá)產(chǎn)物一定影響防治對(duì)象的生長(zhǎng)或存活C．轉(zhuǎn)化：均可采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞D．應(yīng)用：只有將目的基因?qū)敕乐螌?duì)象才能達(dá)到生物防治目的12．在利用種間關(guān)系進(jìn)行生物防治的措施中，下列分析錯(cuò)誤的是（）A．施用綠僵菌工程菌減少蟲(chóng)害，不改變綠僵菌與害蟲(chóng)之間存在寄生關(guān)系B．引入Fhb7增強(qiáng)小麥的抗菌性，目的是調(diào)節(jié)真菌對(duì)植物的寄生能力C．AS1工程菌分泌的多種表達(dá)產(chǎn)物不改變AS1與按蚊之間存在共生關(guān)系D．使AS1工程菌分泌多種表達(dá)產(chǎn)物殺滅瘧原蟲(chóng)，目的是調(diào)節(jié)按蚊對(duì)人的寄生能力【答案】11．B12．D【解析】【分析】1、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原—抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。2、生物的種間關(guān)系包括競(jìng)爭(zhēng)、捕食、互利共生和寄生。互利共生是指兩種生物共居一起，彼此創(chuàng)造有利的生活條件，較之單獨(dú)生活時(shí)更為有利；相互依賴，相互依存，一旦分離，雙方都不能正常地生活。寄生是指一種生物生活在另一種生物的體內(nèi)或體表，并從后者攝取營(yíng)養(yǎng)以維持生活的種間關(guān)系。前者稱寄生物，后者稱寄主。大都為一方受益，一方受害，甚至引起寄主患病或死亡。11．A、目的基因可以從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增或是人工合成，A錯(cuò)誤；B、資料一中神經(jīng)毒素基因AalT導(dǎo)入綠僵菌中可以增強(qiáng)綠僵菌致死害蟲(chóng)的效應(yīng)，資料二中Fhb7基因?qū)胄←?，其表達(dá)產(chǎn)物可減輕赤霉菌對(duì)小麥的感染，資料三，將5種不同抗瘧機(jī)制的基因?qū)氚次玫哪c道共生菌AS1中，AS1工程菌分泌的基因表達(dá)產(chǎn)物可殺滅瘧原蟲(chóng)，因此上述基因表達(dá)產(chǎn)物一定影響防治對(duì)象的生長(zhǎng)或存活，B正確；C、基因AalT導(dǎo)入綠僵菌中可用感受態(tài)細(xì)胞法，F(xiàn)hb7基因?qū)胄←溈捎棉r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法，將5種不同抗瘧機(jī)制的基因?qū)氚次玫哪c道共生菌AS1中可用感受態(tài)細(xì)胞法，C錯(cuò)誤；D、要想達(dá)到生物防治的目的不一定要將目的基因?qū)敕乐螌?duì)象，如資料一，可將目的基因?qū)肽芗纳诙喾N害蟲(chóng)體內(nèi)的綠僵菌中，如資料三，可將目的基因?qū)氚次玫哪c道共生菌AS1中，這種方法同樣可以達(dá)到生物防治的目的，D錯(cuò)誤。故選B。12．A、導(dǎo)入AalT基因的綠僵菌只是增強(qiáng)了致死害蟲(chóng)的效應(yīng)，沒(méi)有改變綠僵菌與害蟲(chóng)之間存在的寄生關(guān)系，A正確；B、Fhb7基因?qū)胄←満?，其表達(dá)產(chǎn)物可減輕赤霉菌對(duì)小麥的感染，調(diào)節(jié)了真菌對(duì)植物的寄生能力，B正確；C、AS1工程菌分泌的基因表達(dá)產(chǎn)物可殺滅瘧原蟲(chóng)，并不會(huì)改變AS1與按蚊之間存在的共生關(guān)系，C正確；D、使AS1工程菌分泌多種表達(dá)產(chǎn)物殺滅瘧原蟲(chóng)，目的是阻斷瘧疾的傳播，不會(huì)改變按蚊對(duì)人的寄生能力，D錯(cuò)誤。故選D。15．（2020年浙江省高考生物試卷（7月選考)·15）下列關(guān)于病毒的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．有的病毒經(jīng)滅活處理后，可用于細(xì)胞工程中介導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞的融合B．適當(dāng)增加機(jī)體內(nèi)參與免疫的細(xì)胞數(shù)量與活性，可提高對(duì)新型冠狀病毒的抵御能力C．在某人的分泌物中檢測(cè)到新型冠狀病毒，推測(cè)該病毒的增殖不依賴于宿主細(xì)胞D．用高溫高壓處理病毒使其失去感染能力，原因之一是病毒的蛋白質(zhì)發(fā)生了熱變性【答案】C【解析】【分析】誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法有三種：生物方法（病毒）、化學(xué)方法（聚乙二醇PEG）、物理方法（離心、震動(dòng)、電刺激）。某些病毒如：仙臺(tái)病毒、副流感病毒和新城雞瘟病毒的被膜中有融合蛋白，可介導(dǎo)病毒同宿主細(xì)胞融合，也可介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞的融合，因此可以用紫外線滅活的此類病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合。【詳解】A、有的病毒經(jīng)滅活處理后，可用于細(xì)胞工程中介導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞的融合，如滅活的病毒，A正確；

B、適當(dāng)增加機(jī)體內(nèi)參與免疫的細(xì)胞數(shù)量與活性，可以參與免疫調(diào)節(jié)中的體液和細(xì)胞免疫，盡可能殺死更多的病毒，可提高對(duì)新型冠狀病毒的抵御能力，B正確；

C、在某人的分泌物中檢測(cè)到新型冠狀病毒，是因?yàn)椴《窘爰?xì)胞后大量繁殖，病毒從細(xì)胞中釋放出來(lái)，不能說(shuō)明該病毒的增殖不依賴于宿主細(xì)胞，C錯(cuò)誤；

D、用高溫高壓處理病毒使其失去感染能力，原因之一是病毒的蛋白質(zhì)在高溫高壓下，空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，肽鏈松散，發(fā)生了變性，D正確。

