動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)博士考題匯總

蛋白質(zhì)分子構(gòu)象（conformation）：又稱(chēng)高級(jí)結(jié)構(gòu)或空間結(jié)構(gòu)，是指蛋白質(zhì)分子中所有的原子在三維空間中的分布。Tm值：DNA熔解溫度，指把DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)降解一半時(shí)的溫度。DNA損傷：是復(fù)制過(guò)程中發(fā)生的DNA核苷酸序列永久性改變，并導(dǎo)致遺傳特征改變的現(xiàn)象。分為:substitutation(替換)deletion(刪除)insertion(插入)exonskipping(外顯子跳躍)。核酸雜交（nucleicacidhybridization）：相同或不同來(lái)源的二個(gè)DNA分子、或DNA和RNA分子，如果含有彼此互補(bǔ)的序列，混合在一起，通過(guò)變性和復(fù)性處理，DNA-RNA同源序列間及DNA-RNA異源序列間都可形成DNA-RNA或DNA-RNA雜交體，稱(chēng)為核酸分子雜交。別構(gòu)調(diào)節(jié)（allostericregulation）：一些代謝分子，包括底物、中間產(chǎn)物和終產(chǎn)物，不直接作用于酶的活性中心，而以非共價(jià)鍵結(jié)合活性中心以外的別構(gòu)部位（allostericsite），通過(guò)構(gòu)象的變化而改變酶的活性，這種調(diào)節(jié)稱(chēng)為酶的別構(gòu)調(diào)節(jié)。轉(zhuǎn)錄因子：結(jié)合在TATA盒子附近核苷酸序列上的蛋白因子轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子：結(jié)合在上游特異核苷酸序列上的蛋白因子。DNA變性（DNAdenaturation）：指DNA分子由穩(wěn)定的雙螺旋結(jié)構(gòu)松解為無(wú)規(guī)則線(xiàn)性結(jié)構(gòu)的現(xiàn)象分子伴侶（molecularchaperone）：一類(lèi)在序列上沒(méi)有相關(guān)性但有共同功能的蛋白質(zhì)，它們?cè)诩?xì)胞內(nèi)幫助其他含多肽的結(jié)構(gòu)完成正確的組裝，而且在組裝完畢后與之分離，不構(gòu)成這些蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)執(zhí)行功能時(shí)的組份hnRNA（heterogeneousnuclearRNA）：不均一核RNA，存在于真核生物中的一類(lèi)RNA，其分子大小很不均已，是真核mRNA前體。蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)層次：一級(jí)結(jié)構(gòu)（primarystructure）：多肽鏈中氨基酸的排列順序，包括多肽鏈數(shù)目，每一條多肽鏈中末端氨基酸種類(lèi)，每一條多肽鏈中氨基酸的數(shù)目、種類(lèi)和排列順序、鏈內(nèi)和鏈間二硫鍵的位置和數(shù)目；二級(jí)結(jié)構(gòu)(secondarystructure)指多肽鏈主鏈骨架全部或部分按一定規(guī)律排列形成的空間結(jié)構(gòu)，它不涉及側(cè)鏈構(gòu)象，包括α-螺旋、β-折疊和β轉(zhuǎn)角等；超二級(jí)結(jié)構(gòu)（supersecondarystructure）蛋白質(zhì)中經(jīng)常存在由若干相鄰的二級(jí)結(jié)構(gòu)單元按一定規(guī)律組合在一起，形成在空間上可彼此區(qū)別的結(jié)構(gòu)單位；結(jié)構(gòu)域（structuredomain）是指在蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中，一條多肽鏈上常常存在一些緊密的、相對(duì)獨(dú)立的區(qū)域，是在二級(jí)或超二級(jí)結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上形成的特定區(qū)域；三級(jí)結(jié)構(gòu)（tertiarystructure）具有特定氨基酸序列的多肽鏈，在形成空間構(gòu)象時(shí)，通常是先由相鄰的氨基酸殘基形成一些有規(guī)則的結(jié)構(gòu)單元，并由相鄰的二級(jí)結(jié)構(gòu)聚集形成超二級(jí)結(jié)構(gòu)，進(jìn)而折疊成一些相對(duì)獨(dú)立的結(jié)構(gòu)域，最有構(gòu)建成完整的、具有生物活性的構(gòu)象，其中每一個(gè)原子或基團(tuán)都有特定的空間排布，這種構(gòu)象稱(chēng)為蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)；亞基（subunit）相對(duì)分子質(zhì)量較大的球狀蛋白分子往往是由兩條或多條肽鏈通過(guò)非共價(jià)鍵連接形成的，其中每一條獨(dú)有獨(dú)立的三級(jí)結(jié)構(gòu)，稱(chēng)為亞基；四級(jí)結(jié)構(gòu)（quaternarystructure）各亞基間相互作用并組成具有生物活性的特定構(gòu)象。SDS的原理和特點(diǎn)：SDS是一種陰離子去污劑，能以一定的比例和蛋白質(zhì)結(jié)合，形成一種SDS-蛋白質(zhì)復(fù)合物。此復(fù)合物可用具有SDS的PAGE進(jìn)行分離，統(tǒng)稱(chēng)稱(chēng)這種電泳為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS)。PAGE能有效地把不同類(lèi)型的蛋白質(zhì)分開(kāi)，主要依據(jù)是各種物質(zhì)的電荷和相對(duì)分子質(zhì)量的差異，而SDS則是根據(jù)各種蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的不同進(jìn)行分離的。電泳前，在蛋白質(zhì)溶液中加入SDS和巰基乙醇進(jìn)行熱變性，巰基乙醇即使蛋白質(zhì)分子中的二硫鍵還原，SDS破壞蛋白質(zhì)亞基間的非共價(jià)鍵，使含有亞基的蛋白質(zhì)解離成各個(gè)亞基。由于SDS帶有較強(qiáng)的負(fù)電荷，使SDS-蛋白質(zhì)復(fù)合物大大超過(guò)天然蛋白原有的電荷，從而消除或掩蓋了不同種類(lèi)蛋白質(zhì)分子原有電荷的差異。并且SDS與蛋白質(zhì)結(jié)合后，引起蛋白質(zhì)構(gòu)象的變化，在水溶液中都變成長(zhǎng)橢圓形，其短軸長(zhǎng)度都為1.8nm左右，而長(zhǎng)軸長(zhǎng)度則與蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量成正比，故SDS中泳動(dòng)率不再受其原有電荷和分子性狀的影響，而只決定于相對(duì)分子質(zhì)量。故該法測(cè)得的只是亞基或單條肽鏈的相對(duì)分子質(zhì)量，而不是完整蛋白的相對(duì)分子質(zhì)量，因此長(zhǎng)被用來(lái)判定相對(duì)分子質(zhì)量大小的均一性，檢測(cè)有無(wú)雜蛋白、宿主細(xì)胞蛋白、聚合體污染以及親核層析中生物分子配基脫落等。簡(jiǎn)述酶活性抑制的類(lèi)型：主要有兩種類(lèi)型（不可逆抑制和可逆抑制），其中不可逆抑制包括：專(zhuān)一性（選擇性）抑制和非選擇性抑制，可逆抑制包括：競(jìng)爭(zhēng)性抑制、非競(jìng)爭(zhēng)性抑制、反競(jìng)爭(zhēng)性抑制和混合型抑制。（知識(shí)點(diǎn)擴(kuò)展專(zhuān)非專(zhuān)一性的不可逆抑制作用抑制劑作用于酶蛋白分子中一類(lèi)或幾類(lèi)基團(tuán)，對(duì)酶不表現(xiàn)專(zhuān)一性；專(zhuān)一性的不可逆抑制作用抑制劑只對(duì)某類(lèi)或某一個(gè)酶起作用，這類(lèi)抑制劑叫做專(zhuān)一性的不可逆抑制劑；競(jìng)爭(zhēng)性抑制competitiveinhibition：由于抑制劑I和底物S結(jié)構(gòu)相似，因此可競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合于酶活性中心同一結(jié)合部位，而且是非此即彼完全排斥的反應(yīng)；非競(jìng)爭(zhēng)性抑制noncompetitiveinhibition：底物S和抑制劑I與酶結(jié)合互不相關(guān)，既無(wú)競(jìng)爭(zhēng)性，也無(wú)先后次序，兩者都可以與酶及相應(yīng)中間復(fù)合物（EI或ES）結(jié)合，但形成的三元復(fù)合物（ESI或EIS相同）不能再分解；反競(jìng)爭(zhēng)性抑制uncompetiviveinhibition：抑制劑I只能與酶-底物復(fù)合物ES結(jié)合形成無(wú)活性的三元復(fù)合物ESI，而不能與游離酶E結(jié)合的一類(lèi)反應(yīng)；混合型抑制：一些介于競(jìng)爭(zhēng)性和非競(jìng)爭(zhēng)之間的抑制作用通常稱(chēng)為混合性抑制作用，即E或ES結(jié)合I的親和力，以及E或EI結(jié)合S的親和力都不相當(dāng)時(shí)，就是混合型抑制。）真核生物啟動(dòng)子特點(diǎn)：真核生物中有三種不同的RNA聚合酶，因此也有三種不同的啟動(dòng)子，其中以啟動(dòng)子Ⅱ最為復(fù)雜。具有如下特點(diǎn)：（1）有多種元件：TATA框、GC框、CAAT框等；（2）結(jié)構(gòu)不恒定。有的有多種框盒如組蛋白H2B；有的只有TATA框和GC框，如SV40早期轉(zhuǎn)錄蛋白，（3）它們的位置、序列、距離和方向都不完全相同，（4）有的有遠(yuǎn)距離的調(diào)控元件存在，如增強(qiáng)子；（5）這些元件常常起到控制轉(zhuǎn)錄效率和選擇起始位點(diǎn)的作用；（6）不直接和RNApol結(jié)合。轉(zhuǎn)錄時(shí)先和其它轉(zhuǎn)錄激活因子相結(jié)合，再和聚合酶結(jié)合。原核生物啟動(dòng)子特點(diǎn)：原核生物啟動(dòng)子是由兩段彼此分開(kāi)且又高度保守的核苷酸序列組成，對(duì)mRNA的合成極為重要。啟動(dòng)子區(qū)域：（1）Pribnow盒，位于轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游5—10bp，一般由6～8個(gè)堿基組成，富含A和T，故又稱(chēng)為T(mén)ATA盒或—10區(qū)。啟動(dòng)子來(lái)源不同，Pribnow盒的堿基順序稍有變化。（2）—35區(qū)，位于轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游35bp處，故稱(chēng)—35區(qū)，一般由10個(gè)堿基組成。這是與真核生物中CAAT區(qū)相對(duì)應(yīng)的序列。