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實驗動物飼養(yǎng)與管理第1頁/共119頁實驗動物飼養(yǎng)管理內(nèi)容微生物控制及環(huán)境設(shè)施管理飼料營養(yǎng)管理育種繁殖管理常用實驗動物的日常管理
第2頁/共119頁一·微生物控制及環(huán)境設(shè)施管理1、實驗動物按微生物等級分類2、普通動物的概念3、清潔級動物的概念4、無特定病原體動物的概念5、無菌動物的概念6、屏障環(huán)境的管理第3頁/共119頁1、實驗動物按微生物等級分類普通動物清潔動物無特定病原體動物(SPF動物)無菌動物第4頁/共119頁2、普通級動物的概念
普通級動物[conventional(CV)animal]
是微生物和寄生蟲控制級別最低的實驗動物;要求不攜帶主要的人獸共患病病原、動物烈性傳染病病原及人獸共患寄生蟲,如沙門菌、結(jié)核分枝桿菌、狂犬病病毒和兔出血癥病毒等。普通級動物有豚鼠、地鼠、兔、犬和猴等,普通級小鼠和大鼠等級被取消。第5頁/共119頁3、清潔級動物的概念
清潔動物[clean(CL)animal]
是根據(jù)我國國情而設(shè)立的等級動物,除普通級動物應(yīng)排除的病原和寄生蟲外,不攜帶對動物危害大和對科學(xué)研究干擾大的病原和寄生蟲,如小鼠肝炎病毒、仙臺病毒等。清潔動物有小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔等動物。犬和猴沒有清潔級。第6頁/共119頁4、無特定病原體動物的概念無特定病原體動物(SPF動物)
[specificpathogenfree(SPF)animal]
通常被稱為SPF動物,除清潔動物應(yīng)排除的病原和寄生蟲外,不攜帶主要潛在感染或條件致病和對科學(xué)實驗干擾大的病原和寄生蟲。如綠膿桿菌等。
SPF動物包括小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔、犬和猴等。第7頁/共119頁5、無菌動物的概念
無菌動物[germfree(GF)animal]指無可檢出一切生命體的動物。其來源是普通動物經(jīng)無菌剖腹產(chǎn)手術(shù),幼子在無菌隔離器中人工哺育或由其他無菌動物代乳飼育而成?!盁o菌”只是一個相對概念,僅僅指以目前的技術(shù)手段未能查出微生物。第8頁/共119頁6.屏障環(huán)境管理嚴(yán)格規(guī)定人員、物品、動物的流向合理選擇消毒方法積極開展各項指標(biāo)的檢測工作認(rèn)真做好屏障環(huán)境內(nèi)外的清潔消毒工作加強(qiáng)人員隊伍建設(shè)和管理有效的檢測措施第9頁/共119頁嚴(yán)格規(guī)定人員、物品、動物的流向人員流向:外環(huán)境→第一更衣→淋浴→第二更衣→潔凈走廊→實驗室→次潔凈走廊→緩沖間→外環(huán)境動物流向:購買SPF級動物→檢疫/觀察室→實驗室→次潔凈走廊→緩沖間→解剖室物品流向:洗消間→高壓滅菌設(shè)備/渡槽/傳遞窗→消毒物品儲存室→實驗室→次潔凈走廊→緩沖間→外環(huán)境第10頁/共119頁合理選擇消毒方法飼養(yǎng)籠盒、飲水瓶、墊料、衣服和各種實驗用具采用高壓蒸汽滅菌器消毒;動物食用飼料采用放射性照射(60Co)的消毒方法;工作人員用的拖鞋等采用渡槽浸泡的方法(0.15%滅菌凈溶液)消毒;對于不耐熱、不耐水、不耐酸堿和不能進(jìn)行放射性照射的物品采用傳遞窗紫外線消毒。
第11頁/共119頁積極開展各項指標(biāo)的檢測工作經(jīng)常對空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)進(jìn)行保養(yǎng),每1~2周更換排風(fēng)口過濾膜,每兩個月更換一次初效和中效過濾袋,每年更換一次高效過濾膜;每半年檢測一次外購飼料的微生物指標(biāo)和營養(yǎng)成分,每半年檢測一次純凈水的微生物指標(biāo);每天對溫濕度、壓差等進(jìn)行監(jiān)測。第12頁/共119頁認(rèn)真做好屏障環(huán)境內(nèi)外的清潔消毒工作保持屏障環(huán)境內(nèi)的潔凈度是SPF級動物房正常運(yùn)行的關(guān)鍵。每天的實驗和飼養(yǎng)工作完成后,對室內(nèi)環(huán)境進(jìn)行清潔,每周3次用滅菌凈消毒水對整個屏障系統(tǒng)的內(nèi)環(huán)境和飼養(yǎng)籠架進(jìn)行消毒。第13頁/共119頁