故選C。16．（2020年浙江省高考生物試卷（7月選考)·24）下列關(guān)于基因工程的敘述，正確的是（）A．若受體大腸桿菌含有構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)用到的限制性核酸內(nèi)切酶，則一定有利于該重組質(zhì)粒進(jìn)入受體并保持結(jié)構(gòu)穩(wěn)定B．抗除草劑基因轉(zhuǎn)入某抗鹽植物獲得2個(gè)穩(wěn)定遺傳轉(zhuǎn)基因品系，抗性鑒定為抗除草劑抗鹽和抗除草劑不抗鹽。表明一定是抗鹽性的改變與抗除草劑基因的轉(zhuǎn)入無(wú)關(guān)C．抗除草劑基因轉(zhuǎn)入某植物獲得轉(zhuǎn)基因植株，其DNA檢測(cè)均含目的基因，抗性鑒定為抗除草劑和不抗除草劑。表明一定是前者表達(dá)了抗性蛋白而后者只表達(dá)抗性基因RNAD．已知不同分子量DNA可分開(kāi)成不同條帶，相同分子量的為一條帶。用某種限制性核酸內(nèi)切酶完全酶切環(huán)狀質(zhì)粒后，出現(xiàn)3條帶。表明該質(zhì)粒上一定至少有3個(gè)被該酶切開(kāi)的位置【答案】D【解析】【分析】基因工程中通常要有多種工具酶、目的基因、載體和宿主細(xì)胞等基本要素，并按一定的程序進(jìn)行操作，包括目的基因的獲得、重組DNA的形成、重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞、篩選含有目的基因的受體細(xì)胞和目的基因的表達(dá)等幾個(gè)方面?！驹斀狻緼、若受體大腸桿菌含有構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)用到的限制性核酸內(nèi)切酶，則該酶會(huì)對(duì)進(jìn)入受體的重組質(zhì)粒進(jìn)行切割，不利于其保持結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，A錯(cuò)誤；B、抗除草劑基因轉(zhuǎn)入抗鹽植物，獲得了抗除草劑抗鹽品系和抗除草劑不抗鹽品系，不抗鹽品系的產(chǎn)生可能是轉(zhuǎn)入的抗除草劑基因插入到抗鹽基因內(nèi)，影響其表達(dá)造成，B錯(cuò)誤；C、轉(zhuǎn)基因植物中均含抗除草劑基因，但存在抗除草劑和不抗除草劑兩種植株，前者表達(dá)了抗性蛋白，后者可能抗除草劑基因未轉(zhuǎn)錄出mRNA，或轉(zhuǎn)錄出的mRNA未能翻譯成蛋白質(zhì)，C錯(cuò)誤；D、某種限制性內(nèi)切酶完全酶切環(huán)狀質(zhì)粒后，出現(xiàn)3條帶，即3種不同分子量DNA，因此環(huán)狀質(zhì)粒上至少有3個(gè)酶切位點(diǎn)，D正確。故選D。17．（2019北京卷·4）甲、乙是嚴(yán)重危害某二倍體觀賞植物的病害。研究者先分別獲得抗甲、乙的轉(zhuǎn)基因植株。再將二者雜交后得到F1，結(jié)合單倍體育種技術(shù)，培育出同時(shí)抗甲、乙的植物新品種，以下對(duì)相關(guān)操作及結(jié)果的敘述，錯(cuò)誤的是A．將含有目的基因和標(biāo)記基因的載體導(dǎo)入受體細(xì)胞B．通過(guò)接種病原體對(duì)轉(zhuǎn)基因的植株進(jìn)行抗病性鑒定C．調(diào)整培養(yǎng)基中植物激素比例獲得F1花粉再生植株D．經(jīng)花粉離體培養(yǎng)獲得的若干再生植株均為二倍體【答案】D【解析】【分析】由題意可知，同時(shí)抗甲、乙的植物新品種的培養(yǎng)過(guò)程為：把含抗甲的目的基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入植物細(xì)胞，獲得抗甲植株，同時(shí)把含抗乙的目的基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入植物細(xì)胞，獲得抗乙植株，通過(guò)雜交獲得F1（二倍體植株），取F1的花粉經(jīng)花藥離體培養(yǎng)獲得單倍體植株，用秋水仙素處理單倍體植株獲得純合的同時(shí)抗甲、乙的植物新品種（二倍體）?！驹斀狻恳@得轉(zhuǎn)基因的抗甲或抗乙植株，需要構(gòu)建基因表達(dá)載體（含目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)），再把基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞中，A正確；對(duì)轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，可以通過(guò)抗病接種實(shí)驗(yàn)進(jìn)行個(gè)體水平的檢測(cè)，B正確；對(duì)F1的花粉進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí)，需要經(jīng)過(guò)脫分化和再分化過(guò)程，其中生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素比例高時(shí)利于根的分化，比例低時(shí)利于芽的分化，C正確；經(jīng)花粉離體培養(yǎng)獲得的植株是單倍體，D錯(cuò)誤。因此，本題答案選D。18．（2019江蘇卷·16）下列生物技術(shù)操作對(duì)遺傳物質(zhì)的改造，不會(huì)遺傳給子代的是A．將胰島素基因表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌，篩選獲得基因工程菌B．將花青素代謝基因?qū)胫参矬w細(xì)胞，經(jīng)組培獲得花色變異植株C．將腸乳糖酶基因?qū)肽膛Ｊ芫眩嘤霎a(chǎn)低乳糖牛乳的奶牛D．將腺苷酸脫氨酶基因轉(zhuǎn)入淋巴細(xì)胞后回輸患者，進(jìn)行基因治療【答案】D【解析】【分析】轉(zhuǎn)基因技術(shù)的原理是基因重組?；蛑亟M和基因突變、染色體變異均屬于可遺傳的變異?；蛑委煟褐赴颜；?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達(dá)到治療疾病的目的，這是治療遺傳病的最有效的手段。【詳解】將含胰島素基因表達(dá)載體的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌獲得的轉(zhuǎn)基因菌，可以通過(guò)二分裂將胰島素基因傳給后代，A不符合題意；將花青素代謝基因?qū)胫参矬w細(xì)胞，再經(jīng)植物組織培養(yǎng)獲得的植株所有細(xì)胞均含有花青素代謝基因，花青素代謝基因會(huì)隨該植物傳給后代，B不符合題意；將腸乳糖酶基因?qū)肽膛Ｊ芫?，培育出產(chǎn)低乳糖牛乳的奶牛所有細(xì)胞均含有腸乳糖酶基因，可以遺傳給后代，C不符合題意；該患者進(jìn)行基因治療時(shí)，只有淋巴細(xì)胞含有該腺苷酸脫氨酶基因，性原細(xì)胞不含該基因，故不能遺傳給后代，D符合題意。19．（2019江蘇卷·23）下圖為雜交瘤細(xì)胞制備示意圖。骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT-），在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA，無(wú)法生長(zhǎng)。