蛋白質(zhì)超二級(jí)結(jié)構(gòu)(supersecondarystructure)：蛋白質(zhì)中經(jīng)常存在由若干相鄰的二級(jí)結(jié)構(gòu)單元按一定規(guī)律組合在一起，形成空間上可彼此區(qū)別的結(jié)構(gòu)單元。分子識(shí)別(molecularrecognition)：指蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)、核酸、脂等分子之間特異性辨認(rèn)。分子自裝配(self-assembly)：把某些病毒（如煙草花葉病毒）或細(xì)胞器解離成蛋白質(zhì)、核酸等組分后，這些組分在體外生理?xiàng)l件下能自動(dòng)裝備成具有功能的病毒或細(xì)胞器碎片的現(xiàn)象。二硫鍵（disulfidebond）：是由兩個(gè)半胱氨酸借助兩個(gè)硫原子形成的一種比較穩(wěn)定的共價(jià)鍵，可存在于一條肽鏈的內(nèi)部或兩條肽鏈之間，對(duì)蛋白質(zhì)構(gòu)象起重要作用。透析（dialysis）：通過(guò)小分子經(jīng)過(guò)半透膜擴(kuò)散到水（或緩沖液）的原理，將小分子與生物大分子分開(kāi)的一種分離純化技術(shù)。鹽析：一般是指溶液中加入無(wú)機(jī)鹽類(lèi)而使某種物質(zhì)溶解度降低而析出的過(guò)程。蛋白質(zhì)分子鹽析：向某些蛋白質(zhì)溶液中加入某些無(wú)機(jī)鹽溶液后,可以使蛋白質(zhì)凝聚而從溶液中析出,這種作用叫作鹽析。酶的化學(xué)修飾（chemicalmodification）：酶蛋白肽鏈上某些殘基，在另一種酶的催化下發(fā)生可逆共價(jià)修飾，從而引起酶活性的改變的過(guò)程。反競(jìng)爭(zhēng)性抑制（uncompetiviveinhibition）：抑制劑只與酶-底物復(fù)合物結(jié)合，而不與游離酶結(jié)合的一種酶促反應(yīng)抑制作用。關(guān)鍵酶：代謝途徑中決定反應(yīng)的速度和方向的酶稱(chēng)為關(guān)鍵酶。它有三個(gè)特點(diǎn)：1、它催化的反應(yīng)速度最慢，所以又稱(chēng)限速酶。其活性決定代謝的總速度。2、它常常催化單向反應(yīng)，其活性能決定代謝的方向。3、它常常受多種效應(yīng)劑的調(diào)節(jié)。同工酶：廣義是指生物體內(nèi)催化相同反應(yīng)而分子結(jié)構(gòu)不同的酶。定向效應(yīng)（orientationeffect）：指底物的反應(yīng)基團(tuán)和催化基團(tuán)之間或底物的反應(yīng)基團(tuán)之間正確地取向所產(chǎn)生的效應(yīng)。臨近效應(yīng)（approximationeffect）：指酶由于具有與底物較高的親和力，從而使游離的底物集中于酶分子表面的活性中心區(qū)域，使活性中心的底物有效濃度得以極大地提高，并同時(shí)使反應(yīng)基團(tuán)之間互相靠近，增加親核攻擊機(jī)會(huì)，從而使自由碰撞機(jī)率增加，提高反應(yīng)速度。負(fù)超螺旋：兩股以右旋方向纏繞的螺旋在外力向松纏的方向捻轉(zhuǎn)時(shí)，產(chǎn)生一個(gè)右旋的超螺旋以解除外力捻轉(zhuǎn)造成的脅迫。這樣形成的超螺旋為負(fù)超螺旋。點(diǎn)突變：由于剪輯突變使某一氨基酸的密碼子變成另一氨基酸的密碼子的突變。移碼突變：是由于基因中堿基數(shù)缺失或插入，造成這一位置以后的一系列或部分編碼發(fā)生移位錯(cuò)誤的突變。問(wèn)答題：蛋白質(zhì)高級(jí)結(jié)構(gòu)維持：蛋白質(zhì)特定構(gòu)象主要是通過(guò)化學(xué)鍵維持，這些化學(xué)鍵主要為非共價(jià)鍵，包括：氫鍵、范德華力、疏水作用力、離子鍵、配位鍵和二硫鍵。它們?cè)诘鞍踪|(zhì)構(gòu)象中發(fā)揮的作用有所不同，鍵能高的化學(xué)鍵可保證肽鏈構(gòu)象的穩(wěn)定性，而弱的化學(xué)鍵可使肽鏈構(gòu)象有一定的靈活性。球蛋白分子特征：（1）球狀蛋白的多肽鏈往往借助各種結(jié)構(gòu)單元、超二級(jí)結(jié)構(gòu)等折疊成緊密的球狀構(gòu)象；（2）球狀蛋白分子中的非極性側(cè)鏈一般存在于分子內(nèi)部的疏水區(qū)域，大多數(shù)極性側(cè)鏈位于分子表面，形成親水區(qū)；（3）球狀蛋白分子分子表面往往有內(nèi)陷的、通常為疏水性的空穴，這類(lèi)空穴可作為蛋白質(zhì)與其他分子進(jìn)行識(shí)別或結(jié)合的關(guān)鍵部位，參與蛋白質(zhì)的多種功能；（4）同類(lèi)球狀蛋白質(zhì)分子，具有基本相同的三級(jí)結(jié)構(gòu)特征，不同種類(lèi)的球狀蛋白分子，具有完全不同的三級(jí)結(jié)構(gòu)特征，這是球狀蛋白分子結(jié)構(gòu)的專(zhuān)一性。Km生物學(xué)意義：（1）鑒別酶的最適底物Km值的大小，可以近似地表示酶和底物的親和力。Km值大，意味著酶和底物的親和力小，反之則大；（2）判斷在細(xì)胞內(nèi)酶的活性是否受底物抑制如果測(cè)得離體酶Km值遠(yuǎn)低于細(xì)胞內(nèi)的底物濃度，而反應(yīng)速度沒(méi)有明顯變化，則表明改酶在細(xì)胞內(nèi)長(zhǎng)處于被底物所飽和的狀態(tài)，底物濃度的稍許變化不會(huì)引起反應(yīng)速度有意義改變，反之，如果酶的Km值大于底物濃度，則反應(yīng)速度對(duì)底物濃度變化就有十分敏感；（3）催化可逆反應(yīng)的酶，當(dāng)正反應(yīng)和逆反應(yīng)Km值不同時(shí)，Km值小的底物所示的反應(yīng)方向，應(yīng)是改酶的催化的優(yōu)勢(shì)方向；（4）多酶催化的連鎖反應(yīng)，如能確定各種酶Km及相應(yīng)底物濃度，有助于尋找代謝過(guò)程的限速步驟。在各底物濃度相似時(shí)，Km值大的酶則為限速酶；（5）由于存在Km值不同而功能相同的酶，從而發(fā)現(xiàn)同工酶；（6）測(cè)定不同抑制劑對(duì)某個(gè)酶Km值及Vmax的影響，可以區(qū)別改抑制劑是競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑還是非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑；（7）為了鑒定不同菌株來(lái)源的天冬酰胺酶對(duì)治療白血病的療效，可以測(cè)定不同菌株的天冬酰胺酶對(duì)天冬酰胺的Km值，從中選用Km值較小的酶，這不僅是評(píng)價(jià)要用酶的理論基礎(chǔ)之一，也是選用要用酶來(lái)源的依據(jù)。酶活性中心：在酶分子上，不是全部氨基酸，而只是少數(shù)氨基酸殘基與酶的活性有直接關(guān)系，這些相關(guān)的氨基酸，一般較集中在酶分子的一個(gè)特定區(qū)域，這個(gè)區(qū)域即為酶的活性中心，是酶蛋白的催化結(jié)構(gòu)域中與底物結(jié)合并發(fā)揮催化作用的部位，包括催化基團(tuán)和底物結(jié)合基團(tuán)。DNA結(jié)構(gòu)層次：包括DNA一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)結(jié)構(gòu)，一級(jí)結(jié)構(gòu)是：四種脫氧單核苷酸按照一定的方式、數(shù)量和排列順序而形成的多核苷酸；二級(jí)結(jié)構(gòu)：是指兩條多核苷酸鏈反向平行盤(pán)繞所生成的雙螺旋結(jié)構(gòu)，包括左手螺旋、右手螺旋；三級(jí)結(jié)構(gòu)：是指DNA雙螺旋進(jìn)一步扭曲盤(pán)繞所形成的構(gòu)象，包括線(xiàn)性雙鏈中的扭結(jié)、超螺旋、多重螺旋、分子內(nèi)部單鏈環(huán)和環(huán)狀DNA中的超螺旋及連環(huán)等拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)DNA和RNA結(jié)構(gòu)和功能區(qū)別：mRNA特征：mRNA是蛋白質(zhì)合成模板，其種類(lèi)很多、含量少、壽命短，一級(jí)結(jié)構(gòu)亦是多核苷酸鏈。原核生物mRNA特征：半衰期短、許多原核生物mRNA以多順?lè)醋有纬纱嬖凇?′端無(wú)帽子結(jié)構(gòu)，3′端沒(méi)有或之憂(yōu)較短的多聚（A）結(jié)構(gòu)、常以AUG（有時(shí)GUG，甚至UUG）作為起始密碼子；真核生物mRNA特征：?jiǎn)雾樂(lè)醋有问酱嬖凇?′端存在“帽子”結(jié)構(gòu)、具有多聚（A）尾巴。EF-Tu·Ts循環(huán)：當(dāng)完整的核糖體在起始密碼子上形成以后，P位已被起始tRNA所充滿(mǎn)，而A位仍空著。根據(jù)密碼子與反密碼子之間的相互作用，相應(yīng)的氨基酰-tRNA可以進(jìn)入到A位。這一過(guò)程需要延伸因子EF-Tu和EF-Ts以及GTP的參與。EF-Tu首先與GTP結(jié)合，再與氨基酰-tRNA形成三元復(fù)合物。只有這樣的復(fù)合物才能進(jìn)入A位，一旦進(jìn)入A位后，GTP立即水解成GDP，EF-Tu·GDP二元復(fù)合物解離下來(lái)。此時(shí)EF-Tu不能直接與GTP或氨基酰-tRNA結(jié)合，而是EF-Ts先置換EF-Tu·GDP復(fù)合物中的GDP，然后再形成EF-Tu·GTP，從而引入下一個(gè)氨基酰-tRNA，這一過(guò)程成為EF-Tu·Ts循環(huán)。MicroRNA：減色效應(yīng)（hypochromiceffect）：DNA復(fù)性時(shí)，其紫外吸收值降低的現(xiàn)象。增色效應(yīng)（hyperchromiceffect）：DNA變性后，其理化性質(zhì)發(fā)生很大變化，如在260nm處紫外吸收值增高的現(xiàn)象成為增色效應(yīng)RNA編輯（RNAediting）：是在RNA分子上出現(xiàn)的一種修飾現(xiàn)象，主要指mRNA在轉(zhuǎn)錄后因插入、缺失或核苷酸的替換，改變了DNA模板來(lái)源的遺傳信息，從而翻譯出氨基酸序列不同的多種蛋白質(zhì)，編輯結(jié)果不僅擴(kuò)大了遺傳信息，也可能是生物適應(yīng)的一種保護(hù)措施。端粒（Telomeres）：是染色體末端的DNA重復(fù)序列，在正常人體細(xì)胞中，可隨著細(xì)胞分裂而逐漸縮短。端粒酶（telomerase）：是一只哦那個(gè)核糖核蛋白酶，是一種特殊的DNA聚合酶，屬于一種反轉(zhuǎn)錄酶，它是由RNA和蛋白質(zhì)組分構(gòu)成，以脫氧核糖核苷酸為產(chǎn)物，已酶分子中的RNA亞單位中的一段序列為模板，延伸染色體3′端，解決通常DNA復(fù)制時(shí)引起的末端隱縮。蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)和功能關(guān)系：（1）一級(jí)結(jié)構(gòu)是空間構(gòu)象的基礎(chǔ)蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)決定空間構(gòu)象，即一級(jí)結(jié)構(gòu)是高級(jí)結(jié)構(gòu)形成的基礎(chǔ)。