仿制藥質(zhì)量研究與標(biāo)準(zhǔn)建立

江蘇弘惠醫(yī)藥有限公司研發(fā)中心周自桂仿制藥質(zhì)量研究與標(biāo)準(zhǔn)的建立仿制藥質(zhì)量研究與標(biāo)準(zhǔn)建立一、藥品質(zhì)量與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的含義二、原料藥及制劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立三、原料藥及制劑產(chǎn)品分析方法的研發(fā)四、原料藥及制劑產(chǎn)品分析方法的驗證五、標(biāo)準(zhǔn)品、工作對照品及雜質(zhì)對照品的要求一、藥品質(zhì)量與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1、藥品質(zhì)量（drugquality）：藥品能滿足規(guī)定要求和需要的特征總和。藥品的質(zhì)量特征：（1）有效性(efficacy)：在規(guī)定的適應(yīng)癥、用法和用量的條件下，能滿足預(yù)防、治療、診斷人的疾病，有目的地調(diào)節(jié)人的生理機能的要求。（2）安全性（safety）：按規(guī)定的適應(yīng)癥和用法、用量使用藥品后，人體產(chǎn)生毒副反應(yīng)的程度。（3）穩(wěn)定性(stability)：在規(guī)定的條件下保持其有效性和安全性的能力。（4）均一性(uniformity)：藥品的每一單位產(chǎn)品都符合有效性、安全性的規(guī)定要求。（5）經(jīng)濟(jì)性(economicproperty)：藥品生產(chǎn)、流通過程形成的價格水平一、藥品質(zhì)量與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

2、藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為保證藥品質(zhì)量而對各種檢查項目、指標(biāo)、限度、范圍等所做的規(guī)定。藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是藥品的純度、成分含量、組分、生物有效性、療效、毒副作用、熱原度、無菌度、物理化學(xué)性質(zhì)以及雜質(zhì)的綜合表現(xiàn)。藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分為法定標(biāo)準(zhǔn)和企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)兩種。法定標(biāo)準(zhǔn)又分為國家藥典、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和地方標(biāo)準(zhǔn)。藥品生產(chǎn)一律以藥典為準(zhǔn)，未收入藥典的藥品以行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)為準(zhǔn)，未收入行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的以地方標(biāo)準(zhǔn)為準(zhǔn)。無法定標(biāo)準(zhǔn)和達(dá)不到法定標(biāo)準(zhǔn)的藥品不準(zhǔn)生產(chǎn)、銷售和使用。一、藥品質(zhì)量與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

3、質(zhì)量研究的目的：通過對藥物理化性質(zhì)的科學(xué)分析和研究，確定藥物的定量和定性分析方法，建立科學(xué)完善的質(zhì)量控制體系，保證藥物的質(zhì)量，確保人民用藥安全。

一、藥品質(zhì)量與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

4、質(zhì)量研究的意義：對我國的醫(yī)藥科學(xué)技術(shù)、生產(chǎn)管理、經(jīng)濟(jì)效益和社會效益產(chǎn)生良好的影響與促進(jìn)作用。有利于促進(jìn)藥品國際技術(shù)交流和推動進(jìn)出口貿(mào)易的發(fā)展與新藥的研制密切相關(guān)。二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立原料藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

（1）品名（中文名、英文名和漢語拼音）（2）有機物的結(jié)構(gòu)式（3）分子式與分子量（4）來源或有機藥物的化學(xué)名稱（5）含量或效價規(guī)定（6）處方（7）制法（8）性狀（9）鑒別（10）檢查

（11）含量或效價測定（12）類別（13）規(guī)格（14）貯藏（15）制劑原料藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)原料藥的質(zhì)量研究應(yīng)在確證化學(xué)結(jié)構(gòu)或組份的基礎(chǔ)上進(jìn)行。原料藥的一般研究項目包括性狀、鑒別、檢查和含量測定等幾個方面。原料藥用于穩(wěn)定性研究的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)考察項目應(yīng)選擇在原料藥保存期間易于發(fā)生變化，并可能會影響到藥品的質(zhì)量、安全性與有效性的測試項目，以便客觀、全面、靈敏地反映藥品質(zhì)量。性狀水分/干燥失重含量測定*有關(guān)物質(zhì)*晶型（如不是穩(wěn)定的晶型）*使用具有穩(wěn)定性指示能力的方法Eg:原料藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

項目標(biāo)準(zhǔn)限度分析方法結(jié)果性狀目視鑒別AIRBHPLC-RTC特定離子Chp二部附錄IVCMet-R003AChp二部附錄III重金屬Chp二部附錄VIIIH第二法干燥失重Chp二部附錄VIIL灼熾殘渣Chp二部附錄VIIN殘留溶劑Met-R003R有關(guān)物質(zhì)已知雜質(zhì)未知雜質(zhì)總雜Met-R003I含量測定（Assay)Met-R003A粒徑分布Met-R003P晶型Met-R003JEg:原料藥穩(wěn)定性質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

項目標(biāo)準(zhǔn)限度分析方法是否測定性狀目視Yes鑒別AIRBHPLC-RTC特定離子Chp二部附錄IVCMet-R003AChp二部附錄IIINo重金屬Chp二部附錄VIIIH第二法No干燥失重Chp二部附錄VIILYes灼熾殘渣Chp二部附錄VIINNo殘留溶劑Met-R003RNo有關(guān)物質(zhì)已知雜質(zhì)未知雜質(zhì)總雜Met-R003IYes含量測定（Assay)Met-R003AYes粒徑分布Met-R003PNo晶型Met-R003JYes/No原料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

