淺談馬鈴薯脫毒快繁流程步奏及配方

千里之行，始于足下。第2頁/共2頁精品文檔推薦淺談馬鈴薯脫毒快繁流程步奏及配方淺談馬鈴薯脫毒快繁流程步奏及配方馬鈴薯：(Solanumtuberosum)為茄科茄屬作物．是全球重要的糧菜兼用作物。馬鈴薯具有生長期短、產(chǎn)量高、習慣性強、營養(yǎng)豐富、耐儲運的特點，所以深受生產(chǎn)和消費者的喜歡。但在馬鈴薯生產(chǎn)中普遍存在種性退化的咨詢題，而病毒侵染是馬鈴薯退化的根源。由于馬鈴薯是無性生殖作物，因此病毒侵染后會世代相傳，危害逐年加重。目前，世界上公認的解決馬鈴薯病毒危害，防止品種退化的有效途徑是莖尖離體培養(yǎng)。經(jīng)過莖尖離體培養(yǎng)哺育脫毒基礎苗，再經(jīng)過建立合理的良種繁育體系生產(chǎn)優(yōu)良種薯是馬鈴薯高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、優(yōu)質的可靠保證。

一脫毒種薯繁育工藝流程

馬鈴薯脫毒種薯繁育工藝流程如圖所示。

二脫毒技術

2.1脫毒辦法

2.1.1外植體挑選及處理

外植體的挑選途徑普通有3條：①在生長季節(jié)從田間挖取植株種植在無菌的盆土中，溫室內(nèi)栽培，取其新長成枝條的芽；②從田間切取枝條，插入營養(yǎng)液中生長，取新抽生枝條上的芽；③塊莖在室內(nèi)發(fā)芽，芽經(jīng)熱處理(38℃)2周后再取芽。另外，定期給植株噴施內(nèi)吸殺菌劑，如0.1％多菌靈和0.1％鏈霉素的混合液，能夠有效提高滅菌效果。通過上述處理之后，要比直截了當取自田間枝條污染少得多。再加上莖尖分生組織又被彼此重疊的葉原基愛護．只要認真剝?nèi)。瑹o須再舉行消毒，就能得到無菌的外植體。但為保險起見，在切取外植體之前，能夠先舉行簡單的表面消毒，普通在5％次氯酸鈉中處理8～10min即可。盡管頂芽和腋芽都能作為外植體，但頂芽的莖尖生長要比腋芽的快，成活率也高，因此普通取頂芽作為外植體。

2.1.2剝離莖尖和接種

在超凈臺上的解剖鏡(8～40倍)下舉行莖尖剝離。解剖時必須注意使莖尖暴露的時刻越短越好．以免超凈臺的氣流風干莖尖。在材料下墊上一塊濕潤的無菌濾紙也可達到保持莖尖新奇的目的。在解剖鏡下用解剖針將葉片和葉原基剝掉，直到露出圓亮的莖尖生長點。將帶有l(wèi)～2個葉原基的莖尖切下．接種到培養(yǎng)基上。要注意防止交叉污染，尤其是當芽未曾舉行過表面滅菌時更要慎重。

2.1.3培養(yǎng)

對馬鈴薯莖尖培養(yǎng)來講，MS和white基本培養(yǎng)基基本上較好的培養(yǎng)基，而且附加少量(0.1～0.5mg／L)的NAA或BA或二者都加，培養(yǎng)效果更好。惟獨生長點的

極小莖尖的培養(yǎng)最好采納液體培養(yǎng)，多放在濾紙橋上培養(yǎng)。

莖尖培養(yǎng)初期的最適光照強度為1000lx，4周后增加到2000lx，6周后增加到4000lx。培養(yǎng)溫度21～25℃，光照時刻以16h／d為宜。1個月左右莖尖再生成有可見小葉的小植株，保存部分原苗，預備擴繁用；另一部分用于病毒檢測。莖尖培養(yǎng)時需要注意以下3個咨詢題：①莖尖接種后基部無明顯膨大，莖尖變綠，成綠群小點，這是激素濃度或溫度偏低造成的；②接種后莖尖明顯膨大，3～5d可見淡綠群愈傷組織，這是由于激素濃度或溫度偏高，光照偏弱造成的。③培養(yǎng)基添加0.8mg／L的GA有利于莖尖的成活和促長，但別要濃度過高或作用時刻過長，否則會使莖尖別易轉綠，導致葉原基迅速伸長，生長點并別生長，整個莖尖變褐而死。