屏障系統(tǒng)動物實驗室的管理者屏障系統(tǒng)動物實驗室的使用者第14頁/共119頁屏障系統(tǒng)動物實驗室的管理者專職技術(shù)人員(包括實驗管理人員,設(shè)施設(shè)備維護(hù)人員和試驗操作人員)既要掌握對屏障系統(tǒng)動物實驗室生物安全性防護(hù)知識和維護(hù)、操作技術(shù)又要有一種對屏障系統(tǒng)動物實驗室的高度責(zé)任心,隨時關(guān)注系統(tǒng)的安全和正常運(yùn)行,及時發(fā)現(xiàn)和解決問題。第15頁/共119頁屏障系統(tǒng)動物實驗室的使用者進(jìn)行項目研究的科研人員:必須接受專職的管人員對其進(jìn)行培訓(xùn)了解屏障系統(tǒng)的流程、路線,人員、物品和動物進(jìn)出屏障系統(tǒng)動物實驗室的方式方法,注意事項第16頁/共119頁有效的檢測措施環(huán)境設(shè)施的檢測日常消毒滅菌物品的檢測第17頁/共119頁環(huán)境設(shè)施的檢測主要參數(shù)包括溫度、濕度、噪音、光照、室內(nèi)風(fēng)速、氨濃度、室內(nèi)換氣次數(shù)、各區(qū)域壓力差等。要根據(jù)檢測的指標(biāo)調(diào)整或適時更換維護(hù)系統(tǒng)的設(shè)備,對多項環(huán)境參數(shù)的正常維持都有著重要的作用。溫、濕度和壓差需每日記錄,根據(jù)它們的變化,需要對風(fēng)閥或空氣過濾器進(jìn)行更換處理。環(huán)境指標(biāo)的全面系統(tǒng)檢測一般一個季度檢測一次。第18頁/共119頁日常消毒滅菌物品的檢測雙扉高壓真空滅菌器,用于所有可經(jīng)高壓滅菌的物品;消毒液渡槽,用于可浸泡消毒的物品;紫外線滅菌渡艙,用于不能高壓,又不能浸泡的物品。第19頁/共119頁加強(qiáng)人員隊伍建設(shè)和管理人員污染是潔凈動物設(shè)施失敗的重要原因。人與動物直接接觸之間的防護(hù)僅僅是洗澡和穿上滅菌衣、戴上手套和口罩。裸露部分很容易對環(huán)境造成污染。工作人員容易出汗,偶爾也打噴嚏,但滅菌衣、口罩并不具備初、中、高效過濾功能,也容易對環(huán)境造成污染。第20頁/共119頁二.飼料營養(yǎng)管理1、嚙齒類實驗動物的營養(yǎng)需要2、實驗動物飼料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)3、飼料的質(zhì)量要求4、飼料對實驗結(jié)果的影響第21頁/共119頁實驗動物的食性與營養(yǎng)需要
實驗動物的食性與營養(yǎng)需要:
*食性—不同種動物攝取食物的習(xí)性。
*依食性將動物分為三大類:
草食性動物:豚鼠、兔、羊;
肉食性動物:狗、貓;
雜食性動物:小鼠、大鼠、金黃地鼠、猴。
實驗動物的基本營養(yǎng)需要——實驗動物對蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂類、礦物質(zhì)、維生素和水等營養(yǎng)素的日平均需求量。第22頁/共119頁1、嚙齒類實驗動物的營養(yǎng)需要
大鼠、小鼠飼料蛋白質(zhì)占18%-20%左右,粗纖維5%,粗脂肪4%。維生素A需求量為每公斤飼料含7000-14000IU,通常以加入1%的清魚肝油來滿足。應(yīng)適當(dāng)補(bǔ)充維生素E,每公斤飼料含60-120IU,以提高受孕率。
金黃地鼠飼料蛋白質(zhì)占21%~24%,動物性蛋白尚應(yīng)含相當(dāng)比例,主要來源于魚粉
和雞蛋。植物性蛋白主要來源于黃
豆和豆粉。此外,應(yīng)喂飼一些白菜
、蘿卜、黃瓜等青飼料。第23頁/共119頁
豚鼠
飼料蛋白質(zhì)占17%-20%左右,尤其對精氨酸的需要量較高。由于它的盲腸較發(fā)達(dá),因而對纖維素亦有較高需要,應(yīng)占飼料總量的10%-15%左右。豚鼠體內(nèi)不能合成維生素C,因此要在飼料中添加。一般每公斤飼料含維生素C1500mg,妊娠豚鼠每公斤飼料含維生素C1800mg。實際喂養(yǎng)時,主要可喂飼苜蓿草粉、干草粉和(或)綠色蔬菜等。第24頁/共119頁兔
新生家兔一般要哺乳一個月左右才能開始吃飼料。家兔飼料中蛋白質(zhì)應(yīng)占14%-17%,粗脂肪占3%,粗纖維占10%-15%以上。飼料中應(yīng)含大量干草,以補(bǔ)足其對粗纖維的基本需要量,從而可防止家兔因粗纖維攝入不足而導(dǎo)致腹瀉。第25頁/共119頁犬和猴的營養(yǎng)需要