只有具有高級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)才能表現(xiàn)生物學(xué)功能，實(shí)際上很多蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)并不是決定蛋白質(zhì)空間構(gòu)象的唯一因素，除一級(jí)結(jié)構(gòu)、溶液環(huán)境外，大多數(shù)蛋白質(zhì)的正確折疊還需要其他分子的幫助。這些參與新生肽折疊的分子，一類(lèi)是分子伴侶，一類(lèi)是折疊酶。（2）一級(jí)結(jié)構(gòu)是功能的基礎(chǔ)一級(jí)結(jié)構(gòu)像是的多肽或蛋白質(zhì)，其空間構(gòu)象和功能也相似。相似的一級(jí)結(jié)構(gòu)具有相似的功能，不同的結(jié)構(gòu)具有不同的功能，即一級(jí)結(jié)構(gòu)決定生物學(xué)功能；（3）蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的種屬差異與分子進(jìn)化從蛋白質(zhì)氨基酸的序列可以了解到重要的生物進(jìn)化信息。對(duì)不同生物體的同源蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的比較研究，發(fā)現(xiàn)它們之間在氨基酸組成和順序上有許多不同，即有種屬差異。一級(jí)結(jié)構(gòu)的種屬差異可用以衡量生物進(jìn)化歷程。從不同種屬的蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的氨基酸變異系數(shù)和替換速度，可了解種屬間的親緣關(guān)系，親緣關(guān)系愈近，氨基酸差異就愈少；（4）同源蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)與分子病同種生物源的一種蛋白質(zhì)，有時(shí)存在兩種或兩種以上的形式，它們的氨基酸序列差異往往很細(xì)微，通常之憂(yōu)一二個(gè)氨基酸殘基或其他基團(tuán)的差別，著重微觀差異在某些情況下可引起功能的明顯變化，有時(shí)甚至可能引起疾病的發(fā)生，如分子病，如血紅蛋白病，異常的血紅蛋白是由于基因突變的結(jié)果，基因突變引起血紅的那白一級(jí)結(jié)構(gòu)的改變，主要表現(xiàn)在血紅蛋白多肽的某一氨基酸被取代等。蛋白質(zhì)分離提純后，有哪些檢測(cè)其提純質(zhì)量的方法：主要有電泳法、免疫法、高效液相層析、分光光度法以及超速離心法等，其中電泳法包括：醋酸纖維薄膜電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳、濃度梯度聚丙烯酰胺凝膠電泳、印記轉(zhuǎn)移電泳。聚丙烯酰胺凝膠等點(diǎn)聚焦、雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳及毛細(xì)管電泳；免疫法包括：免疫擴(kuò)散、免疫電泳、酶聯(lián)免疫吸附及免疫印記等。酶化學(xué)修飾調(diào)節(jié)的意義：（1）絕大多數(shù)修飾調(diào)節(jié)酶具有無(wú)活性（或低活性）與有活性（或高活性）的兩種形式。它們互變反應(yīng)中正逆兩個(gè)方向由不同的酶所催化（底物循環(huán)）。催化互變反應(yīng)的酶受激素等調(diào)節(jié)因素的調(diào)控；（2）此種酶促反應(yīng)常是級(jí)聯(lián)反應(yīng)。如果某激素或其他修飾因子使第一個(gè)酶發(fā)生酶促共價(jià)修飾后，被修飾的酶又可對(duì)話(huà)另一種酶分子發(fā)生共價(jià)修飾，每修飾一次，就可將調(diào)節(jié)因子的信號(hào)再放大一次，從而出現(xiàn)級(jí)聯(lián)式的放大作用，故此種調(diào)節(jié)方式效率極高；（3）酶磷酸化是最常見(jiàn)的酶促共價(jià)修飾反應(yīng)，1分子亞基發(fā)生一次磷酸化修飾，通常消耗1分子ATP，與酶蛋白合成相比，消耗ATP要少很多，且作用迅速，故是生物體調(diào)節(jié)酶活性經(jīng)濟(jì)而有效的方式；（4）化學(xué)修飾調(diào)節(jié)腸與別構(gòu)調(diào)節(jié)相互協(xié)作，更增強(qiáng)了調(diào)節(jié)因子的作用。一些別構(gòu)酶也是化學(xué)修飾酶，如磷酸化沒(méi)、糖原合成酶等均兼有中兩類(lèi)調(diào)節(jié)酶的特性，可以同時(shí)受這來(lái)那個(gè)鐘調(diào)節(jié)方式的雙重調(diào)節(jié)。這雙重調(diào)節(jié)的意義還在于別構(gòu)調(diào)節(jié)是細(xì)胞的基本調(diào)節(jié)機(jī)制，對(duì)于維持代謝物和能量的平衡是很重要的，但當(dāng)別構(gòu)調(diào)節(jié)效應(yīng)劑濃度很低，而不能發(fā)揮足夠的調(diào)節(jié)作用時(shí)，在應(yīng)激等情況下，少量激素的釋放，即可通過(guò)化學(xué)修飾反應(yīng)，引起有效酶活性的迅速改變并引起相應(yīng)的生理效應(yīng)；（5）酶的化學(xué)修飾是體內(nèi)快速調(diào)節(jié)的另一種方式，也是生物體內(nèi)一種普遍的調(diào)節(jié)費(fèi)那個(gè)是。就蛋白質(zhì)（或酶）磷酸化/托磷酸化而言，幾乎涉及所有的生理和病理過(guò)程。如糖代謝、細(xì)胞生長(zhǎng)和發(fā)育、光合作用、基因表達(dá)、神經(jīng)遞質(zhì)的合成與釋放等，在細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中占有極其重要的地位。就調(diào)節(jié)對(duì)象而言，可以是酶類(lèi)、功能蛋白、結(jié)構(gòu)蛋白及各種受體等。DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)特征及其多態(tài)性：(1)主鏈(backbone)：由脫氧核糖和磷酸基通過(guò)酯鍵交替連接而成。主鏈有二條,它們似"麻花狀繞一共同軸心以右手方向盤(pán)旋,相互平行而走向相反形成雙螺旋構(gòu)型。主鏈處于螺旋的外則,這正好解釋了由糖和磷酸構(gòu)成的主鏈的親水性。所謂雙螺旋就是針對(duì)二條主鏈的形狀而言的。(2)堿基對(duì)(basepair)：堿基位于螺旋的內(nèi)則,它們以垂直于螺旋軸的取向通過(guò)糖苷鍵與主鏈糖基相連。同一平面的堿基在二條主鏈間形成堿基對(duì)。配對(duì)堿基總是A與T和G與C。堿基對(duì)以氫鍵維系，A與T間形成兩個(gè)氫鍵。DNA結(jié)構(gòu)中的堿基對(duì)與Chatgaff的發(fā)現(xiàn)正好相符。從立體化學(xué)的角度看,只有嘌呤與嘧啶間配對(duì)才能滿(mǎn)足螺旋對(duì)于堿基對(duì)空間的要求,而這二種堿基對(duì)的幾何大小又十分相近,具備了形成氫鍵的適宜鍵長(zhǎng)和鍵角條件。每對(duì)堿基處于各自自身的平面上，但螺旋周期內(nèi)的各堿基對(duì)平面的取向均不同。堿基對(duì)具有二次旋轉(zhuǎn)對(duì)稱(chēng)性的特征，即堿基旋轉(zhuǎn)180°并不影響雙螺旋的對(duì)稱(chēng)性。也就是說(shuō)雙螺旋結(jié)構(gòu)在滿(mǎn)足二條鏈堿基互補(bǔ)的前提下，DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)產(chǎn)并不受限制。這一特征能很好的闡明DNA作為遺傳信息載體在生物界的普遍意義。(3)大溝和小溝：大溝和小溝分別指雙螺旋表面凹下去的較大溝槽和較小溝槽。小溝位于雙螺旋的互補(bǔ)鏈之間,而大溝位于相毗鄰的雙股之間。這是由于連接于兩條主鏈糖基上的配對(duì)堿基并非直接相對(duì),從而使得在主鏈間沿螺旋形成空隙不等的大溝和小溝。在大溝和小溝內(nèi)的堿基對(duì)中的N和O原子朝向分子表面。(4)結(jié)構(gòu)參數(shù)：螺旋直徑2nm；螺旋周期包含10對(duì)堿基；螺距3.4nm；相鄰堿基對(duì)平面的間距0.34nm。除B-DNA外，人們還發(fā)現(xiàn)了在不同條件下存在不同雙螺旋結(jié)構(gòu)，如A、A′、B、a-B′、β-B′、C、C′、C′′、D、E和Z-DNA等，顯示DNA雙螺旋基本結(jié)構(gòu)的多態(tài)性。中心法則的內(nèi)容？有哪些現(xiàn)象不能用中心法則來(lái)解釋?zhuān)浚褐行姆▌t：是指遺傳信息從DNA傳遞給RNA，再?gòu)腞NA傳遞給蛋白質(zhì)，即完成遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯的過(guò)程。也可以從DNA傳遞給DNA，即完成DNA的復(fù)制過(guò)程。這是所有有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物所遵循的法則。在某些病毒中的RNA自我復(fù)制（如煙草花葉病毒等）和在某些病毒中能以RNA為模板逆轉(zhuǎn)錄成DNA的過(guò)程（某些致癌病毒）是對(duì)中心法則的補(bǔ)充。RNA的自我復(fù)制和逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，在病毒單獨(dú)存在時(shí)是不能進(jìn)行的，只有寄生到寄主細(xì)胞中后才發(fā)生。選擇性剪接（alternativesplicing）：高等真核細(xì)胞中來(lái)自一個(gè)基因的mRNA前體分子中一般不止一個(gè)內(nèi)含子，因此某個(gè)內(nèi)含子5′的供點(diǎn)又可以在特定條件下與另一個(gè)內(nèi)含子的受點(diǎn)進(jìn)行剪接，從而同時(shí)刪除這兩個(gè)內(nèi)含子及其中間的全部外顯子或內(nèi)含子，這種按不同方式對(duì)mRNA進(jìn)行的剪接車(chē)呢個(gè)為選擇性剪接或可變剪接。限制性酶切圖譜（restrictionmap）：又稱(chēng)DNA物理圖譜，是指某種DNA分子的限制性酶切位點(diǎn)數(shù)目、片段長(zhǎng)度和排列順序的圖譜。乳糖操縱子模型主要內(nèi)容：（1）Z（β-半乳糖苷酶）、Y（β-半乳糖苷透性酶）、A（硫代半乳糖苷轉(zhuǎn)乙?；福┗虻漠a(chǎn)物由一條多順販子的mRNA分子所編碼、（2）該mRNA分子的啟動(dòng)子區(qū)（P）位于阻遏基因（I）與操縱區(qū)（O）之間，不能單獨(dú)起始半乳糖苷酶和透性酶基因的高效表達(dá)；（3）操縱區(qū)是DNA上的一小段序列（僅為26bp），是阻遏物的結(jié)合位點(diǎn)；（4）當(dāng)阻遏物與操縱區(qū)相結(jié)合，lacmRNA的轉(zhuǎn)錄起始受到抑制；（5）誘導(dǎo)物通過(guò)與阻遏物結(jié)合，改變它的三維構(gòu)象，使之不能與操縱區(qū)相結(jié)合，從而激發(fā)lacmRNA的合成，這就是說(shuō)，有誘導(dǎo)物存在時(shí)，操縱區(qū)沒(méi)有被阻遏物占據(jù)，所以啟動(dòng)子能夠順利起始mRNA的轉(zhuǎn)錄。