實驗動物組織

實驗動物組織第1頁/共30頁

實驗五、動物組織一、目的與內(nèi)容（一）目的

1．了解動物的四類基本組織的結(jié)構(gòu)特點，理解組織結(jié)構(gòu)與機能的密切關(guān)系；2．掌握血液涂片的方法。（二）內(nèi)容1、上皮組織的觀察：單層扁平上皮裝片，小腸橫切，纖毛上皮裝片等；2、肌肉組織的觀察：平滑肌裝片，骨骼肌橫切，心肌切片等；第2頁/共30頁3、結(jié)締組織的觀察：疏松結(jié)締組織裝片，腱縱切，透明軟骨等，自制人或蛙血液涂片等；4、神經(jīng)組織的觀察：脊髓橫切，運動神經(jīng)元裝片等。二、材料與用品

(一)材料蟾蜍，動物各組織的玻片標本[一般用蘇木精一曙紅(也稱伊紅)染色，簡稱H·E染色]。第3頁/共30頁(二)用品1．器具顯微鏡，解剖器具，蠟盤，載玻片，蓋玻片，燒杯，染色缸，玻片架，蛙釘，采血針、棉花等。2．試劑0．65％生理鹽水，甘油，香柏油，甲醇，吉姆薩染液或瑞氏染液，蒸餾水，乙醚、等。第4頁/共30頁三、操作與觀察

（一）血液涂片的制備與觀察

(1)人或蛙血涂片標本的制備

第5頁/共30頁①取血：左手從蛙背面握蛙，右手持注射器從蛙胸部進針刺入蛙心臟采血。滴1滴在潔凈載玻片右端，注意血滴不宜過大。（或者從人的左手無名指指端內(nèi)側(cè)取血。）②涂片：另取邊緣光滑的1塊載玻片作推片斜置于第1塊載玻片上血滴的左緣，成40。左右角度。將推片稍向右移，接觸血滴，使血液充滿兩玻片之間的夾角。再將推片向左方勻速推進，使玻片上留下薄而均勻的血膜。左右搖動涂有血膜的玻片，使之盡快干燥，避免細胞皺縮。第6頁/共30頁

③染色：晾干后，用瑞特氏染液數(shù)滴加于涂片上固定染色1min，在染液的上面再加蒸餾水再染3min,然后在染色玻片的一端用自來水細流緩緩沖去染液（在稀醋酸液中蘸數(shù)下），斜立血涂片于玻片架上，晾干后置顯微鏡下觀察。第7頁/共30頁

注意事項：第一.滴加瑞氏染液的量不宜太少,太少易揮發(fā)變干,形成顆粒。1張血片,一般可滴加2～3滴染液。第二.沖洗時應(yīng)將蒸餾水直接向血膜上傾倒,使液體自血片邊緣溢出,沉淀物從液面浮去。切勿先將染液傾去再沖洗,否則沉淀物附著于血膜上不易沖掉。第8頁/共30頁

蛙血涂片觀察：在低倍鏡下選擇分布均勻的血細胞，換高倍鏡觀察。蛙紅細胞呈橢圓形，中央有一橢圓形細胞核，呈藍色，細胞質(zhì)呈紅色。此外還可見到白細胞和凝血細胞。人的血涂片觀察：紅細胞數(shù)量最多，小而圓，無細胞核，其中央部分著色較周圍淡；慢慢移動標本，可觀察到各種白細胞，白細胞數(shù)量比紅細胞少，但胞體大，細胞核明顯，極易與紅細胞區(qū)別開。血小板為形狀不規(guī)則的細胞小體，其周圍部分為淺藍色，中央有細小的紫色顆粒，常聚集成群，分布于紅細胞之間。高倍鏡下一般只能看到成堆的紫色顆粒，在油鏡下才能看到顆粒周圍的淺藍色胞質(zhì)部分。(2)蛙血涂片的觀察第9頁/共30頁分類：單層上皮和復(fù)層上皮功能:保護、感覺、分泌和吸收。特征：（1）上皮細胞主要為柱狀、扁平狀。（2）排列緊密，有單層和多層之分。（3）細胞間緊密連接，間質(zhì)少。（4）基部分泌一層很薄的基膜。1.上皮組織(二)觀察各組織制片第10頁/共30頁低倍鏡觀察，可看到許多大小不等的、圓形或橢圓形的紅色甲狀腺濾泡。高倍鏡觀察，濾泡壁由1層立方體形上皮細胞構(gòu)成，核圓形、藍紫色，位于細胞中央，細胞質(zhì)粉紅色。(1)單層立方上皮(圖3—3)(兔甲狀腺切片)第11頁/共30頁(2)單層柱狀上皮(圖3—4)(貓小腸橫切片)

低倍鏡觀察，可見黏膜面形成許多指狀突起，突向管腔，突起表面覆有1層柱狀上皮。

單層柱狀上皮

(胃、腸黏膜)第12頁/共30頁高倍鏡觀察，可見上皮細胞為柱狀，核長橢圓形、藍紫色，靠近細胞的基底部。把虹彩光圈縮小，減少光量，可見細胞的游離面有1層較亮的粉紅色膜狀結(jié)構(gòu)，稱為紋狀緣。在柱狀細胞之間散在有杯狀細胞，此細胞上端膨大、下端細小，核呈三角形或半圓形，位于細胞基底部。在杯狀細胞上端的細胞質(zhì)內(nèi)積有大量不著色的黏液，在切片上呈卵形空泡狀結(jié)構(gòu)，細胞游離面無紋狀緣。第13頁/共30頁(3)假復(fù)層纖毛柱狀上皮（兔氣管橫切片)氣管壁內(nèi)表面即黏膜層由假復(fù)層纖毛柱狀上皮組成。肉眼辨別切片中朝向氣管腔的黏膜層，并置于視野中央。第14頁/共30頁低倍鏡觀察，管壁黏膜表面著色較深的一厚層即假復(fù)層纖毛柱狀上皮。細胞排列緊密，細胞界限不清晰，細胞核位置高低不等。高倍鏡觀察，該上皮由4種細胞成。錐形細胞：基部寬，頂部窄，不能達到上皮游離面，細胞排列在個上皮的下部。梭形細胞：兩端尖細，中間略寬，細胞核排列于整個上皮的中部。柱狀細胞：胞體達上皮游離面，細胞游離面較寬，基部較細，細胞游離面有纖毛，細胞核排列于整個上皮的上部。杯狀細胞：夾于柱狀細胞之間，游離面無纖毛，細胞核也排列在上皮的上部。

