微生物學(xué)分類(lèi)與控制

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)分類(lèi)與控制

（辦）第一節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)控制

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物如受到病原微生物、寄生蟲(chóng)的污染，其正常狀態(tài)的平衡將遭致破壞，引起動(dòng)物發(fā)病，從而給動(dòng)物的生產(chǎn)及實(shí)驗(yàn)的正常進(jìn)行帶來(lái)嚴(yán)重影響。有的不立即發(fā)病，但處于可能發(fā)病的污染狀態(tài)，即機(jī)會(huì)致病因子的潛在性感染時(shí)，如再施加做為附加因素的實(shí)驗(yàn)處理，動(dòng)物可能發(fā)病。一.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物質(zhì)量控制的原因

1．引起實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的疾病和死亡

傳染病是引起實(shí)驗(yàn)動(dòng)物疾病和死亡、影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量的主要原因，這些病原體包括病毒、細(xì)菌和寄生蟲(chóng)。某些烈性傳染病如鼠痘、兔出血癥、犬細(xì)小病毒性腸炎等的流行，可導(dǎo)致動(dòng)物大批死亡或質(zhì)量下降，從而給動(dòng)物的生產(chǎn)和實(shí)驗(yàn)的正常進(jìn)行帶來(lái)嚴(yán)重影響。

2.干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物和寄生蟲(chóng)感染可不同程度干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果，從而影響研究工作的準(zhǔn)確性和可靠性，甚至得出錯(cuò)誤的結(jié)論。隱性感染常導(dǎo)致動(dòng)物生理生化指標(biāo)的改變，使實(shí)驗(yàn)得不到應(yīng)有的結(jié)果?；蛞?qū)嶒?yàn)處置，動(dòng)物抵抗力下降，使隱性感染顯性化，導(dǎo)致疾病的發(fā)生。掠奪宿主的營(yíng)養(yǎng);體外寄生蟲(chóng)對(duì)動(dòng)物的騷擾;對(duì)宿主機(jī)體產(chǎn)生機(jī)械性損傷;對(duì)宿主產(chǎn)生毒性作用;對(duì)宿主生理、生化和免疫系統(tǒng)的影響。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物感染寄生蟲(chóng)后，不僅蟲(chóng)體對(duì)機(jī)體造成一定的損害，動(dòng)物機(jī)體也對(duì)蟲(chóng)產(chǎn)生反應(yīng)，使動(dòng)物機(jī)體的生理、生化及免疫學(xué)指標(biāo)發(fā)生改變，從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

4．影響生物制品的質(zhì)量

病原微生物污染了細(xì)胞培養(yǎng)物、腫瘤移植物或以動(dòng)物組織和細(xì)胞為生產(chǎn)原料的生物制品，不僅干擾實(shí)驗(yàn)，而且還可將病原擴(kuò)散，以至危害人類(lèi)的健康。如果實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是用于生產(chǎn)生物制品的目的，其來(lái)源必須擺脫大量的能引發(fā)人類(lèi)潛在人獸共患病的、帶有特別病原體的動(dòng)物群體。上世紀(jì)30年代美國(guó)的“磺胺”事件、50年代法國(guó)的“有機(jī)錫”事件、60年代德國(guó)的“反應(yīng)停”事件等，均導(dǎo)致大量的人員死亡或殘疾。上世紀(jì)80年代初，我國(guó)最著名的克山病研究科學(xué)家由于使用了不合格的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，研究成果沒(méi)有得到世界同行的認(rèn)可。我國(guó)最有價(jià)值的新藥——青蒿素，也同樣由于使用了不合格的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物而不能進(jìn)入國(guó)際市場(chǎng)，被國(guó)外同行搶先注冊(cè)，失去了獨(dú)立知識(shí)產(chǎn)權(quán)。

隨著現(xiàn)代科學(xué)的發(fā)展和西方動(dòng)物保護(hù)主義運(yùn)動(dòng)的影響，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)已從過(guò)去注重于動(dòng)物的飼養(yǎng)管理和實(shí)驗(yàn)操作，愈來(lái)愈集中于動(dòng)物的福利和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的質(zhì)量。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用總量下降，高質(zhì)量實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用量增加