下列敘述正確的是A．可用滅活的仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合B．兩兩融合的細(xì)胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長(zhǎng)C．雜交瘤細(xì)胞需進(jìn)一步篩選才能用于生產(chǎn)D．細(xì)胞膜的流動(dòng)性是細(xì)胞融合的基礎(chǔ)【答案】ACD【解析】【分析】（1）動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)手段有電激、聚乙二醇、滅活的病毒等，結(jié)果產(chǎn)生雜交細(xì)胞，主要用于制備單克隆抗體。（2）單克隆抗體制備的原理包括：①免疫理：B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生特異性抗體；②細(xì)胞融合原理：利用病毒對(duì)宿主細(xì)胞的穿透性使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合；③動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)：對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)、體外培養(yǎng)。（3）制備單克隆抗體過(guò)程中的幾種細(xì)胞：①免疫B細(xì)胞（漿細(xì)胞）：能產(chǎn)生單一抗體，但不能無(wú)限增殖；②骨髓瘤細(xì)胞：能無(wú)限增殖，但不能產(chǎn)生抗體；③雜交瘤細(xì)胞：既能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無(wú)限增殖。【詳解】誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有電激、聚乙二醇、滅活的病毒（如滅活的仙臺(tái)病毒）等，A正確；兩兩融合的細(xì)胞包括免疫B細(xì)胞與免疫B細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、免疫B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞雖然能無(wú)限增殖，但缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，免疫B細(xì)胞雖然有次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，但不具有無(wú)限增殖的本領(lǐng)，所以在HAT篩選培養(yǎng)液中，兩兩融合的具有同種核的細(xì)胞都無(wú)法生長(zhǎng)，只有雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng)，B錯(cuò)誤；因每個(gè)免疫B細(xì)胞只分泌一種特異性抗體，因此在HAT篩選培養(yǎng)液中篩選出來(lái)的眾多的雜交瘤細(xì)胞所分泌的抗體，不一定都是人類所需要的，還需要進(jìn)一步把能分泌人類所需要抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出來(lái)，C正確；動(dòng)物細(xì)胞融合是以細(xì)胞膜的流動(dòng)性為基礎(chǔ)的，D正確。20．（2020年全國(guó)統(tǒng)一高考生物試卷（新課標(biāo)Ⅰ)·38）為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學(xué)以小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)流程?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）上述實(shí)驗(yàn)前必須給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是_________________。（2）寫(xiě)出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實(shí)驗(yàn)步驟：_________________。（3）為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，需要進(jìn)行篩選。圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于_________________，使用該培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果是_________________。圖中篩選2含多次篩選，篩選所依據(jù)的基本原理是_________________。（4）若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖，可采用的方法有________________（答出2點(diǎn)即可）?！敬鸢浮浚?）誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞（2）取小鼠甲脾臟剪碎，用胰蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞，加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液（3）選擇培養(yǎng)基只有雜交瘤細(xì)胞能夠生存抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性（4）將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)【解析】【分析】由圖可知，篩選1指用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，篩選2指進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞?！驹斀狻浚?）實(shí)驗(yàn)前給小鼠甲注射病毒A，是為了誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞。

（2）取小鼠的脾臟，剪碎組織，用胰蛋白酶處理獲得單個(gè)細(xì)胞，加入培養(yǎng)液可以制成單細(xì)胞懸液。

（3）圖中篩選1需要用到選擇培養(yǎng)基，只有雜交瘤細(xì)胞可以存活。篩選2是為了獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，該過(guò)程要用到抗原抗體雜交，故篩選所依據(jù)的原理是抗原-抗體反應(yīng)具有特異性。

