指紋圖譜技術(shù)在中藥材質(zhì)量控制中的意義與作用

中藥的質(zhì)量是其療效的關(guān)鍵所在.長(zhǎng)期以來(lái)，人們多是憑借閱歷，從.隨著現(xiàn)代分了越來(lái)越寬闊的應(yīng)用前景。(1)中藥指紋圖譜的概念和分類“指紋”(fingerpint〕鑒定來(lái)源于法醫(yī)學(xué),每個(gè)人的指紋在微小的細(xì)節(jié)構(gòu)造中各有不同，依據(jù)這些差異，通過“比對(duì)”,DNADNA指紋圖譜，對(duì)人、動(dòng)物、植物等生命體進(jìn)展鑒別鑒定，乃至親子鑒定等，擴(kuò)大了指紋分析的含義，其意義主要表現(xiàn)在兩個(gè)方面：一是成為指紋圖譜。指紋是以DNADNA片段所構(gòu)成的條帶圖譜。二是分析目的有所擴(kuò)展,既可以像指紋分析一樣作個(gè)體“唯一性”“唯一性”〔多個(gè)個(gè)體之間的共性,即推斷個(gè)體之間的親緣關(guān)系等。中藥指紋圖譜則和DNA指紋圖譜又有所不同。fingerprinting借用DNA指紋圖譜進(jìn)展而來(lái)，最先進(jìn)展起來(lái)的是中藥化學(xué)成分色譜指紋圖譜，〔HPLC〕HPLC具有很高的分別度，可把簡(jiǎn)單的化學(xué)成分進(jìn)展分別而形成凹凸不同的峰組成一張色譜圖,這些色譜峰的出峰位置和高度〔或峰面積)分別代表了不同的化學(xué)成大小。如前所述，中藥指紋圖譜不同于法醫(yī)學(xué)中的DNA指紋圖譜。常疑人指證和控罪。恰恰相反,中藥指紋圖譜賴以鑒別中藥的藥材真?zhèn)巍肮灿刑卣餍浴?更值“指紋”分析的依據(jù)主要是來(lái)源于先天的遺“指紋”“道地性”和“最正確采集時(shí)間”之說(shuō)。然而，植物的代謝過程仍受其物種先可以對(duì)不同藥材種屬進(jìn)展鑒別，對(duì)同種藥材質(zhì)量?jī)?yōu)劣進(jìn)展評(píng)價(jià)的。謝培山先生對(duì)中藥色譜指紋圖譜給出了以下定義:中藥色譜指紋圖譜是一種綜合的、可量化的色譜鑒定手段。借以鑒別真?zhèn)?，評(píng)價(jià)原.其根本屬性是“整體性”和“模糊性”。2)中藥指紋圖譜的分類：狹義的中藥指紋圖譜是指中藥化學(xué)〔成分)指紋圖譜。廣義的中藥指紋圖譜則可按測(cè)定手段和應(yīng)用對(duì)象進(jìn)展不同的分類?！并　嘲礈y(cè)定手段分類：中藥指紋圖譜按測(cè)定手段可分為中藥化學(xué)(成分(成分)指紋圖譜特征的指紋圖譜。目前首推色譜方法和聯(lián)用技術(shù),使用最多的是用HPLC方法。②中藥生物指紋圖譜包括中藥材DNA指紋圖譜和爭(zhēng)論圖譜和中藥蛋白組學(xué)指紋圖譜系指用中藥制劑作用于某特定細(xì)胞或譜,特別是中藥HPLC指紋圖譜。(ⅱ〕按應(yīng)用對(duì)象分類:中藥指紋圖譜按應(yīng)用對(duì)象來(lái)分類，可分為中藥材(原料藥材)(包括飲片、配伍顆?！持讣y圖譜和中藥制劑指紋圖譜.如分得更細(xì)，還可包括用于生產(chǎn)工藝過程中間產(chǎn)物的指紋圖譜.DNADNA圖譜.由于每個(gè)物種基因的唯一性和遺傳性，中藥材DNA指紋圖譜可用于對(duì)中藥材的種屬鑒定、植物分類爭(zhēng)論和品質(zhì)爭(zhēng)論，它對(duì)中藥材GAP基有用.中藥材化學(xué)(成分)指紋圖譜是指測(cè)定中藥材所含各種化學(xué)成分〔次生代謝產(chǎn)物，所建立的指紋圖譜。