早在七十年代，發(fā)達(dá)國(guó)家的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在使用量上已經(jīng)趨于平衡。但是，高質(zhì)量實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的使用數(shù)量呈上升趨勢(shì)，普通級(jí)、清潔級(jí)動(dòng)物逐漸被SPF級(jí)取代。目前發(fā)達(dá)國(guó)家使用的大、小鼠等小型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物大多為SPF級(jí).2005年在全國(guó)基本普及使用清潔級(jí)實(shí)驗(yàn)大鼠、小鼠。某些重點(diǎn)科研項(xiàng)目用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，達(dá)到SPF級(jí)水平。

1.感染源內(nèi)源性外源性2.傳播途徑:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物;生物材料;工作人員;寵物；材料和設(shè)備3.易感動(dòng)物

二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物和寄生蟲(chóng)感染的基本要素流行性出血熱弓形蟲(chóng)病淋巴細(xì)胞脈絡(luò)從腦膜炎沙門(mén)菌病狂犬病猴B病毒感染猴結(jié)核病1.重要的人獸共患病鼠痘兔出血癥（兔瘟）2.主要的烈性傳染病鼠肝炎病毒感染仙臺(tái)病毒感染鼠肺支原體病嗜肺巴斯德桿菌病小鼠呼腸孤3型病毒感染球蟲(chóng)病犬細(xì)小病毒感染犬瘟熱3.常見(jiàn)的微生物和寄生蟲(chóng)感染

不同等級(jí)嚙齒類(lèi)、兔、犬和猴等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物要求排除的細(xì)菌、病毒、寄生蟲(chóng)應(yīng)根據(jù)國(guó)家技術(shù)監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布的有關(guān)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)等級(jí)及監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)(GB14922.2—2001、GB14922.1—2001)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物和寄生蟲(chóng)控制國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB14922-1994《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)和寄生蟲(chóng)學(xué)監(jiān)測(cè)等級(jí)（嚙齒類(lèi)和兔類(lèi)）》將我國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為四級(jí)，即一級(jí)動(dòng)物（普通級(jí)）、二級(jí)動(dòng)物（清潔動(dòng)物）、三級(jí)動(dòng)物（無(wú)特殊病原體動(dòng)物）和四級(jí)動(dòng)物（無(wú)菌動(dòng)物）。GB14922.2-2001《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)等級(jí)及監(jiān)測(cè)》(2002年5月1日開(kāi)始實(shí)施)新標(biāo)準(zhǔn)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物等級(jí)進(jìn)行了重新設(shè)定，將實(shí)驗(yàn)小鼠和大鼠的微生物學(xué)等級(jí)分為清潔級(jí)、無(wú)特定病原體級(jí)（SPF）和無(wú)菌級(jí)，取消了普通級(jí)。豚鼠、地鼠和兔仍保留四級(jí)。犬和猴分為普通級(jí)和SPF級(jí)。

一、普通級(jí)動(dòng)物定義普通級(jí)動(dòng)物（ConventionalAnimalCV）是在微生物學(xué)控制上要求最低的動(dòng)物，它要求不攜帶人獸共患病和動(dòng)物烈性傳染病的病原。如鼠痘病毒、流行性出血熱病毒、弓形體等，飼養(yǎng)于普通環(huán)境中。應(yīng)用：舉例說(shuō)明二、清潔級(jí)動(dòng)物定義

清潔級(jí)動(dòng)物（Cleananimal，CL）是指除普通動(dòng)物應(yīng)排除的病原體外，不攜帶對(duì)動(dòng)物健康危害大和對(duì)科學(xué)研究干擾較大的病原的動(dòng)物，如鼠痘病毒、鼠肝炎病毒、仙臺(tái)病毒、體外寄生蟲(chóng)等，飼養(yǎng)于屏障環(huán)境。應(yīng)用：舉例說(shuō)明應(yīng)用

