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本文格式為Word版,下載可任意編輯——基礎(chǔ)生物化學(xué)A2基礎(chǔ)生物化學(xué)A其次章核酸化學(xué)
一、名詞解釋:1、Tm-常把核酸熱變性過程中光吸收達到最大吸收﹝完全變性﹞一半﹝雙螺旋結(jié)構(gòu)失去一半﹞時的溫度稱
為DNA的熔點或溶解溫度。2、增色效應(yīng):當DNA從雙螺旋結(jié)構(gòu)變?yōu)閱捂湹臒o規(guī)則卷曲狀態(tài)時,它在260nm處的吸收便增加,這叫“增色效應(yīng)〞3、減色效應(yīng):DNA在260nm處的光密度比在DNA分子中的各個堿基在260nm處吸收的光密度的總和小得多(約少35%~40%),這
現(xiàn)象稱為“減色效應(yīng)4、分子雜交:不同的DNA片段之間,DNA片段與RNA片段之間,假使彼此間的核苷酸排列順序互補也可以復(fù)性,形成新的雙螺旋結(jié)構(gòu)。這種依照互補堿基配對
而使不完全互補的兩條多核苷酸相互結(jié)合的過程稱為分子雜交。5、Chargaff法則:即堿基互補配對原則,在DNA分子結(jié)構(gòu)中,由于堿基之間的氫鍵具有固定的數(shù)目和DNA兩條鏈之間的距離保持不變,使得堿基配對必需遵循一定的規(guī)律,這就是Adenine(A,腺嘌呤)一定與
Thymine(T,胸腺嘧啶)配對,Guanine(G,鳥嘌呤)一定與Cytosine(C,胞嘧啶)配對,反之亦然。二、簡答題1.比較DNA和RNA在分子組成和結(jié)構(gòu)上的異同點。答:組成與結(jié)構(gòu)上的異同點:DNA:脫氧核糖、A-T/C-G、雙鏈、雙螺旋RNA:核糖、A-U/C-G、單鏈、局部螺旋。
2.試述RNA的主要種類及其生理學(xué)作用。答:mRNA:蛋白質(zhì)合成的模板;tRNA:識別密碼子,運輸氨基酸;rRNA:核蛋白體組成成分。3.tRNA分
1
子結(jié)構(gòu)上有哪些特點?答:tRNA結(jié)構(gòu)特點是:二級結(jié)構(gòu)是三葉草結(jié)構(gòu),三級結(jié)構(gòu)是倒―L‖型。4.何為DNA的變性?變性后的DNA改變了哪些特性?答:在理化因素作用下,DNA雙螺旋的兩條互補鏈松散而分開成為單鏈,從而導(dǎo)致DNA的理化性質(zhì)及生物學(xué)性質(zhì)發(fā)生改
變,這種現(xiàn)象稱為DNA的變性。DNA變性后的性質(zhì)改變:DNA由線形變成無規(guī)則的線團;增色效應(yīng):指DNA變性后對260nm紫外光的光吸收度增加的現(xiàn)象;粘度降低,沉降速度增加;浮力
密度上升等。5.mRNA結(jié)構(gòu)的哪些特征與mRNA在細胞質(zhì)的穩(wěn)定性有關(guān)?答:mRNA的5’帽子結(jié)構(gòu)可以保護核酸酶的水解,3’尾巴結(jié)構(gòu)可延長其在細胞質(zhì)中的時間。6.何為核酶?其特點是什么?答:具有自身催化作用的RNA稱為核酶(ribozyme);特點:RNA既是
酶又是底物,核酶尋常具有特別的分子結(jié)構(gòu),如錘頭、柄結(jié)構(gòu),這些結(jié)構(gòu)是RNA可以獨立完成rRNA的剪接的基礎(chǔ)。7、比較DNA、RNA在化學(xué)組成上、大分子結(jié)構(gòu)上、細胞內(nèi)分布和生物
學(xué)功能及在oligo﹝dT﹞上的特點。答:在化學(xué)組成上DNA由磷酸和脫氧核糖與腺嘌呤鳥嘌呤胞嘧啶胸腺嘧啶四種堿基組成相應(yīng)的脫氧核苷酸而RNA有磷酸和核糖與腺嘌呤鳥嘌呤胞嘧啶尿嘧啶四種堿基組成相應(yīng)的核苷酸大分子結(jié)
構(gòu)
方
面
RNA
有
tRNArRNAmRNA等類型在細胞中有不同的功能在生物功能方面DNA是主要的遺傳物質(zhì)RNA是病毒的遺傳物質(zhì)。RNA參與蛋白質(zhì)的生物合成rRNA是蛋白質(zhì)合成的裝配
2
者并起催化作用tRNA是轉(zhuǎn)換器攜帶氨基酸并起解譯作用mRNA是信使攜帶DNA的遺傳信息并起蛋白質(zhì)合成的模板。8、DNA雙螺旋構(gòu)象有哪幾種?在溶液中,DNA一般采用哪種構(gòu)象?答:Watson和Crick提出的DNA右手雙螺旋模型是B型構(gòu)象。除了B構(gòu)象外人們還發(fā)現(xiàn)了A構(gòu)象、C構(gòu)象、D構(gòu)象和E構(gòu)象等右手雙螺旋構(gòu)象以及左手雙螺旋的Z構(gòu)象。在溶液中,DNA一般為B型。9、DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型有哪些基本要點?答:(1)主鏈
