實(shí)驗(yàn)五細(xì)菌的芽孢染色法_第1頁
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實(shí)驗(yàn)五細(xì)菌的芽孢染色法第1頁/共14頁實(shí)驗(yàn)五

細(xì)菌的芽孢染色法第2頁/共14頁實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)并掌握芽孢染色法初步了解芽孢桿菌的形態(tài)特征第3頁/共14頁實(shí)驗(yàn)原理芽孢：芽孢又叫內(nèi)生孢子，是某些細(xì)菌生長到一定階段（環(huán)境中缺乏營養(yǎng)及有害代謝產(chǎn)物積累過多時(shí)），在細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)圓形或橢圓形厚壁、含水量極低、抗逆性極強(qiáng)的休眠體。芽孢的存在和特點(diǎn)是細(xì)菌分類與鑒定的重要形態(tài)學(xué)指標(biāo)；是衡量各種消毒滅菌手段的重要指標(biāo)。第4頁/共14頁芽孢染色法是利用細(xì)菌的芽孢和菌體對(duì)染料的親合力不同的原理，用不同染料進(jìn)行著色，使芽孢和菌體呈不同的顏色而便于區(qū)別。芽孢壁厚、透性低，著色、脫色均較困難，因此，當(dāng)先用一弱堿性染料，如孔雀綠或堿性品紅在加熱條件下進(jìn)行染色時(shí)，此染料不僅可以進(jìn)入菌體，而且也可以進(jìn)入芽孢，進(jìn)入菌體的染料可經(jīng)水洗脫色，而進(jìn)入芽孢的染料則難以透出，若再用復(fù)染液（如沙黃）或襯托溶液（如黑色素溶液）處理，則菌體和芽孢易于區(qū)分。第5頁/共14頁實(shí)驗(yàn)器材菌種：枯草芽孢桿菌染色劑：5％孔雀綠水溶液，0.5％番紅水溶液器材：接種環(huán)，酒精燈，載玻片，擦鏡紙、顯微鏡等。第6頁/共14頁操作步驟1、涂片：將培養(yǎng)24小時(shí)左右的枯草芽孢桿菌，作涂片、干燥、固定。

用接種環(huán)挑取試管底部菌種于潔凈載玻片上，涂成薄膜，然后將涂片通過火焰3次溫?zé)峁潭?。?頁/共14頁細(xì)菌涂片的制備過程第8頁/共14頁

孔雀綠染色加熱(5-10min)

水洗脫色

染液切勿干涸番紅復(fù)染

(3－5min)

水洗鏡檢

芽孢呈綠色，芽孢囊及營養(yǎng)體為紅色第9頁/共14頁注意事項(xiàng)1菌液要濃；2選用適當(dāng)菌齡的菌種；3加熱染色時(shí)必須維持在染液微冒蒸汽狀態(tài)第10頁/共14頁實(shí)驗(yàn)結(jié)果游離芽孢芽孢菌體第11頁/共14頁枯草芽孢桿菌第12頁/共

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