國(guó)際上普遍認(rèn)為CL動(dòng)物僅適合于短期或部分科研試驗(yàn)。根據(jù)國(guó)外實(shí)驗(yàn)動(dòng)物工作發(fā)展及國(guó)內(nèi)的具體條件，CL動(dòng)物近年來(lái)在我國(guó)得到了廣泛的應(yīng)用。它較普通動(dòng)物健康，又較SPF易達(dá)到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中可免受動(dòng)物疾病的干擾，其敏感性及重復(fù)性亦較好。因此，我國(guó)針對(duì)自己的實(shí)際情況認(rèn)為這類(lèi)動(dòng)物目前可適用于大多數(shù)科研實(shí)驗(yàn)，應(yīng)是國(guó)內(nèi)科研工作主要要求的標(biāo)準(zhǔn)級(jí)別的動(dòng)物，可應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域藥物安全評(píng)價(jià)：實(shí)驗(yàn)?zāi)芊癯掷m(xù)取決于污染的可能性老年病學(xué)研究：SPF動(dòng)物的壽命普遍超過(guò)普通動(dòng)物免疫學(xué)研究：免疫缺陷動(dòng)物只有SPF級(jí)或以上級(jí)別動(dòng)物才能保種、繁殖

四、無(wú)菌動(dòng)物

定義

無(wú)菌動(dòng)物（Germ-FreeAnimal,GF）是指用現(xiàn)有的監(jiān)測(cè)技術(shù)在動(dòng)物體內(nèi)外的任何部位，均檢測(cè)不出任何活的微生物和寄生蟲(chóng)的動(dòng)物。飼養(yǎng)于隔離環(huán)境，屬四級(jí)動(dòng)物。應(yīng)用：舉例說(shuō)明無(wú)菌動(dòng)物的發(fā)展過(guò)程1895—1910年解決了無(wú)菌生命能否生存的問(wèn)題Pasteur認(rèn)為動(dòng)物沒(méi)有腸道菌參與不能生存。生物學(xué)家NenK提出了相反的看法，由此開(kāi)展了一場(chǎng)學(xué)術(shù)上的爭(zhēng)論。十年后，1895年Nuttall和Thierfelder經(jīng)剖腹產(chǎn)，用牛奶飼喂獲得了無(wú)菌豚鼠，第八天后處死，腸道內(nèi)未檢出細(xì)菌。1898年Scottellies獲得了無(wú)菌雞，無(wú)菌環(huán)境中養(yǎng)活了17天，至此建立了無(wú)菌生命可以存活的論點(diǎn)。無(wú)菌動(dòng)物的特點(diǎn)（一）形態(tài)學(xué)改變消化系統(tǒng)：無(wú)菌動(dòng)物盲腸及其內(nèi)容物重量可達(dá)體重25%，多數(shù)情況下，無(wú)菌動(dòng)物盲腸是普通動(dòng)物的5—10倍。無(wú)菌動(dòng)物由于盲腸膨大，腸壁菲薄，常易發(fā)生腸扭轉(zhuǎn)導(dǎo)致腸壁破裂而死亡。有關(guān)盲腸膨大原因尚無(wú)定論。血液循環(huán)系統(tǒng)：心臟相對(duì)變小，白細(xì)胞數(shù)少，且數(shù)量波動(dòng)范圍小，與無(wú)病原體入侵有關(guān)。免疫系統(tǒng)：由于無(wú)菌動(dòng)物幾乎沒(méi)有受過(guò)抗原刺激，其免疫機(jī)能基本上處于原始狀態(tài)。胸腺中網(wǎng)狀上皮細(xì)胞較大，其胞漿內(nèi)泡狀結(jié)構(gòu)和溶酶體較少，胸腺和淋巴結(jié)處于不活躍狀態(tài)，脾臟變小。（二）生理學(xué)改變免疫功能：由于網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)、淋巴組織發(fā)育不良，淋巴小結(jié)內(nèi)缺乏生發(fā)中心，產(chǎn)生γ-球蛋白的能力很弱。血清中IgM、IgG水平低，免疫功能處于原始狀態(tài)，應(yīng)答速度慢，過(guò)敏反應(yīng)、對(duì)異體移植的排斥反應(yīng)以及自身免疫現(xiàn)象消失或減弱。用低分子無(wú)抗原飼料飼喂無(wú)菌動(dòng)物時(shí)，血清中幾乎不存在γ-球蛋白和特異性抗體。生長(zhǎng)率：無(wú)菌禽類(lèi)>普通禽類(lèi)；無(wú)菌大小鼠≈普通大小鼠無(wú)菌豚鼠、家兔<普通豚鼠、家兔繁殖率：規(guī)律同生長(zhǎng)率代謝：血中含氮量少，腸管對(duì)水的吸收率低，代謝周期比普通動(dòng)物長(zhǎng)。營(yíng)養(yǎng)：無(wú)菌動(dòng)物體內(nèi)不能合成VB和VK，易發(fā)生缺乏癥。抗輻射能力：無(wú)菌動(dòng)物能力強(qiáng)于普通動(dòng)物，無(wú)菌小鼠抗實(shí)驗(yàn)性燙傷引起的休克死亡能力也強(qiáng)于普通小鼠。壽命：無(wú)菌動(dòng)物>普通動(dòng)物無(wú)菌動(dòng)物的應(yīng)用在微生物學(xué)研究中的應(yīng)用在免疫學(xué)研究中的應(yīng)用在放射醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用在營(yíng)養(yǎng)、代謝研究中的應(yīng)用在老年病學(xué)研究中的應(yīng)用在心血管疾病研究中的應(yīng)用在毒理學(xué)研究中的應(yīng)用在腫瘤學(xué)研究中的應(yīng)用在宇航醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用在寄生蟲(chóng)學(xué)研究中的應(yīng)用在口腔醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用抗體制備研究普通動(dòng)物體內(nèi)細(xì)菌種類(lèi)多，很難制備較純的抗體;無(wú)菌動(dòng)物缺乏抗原刺激，免疫系統(tǒng)處于“休眠”狀態(tài),對(duì)外來(lái)刺激，有迅速、單一和持久作出反應(yīng)的特性，如果接種單一的菌株，會(huì)產(chǎn)生較純的、高效價(jià)的、且不會(huì)污染其他微生物的抗體。五、悉生動(dòng)物(gnotobioticanimal,GN)