粒徑分布：水溶性差的原料，并對下列因素有顯著影響，需訂入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的。制劑工藝及含量均勻度溶出速率生物利用度藥物穩(wěn)定性及外觀

原料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

粒徑分布：符合下列條件之一，無需訂入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)在生產(chǎn)過程中原料藥需溶解制劑為溶液劑型對藥物可生產(chǎn)性、含量均勻度、溶出度以及穩(wěn)定性不起關(guān)鍵作用

原料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

多晶形藥物：

研究查明是否存在不同晶形？如存在，有多少種晶形？結(jié)晶形式無定型形式溶劑化物或水合物形式

你需要哪種晶型的原料藥？

原料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

多晶型藥物：水溶性差的原料，并對下列藥物的質(zhì)量及行為有顯著影響，需訂入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與穩(wěn)定性質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。制劑工藝溶解度及溶出速率生物利用度/生物等效性藥物穩(wěn)定性

二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立制劑產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

（1）品名（中文名、英文名和漢語拼音）（2）來源及含量規(guī)定（3）處方（4）制法（5）性狀（6）鑒別（7）檢查

（8）含量或效價測定（9）類別（10）規(guī)格（14）貯藏制劑產(chǎn)品用于穩(wěn)定性研究的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)考察項目應(yīng)選擇在藥品保存期間易于發(fā)生變化，并可能會影響到藥品的質(zhì)量、安全性與有效性的測試項目，以便客觀、全面、靈敏地反映藥品的穩(wěn)定性。性狀水分/干燥失重含量測定*有關(guān)物質(zhì)*溶出度/釋放度*使用具有穩(wěn)定性指示能力的方法制劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

Eg:制劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

項目標(biāo)準(zhǔn)限度分析方法結(jié)果外觀目視鑒別AIRBHPLC-RTChp二部附錄IVCMet-T002A溶出度Met-T002D含量均勻度Met-T002C水分Chp二部附錄VIIN有關(guān)物質(zhì)已知雜質(zhì)未知雜質(zhì)總雜Met-T002I含量測定（Assay)Met-T002AMet-T002A殘留溶劑用到時訂入，不訂說明理由包裝和貯存Eg:制劑產(chǎn)品穩(wěn)定性質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

項目標(biāo)準(zhǔn)限度分析方法是否測定性狀目視Yes鑒別AIRBHPLC-RTChp二部附錄IVCMet-T002ANo溶出度Met-T002DYes含量均勻度Met-T002CNo水分Chp二部附錄VIINYes有關(guān)物質(zhì)已知雜質(zhì)未知雜質(zhì)總雜Met-T002IYes含量測定（Assay)Met-T002AMet-T002AYes殘留溶劑包裝和貯存二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立對于手性藥物

鑒別：區(qū)分另一光學(xué)異構(gòu)體手性含量測定方法手性雜質(zhì)檢測方法含量測定：手性含量測定方法或用非手性含量測定方法結(jié)合手性雜質(zhì)檢測方法手性雜質(zhì)：定量檢測原料藥中手性雜質(zhì)的含量如手性雜質(zhì)也是降解產(chǎn)物，定量檢測在制劑中的含量二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立溶出度或釋放度

對于速釋藥物如有藥典法定標(biāo)準(zhǔn)：方法與限度同標(biāo)準(zhǔn)，并與原研對照藥做溶出對比曲線沒有藥典法定方法，但有公開發(fā)表的原研藥溶出度方法，可按發(fā)表的限度與方法，并與原研藥做溶出對比曲線沒有藥典方法，也沒有公開發(fā)表，按下列條件與原研藥進(jìn)行溶出對比曲線不同的溶出介質(zhì)（pH1~6.8)，對難溶性藥物添加表面活性劑用轉(zhuǎn)籃法與漿法用不同的轉(zhuǎn)速基于已有的生物等效性和其他數(shù)據(jù)來設(shè)置溶出度質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立溶出度或釋放度

對于緩控釋制劑對于緩釋制劑，設(shè)置多點溶出限度對于延遲釋放制劑，設(shè)置多點溶出限度二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立可接受標(biāo)準(zhǔn)

含量原料藥：EP：99.0~101.0%；USP：98.0~102.0%自擬：99.0~101.0%制劑成品：90.0~110.0%95.0~105.0%93.0~107.0%二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立可接受標(biāo)準(zhǔn)

殘留溶劑原料藥：合成路線中各步反應(yīng)及純化用到的溶劑；揮發(fā)性起始原料及試劑最后一步原料藥重結(jié)晶用到的溶劑制劑成品：生產(chǎn)過程中用到的溶劑基于原料藥/輔料報告進(jìn)行計算，產(chǎn)品應(yīng)符合殘留溶劑限度標(biāo)準(zhǔn)二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立可接受標(biāo)準(zhǔn)

第一類溶劑：禁用第二類溶劑：應(yīng)限量，其限度見藥典附錄VIIIP第63頁第三類溶劑：對人類潛在毒性較低，如僅有第三類溶劑，可用干燥失重法測定不得過0.5%。設(shè)置第二類的限度有兩種選擇：法一：按藥典附錄63頁表格中的限度；法二：藥物所含的每個成分的殘留溶劑相加，其每天的攝入總量應(yīng)小于可允許的日攝入量（PDE）二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立可接受標(biāo)準(zhǔn)例：法一或法二乙腈：PDE=4.1mg/天法一限度：410ppm,不合格；法二：3.64mg/天<4.1mg/天，合格組分用量乙腈含量日攝入量主藥0.3g800ppm0.24mg輔料10.9400ppm0.36mg輔料23.8800ppm3.04mg成品5.0728ppm3.64mg二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立可接受標(biāo)準(zhǔn)

