紫杉醇與其脂質(zhì)體研究【精選-】

紫杉醇Taxol,泰素，紫素，Anzatax,安泰素，簡稱PTX。從紫杉樹皮中分離提取具有抗腫瘤活性的二萜類天然化合物。除了帶含氧四環(huán)的紫杉烷環(huán)以外,在C13位置上尚有一必需酯側(cè)鏈。化學(xué)名為5β,20-環(huán)氧-1.2.-α,4,7β,13α-六羥基紫杉烷-11-烯-α-酮-4，10-二乙酸酯-2苯甲酸酯-13-[(2’R,3’,R)-N苯基異絲氨酸酯]分子式為C47H51N014,分子量853.92性狀：具有高度親脂性,不溶于水,熔點大約216-217℃第一頁，共35頁。紫杉醇的發(fā)現(xiàn)1963年,從太平洋西北岸的短葉紫杉樹皮中發(fā)現(xiàn)對許多腫瘤有細胞毒性作用的天然物質(zhì)。

1971年提取了其中的活性成分紫杉醇,初篩有抗腫瘤作用。1979年美國國立癌癥研究所對數(shù)千種植物的天然提取物的抗腫瘤活性進行了篩選,發(fā)現(xiàn)紫杉醇是其中最具抗腫瘤活性的物質(zhì),且具有獨特的作用機制。第二頁，共35頁。紫杉醇的作用機制特異地結(jié)合到小管的β位上,導(dǎo)致微管聚合成團塊和束狀并使其穩(wěn)定,這些作用能抑制微管網(wǎng)的正常重組。第三頁，共35頁。紫杉醇的代謝紫杉醇能與98%血漿蛋白廣泛結(jié)合?；A(chǔ)研究表明,24小時給藥方案抑制白細胞遠較3小時給藥為重。紫杉醇主要在肝臟代謝,隨膽汁進入腸道,經(jīng)糞便排出體外。經(jīng)腎清除只占總清除的1%-8%,腎功能不全者一般不影響紫杉醇的使用。第四頁，共35頁。紫杉醇的藥物相互作用對藥物相互作用的研究表明,先用DDP會加重紫杉醇的主要毒性反應(yīng)可能由于DDP對細胞色素P450酶的調(diào)節(jié)作用,導(dǎo)致紫杉醇的血漿清除率下降體外實驗證實,先用紫杉醇后用DDP,毒性作用較小,對腫瘤細胞的殺傷作用較大第五頁，共35頁。紫杉醇的適應(yīng)癥①卵巢癌和乳腺癌的一線或二線化療。②肺癌。③頭頸部癌。④其他腫瘤:對晚期食管癌、胃癌、膀胱癌、精原細胞瘤、黑色素瘤、復(fù)發(fā)性非霍奇金淋巴瘤等有效。第六頁，共35頁。紫杉醇的用法防止病人發(fā)生過敏反應(yīng),應(yīng)在紫杉醇治療前12小時口服地塞米松10mg,治療前3小時再用地塞米松10mg口服治療前30-60分鐘給予苯海拉明(或其他類似物)肌注40mg

靜注西咪替丁300mg或雷尼替丁50mg第七頁，共35頁。紫杉醇的劑量單藥劑量一般為175mg/m2,配合用G-CSF時,劑量可達250mg/m2,聯(lián)合用藥時劑量酌減。一般將紫杉醇用生理鹽水或5%葡萄糖液或5%葡萄糖鹽水稀釋至終濃度為后,靜滴3小時。聯(lián)合用藥劑量為135-175mg/m2,3-4周重復(fù)。在國外,聯(lián)合用藥時,一般用175mg/m2,靜滴3小時;或135-150mg/m2,靜滴24小時。紫杉醇每周給藥方案:一般用量為60-100mg/m2,靜脈滴注3小時,每周1次,連用3周,停1周為1周期;或每周1次,連用6周,停2周為1周期。第八頁，共35頁。紫杉醇的不良反應(yīng)①過敏反應(yīng):發(fā)生率為39%,其中嚴重過敏反應(yīng)發(fā)生率2%，國內(nèi)報告過敏反應(yīng)發(fā)生率為11%-20%,多數(shù)為I型變態(tài)反應(yīng),表現(xiàn)為支氣管痊攣性呼吸困難、蕁麻疹和低血壓。幾乎所有的反應(yīng)都發(fā)生在用藥后最初10分鐘內(nèi),嚴重反應(yīng)常發(fā)生在用紫杉醇后2-3分鐘。②骨髓抑制:為主要劑量限制性毒性,表現(xiàn)為中性粒細胞減少,血小板減少較少見,一般在用藥后8-10日發(fā)生,15-21日恢復(fù)。在用推薦劑量時,嚴重的中性粒細胞減少（＜0.5×109/L)見于47%的病人,持續(xù)時間一般少于5日。整個療程的發(fā)熱發(fā)生率約為19%,只有5%的病人血小板計數(shù)低于50×109/L,貧血(Hb＜110g/L）則見于90%的病人。值得注意的是,應(yīng)用G-CSF可降低骨髓抑制發(fā)生率。第九頁，共35頁。紫杉醇的不良反應(yīng)③神經(jīng)毒性:周圍神經(jīng)病變表現(xiàn)為輕度麻木及感覺異常。此外,尚可發(fā)生以閃光暗點為特征的視神經(jīng)障礙。紫杉醇劑量>170mg/m2