（6）葡萄糖對(duì)乳糖操縱子的調(diào)控——正調(diào)控系統(tǒng)，在含葡萄糖和乳糖的培養(yǎng)基中，大腸桿菌首先利用葡萄糖，用完了葡萄糖周，生長(zhǎng)慢下來(lái)，激活乳糖操縱子，從而利用乳糖繼續(xù)生長(zhǎng)，這是一種轉(zhuǎn)錄激活過(guò)程，當(dāng)葡萄糖水平降低時(shí)，通過(guò)細(xì)胞內(nèi)cAMP來(lái)實(shí)現(xiàn)控制。cAMP水平受細(xì)菌葡萄糖代謝狀態(tài)的影響。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)葡萄糖含量高時(shí)，大腸桿菌細(xì)胞cAMP水平低。腺干算環(huán)化酶對(duì)細(xì)胞內(nèi)葡萄糖分解代謝的某種中間產(chǎn)物的含量敏感；因此此調(diào)節(jié)過(guò)程的名稱(chēng)是分解代謝產(chǎn)物激活。當(dāng)葡萄糖水平低時(shí)，cAMP水平升高，通過(guò)與一種蛋白質(zhì)作用引發(fā)乳糖操縱子激活，這中蛋白質(zhì)是cAMP受體蛋白（cAMPreceptorprotein，CRP）。與cAMP結(jié)合時(shí)，其構(gòu)象改變。這中改變就極大地增加了與特定DNA位點(diǎn)的親和力。色氨酸操縱子模型主要內(nèi)容：（1）色氨酸操縱子含5個(gè)連在一塊的結(jié)構(gòu)基因（trpE、trpD、trpC、trpB、trpA），這些基因的轉(zhuǎn)錄都由一共同的啟動(dòng)子（操縱基因調(diào)節(jié)區(qū)控制）；（2）trp阻抑蛋白含有螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋基序，由不相連的基因trpR編碼；（3）trp濃度低時(shí)，不與trp結(jié)合的阻抑蛋白無(wú)活性，因阻抑蛋白分子中兩個(gè)識(shí)別螺旋彼此靠得近，不能很好地插入操縱區(qū)DNA螺旋大溝，此時(shí)trp操縱子處于活化狀態(tài)，啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄；（4）當(dāng)trp濃度高是，trp與阻抑蛋白結(jié)合，這時(shí)trp稱(chēng)為輔阻抑物，引起蛋白質(zhì)空間構(gòu)像改變，兩個(gè)識(shí)別螺旋恰好分別落入操縱區(qū)兩個(gè)半位點(diǎn)相鄰的DNA大溝中，阻斷了trp操縱子的轉(zhuǎn)錄起始；（5）trp還存在一種調(diào)節(jié)機(jī)制即弱化作用，當(dāng)trp含量很多時(shí)，它能使trp操縱子的轉(zhuǎn)錄提前，trp操縱子上還含一個(gè)162核苷酸的序列，稱(chēng)為trpL，是trp簽到區(qū)，此序列的5′的113個(gè)核苷酸稱(chēng)為弱化子a。當(dāng)trp含量很高時(shí)，轉(zhuǎn)錄在此處終止。弱化作用發(fā)生的原因是由于位于trp前導(dǎo)區(qū)的4個(gè)寡聚核苷酸序列能經(jīng)堿基配對(duì)形成莖-環(huán)結(jié)構(gòu)。在最穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)中，1區(qū)與2區(qū)配對(duì)，3區(qū)與4區(qū)配對(duì)形成兩個(gè)莖-環(huán)結(jié)構(gòu)。3區(qū)、4區(qū)結(jié)構(gòu)緊接著8個(gè)U，是一個(gè)有效的轉(zhuǎn)錄終止子，其結(jié)構(gòu)與不依賴(lài)終止因子的終止子結(jié)構(gòu)相似。當(dāng)trp含量低時(shí)，3區(qū)、4區(qū)莖-環(huán)結(jié)構(gòu)形成受到抑制，弱化位點(diǎn)的終止不能進(jìn)行。原核翻譯過(guò)程與轉(zhuǎn)錄同時(shí)進(jìn)行，因此在mRNA的3′端仍在合成時(shí)，核糖體就可翻譯mRNA5′端的信息。由于trp操縱子前導(dǎo)區(qū)1區(qū)含2個(gè)色氨酸密碼子，翻譯到這2個(gè)色氨酸密碼子時(shí)，由于沒(méi)有足夠的色氨酸-tRNA翻譯它們，核糖體停止移動(dòng)。由于核糖體位于1區(qū)，使1區(qū)不能與2區(qū)配對(duì)，自由的2區(qū)與3區(qū)配對(duì)。由于2區(qū)與3區(qū)的配對(duì)比3區(qū)與4區(qū)配對(duì)形成的莖-環(huán)結(jié)構(gòu)更穩(wěn)定，使得轉(zhuǎn)錄終止子不能形成，因而可合成完整的mRNA，相反……。蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)測(cè)定方法：一級(jí)結(jié)構(gòu)測(cè)定方法的基本策略是用兩套斷鏈方法分別將純化的蛋白質(zhì)的肽鏈專(zhuān)一性地裂解成肽段；再將各個(gè)肽段分離純化，并測(cè)定每個(gè)肽段的順序；然后比較兩套肽段氨基酸順序以排定蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)。具體測(cè)定的主要內(nèi)容包括：測(cè)定前準(zhǔn)備、氨基酸組成的測(cè)定、肽鏈的拆離與純化、末端氨基酸的測(cè)定、肽鏈的專(zhuān)一性裂解與肽段的分離純化、肽段氨基酸順序的測(cè)定、蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的建立、蛋白質(zhì)分子中二硫鍵位置的確定。（1）一級(jí)結(jié)構(gòu)測(cè)定前準(zhǔn)備包括蛋白質(zhì)純化、蛋白質(zhì)分子質(zhì)量的測(cè)定、蛋白質(zhì)多肽鏈數(shù)目和大小的測(cè)定、封閉自由巰基及去除N端封閉的基團(tuán)；（2）氨基酸組成的測(cè)定，包括蛋白質(zhì)水解（酸水解、堿水解、酶水解）、氨基酸的組成（柱后分析法和株前分析法；（3）肽鏈的拆離與純化，二硫鍵的拆離（氧化法、還原法）、非共價(jià)鍵的拆開(kāi)（pH的該筆愛(ài)你引起多肽鏈的解離、強(qiáng)變性劑導(dǎo)致多肽鏈解離、肽鏈純化同一般蛋白質(zhì)純化；（4）末端氨基酸的測(cè)定，N末端的測(cè)定（二硝基氟苯法、二甲基氨基萘磺酰氯法，具體方法詳見(jiàn)下文）、C末端的測(cè)定（肼解法、羧肽酶水解法）；（5）肽鏈的專(zhuān)一性裂解與肽段的分離純化，肽鏈的專(zhuān)一性裂解，是測(cè)定氨基酸序列中的一個(gè)關(guān)鍵性步驟，裂解方法包括化學(xué)裂解、酶水解法；多肽鏈經(jīng)專(zhuān)一性裂解后，降解成長(zhǎng)短不易的較小的片段，這些片段可以應(yīng)用層析和電泳法分離純化；（6）肽段氨基酸排列順序的測(cè)定，常用Edman降解法和酶解法，具體步驟詳見(jiàn)下文；（7）蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的建立，通常采用肽段重疊法和接頭肽法等；（8）二硫鍵位置的確定，確定二硫鍵位置工作主要包括：將完整的蛋白質(zhì)分子不經(jīng)任何處理，直接用酶或酸水解；用凝膠過(guò)濾或離子交換層析等方法，及二硫鍵鑒定的呈色反應(yīng)，分離檢出其中含有二硫鍵的肽段，將肽的二硫鍵拆開(kāi)，分別測(cè)定兩個(gè)肽段的順序；將兩個(gè)肽段的結(jié)構(gòu)與已測(cè)定的蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)行比較，找出相應(yīng)的二硫鍵的位置。附：Edman降解法原理：包括：偶聯(lián)、裂解、轉(zhuǎn)化三步偶聯(lián)反應(yīng)：（1）偶聯(lián)：在pH8-9條件下，多肽鏈N末端氨基酸的氨基與苯異硫氰酸酯試劑偶聯(lián)，生成苯異硫甲氨酰基-多肽；（2）裂解：在無(wú)水、強(qiáng)酸條件下，靠近苯異硫甲氨酰基的氨基酸幻化、肽鏈斷裂，形成苯氨基噻唑啉酮-氨基酸和一個(gè)失去末端氨基酸的肽鏈。此肽鏈的N末端，可進(jìn)一步反應(yīng)；（3）轉(zhuǎn)化：苯氨基噻唑啉酮-氨基酸不穩(wěn)定，在三乙酸水溶液條件下可轉(zhuǎn)化成穩(wěn)定的乙內(nèi)酰苯硫脲-氨基酸，即N末端第一個(gè)氨基酸。多肽鏈的第一個(gè)氨基酸分離后，其N(xiāo)末端的氨基仍是游離的，可以進(jìn)一步與異硫氰酸苯酯反應(yīng)，進(jìn)行第二步降解，這樣，反復(fù)地進(jìn)行偶聯(lián)-降解-偶聯(lián)-降解反應(yīng)，依次將N末端氨基酸分離。二硝基氟苯法測(cè)定N末端：在很溫和的條件下（室溫，pH8-9），能與多肽鏈或蛋白質(zhì)中N末端的a-氨基作用，生成二硝基苯多肽或蛋白質(zhì)（DNP-多肽或蛋白質(zhì)），再將二硝基苯多肽或蛋白質(zhì)水解，使肽鍵斷開(kāi)，但與N末端氨基酸結(jié)合的DNP基并不脫落，這樣可把DNP氨基酸與其他氨基酸分開(kāi)。PrPsc：它是一種蛋白質(zhì)侵染顆粒，這種蛋白也被稱(chēng)為PrPsc，人等哺乳動(dòng)物的身體中存在有正常的PrP蛋白，稱(chēng)為PrPc蛋白，它和PrPsc蛋白是同分異構(gòu)體，一級(jí)結(jié)構(gòu)相同，但PrPsc比PrPc具有更多的β折疊，從而使PrPsc溶解度降低，對(duì)蛋白酶抗性加強(qiáng)，從而致使大腦細(xì)胞代謝異常致病。側(cè)翼序列（Flankingsequence）：基因起始密碼子上游的序列和終止密碼子下游的序列，它是基因的調(diào)控序列，對(duì)基因的有效表達(dá)起調(diào)控作用，包括啟動(dòng)子、增強(qiáng)子和終止子蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)化（structuraltransformation/switch）：與構(gòu)象變化不同，是指較大程度的結(jié)構(gòu)變化，而后者僅為蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的擾動(dòng)或柔性，包括同源肽段的結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)換，二級(jí)結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)換和蛋白質(zhì)淀粉樣化。SOS修復(fù)（sosrepair）：是指DNA受到嚴(yán)重?fù)p傷、細(xì)胞處于危急狀態(tài)時(shí)所誘導(dǎo)的一種DNA修復(fù)方式，修復(fù)結(jié)果只是能維持基因組的完整性，提高細(xì)胞的生成率，但留下的錯(cuò)誤較多，故又稱(chēng)為錯(cuò)誤傾向修復(fù)（error-pronerepair），使細(xì)胞有較高的突變率。硒代半胱氨酸插入序列（selenocysteineinsertionsequence，SECIS）：硒代半胱氨酸Sec與終止密碼子占用同一密碼子，生物體如何將UGA識(shí)別Sec的關(guān)鍵在于mRNA3′端有一個(gè)獨(dú)特的莖-環(huán)結(jié)構(gòu)，由于該莖-環(huán)結(jié)構(gòu)在Sec-tRNA識(shí)別UGA的過(guò)程中是必不可少的，因此稱(chēng)為SECIS?？