原料藥的有關(guān)物質(zhì)從原料藥合成產(chǎn)生的：未反應(yīng)完全的起始原料、試劑及混入的雜質(zhì)反應(yīng)中間體、副產(chǎn)物立體異構(gòu)體、手性對映體（原料藥為單一光學(xué)活性）降解產(chǎn)物：原料藥生產(chǎn)過程中降解產(chǎn)生強力降解試驗：高溫、光照、氧化、酸/堿水解原料藥貯存過程中（穩(wěn)定性考察期間）產(chǎn)生二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立可接受標(biāo)準(zhǔn)

原料藥的有關(guān)物質(zhì)對于仿制藥：可與原研藥進(jìn)行雜質(zhì)譜對比對藥典或文獻(xiàn)所列的雜質(zhì)進(jìn)行評估供應(yīng)商提供的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)ICHQ3A（R）及化學(xué)藥物雜質(zhì)指導(dǎo)原則二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立可接受標(biāo)準(zhǔn)

制劑的有關(guān)物質(zhì)/降解產(chǎn)物降解產(chǎn)物由原料藥生產(chǎn)及貯存過程中產(chǎn)生降解產(chǎn)物由制劑生產(chǎn)過程中產(chǎn)生強力降解試驗：高溫、高濕、光照、氧化、酸/堿水解制劑貯存過程中（穩(wěn)定性考察期間）產(chǎn)生*不包括原料藥合成的工藝雜質(zhì)（如果不是降解產(chǎn)物）二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立可接受標(biāo)準(zhǔn)

制劑的有關(guān)物質(zhì)/降解產(chǎn)物對于仿制藥：可與原研藥進(jìn)行雜質(zhì)譜對比對藥典或文獻(xiàn)所列的雜質(zhì)進(jìn)行評估ICHQ3B（R）及化學(xué)藥物雜質(zhì)指導(dǎo)原則二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立可接受標(biāo)準(zhǔn)

原料藥最大日劑量報告限度鑒定限度質(zhì)控限度≤2g0.05%0.10%或1mg（取最小值）0.15%或1.0mg（取最小值)＞2g0.03%0.05%0.05%二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立可接受標(biāo)準(zhǔn)

例：*注：報告時，<1.0保留2位小數(shù)；>1.0保留1位小數(shù)日劑量限度實測值（%）報告值（%）日服雜質(zhì)量(mg)鑒別限是否超質(zhì)控限是否超0.5g鑒別限=?0.09630.100.5質(zhì)控限=?0.044—0.20.120.120.60.16490.160.81.2g鑒別限=?0.044—0.5質(zhì)控限=?0.08860.091.10.1140.111.3二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立可接受標(biāo)準(zhǔn)

例：*注：報告時，<1.0保留2位小數(shù)；>1.0保留1位小數(shù)日劑量限度實測值（%）報告值（%）日服雜質(zhì)量(mg)鑒別限是否超質(zhì)控限是否超0.5g鑒別限=0.1%0.09630.100.5——質(zhì)控限=0.15%0.044—0.2——0.120.120.6+—0.16490.160.8++1.2g鑒別限=1.0mg0.044—0.5——質(zhì)控限=1.0mg0.08860.091.1++0.1140.111.3++制定藥典收載原料藥的雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)名稱ICHQ3A（%）藥典限度%制定限度%依據(jù)雜質(zhì)A？NMT0.15？雜質(zhì)B？—？雜質(zhì)C？NMT0.15？雜質(zhì)D？NMT0.15？雜質(zhì)E？—？雜質(zhì)G？NMT0.15？雜質(zhì)H？NMT0.15？最大單雜？0.1？總雜—NMT0.75？最大日劑量：80mg/天，鑒別限=0.10%,質(zhì)控限=0.15%制定藥典收載原料藥的雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)名稱ICHQ3A(%)藥典限度%制定限度%依據(jù)雜質(zhì)A0.15NMT0.15≤0.15USP/ICHQ3A雜質(zhì)B0.15—≤0.15ICHQ3A雜質(zhì)C0.15NMT0.15≤0.15USP/ICHQ3A雜質(zhì)D0.15NMT0.15≤0.15

USP/ICHQ3A雜質(zhì)E0.15—≤0.15ICHQ3A雜質(zhì)G0.15NMT0.15≤0.15USP/ICHQ3A雜質(zhì)H0.15NMT0.15≤0.15USP/ICHQ3A最大單雜0.100.10.10ICHQ3A總雜—NMT0.75≤0.75

USP/最大日劑量：80mg/天，鑒別限=0.10%,質(zhì)控限=0.15%二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立可接受標(biāo)準(zhǔn)

制劑二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立可接受標(biāo)準(zhǔn)

例：日劑量限度實測值（%）報告值（%）日服雜質(zhì)量(mg)鑒別限是否超質(zhì)控限是否超1.9g報告限=?0.044—0.84=1鑒別限=?0.0790.081.52=2質(zhì)控限=?0.1830.183.42=30.1920.193.61=4二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立可接受標(biāo)準(zhǔn)