時,治療2-5日后會發(fā)生瞬間肌痛；劑量＞250mg/m2,且與DDP配伍時多有肌病發(fā)生。④心血管毒性:可有低血壓和無癥狀的短時間心動過緩,后者發(fā)生率約29%。ECG異常見于30%病例。⑤關(guān)節(jié)痛及肌肉痛:見于55%病例,累計手臂和腿的關(guān)節(jié),其癥狀輕微,常出現(xiàn)與用藥后的2-3日內(nèi),數(shù)日內(nèi)恢復(fù)。其發(fā)生率和嚴重性成明顯劑量依賴性,且在接受G-CSF的病人中更為常見。第十頁，共35頁。紫杉醇的不良反應(yīng)⑥胃腸道反應(yīng):惡心和嘔吐、腹瀉和粘膜炎的發(fā)生率分別為59%、43%和39%,一般為輕至中度。⑦肝臟毒性:表現(xiàn)為膽紅素、AKP、AST和ALT升高,與紫杉醇劑量相關(guān)。⑧脫發(fā):可見于80%以上病例,且隨著累積治療,經(jīng)常有全身體毛的脫落。⑨輸注藥物的靜脈周圍和藥物外滲局部,偶爾有局部炎癥反應(yīng),既往照射野可能有炎癥性皮膚反應(yīng)。第十一頁，共35頁。國外I期和Ⅱ期臨床試驗報道,中性粒細胞減少是紫杉醇主要的劑量限制性毒性。當紫杉醇劑量達到200-250mg/m2

時,中性粒細胞絕對數(shù)(ANC)通常低于500/mm3,需要G-CSF支持治療。在沒有血細胞生長因子支持的情況下,紫杉醇的最大耐受劑量為175-200mg/m2。早期應(yīng)用紫杉醇所遇的最嚴重問題是急性過敏反應(yīng)(HSRs),有研究報道其發(fā)生率高達25%-30%。主要表現(xiàn)為低血壓、支氣管痙攣和全身性蕁麻疹,這可能與組織胺的釋放有關(guān)。紫杉醇的不良反應(yīng)第十二頁，共35頁。紫杉醇的注意事項①治療前應(yīng)先采用腎上腺皮質(zhì)激素(如DXM)、苯海拉明和H2受體拮抗劑(如西咪替丁或雷尼替丁)治療。②未稀釋的濃縮藥液不應(yīng)接觸聚氯乙烯塑料(PVC)器械或設(shè)備,且不能用于藥物的滴注。稀釋的藥液應(yīng)貯存于瓶內(nèi)(玻璃、聚丙烯)或塑料袋(聚丙烯、聚烯烴類),并采用聚乙烯類給藥設(shè)備滴注。③給藥期間應(yīng)注意有無過敏癥狀及生命體征的變化。第十三頁，共35頁。脂質(zhì)體(Liposome)的提出英國ADBanghman1965年首先提出脂質(zhì)體概念，并闡述磷脂分散在水中能形成多層封閉小囊泡(Vesicals),且每一層均由脂質(zhì)雙分子層構(gòu)成。1971年Ryman又首先提出利用小泡囊作為藥物載體,以提高藥物靶向性降低藥物副作用。近30年來世界各國科學(xué)工作者在這一領(lǐng)域進行了大量的基礎(chǔ)研究,引人注目的是在醫(yī)藥領(lǐng)域的研究與開發(fā)(R&D)第十四頁，共35頁。脂質(zhì)體(Liposome)的進展1995年在英國倫敦由英國生物技術(shù)生物科學(xué)協(xié)會主辦《紀念脂質(zhì)體誕生三十周年科學(xué)討論會》(ALiposomeBirthdayConference1965－1995)簡要敘述脂質(zhì)體釋藥系統(tǒng)的新進展