雖然化學(xué)成分是次生代謝產(chǎn)植物的代謝具有遺傳性,作為同一物種的個(gè)體在化學(xué)成分上也具有相似性(similarity),指紋圖譜對(duì)掌握中藥材質(zhì)量具有更直接、更重要的意義。中藥原料藥指紋圖譜應(yīng)區(qū)分對(duì)待.對(duì)中藥飲片指紋圖譜的要求根本和中藥材指紋圖譜一樣，對(duì)中藥配伍顆粒(包括標(biāo)準(zhǔn)提取物〕指紋“混批勾兌”的做法，完全可以建立較穩(wěn)定的指紋圖譜，進(jìn)展質(zhì)量掌握。建立穩(wěn)定的中藥制劑化學(xué)指紋圖譜,假設(shè)能實(shí)現(xiàn)將原藥材投料改為提取物投料(可用混批勾兌做法),嚴(yán)格掌握工藝流程,對(duì)生產(chǎn)工藝實(shí)現(xiàn)全過程指紋圖譜監(jiān)控，必定可以解決最終產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定問題。(2〕中藥指紋圖譜的性質(zhì)和作用中藥指紋圖譜應(yīng)符合特征性、重現(xiàn)性和可操作性，才能滿足指紋圖譜的有用要求。不管是中藥材，還是中成藥、中藥方劑的中藥指紋圖譜，肯定要能表達(dá)該中藥(藥材或復(fù)方)的特征，也可稱為專屬性或唯一性。固然來(lái)表現(xiàn)某種中藥(藥材或復(fù)方)的各個(gè)不同側(cè)面的特征，從而構(gòu)成其全貌,但對(duì)其中的每一張圖譜仍應(yīng)有其特征性〔專屬性)的要求。最適宜指紋圖譜.中藥這樣的簡(jiǎn)單體系，根本特性之一是簡(jiǎn)單性，其中包含了不確定度和肯定的模糊性.這些問題和重現(xiàn)性的概念不同，可以在指紋圖譜的數(shù)據(jù)處理中(如相像度的推斷〕承受適當(dāng)?shù)姆椒ㄓ枰越鉀Q。不同的要求.如對(duì)于質(zhì)量掌握應(yīng)考慮工廠和藥檢所常規(guī)配備的儀器藥理、藥效相關(guān)性爭(zhēng)論,就應(yīng)考慮承受聯(lián)用技術(shù),如GC／MS、HPLC／DAD／MS／MS等方法，獵取大量信息，更有利于得到明確的結(jié)度的推斷上要求應(yīng)比最終產(chǎn)品低一些?！?)中藥指紋圖譜質(zhì)控技術(shù)的應(yīng)用中藥產(chǎn)業(yè)進(jìn)展到今日，中成藥指紋圖譜質(zhì)控技術(shù)已是牽動(dòng)行業(yè)全面進(jìn)步的關(guān)鍵技術(shù)，其應(yīng)用爭(zhēng)論，對(duì)保證中成藥成效，提高中藥產(chǎn)業(yè)整體水平，帶動(dòng)中藥農(nóng)業(yè)現(xiàn)代化，推動(dòng)中藥走向世界,具有格外重要的現(xiàn)實(shí)意義。1〕指紋圖譜質(zhì)控技術(shù)在中成藥現(xiàn)代化生產(chǎn)中的應(yīng)用：盡管中成藥在我國(guó)已有1700余年的歷史，但由于受科學(xué)技術(shù)條件的限制,中成謂“丸散膏丹,神仙難辨“的道地性和藥工制作的閱歷性。同仁堂“炮制雖繁，必不敢省人力；品嘗雖貴,必不敢減物力”的古訓(xùn)，集中反映了傳統(tǒng)中成藥生產(chǎn)保證質(zhì)20世紀(jì)60小生產(chǎn)狀態(tài),所以，根本上可保證成藥成效。液色迷人20世紀(jì)50年月以后,中成藥劑型工藝到生產(chǎn)方式發(fā)生了根本的變“丸、散、膏、丹”,制劑主料也由提取物取代原料粉；加之規(guī)?