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(4)復(fù)層扁平上皮(圖3—6)(貓食管橫切片)

復(fù)層扁平上皮位于食管壁內(nèi)表面。低倍鏡觀察，此上皮由許多層細胞組成，上皮的基底面呈波浪形。第16頁/共30頁高倍鏡觀察，可見與基膜相連的是1層排列整齊的矮柱狀細胞，細胞核橢圓形。中層為幾層多角形細胞，排列不整齊，核扁平。接近上皮表面的細胞變?yōu)楸馄綘?，核著色淡，甚至模糊不清。?7頁/共30頁2．肌組織

骨骼肌心肌平滑肌第18頁/共30頁(1)心肌(圖3—9)(狗心肌切片)第19頁/共30頁先低倍鏡后高倍鏡觀察，在縱切面上，心肌纖維彼此以分支相連，核卵圓形，位于肌纖維中央?？s小虹彩光圈，使光線暗些，可看到心肌纖維的橫紋，但不及骨骼肌的明顯。在心肌纖維及其分支上，可見到染色較深的梯形橫線，即閏盤。在橫切面上，心肌纖維為不規(guī)則橫線，由于切片的關(guān)系，有的有核，有的無核。心肌與骨骼肌不同：（1）心肌纖維具有分支，各纖維以分支相連成網(wǎng)；（2）一個橢圓形細胞核位于纖維的中央；（3）心肌也有橫紋，但不如骨骼肌的明顯和規(guī)則。第20頁/共30頁先低倍鏡后高倍鏡觀察蛙的平滑肌分離裝片，可見分離的平滑肌纖維呈長梭形，核長橢圓形，位于細胞中部，在常規(guī)染色標本上肌原纖維分辨不清楚。先低倍鏡后高倍鏡觀察貓的小腸橫切片，可見小腸壁平滑肌橫切面呈大小不等、不規(guī)則的紅色圓點，有的中央有染成藍紫色圓形的核，有的見不到核。(2)平滑肌(圖3—10)(蛙的平滑肌分離裝片，貓的小腸橫切片)第21頁/共30頁第22頁/共30頁3.神經(jīng)組織

(1)多極神經(jīng)元(兔脊髓橫切片)

肉眼觀察觀脊髓橫切片中央為蝴蝶狀的灰質(zhì)的其中心有一孔為中央管，灰質(zhì)較狹的一端為背角，較寬的為腹角。包圍在灰質(zhì)周圍染色較淡的部分是白質(zhì)。低倍鏡觀察，將脊髓灰質(zhì)腹角移至視野中央，觀察神經(jīng)元。在腹角內(nèi)有許多較大的多突起細胞即脊髓腹角運動神經(jīng)元，為多極神經(jīng)元。神經(jīng)元胞體上的突起包括樹突和軸突，但二者不易區(qū)分，一般可根據(jù)軸突基部的軸丘處染色較淺(無尼氏體)來識別軸突。選擇1個胞體較大、突起較多、核較清晰的神經(jīng)元移至視野中央進一步觀察。第23頁/共30頁(2)運動終板(兔肋間肌撕片裝片)低倍鏡觀察，可見骨骼肌平行排列成束，呈藍紫色或紫紅色，肌原纖維的橫紋明顯。傳出神經(jīng)纖維染成黑色，形似樹枝，分布到骨骼肌纖維上，當它們接近肌纖維時，其末端再行分支成爪形小球，附著于肌纖維表面。高倍鏡觀察，神經(jīng)纖維終末的爪狀分支端膨大，在與肌纖維附著處形成橢圓形板狀隆起，即為運動終板。骨骼肌軸突第24頁/共30頁4．結(jié)締組織(1)血液①人血涂片標本(瑞氏染色)的觀察(圖3—11)。第25頁/共30頁(2)疏松結(jié)締組織(圖3—12)(小白鼠皮下疏松結(jié)締組織平鋪片，H·E染色)

由排列疏松的纖維與分散在纖維間的多種細胞構(gòu)成的，纖維和細胞埋在基質(zhì)中，充滿在器官內(nèi)部的間隙中。細胞種類多，間質(zhì)也多。第26頁/共30頁(4)致密結(jié)締組織(圖3—14)(貓的尾腱縱切片)

先低倍鏡后高倍鏡觀察。膠原纖維束粗而直，彼此平行排列。腱細胞在纖維束間排列成單行，切面上呈梭形。核橢圓形或桿狀，藍紫色，2個鄰近細胞的核常?？拷＜毎|(zhì)不易顯示。。第27頁/共30頁(5)透明軟骨(圖3—15)(貓的氣管橫切片)

高倍鏡觀察，軟骨細胞存在的地方稱陷窩。在制片過程中有的軟骨細胞脫落，則軟骨陷窩呈現(xiàn)為白色空腔；有部分軟骨細胞有所收縮，其周圍的白色間隙也是陷窩的一部分。陷窩周圍的基質(zhì)著色略深，稱軟骨囊第28頁/共30頁(6)骨組織