犬
為肉食性動物,其飼料中應(yīng)含20~24%蛋白質(zhì),4.5%-6.5%粗脂肪,3%粗纖維。注意添加維生素A、D、B1、B2,特別是維生素E。
第26頁/共119頁
猴
為雜食性動物,其飼料中的蛋白質(zhì)應(yīng)占16%~21%,粗脂肪4%~5%。猴體內(nèi)不能合成維生素C,其需求量為每公斤飼料含1700-2000mg,因而要注意補(bǔ)充。
在人工喂養(yǎng)時,應(yīng)以面粉、雞蛋、食鹽、骨粉制作的蛋糕或餅干作為主食,此外還應(yīng)有蘋果、香蕉、蔬菜等作為輔食。第27頁/共119頁
2、實驗動物飼料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
飼料的種類及營養(yǎng)特點(diǎn)
*按來源----植物性和動物性飼料。
*按物理性狀---粉狀飼料、顆粒飼料、膨化飼料等。
*按其營養(yǎng)特性---粗飼料、青綠和青貯飼料、能量飼料、蛋白質(zhì)飼料、礦物質(zhì)飼料、維生素飼料、添加劑。
**粗飼料--干苜蓿、干青草粉、稻草等。
**青綠和青貯飼料---天然牧草、樹葉等。
**能量飼料---玉米、高粱、大麥等。第28頁/共119頁苜蓿
苜蓿以“牧草之王”著稱,不僅產(chǎn)量高,而且草質(zhì)優(yōu)良,各種畜禽均喜食。最適宜的條件是土質(zhì)松軟的沙質(zhì)壤土,在陜西、河北、山西、山東、天津、北京地區(qū),以秋播最好。
鼠料兔料犬膨化飼料第29頁/共119頁**蛋白質(zhì)飼料----植物性蛋白飼
料如大豆、黑豆等,動物性蛋白
飼料有肉粉、魚粉、骨粉等。
**礦物質(zhì)飼料----食鹽、石灰石
、貝殼等。
**維生素飼料---酵母、魚肝油、
各種人工合成或提純的單一維生素
、復(fù)合維生素制劑等。
**添加劑----防腐劑、抗氧化劑
、著色劑、激素等非營養(yǎng)性添加劑。
大豆豆粕魚粉第30頁/共119頁3、飼料的質(zhì)量要求
1.原料來源清楚,應(yīng)不含化學(xué)藥品,無蟲害、細(xì)菌及霉菌污染,不發(fā)生變質(zhì),農(nóng)藥殘留不應(yīng)超過國家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)。
2.對于SPF動物,飼料要求無菌:而無菌動物和悉生動物的飼料則要求完全無菌。
3.選擇品質(zhì)新鮮的原料進(jìn)行加工。
4.貯存原料的倉庫要保持通風(fēng)、低溫、干燥,以防霉變產(chǎn)生黃曲霉素。
5.飼料經(jīng)配制加工后,應(yīng)嚴(yán)密包裝,以防蠅、鼠、昆蟲、細(xì)菌等污染。第31頁/共119頁第32頁/共119頁4、飼料營養(yǎng)素對動物實驗結(jié)果的影響影響動物采食量而影響實驗結(jié)果
實驗動物的采食量,以其能達(dá)到對能量的需求量為標(biāo)準(zhǔn)。飼料的原料組成影響飼料中能量的含量,必然影響動物的采食量,而動物采食量多少又對某些實驗結(jié)果產(chǎn)生影響。例如:某些實驗的藥物是摻在飼料中給予的,如果動物采食量發(fā)生變化,動物攝人藥物的量也就會發(fā)生變化,最終影響實驗結(jié)果。第33頁/共119頁影響動物生長發(fā)育
在生物醫(yī)學(xué)研究中,以動物生長發(fā)育(包括體重、體型和組織器官的發(fā)育等)為指標(biāo)的實驗是常見的。如果日糧中營養(yǎng)素含量水平過高或過低,勢必影響以生長發(fā)育指標(biāo)的實驗結(jié)果。例如:SD大鼠日糧蛋白水平低于14%時,極顯著降低肝臟重量。
第34頁/共119頁影響動物生理生化指標(biāo)而影響實驗主要是實驗動物飼料中所含的營養(yǎng)素經(jīng)過動物的消化、吸收后對動物的生理狀態(tài)產(chǎn)生影響。當(dāng)飼料中某種營養(yǎng)素含量發(fā)生改變時,必然導(dǎo)致動物血液及某些臟器、組織中改種營養(yǎng)素含量的改變,并對與之相關(guān)的生理生化指標(biāo)造成影響。當(dāng)這種改變加深或持續(xù)時間較長時,就會造成動物對該種營養(yǎng)索的缺乏或中毒。影響動物營養(yǎng)而影響實驗結(jié)果與營養(yǎng)相關(guān)研究中動物日糧的控制問題日益受到重視,特別是營養(yǎng)與免疫,營養(yǎng)與美容,營養(yǎng)與衰老已成為研究熱點(diǎn)。第35頁/共119頁三.育種繁殖管理1、實驗動物育種繁殖方法2、近交系的育種保種繁殖方法3、封閉群動物的育種繁殖方法第36頁/共119頁1、實驗動物繁殖主要有三種方法