寺≥d體（cloningvector）：通常采用病毒、質(zhì)?；蚋叩壬镏蝎@取的DNA作為克隆載體，在載體上插入合適大小的外源DNA片段，并注意不能破壞載體的自我復(fù)制性質(zhì)，將重組后的載體引入到宿主細(xì)胞中，并在宿主細(xì)胞中大量繁殖。蛋白質(zhì)分離與純化：由于蛋白質(zhì)性質(zhì)各異，有效成分含量較低，離體后穩(wěn)定性較差，加之所取的動(dòng)物、微生物品種甚多，材料極其廣泛，因此，分離純化的方法多種多樣，通用性差，只有大體相似的程序，1、其步驟一般為：選擇一種目的蛋白含量豐富、穩(wěn)定性好的樣品材料；將蛋白質(zhì)從樣品中抽提出來(lái)；（為了提高蛋白質(zhì)的提取率并防止其變性，在提取過(guò)程中，應(yīng)控制以下因素：包括溶劑的pH、溶劑的離子強(qiáng)度和極性、溫度、抽提的體積以及保護(hù)劑的添加等）確定分離純化的方法，使粗品的純度達(dá)到預(yù)定要求；建立靈敏、特異、精確的檢測(cè)手段，分布測(cè)定蛋白質(zhì)的含量，檢測(cè)蛋白質(zhì)的純度；在操作、分析過(guò)程中注意保護(hù)蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性，防止變性。2、此外，一般程序的選擇策略是：選擇不同機(jī)制的分離單元組成一套工藝，將含量多的雜質(zhì)先分離去除，以盡快縮小樣本體積，提高產(chǎn)物濃度。盡早采用高效分離手段，將最昂貴、最費(fèi)時(shí)的分離單元放在最后階段。3、蛋白質(zhì)分離純化方法：（1）利用溶解度不同：鹽析法、等電點(diǎn)沉淀法、有機(jī)溶劑沉淀法、聚乙二醇沉淀法；（2）利用分子大小和形狀不同：透析和超濾、密度梯度離心、凝膠層析（3）利用電離性質(zhì)不同：離子交換層析、聚焦層析與制備電泳；（4）利用吸附能力不同：吸附層析；（5）利用生物功能專(zhuān)一性：親和層析與生物專(zhuān)一性吸附。4、蛋白質(zhì)純度鑒定：主要有電泳法、免疫法、高效液相層析、分光光度法以及超速離心法等，其中電泳法包括：醋酸纖維薄膜電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳、濃度梯度聚丙烯酰胺凝膠電泳、印記轉(zhuǎn)移電泳。聚丙烯酰胺凝膠等點(diǎn)聚焦、雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳及毛細(xì)管電泳；免疫法包括：免疫擴(kuò)散、免疫電泳、酶聯(lián)免疫吸附及免疫印記等酶活性調(diào)節(jié)中的別構(gòu)機(jī)制：MWC模式要點(diǎn)：（1）別構(gòu)酶是由兩個(gè)以上亞基組成的寡聚酶，各亞基占有相等的，物理位置相對(duì)稱(chēng)的排列，因此每個(gè)別構(gòu)酶分子至少有一個(gè)對(duì)稱(chēng)軸；（2）每一個(gè)亞基對(duì)一種配體之憂(yōu)一個(gè)結(jié)合位點(diǎn)；（3）每種亞基都能以松弛型和嚴(yán)緊型兩種構(gòu)象狀態(tài)存在，保持平衡；（4）兩種構(gòu)象狀態(tài)可以互變，這取決于外界條件，也取決于呀幾件的相互作用，構(gòu)象轉(zhuǎn)變采取同步協(xié)同方式，或者采取齊變方式，如果一個(gè)亞基從T型轉(zhuǎn)變?yōu)镽型，則其他亞基也幾乎同時(shí)轉(zhuǎn)變?yōu)镽型，不存在TR雜合型，故MWC模式又稱(chēng)協(xié)調(diào)模式；（5）別構(gòu)酶構(gòu)象狀態(tài)轉(zhuǎn)變時(shí)，分子的對(duì)稱(chēng)性不變。故這一模式又稱(chēng)對(duì)稱(chēng)性模式；（6）無(wú)論多少個(gè)配體結(jié)合到酶的特異結(jié)合部位上，各個(gè)配體與R型結(jié)合的位點(diǎn)都相等，即其內(nèi)在解離常數(shù)KR是相等的，各個(gè)配體與T型結(jié)合的位點(diǎn)都相等，即內(nèi)在解離常數(shù)KT也是相等的。MWC模式能簡(jiǎn)單而又精確地反映別構(gòu)酶大多數(shù)協(xié)同效應(yīng)機(jī)制，但此模型也有缺點(diǎn)，主要是沒(méi)有考慮到同促負(fù)協(xié)同效應(yīng)，因?yàn)榈孜镏缓蚏型結(jié)合，是T、R型間的平衡有利于R型增多，故只能引起正協(xié)同效應(yīng)而不能產(chǎn)生負(fù)協(xié)同效應(yīng)。KNF模式要點(diǎn)：（1）當(dāng)配體不存在時(shí)，別構(gòu)酶之憂(yōu)一種構(gòu)象狀態(tài)存在（T）型，而不處于R-T的平衡狀態(tài)；之憂(yōu)當(dāng)配體與之結(jié)合后，才誘導(dǎo)T型向R型轉(zhuǎn)變；（2）別構(gòu)酶的構(gòu)象是變序方式進(jìn)行的，而不是齊變，特點(diǎn)是有各種TR雜合體。即當(dāng)配體和第一個(gè)亞基結(jié)合引起該亞基構(gòu)象變化，并使臨近亞基易于發(fā)生同樣的構(gòu)象改變，當(dāng)?shù)诙€(gè)配體結(jié)合后又可導(dǎo)致第三個(gè)亞基類(lèi)似的變化，依此順序傳遞，直到最后所有亞基都處于同樣的構(gòu)象。因此該模式又稱(chēng)為序變模式；（3）呀幾件的相互作用可能是正協(xié)同效應(yīng)，也可能是負(fù)協(xié)同效應(yīng)，前者導(dǎo)致下一亞基對(duì)配體有更大親和力，K1<K2<K3<K4，出現(xiàn)S型曲線(xiàn)，后者則是降低親和力，K1>K2>K3>K4。動(dòng)物靠什么途徑調(diào)節(jié)其組成酶的催化活性？以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能關(guān)系為例說(shuō)明酶的別構(gòu)調(diào)節(jié)動(dòng)物對(duì)酶的調(diào)節(jié)主要有兩個(gè)方面：（1）是對(duì)已有酶活性的調(diào)節(jié)，包括酶的別構(gòu)調(diào)節(jié)和可逆共價(jià)修飾；（2）是對(duì)酶的合成與降解的調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能酶活性調(diào)控的影響因素飼料原料分類(lèi)：按營(yíng)養(yǎng)價(jià)值分類(lèi)：1、粗飼料如秸稈、干草等；2、青綠多汁飼料如紫云英、大白菜等；3、精飼料如豆類(lèi)子實(shí)、餅粕等；4、特殊飼料凡不屬于前三類(lèi)的飼料都?xì)w入此類(lèi)，主要包括添加劑、礦物質(zhì)、尿素等；按飼料來(lái)源分類(lèi)：1、植物性飼料包括植物子實(shí)、莖葉及加工副產(chǎn)品等；2、動(dòng)物性飼料利用動(dòng)物性產(chǎn)品加工而成的飼料；3、礦物質(zhì)飼料包括天然和工業(yè)生產(chǎn)的礦物質(zhì)；4、微生物飼料利用微生物，包括酵母、細(xì)菌、藻類(lèi)等生產(chǎn)的飼料等；5、人工合成飼料利用微生物發(fā)酵、化學(xué)合成等方法生產(chǎn)的飼料原料。魚(yú)粉營(yíng)養(yǎng)特點(diǎn)：（1）魚(yú)粉的能量水平主要受脂肪和粗灰分含量的影響，一般在粗脂肪含量合格的情況下，全魚(yú)粉能量水平高，因而很容易搭配成高能量飼料；（2）魚(yú)粉的粗蛋白質(zhì)含量高，而且品質(zhì)好，消化率高。必需氨基酸含量高，比例平衡，尤其是植物性蛋白飼料缺乏的賴(lài)氨酸、蛋氨酸和色氨酸含量很高，但精氨酸相對(duì)較少；（3）粗脂肪那個(gè)含量高，尤其是海水魚(yú)粉中的之分那個(gè)含來(lái)那個(gè)有大量高度不飽和脂肪酸，具有特殊營(yíng)養(yǎng)生理作用，但脂肪含量高于9%會(huì)給貯存帶來(lái)不便；（4）魚(yú)粉灰分含量高，但粗灰分含量越高，表示魚(yú)粉中魚(yú)骨越多，魚(yú)肉越少。魚(yú)粉食鹽含量高，鈣、磷含量豐富，比例適宜，且磷主要已磷酸鈣形式存在，；利用率高。微量元素中，鐵的含量最高，其次是鋅、硒；（5）B族維生素含量豐富，尤其以維生素B1、維生素B2含量高，還含有較豐富的維生素A、維生素D；（6）魚(yú)粉中含有促生長(zhǎng)的未知因子，可刺激動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育；（7）魚(yú)粉質(zhì)量變異很大，常存在以下一些問(wèn)題：摻假、鹽分含來(lái)那個(gè)過(guò)高、變質(zhì)以及維生素B1分解酶等?；ㄉ蔂I(yíng)養(yǎng)特點(diǎn)：花生品種較多，隨脫油方法不同、脫殼程度不同，餅粕中營(yíng)養(yǎng)成分含量及營(yíng)養(yǎng)價(jià)值也不一樣。脫殼花生餅粕的代謝能水平很高，可達(dá)12.26MJ/kg，是餅粕類(lèi)飼料中可利用能量水平最高者。無(wú)氮浸出物中大多為淀粉和戊聚糖等。殘留脂肪熔點(diǎn)低，所含脂肪酸以油酸為主，不飽和脂肪酸約占53%-78%；（2）粗蛋白質(zhì)含量很高，所含蛋白質(zhì)以不溶于水的球蛋白為主，占65%，可溶于水的白蛋白僅占7%，故蛋白質(zhì)性狀與大豆蛋白差異較大。氨基酸組成不佳，賴(lài)氨酸及蛋氨酸偏低，而精氨酸與組氨酸含量相當(dāng)高，分別可達(dá)4.88%和0.88%；（3）礦物質(zhì)中，鈣少磷多，但磷多屬植酸磷，其他礦物元素含量與大豆餅粕相近。維生素中除維生素A、維生素D、維生素C和核黃素外，其他維生素含量豐富，尤其是煙酸含量高；（4）生花生含有胰蛋白酶抑制因子，加熱即可除去。此外，黃曲霉毒素是在霉變花生中發(fā)現(xiàn)的最重要的毒素，采食感染黃曲霉毒素的飼料，會(huì)使家畜生長(zhǎng)不良、中毒、致癌，甚至死亡。大麥營(yíng)養(yǎng)特點(diǎn)：(1)有效能值較低，代謝能約為玉米89%，凈能約為玉米的82%。粗纖維含量高，為玉米的2被左右，高達(dá)5%-6%。而淀粉和糖類(lèi)含量則比玉米低，大賣(mài)的無(wú)氮浸出物約為玉米的92%左右。在淀粉中，支鏈淀粉約占74%-78%，直鏈淀粉約為22%-26%，另外尚含有4.4%的β-1,3葡聚糖；（2）粗蛋白質(zhì)含量較高，高于玉米的蛋白質(zhì)含量，而且蛋白質(zhì)品質(zhì)也較優(yōu)，構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸中除亮氨酸、蛋氨酸、色氨酸外，其他氨基酸含量軍比玉米多，如大麥賴(lài)氨酸含量約為玉米的2倍，雖對(duì)豬的消化率為73%，但從可利用氨基酸總量看仍由于玉米；（3）脂肪含量?jī)H為玉米的一般，亞油酸含量也僅有0.78%，但飽和脂肪酸含量高于玉米，因此用粉碎大麥飼喂育肥豬可獲得硬脂胴體；（4）大麥含礦物質(zhì)較高，主要是鉀和磷，其中63%為植酸磷，鎂的含量也較高，可達(dá)100mg/kg，但鈣和銅含量低。大麥富含B族維生素，煙酸含量較高，但大多與低分子蛋白結(jié)合，單位動(dòng)物利用率只有10%。