悉生動(dòng)物也稱已知菌動(dòng)物或已知菌叢動(dòng)物，是指在無(wú)菌動(dòng)物體內(nèi)植入已知微生物的動(dòng)物。屬四級(jí)動(dòng)物，飼養(yǎng)于隔離系統(tǒng)。分為單菌、雙菌和多菌動(dòng)物。悉生動(dòng)物的特性悉生動(dòng)物腸道內(nèi)存在能合成某種維生素和氨基酸的細(xì)菌，不象GF動(dòng)物發(fā)生維生素缺乏癥，生活力較強(qiáng)，抵抗力明顯增加，易于飼養(yǎng)管理。中國(guó)藥檢所利用五聯(lián)菌悉生動(dòng)物（大腸埃希氏桿菌、表皮葡萄球菌、白色葡萄球菌、糞鏈球菌和乳酸桿菌）可替代無(wú)菌動(dòng)物進(jìn)行藥物檢定。悉生動(dòng)物在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用微生物學(xué)研究在無(wú)菌動(dòng)物斷奶前后，接種一種或多種菌，可觀察這些細(xì)菌對(duì)機(jī)體的作用。了解細(xì)菌之間及細(xì)菌與機(jī)體之間相互關(guān)系和菌群失調(diào)現(xiàn)象。觀察機(jī)體、微生物、致病因子三方面相互作用的關(guān)系。第三節(jié)潔凈動(dòng)物與普通動(dòng)物的

特性比較

潔凈動(dòng)物是指來(lái)源于剖腹產(chǎn)，實(shí)行嚴(yán)格的微生物控制，飼養(yǎng)于空氣凈化設(shè)施內(nèi)的動(dòng)物，主要包括：清潔動(dòng)物、SPF動(dòng)物、悉生動(dòng)物和無(wú)菌動(dòng)物。一、各等級(jí)動(dòng)物的相關(guān)關(guān)系二、微生物控制比較