ADBanghman論文報告中主要包括脂質(zhì)體作為藥物載體、脂質(zhì)體在基因治療中的應(yīng)用,脂質(zhì)體在診斷和免疫治療中的應(yīng)用,脂質(zhì)體在生物技術(shù)藥品及在局部治療中的應(yīng)用等第十五頁，共35頁。脂質(zhì)體(Liposome)的進展1994年6月在瑞典己上市第一個甲肝疫苗脂質(zhì)體,之后流感疫苗脂質(zhì)體上市;美國脂質(zhì)體公司:正在進行紫杉醇及其衍生物脂質(zhì)體研究;抗愛滋病AZT脂質(zhì)體可以降低AZT骨髓毒性,提高抗病毒活性;TNF脂質(zhì)體可以降低TNF的毒性,提高療效;IL-2脂質(zhì)體可以延長Tl/2,與DC合用，療效提高。降低嚴重的毛細血管自漏綜合癥，并用DSC技術(shù)證明IL－2與脂膜能相互作用。80年代美國相繼成立了不少專營脂質(zhì)體的公司,如脂質(zhì)體公司第十六頁，共35頁。兩性霉素B脂質(zhì)體1988年美國Squibb公司與TLC公司聯(lián)合開發(fā)抗深部真菌藥兩性霉素B脂質(zhì)體，我國亦進行了兩性霉素B脂質(zhì)體的研究脂質(zhì)體主要降低兩性霉素B的嚴重腎毒性。第十七頁，共35頁。各類脂質(zhì)體美國TLC公司的阿霉素脂質(zhì)體于1995年批準上市。Nexetar公司的丁胺卡那脂質(zhì)體。日本1994年熊本等研究的亞硝脲(BCNU)脂質(zhì)體能選擇性地殺傷腦腫瘤細胞。三菱化學(xué)公司開發(fā)了將胃癌細胞的人型抗體與脂質(zhì)體結(jié)合,通過利用脂質(zhì)體與細胞融合的特點,使組裝有抗體的脂質(zhì)體識別胃癌細胞,從而通過細胞融合達到選擇性釋放藥物。第十八頁，共35頁。ADM脂質(zhì)體美國Sequus公司開發(fā)的DOXILR

等由阿霉素與合成磷脂組成的脂質(zhì)體于1995年上市,它系用MPEG-DSPE修飾脂質(zhì)體表面而形成的一種長循環(huán)脂質(zhì)體（20mg/支）。在臨床治療艾滋病病人卡波氏肉瘤,提高療效降低毒性,延長半衰期達50hr，而常規(guī)阿霉素僅數(shù)十分鐘。國內(nèi)不少高校與研究機構(gòu)早在90年代初就進行大量實驗研究,均未見產(chǎn)品上市。第十九頁，共35頁。ADM脂質(zhì)體的實驗研究范健等，研究阿霉素(F-ADM)和脂質(zhì)體阿霉素(L-ADM)對正常NIH小鼠和肝癌腹水型(HcAC)小鼠的毒性。結(jié)果：脂質(zhì)體組動物體重和器官失重明顯減輕；血生化變化相對減小，外周血白細胞下降幅度減小,恢復(fù)加快；心、腎、胃腸道病理損害減輕；第二十頁，共35頁。ADM脂質(zhì)體的實驗研究脂質(zhì)體組有較好療效,生存期有所延長。脂質(zhì)體載藥后可降低阿霉素的毒性并保留藥物的抗腫瘤活性。第二十一頁，共35頁。ADM脂質(zhì)體可能機理ADM可與細胞膜或線粒體膜的磷脂分子及Fe3+形成三元絡(luò)合物。使細胞膜“鈍化”，功能及能量代謝受損。而脂質(zhì)體載藥后明顯減少藥物與膜結(jié)合，減輕膜功能損害。脂質(zhì)體在體內(nèi)主要由吞噬細胞攝取,大大減輕了功能細胞的直接損害。由于心肌細胞的吞噬能力很弱，載藥后較少進入心肌，減少心肌病發(fā)生。脂質(zhì)體載藥后藥物在體內(nèi)重新分布,主要分布在網(wǎng)狀巨噬系統(tǒng)器官內(nèi),使心、腎、胃腸內(nèi)藥物濃度明顯減少,降低了藥物毒性。第二十二頁，共35頁。紫杉醇注射液的不足水中溶解度僅為0.006mg/ml,所以國內(nèi)外上市的紫杉醇是聚氧乙基代蓖麻油及無水乙醇(50/50)的復(fù)合溶媒制成的粘稠性針劑。但(1)聚氧乙基代蓖麻油進入人體內(nèi)降解,導(dǎo)致大量組織胺釋放，會發(fā)生嚴重過敏反應(yīng)。盡管采取了預(yù)防措施,仍有41%的病人發(fā)生程度不等的過敏反應(yīng)。(2)紫杉醇本事亦有與其它化療藥物一樣的毒性，如血液學(xué)毒性。(3)紫杉醇注射液在注射前用生理鹽水或5%葡萄糖稀釋后會析出沉淀（結(jié)晶）,故還需接0.22μm微孔過濾器,以保用藥安全,臨床應(yīng)用較為不便。第二十三頁，共35頁。紫杉醇脂質(zhì)體的研究國外有關(guān)文獻報道曾有人將紫杉醇做成乳劑、微球劑、混合膠束、環(huán)糊精包合物等

