制種技術(shù) 液體菌種生產(chǎn)

制種技術(shù)——液體菌種生產(chǎn)固體菌種與液體菌種的特點(diǎn)固體菌種：1，棉籽殼木屑菌種；2，麥粒菌種傳統(tǒng)的較常用的菌種，培養(yǎng)時(shí)間1-2個(gè)月液體菌種：母種培養(yǎng)基不加凝固劑——瓊脂而制成可以大規(guī)模工廠化生產(chǎn)的菌種，培養(yǎng)時(shí)間5-7天可以生產(chǎn)一批。但不便運(yùn)輸和長(zhǎng)期保存。（一）、液體菌種制作的原理食用菌液體菌種制作是在發(fā)酵罐中，采用液體培養(yǎng)基通入無(wú)菌空氣并加以攪拌，增加培養(yǎng)基中溶氧含量，提供食用菌菌體呼吸代謝所需要的氧氣，并控制適宜的外界條件，獲得大量的菌絲體或代謝產(chǎn)物。

（二）、液體菌種的特點(diǎn)1.原料來源廣泛原料主要是一些農(nóng)副產(chǎn)品，土豆、麩皮、玉米粉、可溶性淀粉、黃豆粉、蛋白胨粉等。2.菌絲體生長(zhǎng)快速菌絲體在適宜溫度下，代謝旺盛，生長(zhǎng)快速。3.生產(chǎn)周期短食用菌深層發(fā)酵一般僅需2-7d就可獲得大量的菌絲體，而固體培養(yǎng)則需30-60d。4.工廠化生產(chǎn)、無(wú)季節(jié)性食用菌深層發(fā)酵是在發(fā)酵罐內(nèi)、控制最佳條件來培養(yǎng)菌體的，不受季節(jié)性限制。（三）、液體菌種制作的用途1.生產(chǎn)液體菌種食用菌經(jīng)深層發(fā)酵2-7d的幼嫩菌絲體，可以用來作為食用菌栽培用的原種和栽培種，具有生長(zhǎng)壯，萌發(fā)快，萌發(fā)點(diǎn)多的特點(diǎn)，分別稱為二級(jí)種子液或三級(jí)種子液。2.制備藥物或提取生化制品許多食用菌種類，其深層發(fā)酵培養(yǎng)的菌絲體可作為提取藥物成分或生化制品的材料。

3.制作飲料、保健品食用菌液體培養(yǎng)物經(jīng)過粉碎→研磨打漿→熱水浴浸提→過濾→稀釋或濃縮→調(diào)配，可研制成功能飲料、保健品。4.制作畜禽飼料食用菌液體培養(yǎng)物，經(jīng)過浸提或提取有用成分后的廢棄物，還可制作畜禽飼料。（四）、液體菌種制作的主要工藝

1.液體菌種制備液體菌種制備的目的是大量繁殖足夠數(shù)量的、健壯的、高純度的菌絲體。⑴斜面菌種制備制備方法（培養(yǎng)基配方和操作步驟）同試管斜面母種的制備，在此不再多講了。⑵搖瓶種子制備

液體菌種培養(yǎng)基如同母種培養(yǎng)基

主要工藝流程：稱量→煮制→分裝→滅菌→無(wú)菌檢驗(yàn)→接種→振蕩或攪拌培養(yǎng)管理思考題：液體菌種培養(yǎng)基如同母種培養(yǎng)基的配制，二者的區(qū)別在哪里？1.是否加凝固劑（常用的凝固劑是什么？）培養(yǎng)與固體顆粒菌種不同⑵搖瓶菌種的制備

主要操作步驟：稱量→煮制→分裝→滅菌→無(wú)菌檢驗(yàn)→接種→振蕩或攪拌培養(yǎng)管理生長(zhǎng)快，周期短，每批只需5-7天及可終止培養(yǎng)使用。（五）、液體菌種制作的主要設(shè)備1.搖床食用菌為需氧菌，液體菌種培養(yǎng)需要增加氧氣的供應(yīng)，因此，不斷振蕩有利于菌絲體的快速生長(zhǎng)。搖床是液體菌種生產(chǎn)常用的設(shè)備，通常培養(yǎng)10-50L以下用搖床。又稱淺層培養(yǎng)。振蕩培養(yǎng)的作用分散菌絲體形成菌絲球狀有利于氧氣供應(yīng)攪拌型發(fā)酵罐2.種子罐和發(fā)酵罐一級(jí)種子罐通常為50-100L，二級(jí)種子罐為500-1000L。