生物素、葉酸、維生素A、維生素D、維生素K含量低，只有少量的維生素E；（5）大麥中含有抗胰蛋白酶和抗胰凝乳酶因子，前者含量低，后者可被胃蛋白酶分解，對(duì)動(dòng)物影響不大。另外尚含β-葡聚糖抗?fàn)I養(yǎng)因子，單位動(dòng)物對(duì)該糖不易利用，用量高時(shí)，降低營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，但可通過(guò)添加外源β-葡聚糖酶制劑消除其抗?fàn)I養(yǎng)作用。棉粕營(yíng)養(yǎng)特點(diǎn)：（1）棉籽餅粕的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值受棉酚及環(huán)丙烯脂肪酸含量所影響。所含碳水化合物以糖類(lèi)及戊聚糖為主，纖維含量隨去殼程度而不同。棉籽仁餅粕代謝能水平較高，約10MJ/kg，不脫殼者纖維含量可達(dá)18%，其代謝能水平只有6MJ/kg左右，不能作為肉雞飼料原料；（2）棉籽餅粕蛋白質(zhì)含量高，氨基酸中賴(lài)氨酸少，為第一限制性氨基酸，利用率也差，精氨酸含量高，賴(lài)氨酸和精氨酸比例不適當(dāng)。但游離棉酚含量少者，其粗蛋白質(zhì)及賴(lài)氨酸利用率較佳。棉籽餅粕是色氨酸、精氨酸及蛋氨酸的優(yōu)良來(lái)源，利用率比菜籽餅粕好；（3）礦物質(zhì)鈣少磷多，磷多屬植酸態(tài)磷，占71%，單胃動(dòng)物對(duì)其利用率幾乎為零。維生素含量受加熱影響損失大，維生素B1較高，約7.0mg/kg，維生素A、維生素D含量少；（4）棉籽餅粕含有游離棉酚和環(huán)丙烯脂肪酸等抗?fàn)I養(yǎng)因子。游離棉酚具有很強(qiáng)的都行，表現(xiàn)為生長(zhǎng)受阻、貧血、呼吸困難、繁殖力下降等，嚴(yán)重時(shí)死亡。棉酚可與蛋黃中Fe2+結(jié)合形成復(fù)合物，使蛋黃色澤降低。環(huán)丙烯脂肪酸能改變組織和乳脂總的不飽和脂肪酸含量，容易形成“海面蛋”，影響雞蛋的商品價(jià)值及種蛋的受精率和孵化率。菜籽粕營(yíng)養(yǎng)特點(diǎn)：（1）菜籽餅粕的能量?jī)r(jià)值取決于其外殼及粗纖維的含量。此外，榨油加工工藝對(duì)它的能量?jī)r(jià)值也有較影響，殘油高的能量?jī)r(jià)值高。菜籽餅粕對(duì)豬的能值高，牛次之，雞的能值最低；（2）菜籽餅粕屬蛋白質(zhì)原料，消化率比豆粕差?？傮w上，各種氨基酸含來(lái)那個(gè)豐富，且較平衡，其品質(zhì)接近大豆餅粕。氨基酸組成中，賴(lài)氨酸含量較高，蛋氨酸含量在餅粕類(lèi)飼料中僅次于芝麻餅粕，色氨酸也較高，精氨酸含量很低，菜籽餅粕可供平衡氨基酸用；（3）礦物質(zhì)中鈣、磷均高，但所含磷65%屬植酸態(tài)磷，利用率低。含硒量較高，為0.16%-0.29%mg/kg，是大豆餅粕的10倍。鐵、錳含量也較高，胡蘿卜素和維生素D含量很少，硫胺素和核黃素相對(duì)其他餅粕偏低，但煙酸和膽堿含量高；（4）菜籽餅粕含有多種不良成分，使用上應(yīng)注意其含量并加以限制。硫葡萄糖苷、芥子堿和單寧是主要的抗?fàn)I養(yǎng)因子，其中硫葡萄糖苷水解生成噁唑烷硫銅、硫氰酸鹽等致甲狀腺腫大物質(zhì)，影響動(dòng)物的生產(chǎn)性能；（5）與其它植物性蛋白質(zhì)飼料原料最大不同在于其熱能評(píng)價(jià)變化相當(dāng)大，隨品種、測(cè)定方法及對(duì)象動(dòng)物不同而有很大差異。全脂大豆與膨化大豆?fàn)I養(yǎng)比較：小麥、高粱、豆粕等飼料原料營(yíng)養(yǎng)特點(diǎn)、抗?fàn)I養(yǎng)特性及解決的方法小麥：（1）可利用能值含量較高，比大麥和燕麥高，但略低于玉米，能值約為玉米的95%-97%，原因主要是小麥粗脂肪含量低，不到玉米的一半；（2）蛋白質(zhì)含量較高，約13%左右，為玉米含量的150%。在小麥胚乳中最主要的蛋白質(zhì)是醇溶谷蛋白和谷蛋白，這兩種蛋白存在于胚乳中，常被稱(chēng)為“面筋”。小麥各種氨基酸的含量?jī)?yōu)于玉米，但蘇氨酸含來(lái)那個(gè)按其占蛋白質(zhì)的比例來(lái)說(shuō)，明顯不足。同時(shí)，賴(lài)氨酸、蛋氨酸含量也很少，分別為0.3%，0.25%；（3）脂肪含量低，而且必需脂肪酸的含量也低，如亞油酸含量?jī)H為0.8%；（4）礦物質(zhì)含量不平衡，尤其以鈣、磷為甚，鈣少磷多，但磷有70%屬植酸磷。微量元素中銅、錳、鋅等含量比玉米高。小麥含B族維生素和維生素E較多，小麥胚乳中含胡蘿卜素較高，但維生素A、維生素D、維生素C、維生素K較少，生物素的利用率比玉米和高粱低；（5）小麥含有較高的阿拉伯木聚糖抗?fàn)I養(yǎng)因子，小麥?zhǔn)褂昧扛邥r(shí)影響能量?jī)r(jià)值。阿拉伯木聚糖抗?fàn)I養(yǎng)作用：與水分子直接作用增加了食糜粘性，改變食糜的物理特性和腸道生理活性、與腸黏膜表面脂類(lèi)微團(tuán)和多糖蛋白復(fù)合物相互作用導(dǎo)致黏膜表面水層厚度增加、還能直接結(jié)合消化道中的多種消化酶，使消化酶不能與底物發(fā)生反應(yīng)，在動(dòng)物生產(chǎn)中NSP最重要的作用就是降低飼料表觀代謝能，另外就是降低動(dòng)物對(duì)飼料中各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率。目前解決措施主要是通過(guò)添加外源酶制劑來(lái)消除其抗?fàn)I養(yǎng)作用。高粱：（1）高粱淀粉含量與玉米相近，一般約占籽實(shí)忠良的70%左右，巔峰粒的性狀與大小也與玉米相似，但高粱淀粉受蛋白質(zhì)覆蓋度高，故消化率較低，使高粱的有效能值低于玉米。高粱的能值與單寧的含量有關(guān)；（2）粗蛋白質(zhì)含量略高于玉米，但同樣品質(zhì)不佳，主要以交鏈高粱醇溶蛋白為主，占總蛋白的31%，而且蛋白質(zhì)與淀粉之間存在很強(qiáng)的結(jié)合鏈，致使酶不易進(jìn)入分解，導(dǎo)致高粱蛋白質(zhì)不易消化。其氨基酸組成與玉米相近，缺乏賴(lài)氨酸、含硫氨基酸和色氨酸等必需氨基酸，其含量分別為0.18%、0.29%、0.08%；（3）脂肪含量低于玉米，脂肪酸中飽和脂肪酸比玉米稍多，而必需脂肪酸如亞油酸含量較玉米低。此外，高粱脂類(lèi)中5%為磷脂，25%為蠟質(zhì)，蠟質(zhì)含量是玉米的50倍；（4）礦物質(zhì)中含磷、鎂、鉀較多，而鈣含量稍，所含磷雖多，但40%-70%的磷為植酸磷，利用率低。維生素中，維生素B1、和維生素B6的含量與玉米相當(dāng)，泛酸、煙酸和生物素含量高于玉米，煙酸以結(jié)合型存在，利用率低，生物素的利用率也低，肉用仔雞對(duì)高粱中的生物素的利用率只有20%。其余維生素含量少，尤其是維生素A；（5）單寧是高粱主要的抗?fàn)I養(yǎng)因子。單寧是水溶性的多酚化合物，通常分為水解單寧和縮合單寧，高粱籽實(shí)中的單寧為縮合單寧。單寧主要抗?fàn)I養(yǎng)作用是：苦澀味重，影響適口性，以及與蛋白質(zhì)及消化酶類(lèi)結(jié)合，影響飼料的轉(zhuǎn)化率和代謝能值。去除方法：可采用水浸或煮沸處理、氫氧化鈉處理、氨化處理等，也可通過(guò)飼料中添加蛋氨酸或膽堿等含甲基的化合物來(lái)緩解單寧的不良影響。豆粕：（1）大豆餅粕的粗纖維含量不高，主要來(lái)自大豆皮。無(wú)氮浸出物主要是蔗糖、棉籽糖、水蘇糖以及多糖類(lèi)，淀粉含量低，故所含可利用能量較低，這也是其他豆粕類(lèi)飼料的共同點(diǎn)。大豆餅粕依加工方式不同，脂肪含量也不同。一般來(lái)說(shuō)，壓榨餅殘留脂肪較多，故能值較高，浸提粕殘留脂肪少，比餅類(lèi)能值低；（2）大豆餅粕粗蛋白質(zhì)含量高，消化率也高。必需氨基酸的含量高，組成合理。賴(lài)氨酸和異亮氨酸是所有餅粕類(lèi)飼料中含量最高者，賴(lài)氨酸含量是棉籽餅、菜籽餅、花生餅的2倍左右。賴(lài)氨酸與精氨酸以及異亮氨酸與亮氨酸的比值恰當(dāng)。此外，色氨酸和蘇氨酸含量也很高，與玉米等谷實(shí)類(lèi)飼料配伍可起互補(bǔ)作用。大豆餅粕的缺點(diǎn)是蛋氨酸含量不足，略低于菜籽餅粕和葵花仁餅粕，略高于棉仁餅粕和花生餅粕；（3）礦物質(zhì)中鈣少磷多，磷多屬于植酸磷，約占61%。維生素中，維生素A、硫胺素、核黃素和胡蘿卜素含量少，煙酸和泛酸含量稍多，膽堿含量豐富；（4）大豆餅粕含有胰蛋白酶抑制因子、大豆凝集素、大豆抗原等抗?fàn)I養(yǎng)因子，胰蛋白酶抑制因子可導(dǎo)致蛋白質(zhì)的消化率及利用率降低，并引起胰腺增生與腫大，使動(dòng)物出現(xiàn)消化、吸收功能失調(diào)紊亂；凝集素是通過(guò)破壞小腸刷狀緣黏膜結(jié)構(gòu)，干擾刷狀緣黏膜分泌多種酶功能，使蛋白質(zhì)利用率下降，動(dòng)物生長(zhǎng)受阻，甚至停滯；大豆抗原是一種刺激免疫系統(tǒng)的抗?fàn)I養(yǎng)因子，具有抗原性和致敏性，容易導(dǎo)致幼齡動(dòng)物的過(guò)敏反應(yīng)，對(duì)動(dòng)物健康和生產(chǎn)性能產(chǎn)生不利影響。解決方法：適當(dāng)加熱、熱乙醇浸泡、發(fā)酵或膨化處理可破壞這些抗?fàn)I養(yǎng)因子，但加熱不足和過(guò)度加熱均會(huì)降低蛋白質(zhì)的生物學(xué)效率。配合飼料：指根據(jù)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)需要設(shè)計(jì)飼料配方，將兩種以上飼料原料按飼料加工工藝加工生產(chǎn)出來(lái)的飼料產(chǎn)品。飼料：能提供動(dòng)物所需的營(yíng)養(yǎng)成分，保證動(dòng)物健康，促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)和生產(chǎn)，且在合理使用條件下不發(fā)生有害作用的可飼用物質(zhì)。日糧：滿(mǎn)足一頭動(dòng)物一晝夜所需各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)而才是的各種飼料總量。全價(jià)飼料：除水份外能全部滿(mǎn)足動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)需要的飼料。飼糧：根據(jù)動(dòng)物具體營(yíng)養(yǎng)需要量將各種原料按百分比配制成滿(mǎn)足動(dòng)物一定生產(chǎn)水平要求的混合飼料。飼料添加劑概念及分類(lèi)：為滿(mǎn)足動(dòng)物特殊營(yíng)養(yǎng)需要和保健需要、改善動(dòng)物產(chǎn)品品質(zhì)以及保證飼料產(chǎn)品質(zhì)量而加入飼料中的少量或微量物質(zhì)。