血栓與止血相關(guān)檢查標(biāo)準(zhǔn)及質(zhì)量控制

血栓與止血相關(guān)檢查標(biāo)準(zhǔn)及質(zhì)量控制`精選課件血栓與止血相關(guān)檢查標(biāo)準(zhǔn)及質(zhì)量控制一、標(biāo)準(zhǔn)化及質(zhì)量控制的基本概念二、血栓與止血試驗的標(biāo)準(zhǔn)化及質(zhì)量控制三、常規(guī)凝血試驗的質(zhì)量控制精選課件

一標(biāo)準(zhǔn)化及質(zhì)量控制的基本概念精選課件（一）精密度（precision）和準(zhǔn)確度（accuracy）

1、精密度即實驗結(jié)果的可重復(fù)性。

（1）特別制備的標(biāo)本進行重復(fù)試驗（參考標(biāo)準(zhǔn)，質(zhì)控血漿）。

（2）受檢標(biāo)本的重復(fù)性試驗。2、準(zhǔn)確度指受檢標(biāo)本與真值的接近程度，室間質(zhì)控標(biāo)本的檢測。精選課件（二）標(biāo)準(zhǔn)物、參考物、校準(zhǔn)物和質(zhì)控物1、標(biāo)準(zhǔn)物（referencestandardmalerial）：是一種化學(xué)物質(zhì)或物理材料，具有唯一指定值。多由WHO或ICSH等國際組織決定的。主要用于國家參考物或校準(zhǔn)物的控制。精選課件2、參考物（referencematerial）：是一種物質(zhì)（血漿）或材料（濾光片），符合國家或國際參考標(biāo)準(zhǔn)，用于保證常規(guī)檢測工作的準(zhǔn)確性。（二）標(biāo)準(zhǔn)物、參考物、校準(zhǔn)物和質(zhì)控物精選課件3、校準(zhǔn)物（calibrator）：符合國家或國際參考標(biāo)準(zhǔn)的性能，適用于校準(zhǔn)儀器或調(diào)整測量值以獲得準(zhǔn)確結(jié)果。（二）標(biāo)準(zhǔn)物、參考物、校準(zhǔn)物和質(zhì)控物精選課件4、質(zhì)控物：適用于核查常規(guī)檢驗的精密度（一般有正常、異常、嚴(yán)重異常三種質(zhì)控物）。（二）標(biāo)準(zhǔn)物、參考物、校準(zhǔn)物和質(zhì)控物精選課件（三）、室間質(zhì)量控制對于血栓止血檢驗的室內(nèi)質(zhì)量控制計劃必須考慮下列4大因素：標(biāo)本、試劑、設(shè)備與儀器及技術(shù)，其中每一步影響試驗質(zhì)量的因素都可能最終影響檢測結(jié)果。精選課件1、室內(nèi)質(zhì)控的內(nèi)容

每次測定均同時檢查正常和異常質(zhì)控物，是室內(nèi)質(zhì)控的主要方法。（三）、室間質(zhì)量控制精選課件《1》室間質(zhì)量控制是通過參加室間質(zhì)量評價或稱為室間質(zhì)量保證（externalgualityassurance,EQA）來實現(xiàn)的，EQA是另一種提供結(jié)果準(zhǔn)確度的方法，能反映出實驗室的準(zhǔn)確度和精密度。EQA原則是由專門機構(gòu)以同一物質(zhì)向各個實驗室發(fā)放，然后分析參加實驗室回報的數(shù)據(jù)，并與總體均值或組內(nèi)均值比較，計算偏移百分比。2、室間質(zhì)量控制方式（三）室間質(zhì)量控制精選課件《2》失控分析的基本原則（1）結(jié)果超過±2S。（2）連續(xù)幾個數(shù)據(jù)呈傾向性升高或減低。（3）20次數(shù)據(jù)中有2次或以上數(shù)據(jù)位于＋2S或－2S以外。2、室間質(zhì)量控制方式（三）、室間質(zhì)量控制精選課件二、血栓與止血試驗的標(biāo)準(zhǔn)化及質(zhì)量控制精選課件血栓與止血試驗的標(biāo)準(zhǔn)化是指對檢測標(biāo)本、試劑、儀器、技術(shù)和操作等制定統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，按照標(biāo)準(zhǔn)的要求對試驗進行科學(xué)管理，以減少誤差，提高試驗的精密度、準(zhǔn)確性和可靠性。精選課件（一）