又稱深層發(fā)酵。分散菌絲體形成菌絲片段狀有利于氧氣供應(yīng)適宜大規(guī)模供氧培養(yǎng)，不同于厭氧發(fā)酵，為有氧發(fā)酵。兩種攪拌方式葉片攪拌或渦輪攪拌---培養(yǎng)吹入無(wú)菌空氣----氣體吹入沸騰式---攪拌培養(yǎng)無(wú)菌空氣的過濾形成一級(jí)、二級(jí)過濾器--濾芯濾膜的級(jí)別空氣過濾

技術(shù)的關(guān)鍵就是保證進(jìn)入的空氣無(wú)菌度高，因此必須選擇孔徑小、材料先進(jìn)的過濾膜。一般細(xì)菌直徑在0.5-5um,酵母菌在1-10um，病毒一般在20-400nm，所以選擇過濾膜時(shí)應(yīng)綜合考慮以上因素。當(dāng)然如果選的太小，成本將大幅度提高。規(guī)?；囵B(yǎng)的發(fā)酵罐液體菌種發(fā)酵設(shè)備包括四大系統(tǒng)：溫控系統(tǒng)由控制器、電熱管等組成；供氣系統(tǒng)由空氣壓縮機(jī)、輸送管道、空氣過濾器等組成；冷卻系統(tǒng)由熱交換器、進(jìn)出水管道組成；物料系統(tǒng)由加料管、出料管等組成。工廠化栽培蛹蟲草、金針菇、黑木耳、杏鮑菇

都是液體菌種無(wú)菌氣體吹入沸騰式---攪拌培養(yǎng)創(chuàng)新模式規(guī)?；囵B(yǎng)的發(fā)酵罐---四大系統(tǒng)協(xié)調(diào)液體菌種的發(fā)酵罐是先滅菌后接種再培養(yǎng)滅菌——接種——培養(yǎng)，三合一功能技術(shù)含量高，效益高，技術(shù)人員薪酬高（六）、液體菌種深層發(fā)酵培養(yǎng)生產(chǎn)量較大時(shí)，一般用自動(dòng)控制發(fā)酵罐培養(yǎng)，即深層發(fā)酵培養(yǎng)。儀表控制的主要參數(shù)：1.液體培養(yǎng)基2.菌齡3.接種量4.溫度5.通氣量6.攪拌速度7.酸堿度8.罐壓9.泡沫控制10.培養(yǎng)時(shí)間11.產(chǎn)物分離（七）、液體菌種制作的技術(shù)關(guān)鍵液體菌種的制備液體菌種制備的目的是大量繁殖足夠數(shù)量的、健壯的、高純度的菌絲體。1.斜面菌種制備制備方法（培養(yǎng)基配方和操作步驟）同試管斜面母種的制備，在此不再多講了。健壯的試管斜面母種是基礎(chǔ)2.搖瓶種子液制備

主要操作步驟：稱量→煮制→分裝→滅菌→無(wú)菌檢驗(yàn)→接種→振蕩或攪拌培養(yǎng)→發(fā)酵罐培養(yǎng)管理種子液制備分為二級(jí)、三級(jí)---逐級(jí)擴(kuò)大把握菌種質(zhì)量（純度、活力）是關(guān)鍵3.發(fā)酵罐的使用----制備液體菌種培養(yǎng)期間應(yīng)注意觀察，并做好記錄。包括溫度、壓力、氣流量、排出氣體的氣味等。如遇到停電，排氣閥自動(dòng)關(guān)閉或人工關(guān)閉來保持罐中處于正壓狀態(tài)。來電后重新啟動(dòng)，并打開排氣閥繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)過程中，可隨時(shí)無(wú)菌操作采樣分析，幾天后待菌球密度合適（從視鏡觀察）即可終止培養(yǎng)。智能調(diào)控發(fā)酵罐規(guī)模化、工廠化栽培---液體