2.2脫毒效果檢測

馬鈴薯通過莖尖培養(yǎng)脫毒后，惟獨部分植株是脫病毒植株。所以，在用作脫病毒原種苗之前，必須舉行病毒檢測證明無病毒后才干推廣。在生殖中還要別斷重復檢測，以防重新感染。常用的病毒鑒定辦法有指示植物測定法、血清學辦法和電

子顯微鏡法。

三脫毒苗快繁技術

3.1繼代培殖與生根培養(yǎng)

將經(jīng)鑒定無毒的馬鈴薯脫毒苗，采納固體與液體培養(yǎng)基相結合的辦法舉行繼代增殖培養(yǎng)效果好。取試管苗單節(jié)切段扦插在MS固體培養(yǎng)基上，每瓶可插20個左右莖段，經(jīng)20d左右便可發(fā)育成5～10cm高的小植株，然后舉行切段生殖。此法速度快，每月可生殖5～8倍。假如多莖節(jié)的試管苗接種在液體培養(yǎng)基上，舉行淺層靜止液體培養(yǎng)，則比固體培養(yǎng)基生根快，長得粗壯。便于栽植，并且省去大量瓊脂，落低了生產(chǎn)成本，并且提高了試管苗成活率。培養(yǎng)基可選用MS培養(yǎng)基，其中的煙酸、肌醇都能夠減去，瓊脂濃度也可落低。在25～28℃、光照強度3000~4000lx、延續(xù)光照的條件下，切段生殖速度非常快，普通每月能增加7～8倍。

另外，也可將1～2cm高的苗轉人MS、IAA0.1～0.5mg／L，活性炭0.1～0.2g／L的生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，7～10d生根。

3.2馴化移栽

為增強試管苗對溫室內(nèi)環(huán)境條件的習慣能力，移植前對試管苗要舉行光、溫鍛煉。具體辦法是：移植前7d左右，將長有3～5片葉、高2～3cm的試管苗瓶擺放在溫室內(nèi)的馴化畦內(nèi)，畦內(nèi)澆上水，畦上方半遮陽舉行馴化，以防止強光、高溫灼傷試管苗和維持試管苗身邊的溫度。移至溫室的試管苗，雖然仍處于封口的瓶內(nèi)，但由于封口膜透氣性好，瓶內(nèi)的濕度下落，使試管苗的莖葉變硬，加上光照增強，莖稈變粗，葉片胖厚濃綠，有效地抑制了徒長和真菌的侵染，從而提高了試管苗的抗逆性和對環(huán)境條件變化的習慣能力，提高了移栽成活率。煉苗期溫室內(nèi)的溫度普通要求白天23～27℃，夜間別低于10℃。

移栽辦法采納單芽莖段或雙芽莖段扦插式移栽。邊剪取邊扦插。扦插基質可采納滅過菌的珍珠巖或疏松土壤。扦插成活后每隔2~3d噴1次營養(yǎng)液（表4-5），后期每隔10d噴一次，以促進扦插苗茁壯和順利結薯。

四微型薯生產(chǎn)技術

由試管苗生產(chǎn)的重l～30g的弱小馬鈴薯稱為微型薯。盡管溫室或實驗室內(nèi)都能夠誘導產(chǎn)生微型薯，但以實驗室內(nèi)誘導生產(chǎn)為主，為馬鈴薯的種質保存、交換以及脫毒種薯的繁育和運輸提供了一種便利的途徑，也便于馬鈴薯種薯的大面積推廣。