例：鑒別限=2mg(1.9*0.2%=3.8mg>2mg)；<0.1%質(zhì)控限=3mg(1.9*0.2%=3.8mg>3mg)；<0.15%日劑量限度實測值（%）報告值（%）日服雜質(zhì)量(mg)鑒別限是否超質(zhì)控限是否超1.9g報告限=0.05%0.044—0.84=1——鑒別限=2mg0.0790.081.52=2——質(zhì)控限=3mg0.1830.183.42=3+—0.1920.193.61=4++制定藥典收載制劑的雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)名稱ICHQ3B（%）藥典限度%制定限度%依據(jù)雜質(zhì)A？NMT0.2雜質(zhì)B？NMT0.25雜質(zhì)C？NMT0.25雜質(zhì)E？NMT0.1最大單雜？NMT0.2總雜—NMT0.8最大日劑量：80mg/天，報告限=？鑒別限=？質(zhì)控限=？制定藥典收載制劑的雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)名稱ICHQ3B（%）藥典限度%制定限度%依據(jù)雜質(zhì)A0.25NMT0.2≤0.2USP雜質(zhì)B0.25NMT0.25≤0.25USP/ICHQ3B雜質(zhì)C0.25NMT0.25≤0.25USP/ICHQ3B雜質(zhì)E0.25NMT0.1≤0.1USP最大單雜0.2NMT0.2≤0.2USP/ICHQ3B總雜—NMT0.8≤0.8USP最大日劑量：80mg/天，報告限=0.1%;鑒別限=0.2%;質(zhì)控限=0.25%二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立可接受標(biāo)準(zhǔn)

原料藥的殘留溶劑名稱類別ICH限度測定結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)限度四氫呋喃二類720ppm350ppm720ppm甲苯二類890ppm<LOQLOQ=50ppm500ppmDMF二類880ppm480ppm880ppm乙醚二類5000ppm590ppm3000ppm三、原料藥及制劑分析方法的研發(fā)原料藥的分析方法含量測定有關(guān)物質(zhì)殘留溶劑粒徑分布多晶體無機離子等三、原料藥及制劑分析方法的研發(fā)制劑產(chǎn)品分析方法含量測定含量均勻度有關(guān)物質(zhì)/降解產(chǎn)物溶出度/釋放度三、原料藥及制劑分析方法的研發(fā)含量測定、雜質(zhì)及殘留溶劑分析方法使用藥典專論方法原料藥廠家提供的試驗方法文獻(xiàn)報導(dǎo)的方法內(nèi)部研制的方法三、原料藥及制劑分析方法的研發(fā)分析方法的基本要求原理及應(yīng)用范圍儀器設(shè)備試劑，化學(xué)品及對照品溶液制備詳細(xì)操作程序，包括儀器參數(shù)的設(shè)置（流速、溫度、運行時間、波長等系統(tǒng)適用性試驗及接受標(biāo)準(zhǔn)（拖尾因子、理論板數(shù)、分離度、RSD及RRT等）進(jìn)樣序列（空白—系統(tǒng)適用性溶液—對照—樣品）計算公式結(jié)果報告附典型圖譜三、原料藥及制劑分析方法的研發(fā)高效液相色譜含量測定及雜質(zhì)分析方法儀器設(shè)備色譜柱的選擇：C18、C8、Phenly、CN、Chiral等洗脫模式：等度、梯度流動相組成及比例：乙腈/甲醇：水/緩沖液是否用緩沖液或離子對試劑：極性太大，5%甲醇-水也很快出峰，且具有酸、堿性的化合物可考慮使用，同時視出峰情況選擇不同的C鏈緩沖劑、緩沖液pH、緩沖能力及離子強度的選擇：酸性化合物的pKa值：pH<pKa，分子形式存在，tR大

pH>pKa，離子形式存在，tR小pH=pKa，分子離子共存，出2個峰或裂峰緩沖能力：磷酸鹽pH<3時最強，濃度盡可能?。?.05M/0.01M)三、原料藥及制劑分析方法的研發(fā)高效液相色譜含量測定及雜質(zhì)分析方法檢測器及檢測波長的選擇：含量：輔料無干擾，選λmax有關(guān)物質(zhì)：PDA檢測器，記錄所有雜質(zhì)UV圖，再確定檢測波長流速、進(jìn)樣體積、柱溫（一般高于環(huán)境溫度5℃）樣品溶劑的選擇：不得破壞樣品樣品溶液的制備：三、原料藥及制劑分析方法的研發(fā)HPLC含量測定方法適用于常規(guī)放行及穩(wěn)定性研究

原料藥應(yīng)完全溶解或被溶劑完全萃?。涸纤幏鍛?yīng)與雜質(zhì)（包括降解產(chǎn)物）峰完全分離原料藥峰應(yīng)是純峰原料藥峰的響應(yīng)值應(yīng)在檢測器線性范圍內(nèi)盡可能選擇原料藥的λmax為檢測波長原料藥峰保留時間通?？刂圃?0min內(nèi)低成本、易操作、使用便捷*進(jìn)行強力破壞試驗來表明含量測定方法可用于穩(wěn)定性考察樣品的測試三、原料藥及制劑分析方法的研發(fā)HPLC雜質(zhì)分析方法適用于常規(guī)放行及穩(wěn)定性研究

原料藥及所含雜質(zhì)應(yīng)完全溶解或被溶劑完全萃取原料藥峰保留時間通常控制在10min左右所有雜質(zhì)（包括降解產(chǎn)物）應(yīng)完全從色譜柱中洗脫任何雜質(zhì)峰應(yīng)與溶劑峰分離所有雜質(zhì)峰之間應(yīng)有一定的分離度并與原料藥主峰完全分離（無任何雜質(zhì)/降解產(chǎn)物的峰與主峰重疊）所選波長應(yīng)能檢測所有已知雜質(zhì)和未知雜質(zhì)包括降解產(chǎn)物應(yīng)有足夠的靈敏度能對≤報告限的所有雜質(zhì)檢測并定量低成本、易操作、使用便捷*進(jìn)行強力破壞試驗來表明含量測定方法可用于穩(wěn)定性考察樣品的測試四、原料藥及制劑分析方法的驗證方法驗證：是論證分析方法適用于擬定用途的過程

