臨床基因擴(kuò)增檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室加樣器使用維護(hù)和校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序

臨床基因擴(kuò)增檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室加樣器使用維護(hù)和校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序1 目的保證移液器加樣的準(zhǔn)確性。2 適用范圍各種品牌、型號(hào)的固定、可調(diào)和多通道移液器。3 操作人XXX4 操作方法4.1設(shè)定容量值根據(jù)所需取液量選擇相應(yīng)的加樣器；可調(diào)式加樣器應(yīng)在允許容量范圍內(nèi)調(diào)節(jié)。連續(xù)可調(diào)式加樣器容量計(jì)讀數(shù)由三位撥號(hào)數(shù)字組成（顯示所轉(zhuǎn)移液體容量），從上（最大有效數(shù)字）到下（最小有效數(shù)字）讀??；利用底部刻度可將容量刻度調(diào)節(jié)到更精確的分度。P型(Pipetman)加樣器是連續(xù)可調(diào)的、計(jì)量和移液的專(zhuān)用儀器，量度準(zhǔn)確、操作安全。共有八個(gè)型號(hào)，P右下角數(shù)字為加樣器最大容量值，代表加樣器的型號(hào)已標(biāo)明在按鈕上。容量范圍自0.1ul至10ml（各型號(hào)容量范圍見(jiàn)括號(hào)內(nèi)）。P2(0.1—2ul)P10(1—10ul)P20(2—20ul)P100(20—100ul)P200(30—200ul)1010127272555551.25ul7.5ul12.5ul75ul125ul注：其它型號(hào)P1000(200—1000ul)、P5000(1000—5000ul)、P10ML(1000—10000ul)表1：P型加樣器的應(yīng)用范圍P2，P10超微量計(jì)量及移液，應(yīng)用于DNA定序及酶分析等。P20，P100，P200和P1000應(yīng)用于一般水溶液、酸、堿的計(jì)量和移液。P5000，P10ML大體積計(jì)量和移液。4.2吸液4.2.1首先選擇一支合適的吸嘴安放在加樣器套筒上。使用大體積加樣器（如5000ul以上）時(shí)必須在套筒上加插一過(guò)濾芯，稍加扭轉(zhuǎn)地壓緊吸頭使之與套筒間無(wú)空氣間隙。未裝吸頭的加樣器絕不可用來(lái)吸取任何液體。4.2.2吸液把按鈕壓至第一停點(diǎn)；垂直握持加樣器，使吸嘴浸入液樣中，浸入液體深度視型號(hào)而定：P2和P10P20和P100P200和P1000P5000P10ML≤1mm2--3mm2--4mm3--6mm5--7mm緩慢、平穩(wěn)地松開(kāi)按鈕，吸液樣。等一秒鐘，然后將吸嘴提離液面。用藥用吸紙抹去吸嘴外面可能附著的液滴。小心勿觸及吸嘴口。4.2.3放液將吸嘴貼到容器內(nèi)壁并保持100—400傾斜。平穩(wěn)地把按鈕壓到第一停點(diǎn)。等一秒鐘后把按鈕壓到第二停點(diǎn)以排出剩余液體。壓住按鈕，同時(shí)提起加樣器，使吸嘴貼容器壁擦過(guò)。松開(kāi)按鈕。按吸嘴彈射器除去吸嘴。（只有改用不同液體時(shí)才需更換吸嘴。）4.3預(yù)洗當(dāng)裝上一個(gè)新吸嘴（或改變吸取的容量值）時(shí)應(yīng)預(yù)洗吸嘴，先吸入一次液樣并將之排回原容器中。預(yù)洗新吸嘴能有效提高移液的精確度和重現(xiàn)性。這是因?yàn)榈谝淮挝〉囊后w會(huì)在吸嘴內(nèi)壁形成液膜，導(dǎo)致計(jì)量誤差。而同一吸嘴在連續(xù)操作時(shí)液膜相對(duì)保持不變，故第二次吸液時(shí)誤差即可消除。4.4致密及粘稠液體對(duì)于密度低于水的液體，可將容量計(jì)的讀數(shù)調(diào)到低于所需值來(lái)進(jìn)行補(bǔ)償。例如：用P20加樣器轉(zhuǎn)移10ul血清。先將讀數(shù)調(diào)到10ul，吸取后以重量法測(cè)定。如實(shí)測(cè)體積為9.5ul，即偏差0.5ul，則將讀數(shù)調(diào)到10.5ul并重復(fù)一次。如第二次仍不夠準(zhǔn)確，根據(jù)偏差再作調(diào)整。