由于動(dòng)物分類(lèi)等級(jí)不同，因而其微生物控制程度也不一致，與之相對(duì)應(yīng)的動(dòng)物飼養(yǎng)環(huán)境及飼養(yǎng)管理方法也各不相同。

按微生物控制程度的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分類(lèi)原則三、對(duì)科研實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響的比較四等級(jí)動(dòng)物優(yōu)缺點(diǎn)比較四、如何選擇不同等級(jí)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物？

GF、GN動(dòng)物在絕對(duì)屏障內(nèi)維持，管理復(fù)雜，無(wú)菌狀態(tài)的保持難、產(chǎn)量低、價(jià)格高，實(shí)際應(yīng)用有限。GN動(dòng)物多用于研究微生物與微生物、微生物與宿主間相互關(guān)系的動(dòng)物模型。SPF動(dòng)物在相對(duì)屏障中維持，易管理、產(chǎn)量大、價(jià)格低。因其不攜帶病原體，不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，在發(fā)達(dá)國(guó)家己廣泛應(yīng)用，是目前國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)級(jí)別的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。等級(jí)動(dòng)物優(yōu)缺點(diǎn)比較CL動(dòng)物近年來(lái)在我國(guó)得到了廣泛的應(yīng)用。它較普通動(dòng)物健康，又較SPF易達(dá)到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中可免受動(dòng)物疾病的干擾，其敏感性及重復(fù)性亦較好，是國(guó)內(nèi)科研工作主要要求的標(biāo)準(zhǔn)級(jí)別的動(dòng)物，可應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域。選擇標(biāo)準(zhǔn)

對(duì)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物學(xué)級(jí)別選擇，應(yīng)根據(jù)其各級(jí)動(dòng)物的特點(diǎn)、應(yīng)用范圍及課題的水平高低，選用相匹配的微生物學(xué)級(jí)別的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。一般而言，教學(xué)示范選用普通動(dòng)物，清潔動(dòng)物是國(guó)內(nèi)科研工作要求的標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物，適合于大多數(shù)科研課題，而SPF動(dòng)物則是國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，對(duì)于一些具有國(guó)際交流意義的重大課題，最好選用SPF動(dòng)物，但無(wú)菌及悉生動(dòng)物為非常規(guī)動(dòng)物，僅在特殊課題需要時(shí)才選用。

注：“+”可能或必須用；“-”不可能或適用；“*”不用或不能用不同等級(jí)動(dòng)物在生命科學(xué)的應(yīng)用

第四節(jié)潔凈動(dòng)物的培育及飼養(yǎng)管理(一)無(wú)菌動(dòng)物的培育

主要采用剖腹產(chǎn)技術(shù)。對(duì)于小動(dòng)物，多用子宮摘除術(shù)；大動(dòng)物，多采用子宮切開(kāi)術(shù)器械消毒剖腹產(chǎn)母鼠及帶乳母鼠的準(zhǔn)備子宮摘除術(shù)胎仔處理剖腹產(chǎn)仔鼠的哺育無(wú)菌檢測(cè)在無(wú)菌隔離器中進(jìn)行一、無(wú)菌動(dòng)物的培育及飼養(yǎng)管理剖腹產(chǎn)母鼠與帶乳鼠的準(zhǔn)備選擇合適的母鼠作為剖腹產(chǎn)母鼠，按實(shí)驗(yàn)要求，10～12周齡鼠，雌雄鼠以1：1合籠，每日早晚兩次觀察有無(wú)陰道栓，或用陰道拭子涂片染色，檢查其中有無(wú)精子。以出現(xiàn)陰道栓或發(fā)現(xiàn)精子作為妊娠半天計(jì)算。剖腹產(chǎn)手術(shù)應(yīng)在妊娠19.5天為好,另選擇無(wú)菌母鼠作為代乳鼠。剖腹產(chǎn)母鼠與帶乳鼠應(yīng)同步交配.帶乳鼠較剖腹產(chǎn)鼠提前2-3天交配。剖腹產(chǎn)仔鼠的哺育（1）人工哺乳（2）代乳方法由無(wú)菌子宮摘除術(shù)獲得胎仔，由哺乳中的無(wú)菌小鼠給予代乳。乳母鼠的選擇一般要考慮其綜合性能，選擇母性強(qiáng)的個(gè)體作為乳母鼠。①將代乳母鼠仔鼠留下2—3只，其他棄掉，優(yōu)秀的可棄去全部親生仔鼠。②將代乳母鼠籠內(nèi)的墊料充分分散到被代乳仔鼠身上，悄悄地置于代乳鼠腋下。③一但確認(rèn)被代乳鼠吸吮代乳鼠的乳汁，就將代乳鼠自產(chǎn)仔鼠棄掉。④代乳4周齡即可離乳。無(wú)菌檢測(cè)