《化學(xué)藥物質(zhì)量控制分析方法驗證的技術(shù)指導(dǎo)原則》藥典二部附錄XIXA藥品質(zhì)量分析方法驗證指導(dǎo)原則》四、原料藥及制劑分析方法的驗證方法驗證：是論證分析方法適用于擬定用途的過程，包括：已有藥典專論方法的，可進(jìn)行方法確認(rèn)，主要包括系統(tǒng)適用性、方法重現(xiàn)性、溶液穩(wěn)定性及專屬性方法全驗證藥典論壇方法或其它藥典專論方法原料供應(yīng)商提供的方法內(nèi)部研制的分析方法四、原料藥及制劑分析方法的驗證HPLC含量測定方法全驗證系統(tǒng)適用性/精密度專屬性線性方法準(zhǔn)確性方法精密度中間精密度耐用性范圍四、原料藥及制劑分析方法的驗證HPLC含量測定方法全驗證系統(tǒng)適用性/精密度系統(tǒng)適用性溶液1針，評價：拖尾因子T、理論板數(shù)N、分離度R對照品溶液（5針），評價RSD：一般原料≤1.0%，制劑≤2.0%四、原料藥及制劑分析方法的驗證HPLC含量測定方法全驗證專屬性空白溶劑、輔料溶液原料藥/制劑中摻入雜質(zhì)強力降解試驗溶液：熱、酸及堿水解、氧化、光照固態(tài)：高溫、光照、高濕評價（1）主峰不受溶劑、輔料及任何雜質(zhì)的干擾；（2）主峰純度合格四、原料藥及制劑分析方法的驗證HPLC含量測定方法全驗證線性對照品溶液（5~6個濃度）：一般主成分含量測定：以測定濃度為100%，50%~150%之間選取5個點即可。溶出（釋放）度測定：以釋放量的10%～120%間選取5個點即可線性回歸方程接受標(biāo)準(zhǔn)：（1）相關(guān)系數(shù)：R2不得低于0.998（2）報告Y軸截距與斜率（3）附線性方程與線性圖四、原料藥及制劑分析方法的驗證HPLC含量測定方法全驗證方法準(zhǔn)確性輔料混合物與對照品混合：三個水平（50%、100%、150%）9個樣品接受標(biāo)準(zhǔn)：（1）回收率：98.0~102.0%（2）RSD：四、原料藥及制劑分析方法的驗證HPLC含量測定方法全驗證方法精密度100%水平6個樣品：接受標(biāo)準(zhǔn)：（1）RSD：原料≤1.0%；制劑≤2.0%儀器精密度同一溶液連續(xù)進(jìn)樣6次：接受標(biāo)準(zhǔn)：（1）RSD：≤2.0%四、原料藥及制劑分析方法的驗證HPLC含量測定方法全驗證中間精密度由第二個分析人員在不同天，用不同的儀器及不同批號的柱子重復(fù)方法精密度試驗：接受標(biāo)準(zhǔn)：（1）RSD：原料≤1.0%；制劑≤2.0%（2）兩人結(jié)果偏差：原料≤1.0%；制劑≤2.0%四、原料藥及制劑分析方法的驗證HPLC含量測定方法全驗證耐用性HPLC系統(tǒng)參數(shù)的變化：流動相比例：±10%緩沖鹽pH：±0.2流速：±0.2ml/min柱溫:±5℃樣品制備參數(shù)的變化：振搖/超聲時間：±5min萃取溶劑的比例：±10%樣品過濾的影響：1、2、3、4、5ml對照品及樣品溶液的穩(wěn)定性:0、12、24、48h四、原料藥及制劑分析方法的驗證HPLC含量測定方法全驗證范圍指測試方法適用的高低限濃度區(qū)間，并能達(dá)到一定的精密度、準(zhǔn)確度和線性根據(jù)線性、準(zhǔn)確度、精密度的驗證結(jié)果確定：一般要求：（1）含量測定：80~120%（2）含量均勻度：70~130%（3）溶出度：限度的±20%四、原料藥及制劑分析方法的驗證HPLC雜質(zhì)分析方法驗證系統(tǒng)適用性/精密度專屬性線性檢測限（LOD）定量限（LOQ）方法準(zhǔn)確性方法精密度中間精密度耐用性范圍四、原料藥及制劑分析方法的驗證HPLC雜質(zhì)分析方法驗證系統(tǒng)適用性/精密度系統(tǒng)適用性溶液1針：在100％濃度的主成分溶液中加入1%濃度的雜質(zhì)對照品，以模擬樣品中有可能存在的狀態(tài)評價：拖尾因子T≤1.5、理論板數(shù)N≥2000、分離度R≥1.5對照品混合溶液（6針），評價RSD：每個成分均≤