（4）獲得能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞后，可以在體外培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)，或在小鼠的腹腔中進(jìn)行培養(yǎng)，使雜交瘤細(xì)胞大量增殖。【點(diǎn)睛】制備單克隆抗體的過(guò)程中，需要用到動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，需要用到兩次篩選，第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選的目的是獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。21．（2020年全國(guó)統(tǒng)一高考生物試卷（新課標(biāo)Ⅱ)·38）植樹(shù)造林、“無(wú)廢棄物農(nóng)業(yè)”、污水凈化是建設(shè)美麗中國(guó)的重要措施?；卮鹣铝杏嘘P(guān)生態(tài)工程的問(wèn)題：（1）在植樹(shù)造林時(shí)，一般認(rèn)為，全部種植一種植物的做法是不可取的。因?yàn)榕c混合種植方式所構(gòu)建的生態(tài)系統(tǒng)相比，按照種植一種植物方式所構(gòu)建的生態(tài)系統(tǒng)，其抵抗力穩(wěn)定性___________。抵抗力穩(wěn)定性的含義是___________。（2）“無(wú)廢棄物農(nóng)業(yè)”是我國(guó)利用生態(tài)工程的原理進(jìn)行農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的一種模式，其做法是收集有機(jī)物質(zhì)。包括人畜糞便、枯枝落葉等，采用堆肥和漚肥等多種方式，把它們轉(zhuǎn)變?yōu)橛袡C(jī)肥料，再施用到農(nóng)田中。施用有機(jī)肥料的優(yōu)點(diǎn)是________________（答出3點(diǎn)即可）。在有機(jī)肥料的形成過(guò)程中，微生物起到了重要作用，這些微生物屬于生態(tài)系統(tǒng)組分中的________。（3）在污水凈化過(guò)程中，除發(fā)揮污水處理廠的作用外，若要利用生物來(lái)回收污水中的銅、鎘等金屬元素，請(qǐng)?zhí)峁┮粋€(gè)方案：_______________?！敬鸢浮浚?）低生態(tài)系統(tǒng)抵抗外界干擾并使自身的結(jié)構(gòu)與功能保持原狀或不受損害的能力（2）改善了土壤結(jié)構(gòu)；培育了土壤微生物；實(shí)現(xiàn)了土壤養(yǎng)分的循環(huán)利用分解者（3）種植能吸收這些金屬元素的水生植物，再?gòu)闹参镏谢厥战饘佟窘馕觥俊痉治觥?、生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性：包括抵抗力穩(wěn)定性和恢復(fù)力穩(wěn)定性。2、生態(tài)工程的基本原理：①物質(zhì)循環(huán)再生原理：物質(zhì)能在生態(tài)系統(tǒng)中循環(huán)往復(fù)，分層分級(jí)利用；②物種多樣性原理：物種繁多復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)具有較高的抵抗力穩(wěn)定性；③協(xié)調(diào)與平衡原理：生態(tài)系統(tǒng)的生物數(shù)量不能超過(guò)環(huán)境承載力（環(huán)境容納量）的限度；④整體性原理：生態(tài)系統(tǒng)建設(shè)要考慮自然、經(jīng)濟(jì)、社會(huì)的整體影響；⑤系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理：系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能原理：要通過(guò)改善和優(yōu)化系統(tǒng)結(jié)構(gòu)改善功能；系統(tǒng)整體性原理：系統(tǒng)各組分間要有適當(dāng)?shù)谋壤P(guān)系，使得能量、物質(zhì)、信息等的轉(zhuǎn)換和流通順利完成，并實(shí)現(xiàn)總體功能大于各部分之和的效果，即“1+1＞2”。【詳解】（1）生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性取決于生態(tài)系統(tǒng)中物種組成的復(fù)雜程度，種植一種植物，生態(tài)系統(tǒng)的生物種類過(guò)少，抵抗力穩(wěn)定性較低；所謂抵抗力穩(wěn)定性是指生態(tài)系統(tǒng)抵抗外界干擾并使自身的結(jié)構(gòu)與功能保持原狀或不受損害的能力。（2）由于有機(jī)肥料中有機(jī)物較多，故施用有機(jī)肥料可以改善土壤結(jié)構(gòu)、培育土壤微生物、實(shí)現(xiàn)了土壤養(yǎng)分的循環(huán)利用。分解人畜糞便、枯枝敗葉中的有機(jī)物質(zhì)的微生物屬于分解者。（3）利用生物來(lái)回收污水中的金屬元素，可以通過(guò)種植能吸收這些金屬元素的水生植物，再?gòu)闹参镏谢厥战饘佟！军c(diǎn)睛】本題考查生態(tài)系統(tǒng)和生態(tài)工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)、穩(wěn)定性以及生態(tài)工程的基本原理及生態(tài)恢復(fù)工程的實(shí)例，掌握生態(tài)農(nóng)業(yè)的意義，能結(jié)合所需的知識(shí)準(zhǔn)確答題。22．（2020年全國(guó)統(tǒng)一高考生物試卷（新課標(biāo)Ⅲ)·38）W是一種具有特定功能的人體蛋白質(zhì)。某研究小組擬仿照制備乳腺生物反應(yīng)器的研究思路，制備一種膀胱生物反應(yīng)器來(lái)獲得W，基本過(guò)程如圖所示。（1）步驟①中需要使用的工具酶有________________。步驟②和③所代表的操作分別是________________和________________。步驟④稱為_(kāi)_______________。（2）與乳腺生物反應(yīng)器相比，用膀胱生物反應(yīng)器生產(chǎn)W的優(yōu)勢(shì)在于不受轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的______________（答出2點(diǎn)即可）的限制。（3）一般來(lái)說(shuō)，在同一動(dòng)物個(gè)體中，乳腺上皮細(xì)胞與膀胱上皮細(xì)胞的細(xì)胞核中染色體DNA所含的遺傳信息________________（填相同或不同），原因是_________。