近親繁殖
異系雜交隨機(jī)繁殖第37頁/共119頁近交系動物的育種繁殖近交系(inbredstrain)動物——經(jīng)至少連續(xù)20代的全同胞兄妹之間或親代與子代之間交配培育而成的動物。如BALB/c小鼠、C57BL/6J小鼠等。
第38頁/共119頁近交系(inbredstrain)動物育種原理是人為地使動物連續(xù)進(jìn)行近親交配,逐代提高基因純合率并固定目標(biāo)狀,從而獲得具有目標(biāo)性狀的純系群體。第39頁/共119頁保種方法
單線法從基礎(chǔ)群中選擇3~5對全同胞兄妹進(jìn)行交配,再在子代中選擇l對生育能力最好的同胞兄妹進(jìn)行交配,以后每代都選留l對。這種方法有利于增進(jìn)群體在遺傳上的均一性,但卻減少有效的遺傳變異,且難以在同時期繁殖出眾多子代,特別是容易斷種。第40頁/共119頁平行線法從基礎(chǔ)群中選擇3~5對全同胞兄妹進(jìn)行交配,再在每對兄妹的子代中分別選留1對,以后每對兄妹每一后代都選留l對。這種方法保持的群體在遺傳上的均一性比單線系統(tǒng)差,隨著保種代數(shù)的不斷增加,群體中個體間的性狀差異逐漸明顯,但有利于防止斷種。第41頁/共119頁選優(yōu)法從基礎(chǔ)群(foundationcolony)中選擇3~5對全同胞兄妹進(jìn)行交配,再在各兄妹的子代中比較生育能力、模型性狀,如果差異不大,則從每對兄妹的子代中選留1對作親本;如果差異較大,從滿意的兄妹子代中選留親本,總數(shù)仍為3~5對。一般在每過4~7代時進(jìn)行一次修飾。這種方法同時克服了前兩種方法的缺點(diǎn),既可防止斷種,又保證不發(fā)生亞系分化,為保種的最佳方法。第42頁/共119頁繁殖生產(chǎn)方法
保種維持的近交系動物數(shù)量有限,要大量供應(yīng)實驗就必須擴(kuò)大繁殖生產(chǎn)。繁殖生產(chǎn)近交系動物的方法有多種,Lane-Petter(1961年)所發(fā)表的交通信號燈方法(trafficlightsystem),就是把保種的近交系動物稱為基礎(chǔ)群,在繁殖生產(chǎn)過程中設(shè)有血緣擴(kuò)大群(pedigreedexpansioncolony)、生產(chǎn)群(productioncolony)。第43頁/共119頁基礎(chǔ)群設(shè)白色標(biāo)記,血緣擴(kuò)大群設(shè)綠色標(biāo)記,擴(kuò)大群設(shè)黃色標(biāo)記,生產(chǎn)群設(shè)紅色標(biāo)記?;A(chǔ)群仍按保種方法保種;血緣擴(kuò)大群來自基礎(chǔ)群,采用近交繁殖1~4代;擴(kuò)大群來自血緣擴(kuò)大群或基礎(chǔ)群,采用近交繁殖1~2代;生產(chǎn)群來自擴(kuò)大群或血緣擴(kuò)大群或基礎(chǔ)群,可采用隨機(jī)交配繁殖1~4代,繁殖生產(chǎn)出的動物供應(yīng)實驗。第44頁/共119頁3、封閉群動物的育種繁殖封閉群(closedcolony)動物又稱遠(yuǎn)交群(outbredstock)動物,是指以非近親交配方式進(jìn)行繁殖生產(chǎn)的一個種群,在不從其外部引入新個體的條件下,至少連續(xù)繁殖4代以上的動物。如昆明種小鼠、SD大鼠等。第45頁/共119頁育種方法封閉群(closedcolony)動物培育目的在于保持群體的遺傳變異。其育種原理是根據(jù)Hardy-Weinberg定律,最大限度地避免近親繁殖和不與群外動物雜交,使群體基因頻率平衡穩(wěn)定。第46頁/共119頁四、常用實驗動物的日常管理1、實驗小鼠的飼養(yǎng)管理要點(diǎn)2、實驗大鼠的飼養(yǎng)管理要點(diǎn)3、實驗豚鼠的飼養(yǎng)管理要點(diǎn)4、實驗兔的飼養(yǎng)管理要點(diǎn)5、實驗犬的飼養(yǎng)管理要點(diǎn)第47頁/共119頁1、小鼠飼養(yǎng)管理要點(diǎn)