(backbone):由脫氧核糖和磷酸基通過酯鍵交替連接而成。主鏈有二條,它們似\麻花狀繞一共同軸心以右手方向旋繞,相互平行而走向相反形成雙螺旋構(gòu)型。主鏈處于螺旋的外則,所謂雙螺旋就是針對二條主鏈的形狀而言的。(2)堿基對(basepair):堿基位于螺旋的內(nèi)則,它們以垂直于螺旋軸的取向通過糖苷鍵與主鏈糖基相連。同一平面的堿基在二條主鏈間形成堿基對。配對堿基總是A與T和G與C。堿基對以氫鍵維系,A與T間形成兩個氫鍵。DNA結(jié)構(gòu)中的
堿基對與Chatgaff的發(fā)現(xiàn)正好相符。從立體化學(xué)的角度看,只有嘌呤與嘧啶間配對才能滿足螺旋對于堿基對空間的要求,而這二種堿基對的幾何大小又十分相近,具備了形成氫鍵的適合鍵長和鍵角條件。每對堿基處于各自自身的平面上,但螺旋周期內(nèi)的各堿基對平面的取向均不同。堿基對具有二次旋轉(zhuǎn)對稱性的特征,即堿基旋轉(zhuǎn)180°并不影響雙螺旋的對稱性。也就是說雙螺旋結(jié)構(gòu)在滿足二條鏈堿基互補的前提下,DNA的一級結(jié)構(gòu)并不受限制。這一特征
3
能很好的說明DNA作為遺傳信息載體在生物界的普遍意義。(3)大溝和小溝:大溝和小溝分別指雙螺旋表面凹下去的較大溝槽和較小溝槽。小溝位于雙螺旋的互補鏈之間,而大溝位于相毗鄰的雙股之間。這是由于連接于兩條主鏈糖基上的配對堿基并非直接相對,從而使得在主鏈間沿螺旋形成空隙不等的大溝和小溝。在大溝和小溝內(nèi)的堿基對中的N和O原子朝向分子表面。(4)結(jié)構(gòu)參數(shù):螺旋直徑
2nm;螺旋周期包含10對堿基;螺距3.4nm;相鄰堿基對平面的
間距0.34nm。10、維持DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定因素有哪些,哪種力是最主要的?答:為右手反平行雙螺旋,兩鏈均圍繞同一個中心軸;主鏈(由脫氧核糖基和磷酸基交替構(gòu)成)位于螺旋外側(cè),堿基位于內(nèi)側(cè);兩條鏈間存在堿基互補:A與T或G與C配對形成氫鍵,稱為堿基互補原則(A與T為兩個氫鍵,G與C為三個氫鍵);螺旋的螺距為3.4nm,直徑為2nm,每一圈需要10對堿基。螺旋的穩(wěn)定因
素為橫向氫鍵和縱向堿基堆砌力。11、tRNA分子結(jié)構(gòu)有哪些
共同的特點?答:tRNA分子有丙氨酸-tRNA一級結(jié)構(gòu),有三葉草型的二級結(jié)構(gòu),即是⑴、分子中由A-U,G-C堿基對構(gòu)成的雙螺旋區(qū)叫做臂,不配對的部分叫做環(huán)。:tRNA一般由四個臂四個環(huán)組成。⑵三葉草的葉柄叫做氨基酸臂,它包括3′端接受氨基酸的部位-CpCpAOH.⑶反密碼環(huán)含有該tRNA的三個核苷酸組成的反密碼子。⑷左臂連接一個二氫尿嘧啶環(huán),環(huán)上含有二氫尿嘧啶﹝D﹞.⑸右臂連接一個T¢C環(huán),另外在反密碼臂和右臂之間還有一個可變環(huán)。⑹堿基
4
組成中含有較多的稀有核苷酸。12、真核細胞mRNA的結(jié)構(gòu)特點是什么?答:﹝1﹞.mRNA分
子為單鏈,從5′-端的AUG開始,每3個核苷酸為一組,決定肽鏈上的一個氨基酸。按一定順序排列的3個核苷酸稱為三聯(lián)體密碼。
﹝2﹞.大多數(shù)真核mRNA的5′端在轉(zhuǎn)錄后均加上一個7-甲基鳥苷二磷酸基,形成mTGpppN的結(jié)構(gòu),稱為帽子結(jié)構(gòu)。﹝3﹞.絕大多數(shù)真核mRNA的3′-端有200多個腺苷酸的尾巴,這是在轉(zhuǎn)錄后逐個添加上去的,其作用
在于增加mRNA的穩(wěn)定性和維持其翻譯活性。
13、核酸有何紫外吸收特點?在
試驗室如何利用這一特點研究核酸?答:不同的核苷酸在260nm附近有不同的吸收特性,因此可以利用紫外吸收特性定性和定量地檢測核酸和核苷酸。14、核酸的熱變形有何特點?Tm值表示什么?影響Tm值的因素有哪些?答:DNA變性的特點是爆發(fā)式的,變性作用發(fā)生在一個很窄的溫度范圍內(nèi)。尋常把熱變性過程中光吸收達到最大吸收一半時的溫度稱為DNA
的熔點或溶解溫度,用Tm表示。DNA的Tm值與以下因素有關(guān)⑴、DNA均一性愈高,溶解過程的溫度范圍愈小;⑵、G-C堿基含量
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