（4）從上述流程可知，制備生物反應(yīng)器涉及胚胎工程，胚胎工程中所用到的主要技術(shù)有_____________（答出2點(diǎn)即可）。【答案】（1）限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶顯微注射體外培養(yǎng)胚胎移植（2）性別、年齡（3）相同兩種上皮細(xì)胞都是體細(xì)胞，且來(lái)源于同一個(gè)受精卵（4）體外受精、胚胎移植【解析】【分析】1、膀胱反應(yīng)器有著和乳腺反應(yīng)器一樣的優(yōu)點(diǎn)：收集產(chǎn)物蛋白比較容易,不會(huì)對(duì)動(dòng)物造成傷害。此外,該系統(tǒng)可從動(dòng)物一出生就收集產(chǎn)物,不論動(dòng)物的性別和是否正處于生殖期。膀胱生物反應(yīng)器最顯著的優(yōu)勢(shì)在于從尿中提取蛋白質(zhì)比在乳汁中提取簡(jiǎn)便、高效。2、基因工程技術(shù)的基本步驟包括：目的基因的獲??；基因表達(dá)載體的構(gòu)建，是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；目的基因的檢測(cè)與鑒定。3、分析題圖可知，步驟①為將W基因與運(yùn)載體結(jié)合，構(gòu)建基因表達(dá)載體；步驟②為將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵，常用顯微注射法；步驟③為體外培養(yǎng)；步驟④為胚胎移植。【詳解】（1）由分析可知，步驟①為構(gòu)建基因表達(dá)載體，需使用同種限制酶切割目的基因和運(yùn)載體，再由DNA連接酶連接粘性末端，形成重組表達(dá)載體；步驟②為顯微注射；步驟③為體外培養(yǎng)；步驟④為胚胎移植。（2）與乳腺生物反應(yīng)器相比，用膀胱生物反應(yīng)器生產(chǎn)W，可從動(dòng)物一出生就收集產(chǎn)物,不受動(dòng)物的性別和年齡的限制。（3）在同一動(dòng)物個(gè)體中，乳腺上皮細(xì)胞與膀胱上皮細(xì)胞是由同一個(gè)受精卵有絲分裂產(chǎn)生的體細(xì)胞，其細(xì)胞核中染色體DNA所含的遺傳信息相同。（4）由分析可知，步驟③為體外培養(yǎng)，步驟④為胚胎移植，均屬于胚胎工程?！军c(diǎn)睛】本題考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的基本工具和操作步驟，掌握胚胎工程各項(xiàng)技術(shù)的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查。23．（2020年山東省高考生物試卷（新高考)·25）水稻胚乳中含直鏈淀粉和支鏈淀粉，直鏈淀粉所占比例越小糯性越強(qiáng)。科研人員將能表達(dá)出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉(zhuǎn)入水稻，實(shí)現(xiàn)了對(duì)直鏈淀粉合成酶基因（Wx基因）啟動(dòng)子序列的定點(diǎn)編輯，從而獲得了3個(gè)突變品系。（1）將能表達(dá)出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列插入Ti質(zhì)粒構(gòu)建重組載體時(shí)，所需的酶是______，重組載體進(jìn)入水稻細(xì)胞并在細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程稱為_(kāi)____________。（2）根據(jù)啟動(dòng)子的作用推測(cè)，Wx基因啟動(dòng)子序列的改變影響了______，從而改變了Wx基因的轉(zhuǎn)錄水平。與野生型水稻相比，3個(gè)突變品系中Wx基因控制合成的直鏈淀粉合成酶的氨基酸序列___(填：發(fā)生或不發(fā)生)改變，原因是_____________。（3）為檢測(cè)啟動(dòng)子變化對(duì)Wx基因表達(dá)的影響，科研人員需要檢測(cè)Wx基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA（WxmRNA）的量。檢測(cè)時(shí)分別提取各品系胚乳中的總RNA，經(jīng)_____過(guò)程獲得總cDNA。通過(guò)PCR技術(shù)可在總cDNA中專一性的擴(kuò)增出Wx基因的cDNA，原因是_____________。（4）各品系WxmRNA量的檢測(cè)結(jié)果如圖所示，據(jù)圖推測(cè)糯性最強(qiáng)的品系為_(kāi)____，原因是_____________。【答案】（1）限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶轉(zhuǎn)化（2）RNA聚合酶與啟動(dòng)子的識(shí)別和結(jié)合不發(fā)生編碼直鏈淀粉合成酶的堿基序列中不含啟動(dòng)子（3）逆轉(zhuǎn)錄（或：反轉(zhuǎn)錄）引物是根據(jù)Wx基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的（或：引物能與Wx基因的cDNA特異性結(jié)合）（4）品系3品系3的WxmRNA最少，控制合成的直鏈淀粉合成酶最少，直鏈淀粉合成量最少，糯性最強(qiáng)【解析】【分析】基因工程的操作步驟：1、獲取目的基因（從基因組文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因、化學(xué)合成法）；2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建（這也是基因工程的核心）；一個(gè)完整的基因表達(dá)載體包括：（1）啟動(dòng)子：位于基因的首端，是RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn)，驅(qū)動(dòng)目的基因的轉(zhuǎn)錄；（2）目的基因：編碼蛋白質(zhì)的基因；（3）終止子：位于基因的尾端，其作用使轉(zhuǎn)錄在需要的地方停止；（4）標(biāo)記基因：作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái)。3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞（植物、動(dòng)物、微生物）：目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程，稱為轉(zhuǎn)化。4、目的基因的檢測(cè)與鑒定（DNA分子雜交技術(shù),分子雜交技術(shù)、抗原抗體雜交）?！驹斀狻浚?）