排放致密或粘稠液體時(shí)，宜在第一停點(diǎn)多等一兩秒鐘再壓到第二停點(diǎn)。4.5加樣器吸頭生產(chǎn)過(guò)程純凈，符合當(dāng)今無(wú)染料的要求（避免污染）。經(jīng)改進(jìn)的外形（密封良好的環(huán)口、薄壁和嘴口尖細(xì)）使按裝或卸脫更加容易、管壁有彈性、不會(huì)產(chǎn)生漩渦，從而精度更高。嘴口決無(wú)毛刺。吸嘴表面光潔平滑，沾濕性小，避免液體留外壁引起的誤差。每個(gè)嘴口上都有模具編號(hào)，確保品質(zhì)跟蹤系統(tǒng)。有液體容量刻度線(xiàn)。D200吸嘴在20和100ul處、D1000吸嘴在300ul處、D10吸嘴在2ul處標(biāo)出?？稍?21℃及1巴壓力下消毒20分鐘。應(yīng)選用帶濾芯的吸頭,以避免樣品與樣品、樣品與加樣器或樣品與操作人員的污染。4.6注意事項(xiàng)PCR實(shí)驗(yàn)室應(yīng)備有4套連續(xù)可調(diào)式加樣器(0.2—2ul、20—200ul、200—1000ul)，分別用于試劑準(zhǔn)備、樣品處理、擴(kuò)增及產(chǎn)物檢測(cè)四個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)/室，加樣器在使用時(shí)應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：在取液前所取液體應(yīng)在室溫（15—25℃）平衡；若吸液溫度與室溫有異時(shí)將吸頭預(yù)洗多次再用。注意移液溫度不得超過(guò)70℃。吸頭浸入液體深度要合適，吸液過(guò)程盡量保持不變。在吸取液體時(shí)應(yīng)緩慢勻速吸取，避免液體濺到加樣器頭上；打出液體后不應(yīng)松開(kāi)按鈕，將吸頭壓掉后再將拇指松開(kāi)，避免液體回吸。在調(diào)整取液量的旋鈕時(shí)，不要用力過(guò)猛，并注意計(jì)數(shù)器顯示的數(shù)值不要超過(guò)其可調(diào)范圍。連續(xù)可調(diào)式加樣器在取樣加樣過(guò)程中應(yīng)注意吸嘴不能觸及其它物品，以免XX醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室加樣器使用、維護(hù)和校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序編號(hào)：I002第一版第4頁(yè) 共5頁(yè)被污染；吸嘴盒（架子）、廢液瓶、所取試劑及加樣的樣品管應(yīng)擺放合理，以方便操作過(guò)程、避免污染為原則。改吸不同液體、樣品或試劑前要換新吸嘴；發(fā)現(xiàn)吸嘴內(nèi)有殘液時(shí)要換新吸嘴。新吸嘴使用前要預(yù)洗。（8）吸嘴內(nèi)有液體時(shí)不可將加樣器平放、倒轉(zhuǎn)，以防液體進(jìn)入加樣器套筒內(nèi)。（9）使用了酸或有腐蝕蒸氣的溶液后，最好拆下套筒，用蒸餾水清洗活塞及密封圈；切勿用油脂等潤(rùn)滑活塞及密封圈。（10）連續(xù)可調(diào)式加樣器在使用完畢后應(yīng)置于加樣器架上，遠(yuǎn)離潮濕及腐蝕性物質(zhì)。（11）應(yīng)定期請(qǐng)專(zhuān)業(yè)人員進(jìn)行校準(zhǔn)、調(diào)試、不要自行拆開(kāi)。故障排除發(fā)現(xiàn)漏氣或計(jì)量不準(zhǔn)，其可能原因和解決方法為：套筒螺帽松動(dòng)？用手?jǐn)Q緊螺帽。套筒刮花或破裂？卸下彈射器，檢查套筒。P2、P10或P20移液器套筒破損時(shí)，活塞也可能變形。安裝套筒時(shí)應(yīng)用手?jǐn)Q緊螺帽?；钊蛎芊馐芑瘜W(xué)腐蝕？更換活塞及密封圈。用蒸餾水洗滌套筒內(nèi)壁。發(fā)現(xiàn)套筒內(nèi)有液體，可依下法清潔：卸下彈射器，擰下螺帽并用蒸餾水洗滌套筒、活塞、密封圈及O形環(huán)，待完全干燥后重新組裝。（3）發(fā)現(xiàn)P5000和P10ML濾芯變濕必須更換。#需要時(shí)，可將套筒、螺帽和彈射器在121℃及1巴壓力下消毒20分鐘。注意密封圈及O形環(huán)不能高溫消毒。發(fā)現(xiàn)吸液時(shí)有氣泡：先將液體排回原容器、檢查吸嘴浸入液體是否合適、再更慢地吸入液體；如仍有氣泡應(yīng)更換吸嘴。凡是更換