細胞分化與凋亡課件

第十五章CELLDIFFERENTIATIONANDCELLDEATH細胞分化與凋亡第一節(jié)

細胞分化細胞后代在形態(tài)、結構和功能上發(fā)生差異的過程。每個人的一生中都在進行著細胞分化。細胞分裂的不對稱性和細胞間的相互作用是細胞分化的兩個基本機制。全能性：一個細胞可分化為機體的所有細胞，如受精卵、植物細胞。干細胞多能干細胞單能干細胞（祖細胞）成熟動物細胞不具備全能性。60年代的爪蟾和80年代小鼠的核移殖，90年代末多利羊的誕生都證明了分化細胞具有完整的DNA。

一、細胞全能性卵細胞具有極性，細胞核靠近北極。北極或動物極：極體釋放的部位；南極或植物極：相對北極而言，母體物質主要儲存在于植物極。二、細胞分化的機理（一）細胞分裂的不對稱性動物卵細胞中貯存有大量mRNA，呈非均勻分布；用轉錄抑制劑放線菌素D處理海膽受精卵，胚胎發(fā)育仍能進行至囊胚期用蛋白質翻譯抑制劑嘌呤霉素處理受精卵，受精卵停止發(fā)育。卵裂后的細胞質的特性決定了子細胞核的分化命運。昆蟲以表面卵裂的方式形成胚層細胞的。遷入卵的后端極質部的細胞發(fā)育為原始生殖細胞，用紫外線照射這一區(qū)域，破壞極質，卵將發(fā)育為無生殖細胞的不育個體。

2、分化抑制：分化成熟的細胞可以產生抑素，抑制相鄰細胞發(fā)生同樣的分化。如含有成蛙心組織的培養(yǎng)液培養(yǎng)蛙胚，則蛙胚不能發(fā)育出正常的心臟。3、細胞數量效應小鼠胚胎胰腺原基在體外進行組織培養(yǎng)時，可發(fā)育成具有功能的胰腺組織，但如果把胰原基切成8小塊分別培養(yǎng)，則都不能形成胰腺組織，如果再把分開的小塊合起來，又可形成胰腺組織。4、細胞外基質的影響干細胞在IV型膠原和層粘連蛋白上分化為上皮細胞；在I型膠原和纖粘連蛋白上形成纖維細胞；在II型膠原及軟骨粘連蛋白上發(fā)育為軟骨細胞。5、激素的作用如昆蟲的保幼激素和脫皮激素。1、染色體結構的變化1）基因刪除：原生動物、昆蟲、甲殼動物。2）基因擴增：果蠅多線染色體。3）基因重排：免疫球蛋白基因（106~108種抗體）。4）DNA的甲基化與異染色質化：胞嘧啶的甲基化使基因失活。（三）細胞核與細胞分化Geneand

DevelopmentHOXmutantAntenna—legBithoraxmutant四、再生指生物的器官損傷后，剩余的部分長出與原來形態(tài)功能相同的結構的現象，廣義來看再生是生命的普遍現象，從分子、細胞到組織器官都具有再生現象。1.

生理性再生：即細胞更新，如人的紅細胞。2.

修復性再生：壁虎的尾、蠑螈的斷肢、螃蟹的肢。3.

無性繁殖第二節(jié)細胞的衰老又稱老化，指細胞隨著年齡的增加，機能和結構發(fā)生退行性變化，趨向死亡的不可逆的現象。衰老和死亡是生命的基本現象，衰老過程發(fā)生在生物界的整體水平、種群水平、個體水平、細胞水平以及分子水平等不同的層次。更新組織：如上皮細胞、血細胞。構成更新組織的細胞可分為３類：①

干細胞、②

過渡細胞、③成熟細胞。穩(wěn)定組織：可補償性增生，如：肝、腎細胞。恒久組織：細胞不再分裂，如神經、骨骼、心肌細胞。可耗盡組織：如人類的卵巢實質細胞。一、人體細胞的動態(tài)分類1.

DNA：復制與轉錄受阻，端粒DNA、mtDNA缺失。DNA氧化、斷裂、缺失和交聯，甲基化程度降低。2.

RNA：含量降低。3.

蛋白質：含成下降，發(fā)生修飾、交聯。4.

酶分子：活性中心被氧化，金屬離子丟失，酶分子的二級結構，溶解度，等電點發(fā)生改變，酶失活。5.