將目的基因與Ti質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要限制酶的切割，將目的基因插入載體時(shí)需要DNA連接酶的連接，重組載體進(jìn)入水稻細(xì)胞并在細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程叫做轉(zhuǎn)化。（2）根據(jù)以上分析可知，啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn)，如果啟動(dòng)子序列改變將會(huì)影響RNA聚合酶與之結(jié)合和識(shí)別，進(jìn)而影響基因的轉(zhuǎn)錄水平，在真核生物中，編碼蛋白質(zhì)的序列是基因中編碼區(qū)，編碼區(qū)中不包括啟動(dòng)子序列，因此直鏈淀粉合成酶的基因堿基序列中不含有啟動(dòng)子，因此3個(gè)突變品系中Wx基因中控制合成直鏈淀粉酶的氨基酸序列不發(fā)生改變。（3）以mRNA為模板合成cDNA的過(guò)程為逆轉(zhuǎn)錄，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增Wx基因的cDNA，需要以Wx基因合成的引物，這樣引物能夠在總cDNA中與Wx基因的cDNA特異性結(jié)合，從而利用PCR擴(kuò)增技術(shù)轉(zhuǎn)移性擴(kuò)增出Wx基因的cDNA。（4）識(shí)圖分析可知，圖中品系3的Wx基因的mRNA的含量最少，那么合成的直鏈淀粉酶最少，直鏈淀粉合成量最少，因此該水稻胚乳中含的直鏈淀粉比例最小，糯性最強(qiáng)?！军c(diǎn)睛】本題考查基因工程的知識(shí)點(diǎn)，要求學(xué)生掌握基因工程的操作工具和操作步驟是解決問(wèn)題的關(guān)鍵。識(shí)記并理解基因工程中工具酶的種類和作用，把握基因表達(dá)載體構(gòu)建的過(guò)程，理解啟動(dòng)子的功能和編碼蛋白質(zhì)的基因的結(jié)構(gòu)，這是該題考查的難點(diǎn)；把握PCR擴(kuò)增技術(shù)的操作過(guò)程和引物的作用，這是突破第（3）問(wèn)的關(guān)鍵。24．（2020年天津高考生物試卷）某植物有A、B兩品種?？蒲腥藛T在設(shè)計(jì)品種A組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí)，參照品種B的最佳激素配比（見(jiàn)下表）進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。品種B組織培養(yǎng)階段細(xì)胞分裂素濃度（μmol/L）生長(zhǎng)素濃度（μmol/L）Ⅰ誘導(dǎo)形成愈傷組織m1n1Ⅱ誘導(dǎo)形成幼芽m2n2Ⅲ誘導(dǎo)生根m3n3據(jù)表回答：（1）Ⅰ階段時(shí)通常選擇莖尖、幼葉等作為外植體，原因是________________。（2）在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ階段中發(fā)生基因選擇性表達(dá)的是________________階段。（3）為確定品種A的Ⅰ階段的最適細(xì)胞分裂素濃度，參照品種B的激素配比（m1>2．0），以0．5μmol/L為梯度，設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞分裂素最高濃度應(yīng)設(shè)為_(kāi)_______μmol/L。（4）Ⅲ階段時(shí)，科研人員分別選用濃度低于或高于n3μmol/L的生長(zhǎng)素處理品種A幼芽都能達(dá)到最佳生根效果，原因是處理幼芽時(shí)，選用低濃度生長(zhǎng)素時(shí)的處理方法為_(kāi)_______，選用高濃度生長(zhǎng)素時(shí)的處理方法為_(kāi)_______。（5）在________階段用秋水仙素對(duì)材料進(jìn)行處理，最易獲得由單個(gè)細(xì)胞形成的多倍體?！敬鸢浮浚?）細(xì)胞分化程度低，容易誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織（2）Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ（3）m1+1.0（4）浸泡法（長(zhǎng)時(shí)間處理）沾蘸法（短時(shí)間處理）（5）Ⅰ【解析】【分析】愈傷組織是由一團(tuán)未分化的細(xì)胞組成的，在組織培養(yǎng)中，條件適宜就會(huì)分化成各種組織。如果培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的比例合適，會(huì)促進(jìn)愈傷組織的生長(zhǎng)，分化出根和莖葉；細(xì)胞分裂素太多時(shí)，有利于芽的分化、抑制根的形成；生長(zhǎng)素用量太多時(shí)，有利于根的分化、抑制芽的形成；而當(dāng)生長(zhǎng)素少，細(xì)胞分裂素也不多時(shí)，則愈傷組織繼續(xù)生長(zhǎng)，不發(fā)生分化?；虻倪x擇性表達(dá)是指基因在特定的時(shí)間和空間條件下有選擇表達(dá)的現(xiàn)象，據(jù)此分析?！驹斀狻浚?）在誘導(dǎo)愈傷組織形成時(shí)，通常采用莖尖、幼葉做外植體，因?yàn)檫@些部位的細(xì)胞分裂能力強(qiáng)、分化程度低，全能性容易表達(dá)，容易誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織。（2）Ⅰ過(guò)程愈傷組織形成是離體的植物細(xì)胞脫分化的結(jié)果，脫分化過(guò)程中細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生的明顯改變，成為未分化狀態(tài)；Ⅱ、Ⅲ過(guò)程形成幼芽、根的過(guò)程存在細(xì)胞的分化，分化和脫分化都存在基因的選擇性表達(dá)，故Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ階段都存在基因的選擇性表達(dá)。（3）根據(jù)題意，表中數(shù)據(jù)為品種B的最佳激素配比，若要確定品種A的Ⅰ階段最佳細(xì)胞分裂素濃度，以0.5μmol/L為梯度，可參考m1為中間值，故實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞分裂素最高濃度可設(shè)為m1+1.0μmol/L。（4）實(shí)驗(yàn)中用生長(zhǎng)素處理插條的方法可選用浸泡法或沾蘸法，浸泡法時(shí)間長(zhǎng)、所需濃度低，而沾蘸法處理時(shí)間短、所需濃度高；因此Ⅲ過(guò)程中分別選用濃度低于或高于n3μmol/L的生長(zhǎng)素處理品種A的幼苗芽，選用低濃度生長(zhǎng)素時(shí)的處理方法為浸泡法，時(shí)間長(zhǎng)，而選用高濃度生長(zhǎng)素時(shí)處理方法為沾蘸法，時(shí)間短，都能達(dá)到比較適宜的濃度，達(dá)到最佳生根效果。