現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)〔國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會（ICSH）、國際血栓與止血委員（ICTH）或美國臨床生物化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會（NCCLS）規(guī)定〕精選課件1、凝血酶原時間（PT）、對于PT試驗，規(guī)定：（1）用不同級別的凝血活酶國參考品（如原級凝血活酶參考品67/40，次級參考品68/434等），校正本土制備或生產(chǎn)的組織凝血活酶參考物，本土生產(chǎn)的凝血活酶試劑必須標(biāo)有國際敏感指數(shù)（ISI）值；（2）結(jié)果的報告方式棄用“活動度”，采用“秒（s）”和“患者PT與正常PT比率（PRT）”，在口服華法林類藥物監(jiān)控時，采用“國際標(biāo)準(zhǔn)化比值（INR）”。（一）

現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)精選課件2、APTT試驗，推薦的方法與儀器要求基本同PT試驗。但應(yīng)該注意，不同的部分凝血活酶、不同的活化劑和不同的激活時間，對各種因子缺陷、對肝素和狼瘡抗凝物質(zhì)的敏感性差異很大，應(yīng)根據(jù)不同的檢測目的選擇相應(yīng)敏感的凝血活酶或活化劑。（一）

現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)精選課件3、

纖維蛋白原試驗，世界衛(wèi)生組織的生物標(biāo)準(zhǔn)化委員會已將1992年問世的纖維蛋白原標(biāo)準(zhǔn)品89/644定為國際參考品（IRP），并推薦采用改良Jacobsson法和IRP來標(biāo)準(zhǔn)化本地區(qū)的次級標(biāo)準(zhǔn)品。在常規(guī)纖維蛋白原含量測定時建議使用Clauss法。需要注意的是，目前國內(nèi)使用的某些儀器可以根據(jù)PT的變化換算出纖維蛋白原含量，這種方法只能對纖維蛋白原含量作出大致估計，當(dāng)含量明顯異常特別是明顯減低時，不能準(zhǔn)確判斷。（一）

現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)精選課件根據(jù)手術(shù)前出血、凝血時間測定結(jié)果評估患者是否會術(shù)中出血，國家衛(wèi)生部已行文規(guī)定用“APTT、凝血酶原時間試驗和血小板計數(shù)聯(lián)合檢測，如臨床有出血史時另加模板式（出血時間測定器）法進行出血時間檢測”。（二）

關(guān)于出血、凝血時間測定

精選課件1、采血時間：清晨空腹最佳，病人服藥情況。2、采血技術(shù)要點：止血帶壓力盡量小，束縛時間盡量短。防止促纖溶物質(zhì)釋放。以采取肘靜脈血為主，嬰兒采血，頸靜脈為主，但有嚴(yán)重血小板減少和自發(fā)性出血傾向者應(yīng)慎重處理。采血必須準(zhǔn)確順利，前2ml血液不宜且于檢查，盡量避免組織因子污染、溶血、凝血，以及氣泡產(chǎn)生。(三)

血栓與止血試驗的分析前質(zhì)量控制

[采血]精選課件[采血]3、標(biāo)本放置時間：采血后15min~30min分離處理為宜，分離血漿后應(yīng)在4h以內(nèi)完成試驗（25℃條件下）-20℃保存1周，-80℃保存一年以上，一般不宜于4℃（纖原、FVII)。4、樣本在室溫暫時放置，需用塞子塞上，否則血漿pH有明顯改變，影響結(jié)果。(三)

血栓與止血試驗的分析前質(zhì)量控制

精選課件[抗凝劑]1、抗凝劑種類（1）100mmol/L枸椽酸鈉（2H2O，5H2O），用于凝血，血小板，纖溶功能檢查。（2）1%EDTANa2用于血小板相關(guān)蛋白的檢查。（3）0.1mol/L草酸酸鈉用于BaSO4吸附用血漿。（4）肝素（10u/ml）用于血液流變，細(xì)胞表面抗原測定。(三)