小鼠為雜食動物,因其喜啃咬,一般喂全價顆粒飼料,保證小鼠營養(yǎng)需要,但要注意有些小鼠的品系對營養(yǎng)的特殊要求。飼料中不得加入抗菌素、防腐劑以及激素等,并要求保持相對穩(wěn)定。小鼠胃容量小,隨時采食,應(yīng)采取少量勤添飼喂。飼料平時要放在專用容器中保存,并放于通風(fēng)干燥處,一周內(nèi)應(yīng)用完。小鼠常用飲水瓶給水,每天換水2--3次,保證飲水不中斷。應(yīng)經(jīng)常清洗并消毒飲水瓶及吸水管。第48頁/共119頁籠具和墊料籠具應(yīng)選用國家標(biāo)準(zhǔn)籠具,一般用塑料飼養(yǎng)籠,清潔級以上小鼠的籠具需消毒,TPX塑料飼養(yǎng)盒可達(dá)到耐120度高溫的要求,一般聚丙乙烯塑料盒消毒時只能耐105度,過高溫度可使盒體變形。墊料是直接接觸動物的鋪墊物,有吸濕、保暖、作窩的作用,故應(yīng)有強(qiáng)吸濕性、無毒、無刺激性、無粉塵、不可食并舒適。一般選用以闊葉林木的刨花或鋸末為宜,切忌用針葉林木(松、杉)刨花做墊料。墊料常采用高壓消毒。第49頁/共119頁工作常規(guī)
每周更換兩次墊料,每日加食、換水。注意每天觀察動物,及時作好工作記錄和環(huán)境記錄第50頁/共119頁2、大鼠飼養(yǎng)管理要點(diǎn)
大鼠的飼養(yǎng)管理基本與小鼠相同。
大鼠飼養(yǎng)室要注意避免噪音,強(qiáng)烈的噪音易引起吃仔現(xiàn)象。
由于大鼠體形較大,排泄物多,產(chǎn)生的有害氣體也多。因此必須控制大鼠的飼養(yǎng)密度,確保室內(nèi)通風(fēng)良好,勤換墊料。
大鼠飼養(yǎng)室的濕度不得低于40%,避免環(huán)尾癥的發(fā)生。第51頁/共119頁4、豚鼠飼養(yǎng)管理要點(diǎn)環(huán)境豚鼠聽覺好,膽小,易受驚嚇,環(huán)境應(yīng)保持安靜。
籠具傳統(tǒng)的飼養(yǎng)方式是水泥和木制的地池飼養(yǎng),也可蓋成幾層?,F(xiàn)發(fā)展為抽屜式飼養(yǎng)箱子籠具。豚鼠需一定的活動場地。
第52頁/共119頁飼料豚鼠對纖維素要求量較大,在飼料配方中應(yīng)充分注意。另外必須在飼料中補(bǔ)加維生素C。常規(guī)管理每日喂料兩次,喂新鮮青草或蔬菜一次。注意定時定量。喂青菜時必須清洗干凈。注意室內(nèi)溫、濕度的保持。注意每天觀察動物,并做好工作記錄。第53頁/共119頁4、兔飼養(yǎng)管理要點(diǎn)飼料采用全價營養(yǎng)顆粒飼料,飼料配方應(yīng)符合有關(guān)規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)并保持相對穩(wěn)定,投料應(yīng)定時定量,防止過食或不足。保證供應(yīng)足夠的清潔飲水,飲水器具要定期消毒。消毒防疫嚴(yán)格執(zhí)行衛(wèi)生消毒防疫制度,飼養(yǎng)間或?qū)嶒炇冶仨毻L(fēng)干燥,籠器具要定期清洗消毒。防止噪音。第54頁/共119頁6、犬飼養(yǎng)管理要點(diǎn)飼養(yǎng)環(huán)境犬飼養(yǎng)場所應(yīng)在獨(dú)立區(qū)內(nèi),室內(nèi)飼養(yǎng)應(yīng)有隔音設(shè)備,犬場和犬舍均需有雙重門設(shè)施,上、下水設(shè)施要齊備。實驗中的犬?;\養(yǎng),繁殖犬常散養(yǎng),犬喜運(yùn)動,所以,犬舍應(yīng)有犬的活動場地。第55頁/共119頁
喂養(yǎng)與營養(yǎng)目前廣泛采用犬全價營養(yǎng)膨化顆粒飼料,按犬重的4%供應(yīng)飼料,可保證犬的生長發(fā)育需要。如需自行配制進(jìn)行短期飼養(yǎng),犬飼料中應(yīng)保證以下主要成分:粗蛋白25%,粗脂肪6%,無氮浸出物50%,粗纖維4%以下,灰粉8%以下,還應(yīng)加適量的微量元素、維生素和礦物質(zhì)。飼料要多樣搭配,要選擇適口性強(qiáng),易消化的飼料,適當(dāng)補(bǔ)充動物性蛋白料。喂飼要做到定時、定量、定溫、定質(zhì)、定地點(diǎn)。成犬一般每日2次,生產(chǎn)母犬、幼犬可每日3次。第56頁/共119頁
清潔衛(wèi)生每天清洗飼犬食具、犬籠和犬舍場地,夏季要常給犬洗澡,保持犬體衛(wèi)生。工作人員在工作時注意觀察犬的精神狀態(tài),進(jìn)食情況,口眼、鼻、皮膚及外陰部有無異常以及行為習(xí)性等。按季節(jié)、氣候不同,檢蟲、驅(qū)蟲、防病是犬健康的保障。充分運(yùn)動運(yùn)動可使犬新陳代謝旺盛,增進(jìn)食欲,抵抗力增強(qiáng),日光中的紫外線通過光化學(xué)作用,可促進(jìn)維生素D的合成,促進(jìn)鈣磷的吸收。
第57頁/共119頁實驗動物疾病與控制
第58頁/共119頁(一)導(dǎo)致人獸共患病的主要病原體