（1）營(yíng)養(yǎng)性飼料添加劑維生素：A、D、E、K、B1、B2、葉酸等微量元素：鐵、銅、錳、鋅等氨基酸與小肽：賴(lài)氨酸、蛋氨酸等非蛋白氮（NPN）：尿素、縮二脲等（2）非營(yíng)養(yǎng)性添加劑生長(zhǎng)促進(jìn)劑：抗生素、酶制劑、有機(jī)酸、微生物制劑等驅(qū)蟲(chóng)保健劑：驅(qū)蟲(chóng)劑、抗球蟲(chóng)劑等飼料調(diào)質(zhì)劑：著色劑、風(fēng)味劑等飼料調(diào)制劑：黏結(jié)劑、乳化劑等飼料貯藏劑：抗氧化劑、防霉劑中草藥添加劑：薄荷葉粉、黨參葉等飼料配方的共性及特殊要求：（1）飼料配方的共同性所有飼料配方都是根據(jù)已掌握的基本參數(shù)計(jì)算出來(lái)的，這些參數(shù)包括：飼喂對(duì)象的營(yíng)養(yǎng)需要量、飼料原料的營(yíng)養(yǎng)成分含量；相應(yīng)的校正參數(shù)、管理方式和環(huán)境條件等；（2）飼料配方的特殊要求1、營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)的特殊要求；2、強(qiáng)化動(dòng)物生長(zhǎng)和產(chǎn)品生產(chǎn)的特殊要求；3、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)和形狀的特殊要求；4、動(dòng)物保健和防病方面的特殊要求；5、生物安全和環(huán)境保護(hù)的特殊要求；6、與配合飼料產(chǎn)品形狀有關(guān)的附加要求等配方設(shè)計(jì)應(yīng)考慮因素：1、動(dòng)物的品種、性別和年齡；2、動(dòng)物的采食量和消化生理特性；3、動(dòng)物的生產(chǎn)用途和生產(chǎn)性能；4、動(dòng)物的飼養(yǎng)方式和環(huán)境條件；5、動(dòng)物飼養(yǎng)季節(jié)和氣候條件；6、飼料原料的種類(lèi)、來(lái)源和價(jià)格；7、飼料原料的特性和限制條件；8、飼料加工工藝；9、生態(tài)和環(huán)保要求；10、當(dāng)?shù)仫曫B(yǎng)傳統(tǒng)和市場(chǎng)習(xí)慣等。全價(jià)配合飼料配方涉及的原則：1、設(shè)計(jì)的飼料配方具有科學(xué)性和先進(jìn)性；2、具有最佳經(jīng)濟(jì)效益；3、良好的市場(chǎng)認(rèn)同性；4、具有營(yíng)養(yǎng)特性和產(chǎn)品質(zhì)量保持相對(duì)穩(wěn)定；5、配方應(yīng)安全合法。影響飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)確性的因素：“標(biāo)準(zhǔn)”的產(chǎn)生和應(yīng)用都是有條件的，它是以特定動(dòng)物為對(duì)象，在特定環(huán)境條件下研制的滿(mǎn)足其特定生理階段或生理狀態(tài)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)需要的數(shù)量定額。但在動(dòng)物生產(chǎn)實(shí)際中，影響因素有很多如畜禽的品種（系）、性別、飼養(yǎng)環(huán)境條件、日糧類(lèi)型、飼養(yǎng)階段劃分和能量營(yíng)養(yǎng)體系等。在應(yīng)用飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，必須充分考慮到飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)的適用型和靈活性。豬飼料配方設(shè)計(jì)應(yīng)考慮問(wèn)題：（1）豬全價(jià)配合飼料設(shè)計(jì)關(guān)鍵是選用合適的豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，并根據(jù)各種飼料原料的營(yíng)養(yǎng)特性確定限制條件；（2）不同階段豬的原料選用要根據(jù)豬的消化生理特點(diǎn)和生長(zhǎng)性能來(lái)確定仔豬日糧原料選擇所需考慮因素：（1）日糧中必需有一定的乳制品，尤其是乳清粉、乳糖或脫脂奶粉等，以便仔豬適應(yīng)這一階段轉(zhuǎn)變；（2）使用的原料必須品質(zhì)優(yōu)良、適口性好、易于消化吸收；（3）注意植物性蛋白質(zhì)飼料原料含量不能過(guò)高，或者采用去除抗原性的植物性蛋白質(zhì)飼料原料，如加工良好的膨化大豆粉或分離大豆蛋白等；（4）使用油脂補(bǔ)充能量需要時(shí)，應(yīng)選用含有必需脂肪酸或中鏈脂肪酸的油脂，大豆油和椰子油是仔豬很好的能量飼料原料。豬、牛飼料中考慮的營(yíng)養(yǎng)特性：肉用雞飼料配方設(shè)計(jì)應(yīng)考慮的因素：（1）快大型肉用仔雞是根據(jù)生長(zhǎng)速度快和飼料利用率高等指標(biāo)選育而成的，因此對(duì)能量及其他營(yíng)養(yǎng)需要量都很高。而在我們目前飼的料資源和價(jià)格條件下，很難配到這么高的能量水平；（2）黃羽肉雞的生長(zhǎng)速度慢，日糧的營(yíng)養(yǎng)水平比白羽快大型肉雞低。由于黃羽肉雞品種差異很大，部分品種已育種改良，生長(zhǎng)速度緊接白羽快大肉用仔雞，所以確定營(yíng)養(yǎng)水平是關(guān)鍵；（3）由于肉用仔雞具有生長(zhǎng)速度快、飼料效率高等特點(diǎn)，因此，在設(shè)計(jì)飼料配方時(shí)應(yīng)選用能量、粗蛋白質(zhì)含量較高的優(yōu)質(zhì)原料，如玉米、豆粕、進(jìn)口魚(yú)粉，不選用或少用粗纖維含量較高的原料，如糠麩類(lèi)等；（4）為滿(mǎn)足肉仔雞對(duì)能量的需要，還需要添加2%-4%的動(dòng)、植物油脂，動(dòng)物油脂，如牛、羊脂的飽和脂肪酸含量高，雛雞不能很好地吸收利用，如果同時(shí)用1%大豆油或5%全脂大豆粉作為替代物，可有效提高脂肪的消化率；（5）在實(shí)際生產(chǎn)中，飼料成分與營(yíng)養(yǎng)體系應(yīng)隨出售體重、飼養(yǎng)日齡、飼料效率等目標(biāo)的不同而改變，甚至飼養(yǎng)密度乃至雞舍構(gòu)造也影響飼料配方的設(shè)計(jì)。對(duì)地面平養(yǎng)雞應(yīng)重視抗球蟲(chóng)劑的使用，衛(wèi)生條件欠佳時(shí)，則宜考慮應(yīng)控制腸道感染性疫病的添加劑。在出售錢(qián)1-2周，要嚴(yán)格控制抗生素等藥物的添加，避免藥物殘留同時(shí)又可降低飼料成本。蛋用雞飼料不同時(shí)期飼料配方各有哪些特點(diǎn)：（1）育雛期：蛋用雞0-6周齡為育雛期。這一時(shí)期生長(zhǎng)速度快，但消化系統(tǒng)發(fā)育不健全，胃的容積小，采食量有限；同時(shí)肌胃研磨飼料能力差；消化道內(nèi)缺乏某些消化酶，消化能力差。因此，設(shè)計(jì)飼料配方時(shí)應(yīng)選用粗纖維含量低、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高、品質(zhì)優(yōu)良、容易消化的飼料。如玉米、豆粕、優(yōu)質(zhì)魚(yú)粉等常用原料。（2）育成期：蛋用雞6-20周齡為育成期。這一時(shí)期，雞生長(zhǎng)仍然較快，發(fā)育旺盛，消化器官逐漸發(fā)育完善。由于雞的品種、生產(chǎn)性能、飼養(yǎng)方法不斷改進(jìn)，部分雞種需在育成期進(jìn)行適當(dāng)限制飼養(yǎng)。設(shè)計(jì)飼料配方時(shí)可適量選用農(nóng)副產(chǎn)品和優(yōu)質(zhì)的植物莖葉，以減少精飼料的用量，有利于降低飼料成本。（3）產(chǎn)蛋期：這一時(shí)期又按產(chǎn)蛋率高低分為三階段飼養(yǎng)法（產(chǎn)蛋前期、中期和后期），每一階段分別給予不同營(yíng)養(yǎng)水平的飼糧。1、產(chǎn)蛋前期為開(kāi)產(chǎn)至40周齡或產(chǎn)蛋率由5%到80%以上的高峰階段。這一時(shí)期，母雞攝入的應(yīng)啊與國(guó)內(nèi)物質(zhì)主要用于產(chǎn)蛋和增重。這一時(shí)期除注意飼料配方原料的相對(duì)穩(wěn)定外，其營(yíng)養(yǎng)水平應(yīng)酌情調(diào)整，主要有兩方面：一是當(dāng)產(chǎn)蛋率上升緩慢時(shí)試探性提高粗蛋白質(zhì)水平，以發(fā)揮母雞的最大生產(chǎn)潛力；而是根據(jù)蛋殼質(zhì)量調(diào)整鈣的水平，以增加硬度，減少破損。此外，配合飼料原料要品質(zhì)優(yōu)良、營(yíng)養(yǎng)豐富；蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素等關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)適量提高。2、產(chǎn)蛋中期為40-60周齡或產(chǎn)蛋率由80%至70%的高峰期過(guò)后的階段。這一時(shí)期雖然產(chǎn)蛋率開(kāi)始下降，但蛋重增加。為使產(chǎn)蛋率緩慢而平穩(wěn)的下降，飼糧中的粗蛋白質(zhì)水平不可降得太快，以采取試探性降低蛋白質(zhì)水平較為穩(wěn)妥。3、產(chǎn)蛋后期為60周齡以后或產(chǎn)蛋率降至70%以下的階段，此時(shí)，產(chǎn)蛋率持續(xù)下降。由于雞齡增加，對(duì)飼料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收能力下降，蛋殼質(zhì)量變差，飼糧中應(yīng)適當(dāng)增加礦物質(zhì)飼料的用量，以提高鈣的水平。產(chǎn)蛋后期隨產(chǎn)蛋量下降，母雞對(duì)能量的需要量相應(yīng)減少，在降低粗蛋白質(zhì)水平的同時(shí)不可提高能量水平，一面使雞變肥而影響生產(chǎn)性能。設(shè)計(jì)產(chǎn)蛋雞的飼料配方，除考慮雞的生產(chǎn)性能外，還要考慮雞的品種，體重、蛋的大小、蛋殼的質(zhì)量、蛋黃的色澤以及每天采食量等鴨、鵝的飼料配方設(shè)計(jì)：鴨：各品種鴨的營(yíng)養(yǎng)需要基本相同，與雞比較亦相差不大。設(shè)計(jì)飼料配方時(shí)可參考雞的配方程序。鴨的配方原料選擇面可比雞寬一下，如糠麩等農(nóng)副產(chǎn)品均可用以喂鴨。鵝：鵝是草食禽類(lèi)，比較耐粗飼，尤其是我國(guó)地方品種如獅頭鵝，生長(zhǎng)階段以白天放牧采食天然青草綠飼料和植物籽實(shí)為主；早、中、晚補(bǔ)飼以糠麩為主的混合飼料，精飼料用量很少。對(duì)于引進(jìn)肉用品種，營(yíng)養(yǎng)需要與雞相似，設(shè)計(jì)飼料配方時(shí)可參照雞的配方選擇原料，飼喂配合飼料時(shí)可搭配30%-50%的青綠飼料或配入一定來(lái)那個(gè)的青干草粉、植物葉粉等。理想蛋白：指這種蛋白質(zhì)的氨基酸在組成和比例上與動(dòng)物所需蛋白質(zhì)的氨基酸的組成和比例一致，包括必需氨基酸之間以及必需氨基酸和非必需氨基酸之間的組成和比例，動(dòng)物對(duì)這種蛋白質(zhì)的利用率為100%。應(yīng)用：（1）用于估測(cè)氨基酸的需要量；（2）評(píng)定飼料蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及意義；（3）用于配制氨基酸平衡的日糧；（4）降低日糧蛋白水平，節(jié)約蛋白質(zhì)資源；（5）開(kāi)發(fā)利用非常規(guī)蛋白飼料多不飽和脂肪酸：指具有兩個(gè)或兩個(gè)以上雙鍵的脂肪酸。