（5）秋水仙素可抑制紡錘體形成，導(dǎo)致染色體加倍形成多倍體，愈傷組織分裂旺盛，故在Ⅰ階段用秋水仙素處理，最易獲得由單個(gè)細(xì)胞形成的多倍體。【點(diǎn)睛】本題以植物組織培養(yǎng)為背景，主要考查組織培養(yǎng)過(guò)程激素的使用，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系和分析數(shù)據(jù)、處理數(shù)據(jù)的能力。25．（2020年浙江省高考生物試卷（7月選考)）回答下列（二）小題：（二）回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問(wèn)題：（1）天然農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上存在著一段DNA片段（T-DNA），該片段可轉(zhuǎn)移并整合到植物細(xì)胞染色體上。為便于轉(zhuǎn)基因植物在組織培養(yǎng)階段的篩選，設(shè)計(jì)重組Ti質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)考慮T-DNA中要有可表達(dá)的目的基因，還需要有可表達(dá)的__________。（2）結(jié)合植物克隆技術(shù)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)，為獲得轉(zhuǎn)基因植株，農(nóng)桿菌侵染的宿主一般要選用具有優(yōu)良性狀、較高的遺傳穩(wěn)定性、__________及易被農(nóng)桿菌侵染等特點(diǎn)的植物材料。若植物材料對(duì)農(nóng)桿菌不敏感，則可用__________的轉(zhuǎn)基因方法。（3）利用帶側(cè)芽的莖段獲得叢狀苗的過(guò)程與利用莖段誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織再獲得叢狀苗的過(guò)程相比，前者總培養(yǎng)時(shí)間__________，且不經(jīng)歷__________過(guò)程，因而其遺傳性狀穩(wěn)定，是大多數(shù)植物快速繁殖的常用方法。（4）與發(fā)芽培養(yǎng)基相比，配制轉(zhuǎn)基因叢狀苗生根培養(yǎng)基時(shí)，可根據(jù)實(shí)際情況適當(dāng)添加__________，促進(jìn)叢狀苗基部細(xì)胞分裂形成愈傷組織并進(jìn)一步分化形成__________，最終形成根。還可通過(guò)改變MS培養(yǎng)基促進(jìn)生根，如_____（A．提高蔗糖濃度B．降低培養(yǎng)基濃度C．提高大量元素濃度D．不添加瓊脂）。（二）（1）抗性基因（2）全能性表達(dá)充分顯微注射（3）短脫分化（4）生長(zhǎng)素根的分生組織B【解析】（二）（1）設(shè)計(jì)重組質(zhì)粒時(shí)，除了要含有可表達(dá)的目的基因，還需要有可表達(dá)的抗性基因（如抗生素抗性基因），在添加抗生素的培養(yǎng)基上，含重組質(zhì)粒的宿主細(xì)胞能夠生長(zhǎng)，因而被篩選出來(lái)。（2）轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)要求宿主細(xì)胞性狀優(yōu)良、遺傳穩(wěn)定性較高、全能性（細(xì)胞發(fā)育成個(gè)體的潛能）較高及易被農(nóng)桿菌侵染等特點(diǎn)。若植物材料對(duì)農(nóng)桿菌不敏感，可采用顯微注射的方法。（3）利用帶側(cè)芽的莖段獲得叢狀苗的過(guò)程，比利用莖段誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織獲得叢狀苗的過(guò)程時(shí)間更短，因?yàn)椴恍枰?jīng)歷脫分化的過(guò)程，而且遺傳性狀穩(wěn)定。植物器官的分化需要一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及適宜的激素配比，配制叢狀苗生根培養(yǎng)基需根據(jù)實(shí)際情況添加生長(zhǎng)素，促進(jìn)基部細(xì)胞形成愈傷組織，并進(jìn)一步分化形成根的分生組織，最終形成根。比較發(fā)芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基可知MS培養(yǎng)基的濃度下降，因此可降低培養(yǎng)基的濃度促進(jìn)生根。故選B。26．（2020年江蘇省高考生物試卷）新型冠狀病毒可通過(guò)表面的刺突蛋白（S蛋白）與人呼吸道粘膜上皮細(xì)胞的ACE2受體結(jié)合，侵入人體，引起肺炎。圖1為病毒侵入后，人體內(nèi)發(fā)生的部分免疫反應(yīng)示意圖。單克隆抗體可阻斷病毒的粘附或入侵，故抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎的研究熱點(diǎn)之一。圖2為篩選、制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：（1）圖1中人體內(nèi)抗原遞呈細(xì)胞吞噬病毒，并將病毒的抗原暴露在細(xì)胞表面，被__________細(xì)胞表面的受體識(shí)別后激活該細(xì)胞。（2）B細(xì)胞識(shí)別入侵的病毒后，在淋巴因子作用下，經(jīng)過(guò)細(xì)胞的__________，形成__________細(xì)胞。（3）為判斷疑似患者是否為新型冠狀病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原學(xué)檢查，檢測(cè)病毒的__________；采集血液樣本主要用于血清學(xué)檢查，檢測(cè)__________。（4）據(jù)圖2所示，研制抗S蛋白單克隆抗體，需先注射__________免疫小鼠以激活小鼠的免疫細(xì)胞，再提取激活的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，用HAT培養(yǎng)基篩選獲得__________細(xì)胞。因?yàn)橥环N抗原可能激活__________細(xì)胞，還需繼續(xù)篩選才能獲得分泌單克隆抗體的細(xì)胞株?！敬鸢浮浚?）T（2）增殖、分化漿細(xì)胞和記憶（3）核酸抗新型冠狀病毒抗體（4）刺突蛋白（或S蛋白）雜交瘤多種B【解析】【分析】本題以新冠病毒為載體考查體液免疫、核酸檢測(cè)和單克隆抗體的有關(guān)知識(shí)。