；C(jī)械化生產(chǎn)方式的沖擊，以老藥工的閱歷性”掌握中成藥質(zhì)量的局面受到了沖擊。要維持中成藥以嚴(yán)格的檢驗(yàn)掌握.隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步和植物化學(xué)爭(zhēng)論的不斷深入相應(yīng)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，也有了長(zhǎng)足的進(jìn)步.以《中華人民共和國(guó)藥典》為例,1963年版《藥典》收載的中藥材只有基原與外觀外形鑒別，中成藥則僅有處方與制法,沒有任何檢驗(yàn)工程。1977年版《藥典》大量采用了顯微鑒別。1985版《藥典》開頭，色譜、光譜技術(shù)在中藥質(zhì)量掌握上被承受,應(yīng)用的具體方法、技術(shù)、測(cè)定的成分和被要求的品種，2023308種，把的主要成分或有藥效的成分作為質(zhì)控指標(biāo)予以檢測(cè)掌握。麻黃、甘草酸與甘草、人參皂苷與人參、天麻素與天麻等在中醫(yī)來(lái)看“補(bǔ)氣”“活血”“溫里”“發(fā)表”“滋陰”、“健脾”等成效，是藥材飲片或成藥方劑內(nèi)含物質(zhì)群的整體作用結(jié)果。此物質(zhì)群的整體狀況,包括所含的物質(zhì)數(shù)、物質(zhì)量及組成比例差異，.就拿化學(xué)皂苷有30多種，揮發(fā)油29種,氨基酸15種，礦物質(zhì)29種，糖類16種，有機(jī)酸11,而且還不斷有的覺察.一味藥材尚且如此，復(fù)方成藥的物質(zhì)群就更簡(jiǎn)單了。液色迷人中醫(yī)傳統(tǒng)上有“傳方不傳量”的發(fā)表劑“桂枝湯”由桂枝、芍藥、生姜、炙甘草、大棗5味藥組成，〔脾胃〕的補(bǔ)益劑“小建中湯”。所以要掌握中藥成效，不能只針對(duì)某一二個(gè)化學(xué)成分，必需對(duì)方劑物質(zhì)群整體予以掌握。就此而言，要把質(zhì)量有效方法。而現(xiàn)代色譜、光譜等儀器分析所得物質(zhì)群指紋圖譜，呈現(xiàn)了這種可能性。幾個(gè)物質(zhì)群在一樣儀器、一樣試驗(yàn)條件、一樣操作方法下所得的指紋圖譜一樣性,即可反映這些物質(zhì)群的同屬性。雖然對(duì)知曉,但這并不影響對(duì)物質(zhì)群全都性的推斷。不僅可以定性鑒別,還可,最大成藥現(xiàn)代化生產(chǎn)中的應(yīng)用成為可能.結(jié)底要表達(dá)在產(chǎn)品質(zhì)量掌握的現(xiàn)代化上.這種質(zhì)量掌握的要求，首先以掌握到達(dá)成品內(nèi)在質(zhì)量的全都.而這兩點(diǎn)正是當(dāng)前中成藥生產(chǎn)中最為突出的問題,不僅現(xiàn)有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本身缺乏以掌握成品成效穩(wěn)定和安全，而且生產(chǎn)本身也難以保證成品的全都.全部這些又都是由于對(duì)成品的物質(zhì)群差異狀況本身就知之甚少。液色迷人,帶動(dòng),對(duì)原料倉(cāng)儲(chǔ)治理予以改進(jìn);必需要求對(duì)配方投料不僅僅是按處方投料,治理，切實(shí)保證操作全都性,到達(dá)結(jié)果的全都性；必定要求對(duì)生產(chǎn)過程中的內(nèi)在質(zhì)量予以監(jiān)控，爭(zhēng)論相應(yīng)技術(shù)對(duì)策,努力保證每個(gè)程序的出料符合要求,到達(dá)最終成品符合要求；必定要求對(duì)設(shè)備選型進(jìn)展研究，改善設(shè)備保養(yǎng)治理，保證設(shè)備狀態(tài)和使用的全都性。