對(duì)代乳母鼠、剖腹產(chǎn)仔鼠的無(wú)菌檢測(cè)，應(yīng)在手術(shù)后的7、12、25天進(jìn)行，對(duì)了解動(dòng)物體內(nèi)的微生物狀況，保證動(dòng)物的質(zhì)量極為重要。（二）悉生動(dòng)物的培育

傳入授入已知微生物材料無(wú)菌隔離器無(wú)菌動(dòng)物二、SPF動(dòng)物、清潔動(dòng)物培育1、種群來(lái)源來(lái)源于無(wú)菌動(dòng)物。即將無(wú)菌動(dòng)物或悉生動(dòng)物飼養(yǎng)于屏障系統(tǒng)。培育SPF動(dòng)物時(shí)是以卵或子宮無(wú)病原體為前提，防止某些病原體通過(guò)胎盤(pán)垂直傳染給胎兒。2、飼養(yǎng)設(shè)施SPF動(dòng)物屏障系統(tǒng)清潔動(dòng)物屏障系統(tǒng)3、飼養(yǎng)管理嚴(yán)格的微生物學(xué)檢測(cè)

（一）監(jiān)測(cè)意義實(shí)施微生物學(xué)與寄生蟲(chóng)學(xué)監(jiān)測(cè)，是保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量及標(biāo)準(zhǔn)化的必要手段。通過(guò)監(jiān)測(cè)可掌握動(dòng)物群中病毒、細(xì)菌、寄生蟲(chóng)的流行情況，及時(shí)診斷感染性疾病，發(fā)現(xiàn)并控制其傳播，以保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的健康。

第五節(jié)、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)和寄生蟲(chóng)學(xué)質(zhì)量監(jiān)測(cè)（二）監(jiān)測(cè)內(nèi)容

不同級(jí)別實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物和寄生蟲(chóng)監(jiān)測(cè)內(nèi)容不同，見(jiàn)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GBl4922.1—2001和GBl4922.2—2001。（三）檢驗(yàn)方法目前使用國(guó)標(biāo)推薦的方法和詳細(xì)檢驗(yàn)程序。病原菌以分離培養(yǎng)鑒定為主，病毒以血清學(xué)和病原學(xué)檢測(cè)為主，寄生蟲(chóng)以鏡檢為主。病毒常用檢測(cè)方法有血清學(xué)和病原學(xué)檢測(cè)血清學(xué)常采用的方法：血球凝集試驗(yàn)（HA）血球凝集抑制試驗(yàn)（HI）免疫熒光試驗(yàn)（IFA）免疫酶染色試驗(yàn)（IEA）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）病原學(xué)檢查包括：病毒分離培養(yǎng)與鑒定；病毒顆粒、抗原或核酸的檢出；抗體產(chǎn)生試驗(yàn)；潛在病毒的激活等試驗(yàn)。

細(xì)菌學(xué)常用的檢測(cè)方法是進(jìn)行病原菌的分離培養(yǎng)真菌監(jiān)測(cè)主要采用分離培養(yǎng)法（沙式培養(yǎng)基）菌落特點(diǎn)，鏡下染色檢查，生化反應(yīng)和免疫學(xué)方法寄生蟲(chóng)監(jiān)測(cè)采用肉眼觀和鏡下觀察分為體表和腸道寄生蟲(chóng)檢測(cè)（四）檢驗(yàn)程序

