實(shí)驗(yàn)二偶氮苯及其衍生物綜述

實(shí)驗(yàn)二偶氮苯及其衍生物綜述第1頁/共13頁實(shí)驗(yàn)二

偶氮苯及其衍生物

的分離及鑒定(薄層色譜)第2頁/共13頁【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?．掌握薄層色譜的原理及其特點(diǎn)。2．熟悉薄層板的制備方法。3．了解薄層色譜的顯色方法。第3頁/共13頁【實(shí)驗(yàn)原理】薄層色譜（薄層層析）是在柱色譜和紙色譜的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種微量、快速而又操作簡便的色譜法。與柱色譜與紙色譜相比，薄層色譜具有分離效率高、靈敏度高、應(yīng)用面廣以及層析后可用各種方法顯色等優(yōu)點(diǎn)。薄層色譜法在有機(jī)化學(xué)中的主要用途為：1．確證兩個(gè)化合物是否相同；2．測定混合物中組分?jǐn)?shù)目；3．監(jiān)控合成反應(yīng)的進(jìn)程；4．監(jiān)控柱層析分離的有效程度。薄層色譜可用著定性分析外，還可與比色法相配合起來作定量分析。第4頁/共13頁【實(shí)驗(yàn)步驟】1．薄層板的制備（1）清洗薄層板：將載玻片③用肥皂水煮沸、洗凈，再用洗滌液浸泡，最后用水洗滌④，烘干，備用。（2）制板：稱取1.2g硅膠G或CF254加3mL蒸餾水，調(diào)成均勻的糊狀，如有氣泡可加1滴~2滴乙醇，均勻涂布于玻片上。在室溫下晾干（約30min），再移入烘箱，緩慢升溫至110℃恒溫活化30min，取出稍冷后，備用。第5頁/共13頁

2．點(diǎn)樣（1）畫線：在經(jīng)活化薄層板一端1cm～1.5cm處，用鉛筆輕輕畫平行線，并將此線四等分，見圖4-5中的點(diǎn)樣線。（2）點(diǎn)樣：用3支點(diǎn)樣毛細(xì)管，分別取少量1%偶氮苯溶液、0.01%對-二甲氨基偶氮苯溶液、偶氮苯和對-二甲氨基偶氮苯混合溶液，分別點(diǎn)在經(jīng)活化的薄層板距下端1cm～1.5cm處(圖4-4)。點(diǎn)樣時(shí)，應(yīng)注意垂直地使點(diǎn)樣毛細(xì)管與薄層板輕輕接觸。若一次點(diǎn)樣量不夠，可待溶劑揮發(fā)后重復(fù)點(diǎn)樣，斑點(diǎn)擴(kuò)展后直徑不超過2mm～3mm。幾個(gè)點(diǎn)樣點(diǎn)必須在同一水平線上。第6頁/共13頁第7頁/共13頁

3．展開

將展開劑5mL倒入層析缸中，蓋上蓋子讓層析缸內(nèi)蒸氣飽和5min～10min。將點(diǎn)好樣品的薄層板放入層析缸中進(jìn)行展開。點(diǎn)樣線必須保持在液面之上。當(dāng)展開劑升到距薄層頂端1cm左右時(shí)，取出薄層板，用鉛筆輕輕劃出前沿線，在空氣流通處晾干。

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4．Rf值的計(jì)算分別計(jì)算出偶氮苯及對-二甲氨基偶氮苯的Rf值，并鑒定樣品中各組分屬于何種物質(zhì)。第10頁/共13頁【注意事項(xiàng)】（1）若認(rèn)為制備的薄層板不夠牢固時(shí)，可采用0.8%的CMC-Na溶液代替蒸餾水制備薄層板。（2）這是因?yàn)楫?dāng)混合劑在薄層板上爬行時(shí)，沸點(diǎn)較低的和與吸附劑親合力較弱的溶劑，在薄層兩個(gè)邊緣易揮發(fā)，它們在薄層兩個(gè)邊緣處的濃度比在中部的濃度小，也就是說薄層板的兩個(gè)邊緣比中部含有更多極性較強(qiáng)的溶劑。為避免此現(xiàn)象的發(fā)生，防止邊緣效應(yīng)。為此，需預(yù)先將層析缸用展開劑蒸氣飽和。第11頁/共13頁③對于一般的定性實(shí)驗(yàn)，用載玻片（7.5cm×2.5cm）制成的硬板完全可以獲得滿意的結(jié)果。④制備所用的薄層板必須表面光滑、清潔。若所用薄層板有油污的部位會(huì)發(fā)生吸附劑涂不上去或薄層易剝落的現(xiàn)象。⑤偶氮苯的