中成藥的GMP在這時(shí)才更表達(dá)出“軟件要求重于硬件要求的真諦”。此外，指紋圖譜質(zhì)控技術(shù)的承受，也為各種設(shè)備、技術(shù)的應(yīng)用供給了寬闊的空間。指紋圖譜與生產(chǎn)過程關(guān)系親熱，可變因素多.一方面給指紋圖譜全都性帶來(lái)難度,另一方面正是由于有了指紋圖譜工藝，設(shè)備,而不是簡(jiǎn)潔地要么都是醇沉工藝,要么都是大孔樹脂工藝，要么一概排斥，盲目性很大。同樣，中成藥企業(yè)承受指紋圖譜要抑制很多技術(shù)和治理的障礙,但同時(shí)，也就在制定產(chǎn)品的指紋質(zhì),就不產(chǎn)品自我保護(hù)的技術(shù)壁壘?；僮?，提高標(biāo)準(zhǔn)治理程度,促進(jìn)生產(chǎn)過程的數(shù)字化掌握，提高儀器一處方,不同工藝,,就可以篩選優(yōu)化、標(biāo)準(zhǔn)化的過程中，必將促進(jìn)產(chǎn)業(yè)構(gòu)造更加集中化，企業(yè)更加規(guī)?；??？梢灶A(yù)見,如同當(dāng)年中成藥衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)引發(fā)了中成藥企業(yè)的全面進(jìn)步—樣,中藥質(zhì)控指紋圖譜的爭(zhēng)論與應(yīng)用在推動(dòng)中成藥產(chǎn)業(yè)現(xiàn)代化上必定起到更深、更廣的導(dǎo)向與促進(jìn)作用。2600多年前的《詩(shī)經(jīng)》中就有具體20的局面,已相當(dāng)群眾化。直至現(xiàn)在家種家養(yǎng)藥材已經(jīng)根本滿足市場(chǎng)需要.在此過程中，培育了一批中藥材農(nóng)藝科技人員,積存了一批中藥材大，藥材質(zhì)量波動(dòng)亦大，而且藥材質(zhì)量比之過去反而下降。不僅是種植粗放問題,更有品種基原混亂、栽培地域混亂、收獲季節(jié)混亂以及農(nóng)藥、化肥的濫用。再加上藥材千年沿襲的集貿(mào)交易形式給制假、摻,藥材質(zhì)量的參差不齊直接影響國(guó)內(nèi)飲片與中成藥質(zhì)量，影響藥材出口,造成出口數(shù)量的下降。.30對(duì)原料質(zhì)量不講究,什么廉價(jià)進(jìn)什么，導(dǎo)致了中藥農(nóng)業(yè)重?cái)?shù)量不重質(zhì)量的狀況?，F(xiàn)代中藥產(chǎn)業(yè)藥材、飲片、提取物、成藥四大支柱，中成藥的經(jīng)濟(jì)份額最大，藥材的70％以上供給中成藥廠,中成藥工業(yè)已經(jīng)處于中藥產(chǎn)業(yè)的主體地位,對(duì)中藥農(nóng)業(yè)客觀上具有主導(dǎo)作用.建立藥材基地，對(duì)工業(yè)企業(yè)和藥農(nóng)有供需穩(wěn)定、價(jià)格穩(wěn)定、生產(chǎn)穩(wěn)定和質(zhì)量穩(wěn)定的好處.對(duì)產(chǎn)業(yè)來(lái)說(shuō)，這充分表達(dá)出工業(yè)為主導(dǎo)，農(nóng)業(yè)為根底.