,以期能減小紫杉醇注射劑的過敏反應(yīng)及毒副作用,但都不甚理想。紫杉醇脂質(zhì)體從90年代初進行的基礎(chǔ)研究至目前臨床前研究取得了有意義及實用價值的結(jié)果。第二十四頁，共35頁。紫杉醇脂質(zhì)體Robert等(1993)報道紫杉醇脂質(zhì)體的動物體內(nèi)毒性明顯小于紫杉醇注射液前者i.v給藥最大耐受量達200mg/kg,而后者最大耐受量30mg/kg同時報道紫杉醇脂質(zhì)體對耐藥細胞株亦有效。第二十五頁，共35頁。紫杉醇脂質(zhì)體Sharma等(1996)報道小鼠靜脈給紫杉醇注射劑(即市售Paclitaxel),其LD5035mg/kg,而注射紫杉醇脂質(zhì)體的LD5070mg/kg,靜注毒性降低一倍。第二十六頁，共35頁。紫杉醇脂質(zhì)體Cabanes等比較了紫杉醇注射液與紫杉醇脂質(zhì)體在正常小鼠體內(nèi)毒性及荷L1210小鼠的抗癌性。結(jié)果表明以相同劑量32.5mg/kg靜脈連續(xù)三天給紫杉醇注射液,結(jié)果注射液組小鼠100%死亡,而紫杉醇脂質(zhì)體組無死亡,而相等劑量賦形劑聚氧乙基代離麻油與乙醇(1:1V:V)組死亡率為30%。紫杉醇注射劑及脂質(zhì)體兩種劑型對L1210荷瘤小鼠具有近似的抗腫瘤活性。第二十七頁，共35頁。紫杉醇注射液的腹腔給藥紫杉醇注射液在一期臨床試驗腹腔給藥治療腔內(nèi)惡性腫瘤可以保持較長時間(24-48小時)藥物濃度,但病人有嚴重腹痛。分析認為可能是賦形劑(聚氧乙基代蓖麻油及無水乙醇)的影響。Bicher等亦報道注射部位軟組織損傷及毒性反應(yīng)。上述情況限制了臨床進一步治療方案的實施第二十八頁，共35頁。紫杉醇脂質(zhì)體的腹腔給藥Sharma報道用荷P388DBA-2小鼠腹腔給予紫杉醇脂質(zhì)體治療,結(jié)果表明與市售紫杉醇注射液具有相似療效,但耐受性前者明顯優(yōu)于后者提示紫杉醇脂質(zhì)體有可能為臨床提供降低毒性及改變紫杉醇的給藥途徑以提高治療效果的新劑型。第二十九頁，共35頁。紫杉醇脂質(zhì)體毒性試驗急性毒性試驗首先比較了注射用紫杉醇脂質(zhì)體與市售紫杉醇注射劑對小鼠靜脈注射的急性毒性,結(jié)果:本品靜脈注射LD50

為69.8mg/kg,而紫杉醇注射液LD50

為33.0mg/kg。且靜脈注射2分鐘后動物出現(xiàn)不斷抬頭、甩頭、呼吸困難急促,抖毛等反應(yīng),直至死亡。并隨劑量增大,死亡動物數(shù)增多,反應(yīng)程度增強。注射用紫杉醇脂質(zhì)體腹腔注射LD5067.78mg/kg。第三十頁，共35頁。紫杉醇脂質(zhì)體藥效學(xué)試驗比較了注射用紫杉醇脂質(zhì)體與陽性對照藥市售紫杉醇注射液對荷瘤小鼠的藥效。荷瘤鼠分別接種艾氏癌實體型及小鼠肉瘤-180(S-180),本品分別用三個劑量組:20mg/kg、14mg/kg、9.8mg/kg,市售紫杉醇注射液用兩個劑量組14mg/kg、9.8mg/kg(因大劑量動物死亡,無法用大劑量),二劑型均有效,且療效近似(P＞0.05),結(jié)果可見市售紫杉醇注射液抑制骨髓細胞,可使粒細胞成熟障礙,對紅細胞起抑制作用。注射用紫杉醇脂質(zhì)體組可明顯減輕紫杉醇對骨髓的抑制作用,主要表現(xiàn)在早期粒細胞增加程度減輕,成熟紅細胞減少程度較輕,與市售紫杉醇注射液比較P＜0.05或P＜0