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匯報內(nèi)容研究背景禽白血病流行病學調(diào)查A/B亞群禽白血病遺傳抗性研究進展J亞群禽白血病遺傳抗性研究進展研究展望12354第一頁,共25頁。一、研究背景第二頁,共25頁。給世界養(yǎng)雞業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失第三頁,共25頁。第四頁,共25頁。禽白血病——嚴重威脅著我國養(yǎng)雞業(yè)近年的流行病學調(diào)查結(jié)果顯示,禽白血病在我國商品肉雞、蛋雞和地方品系雞中普遍存在,目前采取的防控措施不能完全根除禽白血病在中國的發(fā)生與流行。項目A、B亞群J亞群陽性雞群/檢測雞群總數(shù)92/192105/199雞群陽性率(%)47.952.8陽性個體數(shù)/總檢測雞只數(shù)(羽)508/14995855/15122總個體陽性率(%)3.45.7中國雞群禽白血病血清學調(diào)查崔治中,2010第五頁,共25頁。
因此,我國養(yǎng)禽業(yè)迫切要求研發(fā)更適合控制我國禽白血病的新策略。國外已有研究證明,從宿主遺傳抗性角度研究禽白血病的遺傳抗性,提高雞群對禽白血病的遺傳抗性已成為防控禽白血病的有效策略。第六頁,共25頁。(ChristopherPower,2001)Receptor禽白血病病毒感染機理禽白血病病毒侵入宿主細胞必須通過特異性受體,不同亞群的ALV由相應(yīng)的細胞表面特異性受體介導侵入宿主細胞,繼而發(fā)生感染。第七頁,共25頁。(ChristopherPower,2001)Receptor禽白血病病毒遺傳抗性機理受體基因的遺傳變異導致受體蛋白的表達完全缺失或表達一個不適宜作為病毒受體的缺陷型蛋白,引起宿主細胞對ALV感染的產(chǎn)生完全抗性或易感性降低。第八頁,共25頁。二、禽白血病的流行病學調(diào)查第九頁,共25頁。禽白血病的流行病學調(diào)查研究
2014年3月—2015年2月,對8個種雞場,38個不同品系,共53896份樣品,進行了禽白血病流行病學調(diào)查,結(jié)果如下所示:項目A、B亞群A、B、J亞群J亞群陰性陽性雞群/檢測雞群總數(shù)(批)21/795/7927/7926/79雞群陽性率(%)26.586.3334.1832.91陽性個體數(shù)/總檢測雞只數(shù)(羽)656/538961054/538962710/5389649476/53896總個體陽性率(%)1.221.955.0391.80
8個種雞場禽白血病流行病學調(diào)查結(jié)果第十頁,共25頁。三、A/B亞群禽白血病遺傳抗性研究進展第十一頁,共25頁。3.1ALV-A/B受體基因tva和tvb的遺傳多樣性分析本研究分析了25個中國雞種ALV-A/B受體基因tva和tvb的遺傳多樣性,檢測是否存在國外白來航雞品系中報道的遺傳抗性位點,評估中國雞種抗ALV-A/B的遺傳改良潛力,以挖掘培育ALV-A/B抗性品系的素材。第十二頁,共25頁。3.1.1ALV-A受體基因tva的遺傳多樣性分析第十三頁,共25頁。研究結(jié)果表明:tvar3和tvar4在中國雞種中普遍存在,tvar1和tvar2存在于某些雞種。這提示了中國雞種抗ALV-A的遺傳改良潛力巨大,為培育ALV-A的抗性品系提供了重要的科學依據(jù)和育種素材。3.1.1ALV-A受體基因tva的遺傳多樣性分析第十四頁,共25頁。3.1.2ALV-B受體基因tvb的遺傳多樣性分析研究結(jié)果表明:tvbr存在于個別雞種。這提示了中國雞種具有一定的抗ALV-B的遺傳改良潛力。第十五頁,共25頁。
研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn):中國雞種中tva受體基因內(nèi)含子1破裂點信號保守區(qū)域存在另2種自然突變(tvadel502-511和tvadel502-516,即tvar5和tvar6):即tva基因第502-511堿基(序列為CGCTCACCCC)缺失,tva基因第502-516堿基(序列為CGCTCACCCCGCCCC)缺失,如圖1所示。圖1中國雞種tva受體基因內(nèi)含子1破裂點信號保守區(qū)域的2種自然突變3.2中國雞種tva受體基因潛在遺傳抗性位點的挖掘與功能驗證第十六頁,共25頁。
tvar5和tvar6突變干擾了tva受體基因mRNA的剪切(發(fā)生選擇性剪切),致使內(nèi)含子1保留于tva受體基因mRNA中,引起宿主降低了對ALV-A的易感性而產(chǎn)生遺傳抗性。(體內(nèi)和體外均得到驗證)第十七頁,共25頁。
研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn):中國雞種中B亞群禽白血病受體基因存在幾個潛在的遺傳抗性位點,目前正在進行功能驗證。3.2.3B亞群禽白血病遺傳抗性研究進展第十八頁,共25頁。四、J亞群禽白血病遺傳抗性研究進展第十九頁,共25頁。J亞群禽白血病遺傳抗性研究技術(shù)路線第二十頁,共25頁。ALV-J感染陰性雞♂×陰性雞♀F2代的檢測第二十一頁,共25頁。ALV-J受體基因chNHE1遺傳多樣性分析1.在所檢測的陰性和陽性雞樣品中,ALV-J受體chNHE1mRNA309/414/450/678/708/732/786/888/894/912/921/1233/1311/1317/1449/1686/1692/1725/2100/2130/2340等位置存在cSNP多態(tài)性,但是均為同義cSNP,未引起其氨基酸發(fā)生改變,受體編碼蛋白氨基酸未發(fā)生變異。2.
與原雞相比,在第2和11個內(nèi)含子的分別存在TGAAGCC插入以及TGTCCTGTGTCCTCCCTGC的缺失,但在陰性和陽性雞中均存在此種現(xiàn)象第二十二頁,共25頁。篩選到217個差異表達基因,陰性雞比陽性雞有89個基因上調(diào),128個基因下調(diào)。2.差異表達基因的KEGG分析結(jié)果表明:差異表達基因涉及到DNA復(fù)制,細胞周期相關(guān)因子以及Jak-STAT信號通路、p53信號通路、細胞因子相互作用等分子生化過程。3.目前,J亞群禽白血病遺傳抗性候選基因的功能正在研究。ALV-J感染陰性雞♂×陰性雞♀F2代的mRNA-Seq第二十三頁,共25頁。五.研究展望1、本研
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