1.病毒:淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒、狂犬病病毒、獼猴皰疹病毒1型(B病毒)、流行性出血熱病毒。
2.細(xì)菌:沙門菌、布魯桿菌、志賀菌、結(jié)核分枝桿菌、鉤端螺旋體。
3.真菌:皮膚病原真菌。
4.寄生蟲:弓形蟲。第59頁/共119頁(二)實驗動物主要烈性傳染病病原體鼠痘病毒(小鼠脫腳病病毒)、兔出血癥(兔瘟)病毒、犬細(xì)小病毒(急性出血性腸炎)、犬瘟熱病毒、傳染性犬肝炎病毒。(三)引起實驗動物一般性疾病的病原體1.病毒——小鼠肝炎病毒、仙臺病毒、猴反轉(zhuǎn)錄D型病毒。2.細(xì)菌——多殺巴斯德桿菌、泰澤病原體、鼠棒狀桿菌、支原體。3.寄生蟲——多種體內(nèi)寄生蟲。第60頁/共119頁二、病毒性疾?。ㄒ唬┝馨图?xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎(LCM)
是一種人獸共患病,在實驗動物多呈隱性感染,小鼠感染后可不出現(xiàn)癥狀,但可通過胎盤傳給子代。感染該病毒的小鼠,是研究病毒特異性免疫耐受性疾病的理想動物模型。第61頁/共119頁1.病原學(xué)
淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒(LCMV)。屬砂粒病毒,呈圓形或橢圓形,單鏈RNA,有囊膜??稍陔u胚絨毛尿囊上增殖,但不產(chǎn)生可見痘斑,只有適應(yīng)生長后才產(chǎn)生細(xì)胞病變。LCM病毒對乙醚敏感,不耐熱,56℃1h,紫外線或0.1%甲醛都可滅活。第62頁/共119頁2.流行病學(xué)(1)傳染源:感染LCM病毒的野小鼠、無癥狀帶病毒小鼠。(2)傳播途徑:接觸帶病毒野小鼠或?qū)嶒炐∈蟮姆置谖?、排泄物、吸血昆蟲傳播,以及胎盤垂直傳播等。(3)易感者:小鼠、猴、豚鼠、大鼠、地鼠、兔、狗等,人亦易感。第63頁/共119頁
3.癥狀在實驗動物多呈隱性感染,小鼠感染后可不出現(xiàn)癥狀。人感染后表現(xiàn)類似流感樣癥狀,嚴(yán)重者侵犯中樞神經(jīng)引起腦膜炎等。4.診斷
LCM病毒通常是無癥狀感染。懷疑本病時,可將患病動物的血清、腦脊液或病變組織接種在SPF小鼠腦內(nèi),SPF小鼠4-5天后死亡。亦可用血清方法檢測LCM病毒抗體。第64頁/共119頁5.預(yù)防與控制嚴(yán)格防止野鼠和感染鼠等進(jìn)入動物室與實驗室。加強(qiáng)血清學(xué)監(jiān)測,消滅帶毒病鼠,也非常必要。第65頁/共119頁
(二)鼠痘
鼠痘又稱為小鼠傳染性脫腳病,是由鼠痘病毒感染引起的小鼠烈性傳染病,患病動物往往未出現(xiàn)癥狀即死亡,死亡率高達(dá)90%以上。第66頁/共119頁1.病原學(xué)
鼠痘病毒屬痘病毒科,雙鏈DNA結(jié)構(gòu),包膜上有血球凝集素,可凝集雞的紅細(xì)胞。鼠痘病毒與其他痘病毒之間的抗原關(guān)系密切,血清學(xué)上有明顯的交叉反應(yīng)。鼠痘病毒對干燥、低溫有較強(qiáng)的抵抗力,但可被100℃以上高溫及紫外線迅速殺死。第67頁/共119頁2.流行病學(xué)(1)傳染源:病小鼠、無癥狀帶病毒小鼠。
(2)傳播途徑:接觸病鼠患處滲出液、分泌
物及其污染物品。(3)易感動物:小鼠、尤其是A、C3H、DBA/2、BALB/c、CBA等品系。幼鼠和衰老小鼠對本病特別易感,且常呈致死性。但本病在野鼠中較少發(fā)生。第68頁/共119頁
3.癥狀
小鼠肢體和尾巴嚴(yán)重水腫、潰瘍,最后壞死脫落,故稱脫腳病。4.診斷
根據(jù)流行病學(xué)、癥狀特征、病毒分離鑒定、血清學(xué)檢查可作診斷。血清學(xué)檢查方法主要有酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)等。第69頁/共119頁
5.預(yù)防與控制
定期作血清學(xué)監(jiān)測,防止將傳染源引入動物種群和實驗室,對可疑小鼠要隔離檢疫,證實后應(yīng)消滅整個感染鼠群。一切可能受污染的物品要高壓消毒,房間用福爾馬林等消毒劑熏蒸。接種牛痘疫苗可預(yù)防此病。第70頁/共119頁(三)狂犬病
狂犬病又稱恐水癥,是一種由狂犬病病毒引起的,累及中樞神經(jīng)系統(tǒng)的急性傳染病。動物感染后,一般有兩種表現(xiàn)類型:狂暴型和麻痹型。人感染后出現(xiàn)高度興奮、恐懼不安、畏風(fēng)、流涎、恐水、吞咽困難、呼吸困難等癥狀,嚴(yán)重者癱瘓甚至死亡??袢?1頁/共119頁1.病原學(xué)
