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文檔簡介
植物生理學(xué)設(shè)計性實驗上課時間:周二第五組乙烯利對油桃生理指標(biāo)的影響一、實驗?zāi)康?、通過本實驗了解乙烯利對果蔬生理指標(biāo)的影響。2、掌握呼吸強度的測定方法。3、掌握多酚氧化酶的測定方法及分光光度計的使用方法。呼吸強度的測定通常是采用定量堿液吸收果蔬在一定時間內(nèi)呼吸所釋放出來的CO2,再用酸滴定剩余的堿,即可計算出呼吸所釋放出的CO2量,求出其呼吸強度。其單位為每kg每小時釋放出CO2毫克數(shù)。反應(yīng)如下:2NaOH+CO2→Na2CO3+H2ONa2CO3+BaCl2→BaCO3↓+2NaCl2NaOH+H2C2O4→Na2CO4+2H2O測定可分為氣流法和靜置法兩種。氣流法設(shè)備較復(fù)雜,結(jié)果準(zhǔn)確。靜置法簡便,但準(zhǔn)確性較差。由于實驗條件限制,本實驗采用靜置法
多酚氧化酶是一種含銅的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化生成醌。多酚氧化酶活性可以用比色法測量產(chǎn)物的形成,常用的底物如兒茶酚(鄰苯二酚)和多巴(3,4-二羥苯丙氨酸)。四實驗內(nèi)容1、呼吸強度的測定采用靜止法。吸取0.4mol?L-1的氫氧化鈉溶液25ml于培養(yǎng)皿中,立即放入干燥器中,把已稱重的果實(約1kg)放到干燥器中的隔架上,密封并記時,1h后,吸取10mLNaOH轉(zhuǎn)移到三角瓶中,再加入1.0ml的Bacl2溶液和兩滴酚酞,用以標(biāo)定好的0.1mol?L-1的草酸溶液滴定至終點,以不放樣品的空白組為對照,每個樣品重復(fù)三組,操作同上。呼吸強度的單位表示為CO2,mg?kg-1?h-1。按下式計算:呼吸強度(CO2,mg?kg-1?h-1)=0.1×(V樣品-V空白)×44×25/(w×1)式中:v樣品為樣品所消耗草酸的體積,單位mLv空白為空白組所消耗草酸的體積,單位mL44為co2的質(zhì)量分數(shù)25為NaoH的體積,單位mLw為樣品鮮重,單位g1為所用時間,1h實驗結(jié)果記錄在下表A:樣品管在525nm的吸光度;VT:提取酶液總體積,ml;W:
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