體液免疫包括三個(gè)階段：（1）感應(yīng)階段：除少數(shù)抗原可以直接刺激B細(xì)胞外，大多數(shù)抗原被吞噬細(xì)胞攝取和處理，并暴露出其抗原決定簇；吞噬細(xì)胞將抗原呈遞給T細(xì)胞，再由T細(xì)胞呈遞給B細(xì)胞；（2）反應(yīng)階段：B細(xì)胞接受抗原刺激后，開(kāi)始進(jìn)行一系列的增殖、分化，形成記憶細(xì)胞和漿細(xì)胞；（3）效應(yīng)階段：漿細(xì)胞分泌抗體與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合，發(fā)揮免疫效應(yīng)。制備單克隆抗體的具體過(guò)程：1、用目的抗原免疫小鼠，使小鼠產(chǎn)生致敏B淋巴細(xì)胞；2、將準(zhǔn)備好的同系骨髓瘤細(xì)胞與小鼠脾細(xì)胞按一定比例混合，并加入促融合劑聚乙二醇。在聚乙二醇作用下，各種淋巴細(xì)胞可與骨髓瘤細(xì)胞發(fā)生融合，形成雜交瘤細(xì)胞；3、在HAT選擇性培養(yǎng)基中，未融合的骨髓瘤細(xì)胞因缺乏次黃嘌呤-鳥(niǎo)嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，不能利用補(bǔ)救途徑合成DNA而死亡。未融合的淋巴細(xì)胞雖具有次黃嘌呤-鳥(niǎo)嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，但其本身不能在體外長(zhǎng)期存活也逐漸死亡。只有融合的雜交瘤細(xì)胞由于從脾細(xì)胞獲得了次黃嘌呤鳥(niǎo)嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，并具有骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖的特性，因此能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖；4、在HAT培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的雜交瘤細(xì)胞，只有少數(shù)是分泌預(yù)定特異性單克隆抗體的細(xì)胞，因此，必須進(jìn)行篩選和克隆化。篩選出能產(chǎn)生所需單克隆抗體的陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞，并進(jìn)行克隆擴(kuò)增；5、單克隆抗體的大量制備單克隆抗體的大量制備重要采用動(dòng)物體內(nèi)誘生法和體外培養(yǎng)法?！驹斀狻浚?）據(jù)題圖1可知，人體內(nèi)抗原遞呈細(xì)胞吞噬新冠病毒，并將新冠病毒的抗原暴露，呈遞給T細(xì)胞，被T細(xì)胞表面的受體識(shí)別后激活T細(xì)胞；

（2）激活的T細(xì)胞釋放淋巴因子，并將抗原呈遞給B細(xì)胞，B細(xì)胞識(shí)別入侵的病毒后，迅速增殖分化成漿細(xì)胞和記憶細(xì)胞；

（3）臨床上為判斷疑似患者是否為新型冠狀病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原學(xué)檢查，檢測(cè)疑似患者的呼吸道是否有新冠病毒的核酸，采集血液樣本主要用于血清學(xué)檢查，檢測(cè)血清中是否產(chǎn)生抗新型冠狀病毒的抗體；

（4）據(jù)題中圖2所示，結(jié)合單克隆抗體制備方法，要研制抗刺突蛋白單克隆抗體，需先注射新冠病毒的刺突蛋白（或S蛋白），以激活小鼠的免疫細(xì)胞，再提取激活的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，獲得融合的、未融合的細(xì)胞，用HAT篩選培養(yǎng)基培養(yǎng)，未融合的B細(xì)胞不能長(zhǎng)期生存而死亡，未融合的骨髓瘤細(xì)胞不能合成DNA而死亡，只有雜交瘤細(xì)胞能成活；由于同一種抗原可能激活多種B細(xì)胞，篩選出的融合的骨髓瘤細(xì)胞就可能分泌多種抗體，還需繼續(xù)篩選才能獲得分泌單克隆抗體的細(xì)胞。27．（2020年江蘇省高考生物試卷）如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，簡(jiǎn)捷地分析出已知序列兩側(cè)的序列，具體流程如下圖（以EcoRI酶切為例）：請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題：（1）步驟I用的EcoRI是一種__________酶，它通過(guò)識(shí)別特定的__________切割特定位點(diǎn)。（2）步驟Ⅱ用的DNA連接酶催化相鄰核苷酸之間的3′-羥基與5′-磷酸間形成__________；PCR循環(huán)中，升溫到95℃是為了獲得__________；TaqDNA聚合酶的作用是催化__________。（3）若下表所列為已知的DNA序列和設(shè)計(jì)的一些PCR引物，步驟Ⅲ選用的PCR引物必須是__________（從引物①②③④中選擇，填編號(hào)）。DNA序列（虛線處省略了部分核苷酸序列）已知序列PCR引物①5′-AACTATGCGCTCATGA-3′②5′-GCAATGCGTAGCCTCT-3′③5′-AGAGGCTACGCATTGC-3′④5′-TCATGAGCGCATAGTT-3′（4）對(duì)PCR產(chǎn)物測(cè)序，經(jīng)分析得到了片段F的完整序列。下列DNA單鏈序列中（虛線處省略了部分核苷酸序列），結(jié)果正確的是_________________。A．5′-AACTATGCG-----------AGCCCTT-3′B．5′-AATTCCATG-----------CTGAATT-3′C．5′-GCAATGCGT----------TCGGGAA-3′D．5′-TTGATACGO----------CGAGTAC-3′【答案】（1）限制性核酸內(nèi)切（或限制）核苷酸序列（2）磷酸二酯鍵DNA單鏈以DNA為模板的DNA鏈的延伸（3）②④（4）B【解析】【分析】采用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA的過(guò)程為：變性、退火、延伸、終止，PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的原理：DNA雙鏈復(fù)制，引物是一小段單鏈DNA，引物5′端的堿基可以與DNA兩條鏈的3′端的堿基進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)，可作為DNA復(fù)制的起始點(diǎn)，子鏈的延伸方向從5′→3′。【詳解】（1）EcoRI是一種限制性核酸內(nèi)切酶，它通過(guò)識(shí)別特定的核苷酸序列切割特定的位點(diǎn)。（2）DNA連接酶可催化相鄰核苷酸之間的3'-羥基和5'-磷酸之間形成磷酸二酯鍵；PCR循環(huán)中，升溫到95℃時(shí)，DNA受熱變性后解旋為單鏈；TaqDNA聚合酶是一種耐高溫的依賴于DNA模板的DNA聚合酶，能催化以