生物學(xué)功能：（1）影響機(jī)體的免疫機(jī)能，日糧中不飽和脂肪酸的種類(lèi)和添加量會(huì)影響細(xì)胞免疫和體液免疫以及細(xì)胞因子和抗體分泌等；（2）對(duì)基因表達(dá)具有調(diào)控作用，日糧中PUFA可調(diào)控許多基因的表達(dá)，從而影響動(dòng)物的代謝過(guò)程并最終影響動(dòng)物的生長(zhǎng)；（3）影響機(jī)體脂肪的代謝，PUFA具有降低血清中膽固醇和甘油三酯的作用；（4）對(duì)細(xì)胞膜功能有影響，PUFA是細(xì)胞膜磷脂的重要成分，是決定細(xì)胞膜功能的重要因素。寡糖、寡肽營(yíng)養(yǎng)功能：寡糖：（1）增殖腸內(nèi)有益菌，抑制有害菌，果寡糖被腸道雙歧桿菌利用后，大量繁殖，產(chǎn)生多種有機(jī)酸，降低腸道pH值，從而使有害微生物得到抑制；（2）結(jié)合吸收外源性病原菌，微生物表面的糖蛋白（或菌毛）能夠特異地識(shí)別腸黏膜上皮的寡糖受體，并與之結(jié)合。當(dāng)含寡糖飼料進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)后，胃腸道中的致病菌就會(huì)與之結(jié)合，從而不能在腸壁表面定植，這樣它們就會(huì)隨食糜一道排出體外，從而保護(hù)了動(dòng)物免遭這些致病菌的侵害；（3）增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體免疫力，寡糖作為免疫佐劑和抗原直接參與機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫調(diào)節(jié)，另外還通過(guò)抑制有害菌繁殖，調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道微生態(tài)系統(tǒng)處于平衡狀態(tài)來(lái)提高機(jī)體的免疫能力；（4）促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，寡糖的代謝物可提高酸性環(huán)境，有利于Ca、Zn、Se、Fe等礦物元素的吸收。寡肽：是指氨基酸之間由肽鍵連接的低聚化合物。（1）消除游離氨基酸的吸收競(jìng)爭(zhēng)，促進(jìn)氨基酸的吸收，小肽吸收機(jī)制本身具有不易飽和、轉(zhuǎn)運(yùn)速度快，能緩解腸壁細(xì)胞對(duì)不哦他那個(gè)FAA攝入的競(jìng)爭(zhēng)；（2）直接參與組織蛋白質(zhì)的合成，提高蛋白質(zhì)在體內(nèi)的沉積率；（3）促進(jìn)礦物元素的吸收利用；（4）提高生產(chǎn)性能，一些蛋白質(zhì)在消化酶的作用下降解產(chǎn)生具有特殊生理活性的小肽，能直接被動(dòng)物吸收利用，但與機(jī)體生理活動(dòng)和代謝調(diào)節(jié)，從而提高生產(chǎn)性能。仔豬消化生理特征：（1）胃腸重量輕；（2）酶系發(fā)育不完善，出生仔豬乳糖酶活性很高，碳水化合物分解酶的活性很低，因此，仔豬對(duì)非乳飼料的碳水化合物的利用率很差。蛋白分解酶中，凝乳酶在初生時(shí)活性較高，1－2周齡達(dá)到高峰，以后隨日齡增加而下降，其他蛋白酶活性很低。蛋白分解酶的這一狀況決定了早期斷奶仔豬對(duì)植物飼料蛋白不能很好消化，日糧蛋白質(zhì)只能以乳蛋白等動(dòng)物蛋白為主。至于脂肪分解酶，其活性在出生時(shí)就比較高，同時(shí)膽汁分泌也較旺盛。因此，仔豬對(duì)以乳化狀態(tài)存在的母乳中的脂肪消化率高，而對(duì)日糧中添加的長(zhǎng)鏈脂肪利用較差。（3）胃腸酸性低：出生仔豬胃酸分泌量低，且缺乏游離鹽酸。胃酸低，不但削弱了胃液的殺菌抑菌作用，而且限制了胃腸消化酶活性的活性和消化道的運(yùn)動(dòng)機(jī)能，繼而限制了對(duì)養(yǎng)分的消化吸收。（4）胃腸運(yùn)動(dòng)機(jī)能微弱，胃排空速度快：初生仔豬胃運(yùn)動(dòng)微弱無(wú)靜止期，隨日齡增加，胃運(yùn)動(dòng)逐漸呈運(yùn)動(dòng)和靜止的節(jié)律性變化，到2－3個(gè)月接近成年豬。影響采食量因素：影響采食量因素有動(dòng)物、飼糧、環(huán)境和飼喂技術(shù)等；（1）動(dòng)物因素包括：遺傳因素、生理階段、健康狀況、疲勞程度、感覺(jué)系統(tǒng)和學(xué)習(xí)；（2）飼糧因素：適口性、能量濃度、蛋白質(zhì)和氨基酸水平、脂肪、中型洗滌纖維、礦物元素和維生素；（3）環(huán)境因素：如擁擠、運(yùn)輸和環(huán)境溫度；（4）飼喂技術(shù)：飲水、飼料形態(tài)、飼喂方式和時(shí)間、飼喂的連續(xù)性。降低畜牧業(yè)對(duì)環(huán)境污染的營(yíng)養(yǎng)飼養(yǎng)措施：（1）按照理想蛋白模型配制低蛋白日糧（2）配制低磷日糧（3）適量添加粗纖維（4）合理使用添加劑：酶制劑、有機(jī)微量元素添加劑、益生素、絲蘭屬植物提取物、酸化鹽（5）消除飼料中抗?fàn)I養(yǎng)因子（6）分階段飼養(yǎng)降低熱應(yīng)激的措施：營(yíng)養(yǎng)對(duì)策主要是通過(guò)以下幾個(gè)方面實(shí)現(xiàn)（1）日糧蛋白質(zhì)水平與氨基酸的構(gòu)成（2）維生素A、E、C等（3）電解質(zhì)平衡和飲水（4）添加益生素如乳酸桿菌和有機(jī)微量元素如鉻、鋅等；飼養(yǎng)措施（1）限飼；（2）濕飼；（3）制粒；（4）早期日糧限飼；（5）早期熱應(yīng)激經(jīng)歷。益生素種類(lèi)和作用機(jī)理：定義：可直接飼喂動(dòng)物并通過(guò)調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道維生態(tài)平衡達(dá)到預(yù)防疾病、促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)和提高飼料利用率的活性微生物或其培養(yǎng)物種類(lèi)：乳酸桿菌類(lèi)（嗜酸乳酸桿菌、雙歧桿菌和糞鏈球菌）、芽孢桿菌類(lèi)（枯草桿菌、地衣芽孢桿菌、東洋桿菌）作用機(jī)理：（1）促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育，產(chǎn)生各種消化酶，提供動(dòng)物機(jī)體所需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，使動(dòng)物胃腸道形成微酸性環(huán)境；（2）維持消化道的有益菌數(shù)，通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)排斥（營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)、生物奪氧）和產(chǎn)生抑制有害菌生長(zhǎng)的物質(zhì)實(shí)現(xiàn)有益菌數(shù)增加；（3）調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)；（4）防腹瀉；（5）加強(qiáng)機(jī)體對(duì)乳糖耐受；（6）減少膽固醇；（7）凈化飼養(yǎng)環(huán)境。飼用酶制劑作用、機(jī)理：作用：補(bǔ)充內(nèi)源性消化酶的不足（強(qiáng)消化）；消除、降解日糧抗?fàn)I養(yǎng)因子和消化內(nèi)源酶不能消化的養(yǎng)分。機(jī)理：（1）降低消化道食糜粘度，減少疫病發(fā)生。構(gòu)成植物細(xì)胞壁的非淀粉多糖類(lèi)物質(zhì)，能夠結(jié)合大量的水，增加消化道食糜的粘度，使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)和內(nèi)源消化酶不能充分接觸，降低了蛋白質(zhì)、淀粉等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化利用率。飼料中添加酶制劑，可以破壞食糜周?chē)乃ぃ档褪趁拥酿こ矶?，增加食糜與酶及小腸的接觸面，提供畜禽生產(chǎn)性能。（2）破壞植物細(xì)胞壁，提高養(yǎng)分消化率，植物細(xì)胞中淀粉和蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被細(xì)胞壁包裹。細(xì)胞壁是由纖維素、半纖維素和果膠等組成的一種發(fā)咋聚合物，除草食動(dòng)物之外，其他動(dòng)物不能消化這類(lèi)物質(zhì)，這樣大大影響了植物飼料中淀粉、蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率。若在飼料中適當(dāng)?shù)靥砑幽芊纸夥N類(lèi)聚合物的酶，以破壞飼料中存在的植物細(xì)胞壁，使細(xì)胞中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)釋放出來(lái)，可提高飼料中能量和蛋白質(zhì)的利用率。（3）消除抗?fàn)I養(yǎng)因子。飼料中抗?fàn)I養(yǎng)因子廣泛存在于各種飼料原料中，他們直接或間接地影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收和代謝作用，而酶制劑可部分或全部消除這些抗?fàn)I養(yǎng)因子的不良影響。（4）補(bǔ)充內(nèi)源酶的不足，激活內(nèi)源酶的分泌。幼年動(dòng)物或處于病態(tài)等應(yīng)激狀態(tài)的動(dòng)物分泌酶的能力較弱，飼料中適當(dāng)?shù)靥砑拥鞍酌浮⒌矸勖负椭久?，可補(bǔ)充內(nèi)源酶的不足，提高飼料利用率，此外還可促進(jìn)內(nèi)源酶的分泌。健康養(yǎng)殖替代抗生素的添加劑有哪些？如何發(fā)揮作用？（主要有微生態(tài)制劑、酶制劑和中草藥，微生態(tài)制劑及酶制劑作用機(jī)理詳見(jiàn)上文）中草藥：（1）對(duì)機(jī)體物質(zhì)代謝，中草藥可以提高機(jī)體干物質(zhì)的代謝率，并能提高血液中蛋白質(zhì)、微量元素等物質(zhì)濃度；（2）抗病原體作用，對(duì)一些中草藥及其方劑進(jìn)行的體外試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，有許多中草藥及其方劑對(duì)細(xì)菌、病菌有強(qiáng)大的抑制作用；（3）調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，中草藥的活性成分包括苷類(lèi)、生物堿、多糖、有機(jī)酸等，它們能活化機(jī)體的免疫系統(tǒng)，從而提高機(jī)體的抗感染能力；（4）中草藥的營(yíng)養(yǎng)作用，中草藥含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，可以直接被機(jī)體吸收利用；（5）激素樣作用，中草藥本身不是激素，但可以起到與激素相似的作用，并能減輕或防止、消除外激素的毒副作用，所以被認(rèn)為是勝似激素的激素樣作用；（6）抗應(yīng)激作用，許多中草藥如黃芪、黨參、刺五加等具有抗應(yīng)激作用，并能減少應(yīng)激反應(yīng)對(duì)機(jī)體造成的損害。NSP影響消化吸收機(jī)理及NSP酶作用機(jī)理及其影響因素：（1）NSP溶于水后，顯著增加食糜黏性，改變食糜的物理特性和腸道生理活性（2）高親水