血栓與止血試驗的分析前質(zhì)量控制

精選課件2、抗凝注意事項（1）血液與抗凝劑比例：多采用抗凝劑與血液比為1：9。（2）充分混勻，避免氣泡產(chǎn)生以及自身污染。（3）血球壓積容積的影響：嚴(yán)重貧血者（HCG<20%），紅細(xì)胞增多者（HCT>60%）。應(yīng)適當(dāng)調(diào)節(jié)抗凝劑與血液的比例，調(diào)節(jié)公式：抗凝劑的體積（ml）=1.85×10-3×血量×（100－血細(xì)胞比容）。[抗凝劑](三)、

血栓與止血試驗的分析前質(zhì)量控制

精選課件[標(biāo)本處理]（1）溫度：4℃或20℃為常用。（2）轉(zhuǎn)速與時間：富含血小板血漿900~1200r/min，10min或6min，乏血小板血漿3000~4000r/min，15~20min。

(3)注意：離心時間長于30min，應(yīng)嚴(yán)格控制溫度變化。(三)

血栓與止血試驗的分析前質(zhì)量控制

精選課件三、常規(guī)凝血試驗的質(zhì)量控制精選課件1、PT應(yīng)用乏血小板血漿，離心條件2000~2500×g30min或3200~4000r/min×30min。2、不同廠家，不同批號組織凝血活酶都有不同的參考質(zhì)控物。3、實驗溫度35℃±0.5℃，實驗反應(yīng)時pH7.2~7.3。（一）凝血酶原時間（PT）精選課件ISI4、關(guān)于國際標(biāo)準(zhǔn)化比率（INR）：INR是PT結(jié)果的一種報告方式，主要適用于口服抗凝劑（OAT）的實驗室監(jiān)測，計算公式如下：

患者PTSINR=RPTISI=平均正常PTS公式中RPT為患者PT與平均正常人PT的比，ISI是凝血酶的國際敏感指數(shù)，ISI分高（0.98~1.5）、中（1.6~2.0）、低（>2.0）敏感性三種，ISI值越接近1.0敏感度越高，OAT監(jiān)測常用高、中敏，一般用中、低敏凝血活酶。注意：所謂高敏是指對凝血因子缺乏的敏感性較高，并不指PT時間的長短，高敏者正常PT時間往往較長（15~18秒）。（一）凝血酶原時間（PT）ISI精選課件5、目前PT的報告方式多用PT秒，INR、百分活動度已被廢棄。主要目的是提高在不同實驗室儀器、試劑所做PT的可比性，向有利于OAT患者的監(jiān)測。（一）凝血酶原時間（PT）精選課件（二）活化部分凝血活酶時間（APTT）

1、每天測試至應(yīng)在上、下午各做一次正常對照。2、APTT要嚴(yán)格用PPP測定，否則會因血小板磷脂量的差異而影響結(jié)果。3、所用激活劑是試驗的關(guān)鍵，白陶土選擇激活能力需選擇，商買品多用鞣花酸。4、激活所用時間在以3min為最佳，長短均受影響。5、血漿凝血、溶血、抗凝比例不準(zhǔn)都會嚴(yán)重影響APTT測定結(jié)果。6、標(biāo)本時間放置過長（>4h），室溫過高均可導(dǎo)致APTT明顯延長或縮短。精選課件（三）纖維蛋白原測定（Fbg）

1、功能測定法（1）凝血酶原衍生法：該法又分為濁度含量與時間含量計算法。前法較好但如凝血活酶試劑濁度高則誤差大，后者受凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ影響較大。（2）Clauss法：是目前較為普遍采用的方法，但因凝血酶受血中肝素類物質(zhì)，纖維蛋白（原）裂解產(chǎn)物（FDP）的影響，在一些特殊病例子如DIC、原發(fā)性、繼發(fā)性纖溶亢進時結(jié)果往往不準(zhǔn)。（3）動力學(xué)測定法：利用蘄蛇酶為凝固劑測定纖維蛋白原體聚合速率并通過米式酶反應(yīng)方程計算纖維蛋白原含量。由于蘄蛇酶不受肝素和較少受FDP的干擾，結(jié)果優(yōu)于前兩法。精選課件（三）纖維蛋白原測定（Fbg）

2、物理學(xué)方法：又分鹽析法、熱變性法和電泳法，但都比較陳舊，特異性差，耗時，已不多采用。3、免疫學(xué)方法：準(zhǔn)確特異，但耗時不適用急診，同時不能測定實際上的可凝固蛋白。精選課件（三）纖維蛋白原測定（Fbg）

4、目前對纖維蛋白原測定還沒有一