5.0%質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的系統(tǒng)適用性試驗如何擬定柱效2500即可，沒必要更高，否則作繭自縛。采用雜質(zhì)對照品驗證分離度，如該雜質(zhì)僅用于定位、則無需純度很高；該雜質(zhì)的選擇一者可為目標(biāo)降解物，分離度要求根據(jù)研究時的具體情況擬定；二者選用與主成分峰最難分離雜質(zhì)。采用強破壞試驗驗證，通過對比破壞前產(chǎn)生的雜質(zhì)峰與主成分峰的分離情況。如：國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS1-(X-350)-2004Z——注射用奧美拉唑鈉的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定：取供試品溶液，加3%過氧化氫溶液3ml，放置10分鐘后，再加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為系統(tǒng)適用性驗證用溶液。色譜圖中與主成分峰相鄰的氧化降解產(chǎn)物峰與主成分峰的分離度應(yīng)符合規(guī)定 典型圖譜分析四、原料藥及制劑分析方法的驗證HPLC雜質(zhì)分析方法驗證專屬性空白溶劑、輔料、每個雜質(zhì)原料藥/制劑中摻入雜質(zhì)強力降解試驗溶液：熱、酸及堿水解、氧化、光照固態(tài)：高溫、光照、高濕評價（1）所有雜質(zhì)能被檢測并能互相分離，而且也能與溶劑、輔料以及主峰分離；（2）主峰純度合格（3）質(zhì)量平衡評估（將破壞溶液進(jìn)一步稀釋測定含量，平衡=有關(guān)物質(zhì)+含量，≥95%）（4）穩(wěn)定性、降解途徑及色譜圖四、原料藥及制劑分析方法的驗證HPLC雜質(zhì)分析方法驗證線性對照品混合溶液（5~6個濃度）：一般LOQ~150%）每個成分的線性回歸方程每個成分接受標(biāo)準(zhǔn)：（1）相關(guān)系數(shù)：R2不得低于0.99（2）報告Y軸截距與斜率（3）附線性方程與線性圖四、原料藥及制劑分析方法的驗證HPLC雜質(zhì)分析方法驗證檢測限（LOD）：試樣中被測物能可靠的被檢測出的最低濃度在低濃度被測物的色譜圖上比較其響應(yīng)信號與儀器噪音接受標(biāo)準(zhǔn)：（1）信噪比：3：1或2：1注：信噪比的三倍——純屬“紙上談兵”，實際測定中根本用不上。是相對值，不是絕對值。是相對于供試品溶液濃度的多少分之一而言，一般至少要在5000倍以上(1)最大進(jìn)樣量

(2)有關(guān)物質(zhì)測定供試品溶液濃度、

(3)含量測定濃度

(4)有關(guān)物質(zhì)測定自身稀釋對照溶液濃度

(5)最低檢出限五者間的比例關(guān)系濃

度進(jìn)樣量絕對量相當(dāng)于供試品溶液濃度的倍數(shù)關(guān)系最大進(jìn)樣量0.3mg/ml10μl有關(guān)物質(zhì)供試品溶液濃度0.1mg/ml10μl1μg100%10000倍含量測定濃度10μg/ml10μl10%1000倍有關(guān)物質(zhì)自身稀釋對照溶液濃度1.0μg/ml10μl10ng1.0%100倍最低檢出限10ng/ml10μl0.1ng0.01%“基準(zhǔn)點”四、原料藥及制劑分析方法的驗證HPLC雜質(zhì)分析方法驗證定量限（LOQ）：試樣中被測物被定量測定的最低濃度，其結(jié)果應(yīng)具有一定的準(zhǔn)確度在低濃度被測物的色譜圖上比較其響應(yīng)信號與儀器噪音線性試驗的最低濃度，對照品混合液6針接受標(biāo)準(zhǔn)：（1）信噪比：10：1（2）每個成分的RSD≤10%四、原料藥及制劑發(fā)析方法的驗證HPLC雜質(zhì)分析方法驗證方法準(zhǔn)確性原料藥/制劑中摻入雜質(zhì)對照品：三個水平（LOQ、100%、150%）9個樣品接受標(biāo)準(zhǔn)：（1）每個雜質(zhì)回收率：80~120%（2）RSD：四、原料藥及制劑發(fā)析方法的驗證HPLC雜質(zhì)分析方法驗證方法精密度按照方法測試6個樣品（原料/制劑）或原料/制劑中摻入雜質(zhì)對照品（6×100%）接受標(biāo)準(zhǔn)：（1）總雜質(zhì)的RSD：≤10%（2）或每個雜質(zhì)回收率的RSD：≤10%四、原料藥及制劑發(fā)析方法的驗證HPLC雜質(zhì)分析方法驗證中間精密度由第二個分析人員在不同天，用不同的儀器及不同批號的柱子重復(fù)方法精密度試驗：接受標(biāo)準(zhǔn)：（1）總雜的RSD：≤10%（2）或每個雜質(zhì)回收率的RSD：≤10%（3）兩人結(jié)果偏差及類似的雜質(zhì)譜：≤15%四、原料藥及制劑分析方法的驗證HPLC雜質(zhì)分析方法驗證耐用性HPLC系統(tǒng)參數(shù)的變化：流動相比例：±10%緩沖鹽pH：±0.2流速：±0.2ml/min柱溫:±5℃接受標(biāo)準(zhǔn)：符合系統(tǒng)適用性限度樣品制備參數(shù)的變化：振搖/超聲時間：±5min萃取溶劑的比例：±10%樣品過濾的影響：1、2、3、4、5ml對照品及樣品溶液的穩(wěn)定性:0、12、24、48h接受標(biāo)準(zhǔn)：樣品溶液總雜偏差：≤15%對照品溶液每個雜質(zhì)偏差：≤10%類似的雜質(zhì)譜四、原料藥及制劑分析方法的驗證HPLC雜質(zhì)分析方法驗證范圍指測試方法適用的高低限濃度區(qū)間，并能達(dá)到一定的精密度、準(zhǔn)確度和線性根據(jù)線性、準(zhǔn)確度、精密度的驗證結(jié)果確定：一般要求：LOQ~150%四、原料藥及制劑分析方法的驗證GC殘留溶劑方法驗證系統(tǒng)適用性/精密度專屬性線性檢測限（LOD）定量限（LOQ）方法準(zhǔn)確性方法精密度中間精密度耐用性范圍四、原料藥及制劑分析方法的驗證GC殘留溶劑方法驗證系統(tǒng)適用性/精密度系統(tǒng)適用性溶液1針，評價：拖尾因子T≤1.5、理論板數(shù)N≥2000、分離度R≥1.5對照品混合溶液（6針），評價RSD：每個溶劑均≤