脂類：不飽和脂肪酸被氧化。（二）分子水平的變化（一）差錯學派1、代謝廢物積累：如：脂褐質3、自由基攻擊：導致DNA、蛋白質變異，正常細胞內存在清除自由基的防御系統(tǒng)：酶系統(tǒng)：超氧化物歧化酶(SOD)，過氧化氫酶(CAT)，谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)；非酶系統(tǒng)：維生素E，醌類等電子受體。三、細胞衰老的分子機理1、細胞有限分裂學說“Hayflick”極限，即細胞最大分裂次數。L.Hayflick(1961)報道，人的成纖維細胞在體外培養(yǎng)時增殖次數是有限的（60~70代）。細胞增殖次數與端粒DNA長度有關。2、重復基因失活學說：如哺乳動物rRNA基因數隨年齡而減少。（二）遺傳論學派Werner'ssyndromeHutchinson-Gilfordsyndrome（二）、細胞凋亡cellapoptosisKerr（1972）最先提出，與細胞壞死的區(qū)別是：①細胞通過出芽的方式形成許多凋亡小體；②凋亡小體內有結構完整的細胞器；③不引起炎癥；④線粒體無變化，溶酶體活性不增加；⑤內切酶活化，DNA有控降解，凝膠電泳圖譜呈梯狀；⑥凋亡通常是生理性變化，而細胞壞死是病理性變化。

胸腺細胞正常凋亡胸腺細胞正常凋亡細胞程序性死亡（programmedcelldeath，PCD）是一種基因指導的細胞自我消亡方式。PCD和細胞凋亡的區(qū)別在以下方面：PCD是功能性概念，凋亡是形態(tài)學概念。PCD的最終結果是細胞凋亡，但細胞凋亡并非都是程序化的。PCD存在于胚胎發(fā)育過程中。（三）、細胞程序性死亡線蟲Caenorhabditiselegans是研究個體發(fā)育和細胞程序性死亡的理想材料（生命周期短，細胞數量少）。線蟲神經系統(tǒng)由302個細胞組成。這些細胞來自于407個前體細胞。也就是說105個細胞發(fā)生了程序性死亡?？刂凭€蟲細胞凋亡的基因主要有3個Ced-3、Ced-4和Ced-9Ced-3和Ced-4的作用是誘發(fā)凋亡；Ced-9抑制Ced-3、Ced-4的作用。2002年10月7日英國人悉尼·布雷諾爾、美國人羅伯特·霍維茨和英國人約翰·蘇爾斯頓，因在細胞程序性死亡方面的研究獲諾貝爾諾貝爾生理與醫(yī)學獎。SydneyBrennerH.RobertHorvitzJohnE.Sulston

與細胞增殖有關的原癌基因和抑癌基都參于對細胞凋亡的凋控。其中研究較多的有bcl-2c-myc、p53、Ice、Fas/APO-1等。1、mycc-myc對增殖和凋亡的調節(jié)是一樣的。當生長因子存在，bcl-2基因表達時，促進細胞增殖，反之細胞凋亡。（一）細胞凋亡相關基因2、bcl-2細胞凋亡抑制基因，名稱來源于B細胞淋巴瘤/白血病-2(B-celllymphoma/Leukemia-2，bcl-2)。bcl-2

能夠編碼bcl-2α（26KD）和bcl-2β（22KD）兩種蛋白質，是膜的整合蛋白，主要存在于線粒體外膜、核膜及部分內質網中。bcl-2的功能相當于線蟲中的ced9。3、fasfas又稱作APO-1，屬TNF受體和NGF受體家族。1993年人白細胞分型國際會議統(tǒng)一命名為CD95。fas基因編碼產物為分子量45KD的跨膜蛋白。Fas蛋白與Fas配體組成Fas系統(tǒng)，二者的結合導致靶細胞走向凋亡。4、ICE蛋白酶家族ICE蛋白酶參與Fas誘導的細胞凋亡，與線蟲細胞凋亡基因ced-3同源。ICE又稱為Caspase，能選擇性降解蛋白質。ced-4在哺乳動物中的同源體為Apaf-1(apoptoticproteaseactivatingfactor-1)，能激活Caspase3，這一過程需要細胞色素c(Apaf-2)和Apaf-3的參與。Fas與配體（如TNF）結合發(fā)生三聚化，使胞內的DD區(qū)（Deathdomain）與接頭蛋白FADD的DD區(qū)結合。FADDN端通過DED區(qū)（deatheffectordomain）與Caspase-8前體蛋白和CAP3結合，激活Caspase-8。Caspase-8自剪切活化，激活Caspase-3，Caspase-7Caspase-3激活Caspase-6。Caspase可降解結構蛋白、信號蛋白、轉錄調控蛋白、周期蛋白等等。Caspase還可降解CAD的調節(jié)蛋白，釋放出CAD，CAD進入細胞核降解DNA。CAD