以現(xiàn)代化工業(yè)引導(dǎo)現(xiàn)代化農(nóng)業(yè)，把現(xiàn)代化工業(yè)建立在現(xiàn)代化農(nóng)業(yè)的根底上。只有這樣才能保證中藥工業(yè)現(xiàn)代化的長(zhǎng)久穩(wěn)定發(fā)展，也只有這樣才有整體協(xié)調(diào)的中藥現(xiàn)代化.可以說(shuō)，沒有中藥農(nóng)業(yè)現(xiàn)代化，就沒有中藥現(xiàn)代化，這方面一些企業(yè)已經(jīng)有了成功的閱歷，陜西南洛的丹參基地，上海市藥材公司在上海市郊的西紅花基地等。中藥指紋圖譜的應(yīng)用已經(jīng)促使一些中藥工業(yè)企業(yè)認(rèn)真思考原料基地實(shí)現(xiàn)現(xiàn)代化的問題.由此可見，這項(xiàng)技術(shù)有牽動(dòng)中藥工業(yè)與中藥農(nóng)業(yè)共同實(shí)現(xiàn)現(xiàn)代化的作用,這種作用還剛剛開頭,由此產(chǎn)生的工業(yè)生產(chǎn)規(guī)?；?、集約化帶動(dòng)中藥農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的集約化、標(biāo)準(zhǔn)化〔GAP)和中藥農(nóng)業(yè)的集中化、規(guī)?；⒌赖匦?，這種作用必將越來(lái)越顯著。4〕國(guó)外中藥指紋圖譜質(zhì)控技術(shù)的爭(zhēng)論現(xiàn)狀：近20年來(lái)，承受指紋圖譜質(zhì)控技術(shù)對(duì)中成藥這樣的物質(zhì)群實(shí)施質(zhì)量掌握已成為世界各國(guó)的共識(shí)。如在20世紀(jì)80年月，日本漢方藥主要生產(chǎn)企業(yè)在企業(yè)內(nèi)和監(jiān)控生產(chǎn)過程。即承受傳統(tǒng)方劑和道地藥材,嚴(yán)格掌握大生產(chǎn)的原.歐洲始終比較EGb761就是一個(gè)典型的范例.他們對(duì)銀杏葉提取物進(jìn)展了長(zhǎng)期的爭(zhēng)論，覺察合物所含內(nèi)酯和黃酮相互分別，覺察都不具備全部提取物整體的成效。最終得出EGb761提取物是一個(gè)“整體“，正是這樣一種混合物保證了其所具有的治療作用。這個(gè)結(jié)論和中醫(yī)藥整體觀的生疏是全都的，即中成藥的療效是物質(zhì)群整體的成效。而對(duì)于這樣一個(gè)“整體”的質(zhì)量掌握,也殊途同歸，現(xiàn)在也是承受高效液相指紋圖譜方法。美國(guó)FDA最近幾年制定的植物草藥指南中已經(jīng)明確把指紋圖譜作為這類混合物質(zhì)群的質(zhì)量掌握方法.對(duì)用于治療抑郁癥的草藥貫葉連翹的1998年貫葉連翹產(chǎn)品從德國(guó)傳到美國(guó),使之成為了美國(guó)草藥市場(chǎng)上令人注目的熱點(diǎn)。美國(guó)承受指標(biāo)成分金絲桃素含量作為其質(zhì)量掌握標(biāo)準(zhǔn).但是，近年一些爭(zhēng)論覺察,此質(zhì)控成分無(wú)抗抑郁作用，而德國(guó)公司始終承受指紋圖譜整體掌握技術(shù),被認(rèn)為更合理.產(chǎn)業(yè)界卻應(yīng)用很少,用于中藥生產(chǎn)尚有很多問題有待解決.特別是怎樣,不斷探究、加強(qiáng)溝通、準(zhǔn)時(shí)總結(jié)和完善,才能逐步建立起符合中藥特色的指紋圖譜質(zhì)控技術(shù)體系.總之，以指紋圖譜作