5.0%四、原料藥及制劑分析方法的驗證GC殘留溶劑方法驗證專屬性空白溶劑每個殘留溶劑定位殘留溶劑對照品混合溶液原料/制劑溶液原料/制劑中摻入殘留溶劑評價（1）所有殘留溶劑能被檢測到并能很好的互相分離；（2）也能與溶劑及其雜質(zhì)很好分離（3）每個色譜圖四、原料藥及制劑分析方法的驗證GC殘留溶劑方法驗證線性對照品混合溶液（5~6個濃度）：一般LOQ~150%）每個溶劑的線性回歸方程每個溶劑接受標(biāo)準(zhǔn)：（1）相關(guān)系數(shù)：R2不得低于0.99（2）報告Y軸截距與斜率（3）附線性方程與線性圖四、原料藥及制劑分析方法的驗證GC殘留溶劑方法驗證檢測限（LOD）：試樣中被測物能可靠的被檢測出的最低濃度在低濃度被測物的色譜圖上比較其響應(yīng)信號與儀器噪音接受標(biāo)準(zhǔn)：（1）信噪比：3：1或2：1四、原料藥及制劑分析方法的驗證GC殘留溶劑方法驗證定量限（LOQ）：試樣中被測物被定量測定的最低濃度，其結(jié)果應(yīng)具有一定的準(zhǔn)確度在低濃度被測物的色譜圖上比較其響應(yīng)信號與儀器噪音線性試驗的最低濃度，對照品混合液6針接受標(biāo)準(zhǔn)：（1）信噪比：10：1（2）每個溶劑的RSD≤10%四、原料藥及制劑分析方法的驗證GC殘留溶劑方法驗證方法準(zhǔn)確性原料藥/制劑中摻入殘留溶劑：三個水平（LOQ、100%、150%）9個樣品接受標(biāo)準(zhǔn)：（1）每個溶劑回收率：80~120%（2）RSD：四、原料藥及制劑分析方法的驗證GC殘留溶劑方法驗證方法精密度原料/制劑中摻入殘留溶劑對照品（6×100%）原料/制劑樣品作為空白接受標(biāo)準(zhǔn)：（1）每個溶劑回收率的RSD：≤10%四、原料藥及制劑分析方法的驗證GC殘留溶劑方法驗證中間精密度由第二個分析人員在不同天，用不同的儀器及不同批號的柱子重復(fù)方法精密度試驗：接受標(biāo)準(zhǔn)：（1）每個溶劑回收率的RSD：≤10%（3）兩人結(jié)果偏差及類似的溶劑譜：≤15%四、原料藥及制劑分析方法的驗證GC殘留溶劑方法驗證耐用性GC系統(tǒng)參數(shù)的變化：流速：±0.5ml/min初始溫度:±5℃溫度梯度速率：±5℃/min接受標(biāo)準(zhǔn)：符合系統(tǒng)適用性限度樣品制備參數(shù)的變化：振搖平衡時間：±5min平衡溫度：±5℃對照品及樣品溶液的穩(wěn)定性:0、12、24、48h接受標(biāo)準(zhǔn)：偏差：≤15%類似的溶劑譜四、原料藥及制劑分析方法的驗證GC殘留溶劑方法驗證范圍指測試方法適用的高低限濃度區(qū)間，并能達(dá)到一定的精密度、準(zhǔn)確度和線性根據(jù)線性、準(zhǔn)確度、精密度的驗證結(jié)果確定：一般要求：LOQ~150%殘留溶劑研究思路★研究原則：合成過程中使用到的有機溶劑均需建立測定方法、并予以研究測定。

★觀測樣品測定結(jié)果：申報3批樣品測定結(jié)果說明工藝穩(wěn)定性。

★質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)擬定原則：除第一類溶劑外、“未檢出的溶劑”可以不擬定，僅擬定最后一步重結(jié)晶溶劑。

★測定方法：根據(jù)研究檢測結(jié)果，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)方法完全可以與研究時方法不同。殘留溶劑研究思路★質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)擬定原則：如僅殘留有重結(jié)晶溶劑、且為低沸點（如乙醇、丙酮等），完全可采用105℃干燥失重方法予以替代。從而省略掉氣相測定，且干燥失重限度可酌情放寬。