狂犬病病毒屬于RNA型的彈狀病毒科,病毒型似子彈,單鏈結(jié)構(gòu),表面有脂蛋白包膜。病毒對過氧化氫、高錳酸鉀、新潔爾滅、來蘇兒等消毒藥敏感。病毒不耐濕熱:100°C加熱2分鐘以及紫外線照射均能滅活,耐低溫,在4°C下可存活數(shù)月到1年。第72頁/共119頁2.傳染病學(xué)(1)傳染源:主要是犬、其次是攜帶病原的貓、豬及牛、馬等家畜和野獸等溫血動物。自然界中,以野生動物如狼、狐、吸血蝙蝠等為主。(2)傳播途徑:主要通過咬傷傳播,也可由帶病毒唾液經(jīng)各種傷口和抓傷、舔傷的黏膜和皮膚入侵。(3)易感者:人、各種畜類,尤其是犬科和貓科的動物。第73頁/共119頁3.癥狀動物:犬狂暴型、犬麻痹型。人感染后的臨床表現(xiàn):恐水、怕風(fēng)、恐懼不安、咽肌痙攣、進(jìn)行性癱瘓,甚至死亡。4.診斷
典型的癥狀結(jié)合病史,尸檢動物腦組織內(nèi)基氏小體可確診。第74頁/共119頁5.預(yù)防與控制
24小時內(nèi)注射狂犬疫苗。對可疑動物要隔離觀察,病死動物應(yīng)予焚毀或深埋處理。捕殺野犬、管理和免疫家犬和家畜(注射獸用狂犬病毒疫苗)。第75頁/共119頁(四)流行性出血熱
流行性出血熱為人獸共患??;引起該病的病毒主要存在于野生嚙齒類動物。在實驗動物,多呈隱性感染和持續(xù)帶病毒狀態(tài),可無明顯臨床癥狀和病理改變。第76頁/共119頁1.病原學(xué)
引起流行性出血熱的病毒屬漢坦病毒,單鏈RNA結(jié)構(gòu),有囊膜,可凝集鵝的紅血球。該病毒能在多種細(xì)胞中生長,且細(xì)胞病變不明顯。此病毒對環(huán)境和理化因素的抵抗力較差。
第77頁/共119頁2.流行病學(xué)(1)傳染源:主要是野鼠,以黑線姬鼠和褐家鼠為代表,可在實驗大鼠等嚙齒類動物中流行。近年發(fā)現(xiàn),該病毒可由實驗大鼠傳播給人。黑線姬鼠褐家鼠第78頁/共119頁(2)傳播途徑:該病主要以螨等吸血昆蟲為傳播媒介。含有病毒的血、尿等,污染人的破損處,亦使人患病。(3)易感者:主要是人,其次為大鼠、小鼠、豚鼠、兔等實驗動物。動物感染后可不發(fā)病,而人則發(fā)病。第79頁/共119頁
3.癥狀
人感染后出現(xiàn)頭痛、眼眶痛、腰痛等“三痛”癥狀,臉、脖子、胸部紅腫等“三紅”體征,經(jīng)過低血壓期、少尿期甚至尿閉期,最后到多尿期。有發(fā)熱、頭痛等類感冒癥狀,個別病例嚴(yán)重時并發(fā)急性心力衰竭,可導(dǎo)致死亡。第80頁/共119頁4.診斷多數(shù)易感動物對該病毒表現(xiàn)為無癥狀感染,其診斷主要靠血清特異性抗體檢測,也可在感染大鼠的肺組織中查出特異性病毒抗原。常用的方法有酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)和免疫熒光抗體試驗等。第81頁/共119頁
5.預(yù)防與控制
由于野鼠是本病的主要傳染源和病毒攜帶者,因此消滅野鼠,防止野鼠進(jìn)入動物飼養(yǎng)室和實驗室是預(yù)防該病的關(guān)鍵措施。定期做血清學(xué)檢查具有重要意義。無菌剖腹取胎術(shù)和屏障環(huán)境飼養(yǎng)可根除該病毒感染。第82頁/共119頁(五)兔瘟又名兔出血癥,是家兔的一種的急性烈性傳染病。由兔流行性出血熱病毒引起。常表現(xiàn)為突然倒地,抽搐,尖叫后死亡;病程稍慢的,體溫可升高到41℃以上,精神不振,食少,消瘦明顯,死亡前常呈興奮狀,鳴叫,肌肉震顫,呼吸急促,掙扎,狂奔等現(xiàn)象。第83頁/共119頁1.病原:
引起兔瘟的病原為病毒性出血癥病毒,該病毒能凝聚人和綿羊紅細(xì)胞。以人的“o”型紅細(xì)胞最敏感,此特點(diǎn)是與兔巴氏桿菌的鑒別診斷方法。2.流行病學(xué):
經(jīng)消化道、呼吸道、皮膚劃傷和交配傳染。主要侵害青年兔和成年兔,發(fā)病率和死亡率高。第84頁/共119頁3.癥狀:體溫升高、稽留熱,精神沉郁,死前體溫下降全身顫抖。4.病變:鼻腔、喉頭及氣管粘膜充血、瘀血和出血,氣管內(nèi)充滿白泡或粉紅色泡沫,肺嚴(yán)重瘀血和水腫;肝腫大,偶見小出血點(diǎn);腎瘀血腫大,胃粘膜脫落,十二指腸粘膜充血,腸腔內(nèi)充滿膠樣分泌物;懷孕母兔子宮粘膜充血、出血、胎兒死亡。第85頁/共119頁5.診斷根據(jù)流行病學(xué),臨床癥狀和病理變化一般能作出正確的診斷。6.防治封鎖;深埋病死兔;0.3%的過氧乙酸或2-3%氫氧化鈉消毒;免疫接種。第86頁/共119頁三、細(xì)菌性疾病