抽取動(dòng)物↓編號(hào)↓體外檢查↓麻醉↓取血——血清檢查病毒抗體或其他病原的抗體↓體外寄生蟲(chóng)檢查——皮膚取樣——真菌檢查↓臟器、腸內(nèi)容物、——無(wú)菌解剖——?dú)夤芊置谖?、腸內(nèi)容物、糞便，體內(nèi)寄生蟲(chóng)檢查↓臟器分離細(xì)菌檢測(cè)↓檢測(cè)報(bào)告

規(guī)定了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量判定原則，即：經(jīng)檢測(cè)，如有一項(xiàng)指標(biāo)不符合該級(jí)別標(biāo)準(zhǔn)要求，則判為不符合該級(jí)別標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)檢驗(yàn)結(jié)果，由檢驗(yàn)人員及其負(fù)責(zé)人簽發(fā)檢測(cè)報(bào)告。（五）報(bào)告第六節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的衛(wèi)生防疫與隔離措施

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（除大型或稀有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物），不應(yīng)采取疫苗接種或藥物治療第一，應(yīng)用疫苗或治療制劑可能干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果，而使實(shí)驗(yàn)無(wú)效。如使用抗生素或磺胺類(lèi)藥物可使動(dòng)物的肝、膽、腎等臟器組織產(chǎn)生毒性損傷，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；第二，經(jīng)過(guò)治療或免疫的動(dòng)物，外表健康，但仍帶菌或帶毒，成為潛在的傳染源。如沙門(mén)氏菌即使采取藥物治療，也不能使其從動(dòng)物群中徹底根除。又如小鼠肝炎病毒，雖用疫苗免疫可以產(chǎn)生免疫力，但有些小鼠仍可帶毒，使其在小鼠群中長(zhǎng)期存在；第三，對(duì)小型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，采取治療措施，尤其是需用特殊藥物的個(gè)體治療，經(jīng)濟(jì)上也不合算。

一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的防疫原則隔離飼養(yǎng)：各種動(dòng)物要分開(kāi)飼養(yǎng)，嚴(yán)禁混養(yǎng)在一起。防止交叉感染。引進(jìn)動(dòng)物要嚴(yán)格檢疫：依據(jù)國(guó)家檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，要從具有動(dòng)物質(zhì)量合格證的單位引進(jìn)動(dòng)物。堅(jiān)持衛(wèi)生消毒制度：杜絕各種微生物的侵入和繁殖。其中定期對(duì)動(dòng)物房舍和飼養(yǎng)用具的消毒是必不可少的。飼養(yǎng)管理人員要定期健康檢查，有人畜共患病者，應(yīng)調(diào)離與動(dòng)物接觸的工作崗位。保種單位要對(duì)保種的動(dòng)物定期進(jìn)行質(zhì)量檢查，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及時(shí)更新種群。對(duì)國(guó)標(biāo)要求必須實(shí)施預(yù)防接種的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物要定期進(jìn)行免疫接種。嚴(yán)格防止野生動(dòng)物侵入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室，對(duì)死亡動(dòng)物進(jìn)行無(wú)害化處理。二、平時(shí)的預(yù)防措施①飼養(yǎng)人員應(yīng)嚴(yán)格按照不同等級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)管理和衛(wèi)生防疫制度和操作規(guī)程，認(rèn)真做好各項(xiàng)記錄，發(fā)現(xiàn)情況，及時(shí)報(bào)告。②實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施周?chē)鷳?yīng)無(wú)傳染源，不得飼養(yǎng)非實(shí)驗(yàn)用家畜家禽，防止昆蟲(chóng)及野生動(dòng)物侵入。③堅(jiān)持平時(shí)衛(wèi)生消毒制度，降低環(huán)境設(shè)施中的病原體含量。④不從疫區(qū)引進(jìn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

⑤各類(lèi)動(dòng)物應(yīng)分室飼養(yǎng)，以防交叉感染。飼養(yǎng)室嚴(yán)禁非飼養(yǎng)人員出入和各類(lèi)人員互串，購(gòu)買(mǎi)或領(lǐng)用動(dòng)物者不得進(jìn)入飼養(yǎng)室內(nèi)