★質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是一個不斷完善的過程：氣相色譜法測定時應(yīng)注意事項將對照品溶液濃度配制為限度點。對于二氯甲烷、三氯甲烷采用氫火焰檢測器(FID)勉為其難、應(yīng)采用電子捕獲檢測器(ECD)。如要強行檢測，可采用的辦法有：直接進(jìn)樣、加大流速，使峰形更尖銳、從而提高峰面積積分精密度。供試品溶液一定要全部溶解。對于一些高沸點和低沸點的殘留溶劑，不推薦采用頂空法進(jìn)樣！盡可能建立內(nèi)標(biāo)法、而非外標(biāo)法。色譜柱的選擇一定要遵循“極性相似”原理。直接法進(jìn)樣樣品溶液后，進(jìn)樣針極易堵塞。自動進(jìn)樣器時設(shè)定幾針溶劑，沖洗時多洗幾次。試驗結(jié)束后用乙醇浸泡進(jìn)樣針五、標(biāo)準(zhǔn)品、工作對照品及雜質(zhì)對照品的要求一級標(biāo)準(zhǔn)品如果藥典標(biāo)準(zhǔn)品（或其它官方認(rèn)可的來源）已有市售使用藥典標(biāo)準(zhǔn)品的現(xiàn)行批次作為一級標(biāo)準(zhǔn)品提供所使用的藥典標(biāo)準(zhǔn)品的批號使用藥典標(biāo)準(zhǔn)品，標(biāo)定工作對照品（二級標(biāo)準(zhǔn)品）貯存條件：按標(biāo)簽上的貯存條件保存五、標(biāo)準(zhǔn)品、工作對照品及雜質(zhì)對照品的要求一級標(biāo)準(zhǔn)品如果藥典標(biāo)準(zhǔn)品（或其它官方認(rèn)可的來源）未市售選擇具高純度的原料來建立一級標(biāo)準(zhǔn)品，并提供其來源、批號進(jìn)行完整的結(jié)構(gòu)鑒別鑒定：包括IR、UV、MS、氫譜/碳譜及其光譜解析和元素分析等以確保其結(jié)果的準(zhǔn)確性及含量與純度建立標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)項目要求，進(jìn)行完整的分析檢驗，包括性狀、理化性質(zhì)及純度檢測等五、標(biāo)準(zhǔn)品、工作對照品及雜質(zhì)對照品的要求二級標(biāo)準(zhǔn)品（工作對照品）使用藥典標(biāo)準(zhǔn)品，標(biāo)定工作對照品選擇一批原料作為工作對照品，并提供其來源、批號建立工作對照品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)所列項目要求，進(jìn)行完整的分析檢驗，（鑒別及含量項目測試與藥典標(biāo)準(zhǔn)品作對比）審核、批準(zhǔn)、放行工作對照品的分析報告單五、標(biāo)準(zhǔn)品、工作對照品及雜質(zhì)對照品的要求雜質(zhì)對照品使用藥典雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品，標(biāo)定內(nèi)部雜質(zhì)對照品使用其它官方認(rèn)可來源的化學(xué)品作為雜質(zhì)對照品通過紅外、紫外、核磁共振、質(zhì)譜等，鑒別雜質(zhì)對照品的化學(xué)結(jié)構(gòu)來源、批號及純度建立雜質(zhì)對照品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)雜質(zhì)對照品的分析報告單ThankYou!謝謝大家！附錄資料：不需要的可以自行刪除急性中毒的救治中毒的定義中毒（poisoning）：化學(xué)物質(zhì)作用人體造成全身性損害，稱之為中毒分為：急性中毒和慢性中毒毒物來源中毒的救治特點多數(shù)中毒臨床表現(xiàn)類似于其他系統(tǒng)疾病，臨床檢驗直接提示中毒為數(shù)不多。中毒的治療，除去病因治療以外，多數(shù)情況下實行綜合、對癥、支持治療。急性中毒的治療，反映急救醫(yī)學(xué)的特點。中毒患者的體檢要點針對性體檢，明確與中毒相關(guān)體征：1、皮膚黏膜2、呼吸功能3、心血管功能4、神經(jīng)功能5、消化功能6、急性腎功能衰竭7、血液系統(tǒng)8、瞳孔變化中毒患者的處理要點應(yīng)高度重視生命特征的變化及時準(zhǔn)確判斷威脅患者生命的主要矛盾，及時處理并聯(lián)系相關(guān)?？茣\，選擇最佳的救治方案交代病情認(rèn)真、準(zhǔn)確，并及時準(zhǔn)確記錄。中毒患者病情危重的指標(biāo)中樞神經(jīng)系統(tǒng)抑制肺水腫嚴(yán)重的心律失常心臟驟停嚴(yán)重缺氧（紫紺）急性溶血性貧血，血紅蛋白尿急性腎衰竭中毒性腦病急救處理措施1、終止接觸毒物2、加強生命支持3、清除尚未吸收的毒物催吐、導(dǎo)瀉、洗胃4、促進(jìn)已吸收毒物的排泄

血液凈化：血液透析、血液灌流、血漿置換5、特殊解毒劑6、對癥支持治療呼吸支持、循環(huán)支持、抗生素、高壓氧療洗胃一般主張在服毒后6小時之內(nèi)洗胃。近年來研究表明：洗胃并不能有效的排除中毒藥物。洗胃的過程應(yīng)注意并發(fā)癥的發(fā)生，可能對病人的預(yù)后產(chǎn)生一定的影響。并發(fā)癥：食管破裂、吸入性肺炎、脂質(zhì)性肺炎血液凈化用于中毒搶救的指證嚴(yán)重中毒，內(nèi)科保守治療無效，病情進(jìn)行性惡化重度中毒導(dǎo)致腦功能障礙、呼吸功能障礙主要臟器功能不全藥物、毒物正常排泄途徑受損產(chǎn)生毒性代謝產(chǎn)物或延遲毒性的藥物中毒（甲醇中毒、百草枯中毒）血液凈化的禁忌癥嚴(yán)重感染嚴(yán)重貧血嚴(yán)重心功能不全嚴(yán)重出血傾向嚴(yán)重高血壓有機磷中毒救治的若干問題急性有機磷中毒（AOPP）的救治中熱點：中間綜合征（IMS）

臨床上口服中毒患者中，IMS發(fā)生率為20%，臨床表現(xiàn)多樣性，嚴(yán)重者常需機械通氣治療。目前認(rèn)為有機磷誘導(dǎo)的肌病參與了IMS的發(fā)生，兩者因果關(guān)系尚難以確定。

IMS發(fā)病機制可能包括：遺傳因素、解毒藥物用量不足等等有機磷中毒的藥物治療（一）在AOPP中毒早期，及時足量的使用