細(xì)菌性疾病的易感性不同,且存在種群、品系、性別、年齡的差異。其細(xì)菌性疾病具有不同程度的地域性、流行性、季節(jié)性和感染后免疫性。隨病原菌的毒力、動物的健康狀況及免疫力的不同,其流行性可表現(xiàn)為散發(fā)、暴發(fā)、大流行等形式。第87頁/共119頁
引發(fā)實驗動物感染性疾病的細(xì)菌大致可分為人獸共患病病原菌、動物致病菌和條件致病菌三大類。在動物實驗中,條件致病菌對實驗結(jié)果的影響最易被忽視,因而必須嚴(yán)格控制。對實驗動物的細(xì)菌性疾病一般不主張治療,因為藥物不能根除感染的病原菌,而使治愈動物成為新的傳染源。此外,藥物尚會改變動物的機(jī)能,從而影響實驗結(jié)果。因此,預(yù)防才是保證動物質(zhì)量的有效手段。第88頁/共119頁
(一)沙門菌病
實驗動物的沙門菌病為人獸共患病,主要由鼠傷寒沙門菌和腸炎沙門菌引起。1.病原學(xué)沙門菌屬革蘭氏陰性短桿菌,無芽孢、有鞭毛、能運(yùn)動。該菌不發(fā)酵乳糖和蔗糖,不凝固半乳糖,不液化明膠,不產(chǎn)生靛基質(zhì)。在營養(yǎng)瓊脂上生長良好。第89頁/共119頁2.流行病學(xué)(1)傳染源:攜帶鼠傷寒沙門菌和腸炎沙門菌的野鼠、蒼蠅、病鼠等。(2)傳播途徑:糞便污染墊料、飼料、飲用水后經(jīng)消化道感染。(3)易感者:大鼠、小鼠、豚鼠、兔。
第90頁/共119頁
3.癥狀主要表現(xiàn)為食少和腹瀉,急性暴發(fā)型可導(dǎo)致動物迅速死亡。4.診斷根據(jù)癥狀及細(xì)菌培養(yǎng)鑒定可診斷,如果能從動物體液、器官組織中分離出該菌,說明該菌已在動物體內(nèi)廣泛播散。5.預(yù)防與控制嚴(yán)防野鼠、防止蒼蠅、糞便污染、隔離和淘汰病鼠。
第91頁/共119頁(二)支原體病
支原體又稱菌形體、霉形體,是一種介于病毒和細(xì)菌之間的多形微生物。它可引起實驗動物、家畜、家禽和人類發(fā)生有關(guān)疾病。危害實驗動物的支原體有肺支原體、溶神經(jīng)支原體、關(guān)節(jié)炎支原體等。第92頁/共119頁1.病原學(xué)
支原體為革蘭氏陰性,高度多態(tài)且大小不一,無細(xì)胞壁,而僅在細(xì)胞質(zhì)表面有三層細(xì)胞膜;在合適的瓊脂培養(yǎng)基上可以形成約0.5mm直徑的荷包蛋形菌落。第93頁/共119頁2.流行病學(xué)(1)傳染源:攜帶病原體或已知患病的小鼠、大鼠。(2)傳播途徑:帶菌母鼠舔仔鼠、氣溶膠傳播,經(jīng)污染籠具間接接觸等。(3)易感動物:小鼠、大鼠。第94頁/共119頁
3.癥狀
肺支原體可引起化膿性鼻炎和慢性肺炎等呼吸系統(tǒng)疾??;有時并發(fā)中耳炎、內(nèi)耳炎引起實驗動物“歪頭病”,患鼠頭斜于患側(cè)轉(zhuǎn)圈走,提起鼠尾使之倒立,患鼠身體迅速旋轉(zhuǎn);肺支原體感染生殖道可致死胎或不育。
溶神經(jīng)支原體導(dǎo)致小鼠旋轉(zhuǎn)病,可出現(xiàn)頭部震顫、身體翻滾等癥狀,關(guān)節(jié)炎支原體主要侵襲大鼠,引起多發(fā)性關(guān)節(jié)炎。第95頁/共119頁4.診斷
分離培養(yǎng)支原體,間接血凝試驗、補(bǔ)體結(jié)合試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)等血清學(xué)方法,有助于確診。
預(yù)防與控制淘汰病鼠,使用屏障系統(tǒng)飼養(yǎng)。第96頁/共119頁第97頁/共119頁四、寄生蟲疾病
實驗動物寄生蟲病按寄生部位可分為體內(nèi)寄生蟲(原蟲、蠕蟲)和體外寄生蟲(昆蟲)兩大類。動物寄生蟲的種類繁多,感染較為普遍,且難以根除。既影響動物的質(zhì)量,干擾實驗結(jié)果,又威脅飼養(yǎng)和科研人員的健康。第98頁/共119頁
弓形蟲病
弓形蟲病又稱毒漿原蟲病,為人獸共患體內(nèi)寄生蟲病,由襲地弓形蟲引起。第99頁/共119頁1.病原學(xué)
襲地弓形蟲依其不同發(fā)育階段有滋養(yǎng)體、包囊、裂殖體、配子體和卵囊、滋養(yǎng)體和包囊出現(xiàn)在中間宿主和終宿主貓的體內(nèi),而裂殖體、配子體和卵囊則只出現(xiàn)在終宿主貓的體內(nèi)。第100頁/共119頁2.生活史
貓吞食含弓
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