4.1實驗室生產(chǎn)微型薯

組織培養(yǎng)生產(chǎn)微型薯要求條件較嚴格，費用較高，但產(chǎn)品的質量好，整齊度高，粒重普通惟獨1～5g，由于是在三角瓶中或試管中培養(yǎng)，所以可作為別帶病原菌的原種使用，或作為基礎研究材料和病原鑒定的實驗材料。實驗室微型薯生產(chǎn)(圖

4—12)普通分單莖段擴大生殖和微型薯誘導兩個時期。

4.1.1單莖節(jié)擴大生殖

從試管苗中獲得莖切段，每個切段上帶有1～2個葉片和腋芽。每個三角瓶中接4～5個莖段舉行培養(yǎng)。培養(yǎng)條件是溫度22℃、光照16h／d、光照強度1000lx。所采納培養(yǎng)基：①節(jié)段培養(yǎng)基，MS、3％蔗糖、0.8％瓊脂；②液體振蕩培養(yǎng)基，MS、2％蔗糖；③微型種薯誘導培養(yǎng)基，MS、香豆素50～100rag／L；④離體保存培養(yǎng)基，MS、3％蔗糖、4％甘露醇、0.8％瓊脂。在此條件下，由腋芽形成的小植株生長非常快，當小植株長到4～5cm時，就能夠舉行第二步培養(yǎng)。

4.1.2微型薯誘導

微型薯要求有一定量的激素，同時要在黑暗條件下培養(yǎng)。采納便宜的香豆素代替CCC和BAP，用食用白糖代替蔗糖，同樣結薯非常好。采納MS、香豆素50～100mg／L的液體或固體培養(yǎng)基。培養(yǎng)基的液固狀態(tài)和光照條件對微型薯誘導有非常大作用。與單莖節(jié)擴大生殖別同，微型薯的誘導必須在黑暗條件下舉行，否則只

有植株生長，而沒有小薯形成。培養(yǎng)溫度22℃。

4.2溫室生產(chǎn)微型薯

普通采納脫毒苗切繁辦法舉行。為了節(jié)省土地，充分利用空間，有人特意設計了溫室多層架盤工廠化生產(chǎn)微型薯的辦法。具體辦法是：在溫室4～6層育苗架上放育苗盤，基質能夠是蛭石、珍珠巖等。將脫毒試管苗以單莖段或雙芽芽莖段扦插，然后在人工調(diào)控的溫光條件下經(jīng)60～90d即可收獲微型薯。扦插時用GA3mg／L、NAA5mg／I。的混合液浸泡莖段，扦插成活率達98％。

五原種種薯和生產(chǎn)種薯生產(chǎn)技術

在實驗室或溫室生產(chǎn)的微型薯(原原種)，可進一步經(jīng)過大田或塑料大棚在春秋兩季擴大生殖，生產(chǎn)原種種薯。利用原種種薯切塊播種，生產(chǎn)出生產(chǎn)種薯，用于馬鈴薯栽培用種。原種和生產(chǎn)種的種薯生產(chǎn)要求在愛護地設施內(nèi)舉行，以下介紹原

種生產(chǎn)技術。

選3～4年未種過馬鈴薯的土地，精細整地后搭棚。拱棚可采納30m×50m或25m×8m的規(guī)格或直截了當在溫室內(nèi)生產(chǎn)。播種前澆水，施有機胖4000～5000kg／畝，并用過磷酸鈣20～25kg或硫酸鉀15～20kg／畝的一半作基胖，另一半留在馬鈴薯現(xiàn)蕾期結合培土施用。微型薯原原種在播種前須用濕沙埋住，在室內(nèi)散射光下催芽。由于休眠的妨礙，必須等芽萌動后才干播種，這是保全苗的關鍵。微型薯大小別一致時分級播種。原種生產(chǎn)要求高密度播種(行株距：50cm×10cm或60cm×10cm)，要求單株結薯多，以5～10g的單薯重為宜。春季防治早疫病，秋季防治晚疫病，在溫室或拱棚