實驗探究酵母菌數(shù)量變化

關于實驗探究酵母菌數(shù)量變化第一頁，共十四頁，編輯于2023年，星期一關注本實驗中的幾個關鍵點：酵母菌的計數(shù)利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)，是一種常用的微生物計數(shù)法，也叫做顯微鏡直接計數(shù)法。優(yōu)點：直觀、快速。適用于稀釋的菌懸液（或孢子懸液），即液體培養(yǎng)基中菌體的計數(shù)。此法計得的是活菌體和死菌體的總和，又稱為總菌計數(shù)法。第二頁，共十四頁，編輯于2023年，星期一酵母菌的計數(shù)（1）計數(shù)工具——血球計數(shù)板實物圖正面圖側面圖計數(shù)室滴液處血球計數(shù)板是一種專門用于計算較大單細胞微生物的一種儀器。計數(shù)時，常采用樣方法。第三頁，共十四頁，編輯于2023年，星期一酵母菌的計數(shù)（1）計數(shù)工具——血球計數(shù)板放大后的計數(shù)池每塊計數(shù)板由H形凹槽分為2個同樣的計數(shù)池。每個計數(shù)池分為9個大方格。第四頁，共十四頁，編輯于2023年，星期一25個中格16個小格16個中格25個小格25X16=400小格16X25=400小格每個計數(shù)室（大方格）共有400小格，總容積為0.1mm3*********抽樣檢測：5×16=80個小格抽樣檢測：4×25=100個小格第五頁，共十四頁，編輯于2023年，星期一酵母菌的計數(shù)（2）計算：

每毫升培養(yǎng)液中的酵母菌細胞數(shù)是多少？酵母細胞個數(shù)/mL=所數(shù)小方格中細胞總數(shù)x400x104x稀釋倍數(shù)所數(shù)的小方格數(shù)第六頁，共十四頁，編輯于2023年，星期一例2:酵母菌的計數(shù)通常用血球計數(shù)板進行，血球計數(shù)板每個大方格容積為0.1mm3，由400個小方格組成?，F(xiàn)對某一樣液進行檢測，如果一個小方格內酵母菌過多，難以計數(shù)，應先

后再計數(shù)。若多次重復計數(shù)后，算得每個小方格中平均有5個酵母菌，則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有

個。例1:在用血球計數(shù)板（2mm×2mm方格）對某一稀釋50倍樣品進行計數(shù)時，發(fā)現(xiàn)在一個計數(shù)室內（蓋玻片下的培養(yǎng)液厚度為0.1mm）酵母菌平均數(shù)為16，據(jù)此估算10mL培養(yǎng)液中有酵母菌

個。2x1072×108稀釋第七頁，共十四頁，編輯于2023年，星期一例3

檢測員將1mL水樣稀釋10倍后，用抽樣檢測的方法檢測每毫升藍藻的數(shù)量；將蓋玻片放在計數(shù)室上，用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計數(shù)室，并用濾紙吸去多余液體。已知每個計數(shù)室由25×16＝400個小格組成，容納液體的總體積為0．1mm3?，F(xiàn)觀察到圖中該計數(shù)室所示a、b、c、d、e5個中格80個小格內共有藍藻n個，則上述水樣中約有藍藻

個／mL。5n×105

第八頁，共十四頁，編輯于2023年，星期一酵母菌的計數(shù)（3）計數(shù)的操作稀釋：將酵母菌培養(yǎng)液進行適當?shù)南♂尲訕悠罚涸谇鍧嵏稍锏难蛴嫈?shù)板蓋上蓋玻片，再用無菌細口滴管將稀釋的酵母菌液由蓋玻片邊緣滴入一小滴（將計數(shù)室充滿即可），讓菌液沿縫隙自行滲入計數(shù)室。注意不可有氣泡產(chǎn)生。第九頁，共十四頁，編輯于2023年，星期一（3）計數(shù)的操作顯微計數(shù)：靜止5分鐘后，先用低倍鏡（16×10）找到計數(shù)室所在的位置。然后根據(jù)血球計數(shù)板規(guī)格，每個計數(shù)室選取5個（或4個）中方格中的菌體進行計數(shù)。每個小方格內約有5-10個菌體為宜。對于壓在小方格界線上的酵母菌應取相鄰兩邊及頂角計數(shù)。如遇酵母出芽，芽體大小達到母細胞的一半時，即作為兩個菌體計數(shù)。計數(shù)一個樣品要從兩個計數(shù)室中計得的值來計算樣品的含菌量。第十頁，共十四頁，編輯于2023年，星期一酵母菌的計數(shù)（4）血球計數(shù)板的清洗：使用完畢后，將血球計數(shù)板在水龍頭上用水柱沖洗，切勿用硬刷洗刷，洗完后自行晾干或用吹風機吹干。鏡檢，觀察每個小格內是否有殘留菌體或其他沉淀物。若不干凈，則必須重復洗滌至干凈為止。第十一頁，共十四頁，編輯于2023年，星期一酵母菌的計數(shù)（5）注意事項：進行計數(shù)前，應先將試管搖勻，目的是使酵母菌在培養(yǎng)液中混合均勻，以減少計數(shù)誤差。顯微鏡計數(shù)時，對于壓在小方格界線上的酵母菌，應取相鄰兩邊及頂角計數(shù)。若一個小方格內酵母菌數(shù)量過多，難以數(shù)清時，則可將培養(yǎng)液稀釋一定倍數(shù)后再計數(shù)。本實驗無對照實驗，酵母菌每天的數(shù)量變化可形成前后對照。血球計數(shù)板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用浸泡和沖洗的方法清洗。第十二頁