抗腫瘤壞死因子藥物和重組細胞因子

抗腫瘤壞死因子藥物和重組細胞因子第1頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五抗腫瘤壞死因子藥物重組細胞因子第2頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五腫瘤壞死因子（TumorNecrosisFactor,TNF)1975年由Carswell在研究中觀察到，經(jīng)卡介苗致敏的小鼠被注射大腸桿菌內(nèi)毒素后，血清中出現(xiàn)一種物質(zhì)，該物質(zhì)在體內(nèi)可以使移植腫瘤發(fā)生出血、壞死，遂將該物質(zhì)命名為腫瘤壞死因子TNF。TNF-α主要由單核－巨噬細胞分泌，又稱為惡液素；TNF-β主要由活化的T淋巴細胞分泌。兩型TNF有不同的細胞來源,DNA水平上也僅有28%的核苷酸序列同源,但兩者結(jié)合于相同的膜受體,并且具有非常相似的生物學(xué)功能。第3頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五1984年P(guān)ennica等首次克隆了人TNF-α的cDNA，并在大腸桿菌中表達成功。20世紀80年代末，西方國家就已批準了人TNF治療惡性腫瘤的臨床試驗，但因毒副作用太強而未能進行下去。1995年，第四軍醫(yī)大學(xué)研制的突變體新型人重組腫瘤壞死因子（nrhTNF），其殺傷腫瘤細胞的活性是天然人TNF的100倍，毒性降低了3倍。2003年8月，正式獲得新藥生產(chǎn)文號。這是目前世界上第一個被批準生產(chǎn)的重組改構(gòu)人腫瘤壞死因子藥物。1-78-P-S-D-108-R-L-R-10157L157P1233第4頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五免疫：TNF是一種真正的多效因子，具有多種生物學(xué)效應(yīng)。它可直接作用于T細胞、B細胞、NK細胞等效應(yīng)細胞，在細胞水平上發(fā)揮作用?？鼓[瘤：TNF通過受體介導(dǎo)對腫瘤細胞的直接殺傷作用，抑制細胞生長和誘導(dǎo)凋亡，通過損傷腫瘤的血供系統(tǒng)而導(dǎo)致腫瘤的壞死，逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞的多藥耐藥，增加對化療藥物的敏感性。炎癥反應(yīng)：TNF誘導(dǎo)黏附分子表達，促進白細胞黏附于血管內(nèi)皮細胞，使白細胞向炎癥部位滲出，誘導(dǎo)其他炎性細胞因子的合成?？垢腥荆阂种漂懺x生長、抑制病毒復(fù)制、抑制病毒蛋白合成、抑制病毒顆粒產(chǎn)生和感染性以及殺傷病毒感染細胞。其他第5頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五感染性休克：目前認為革蘭氏陰性桿菌或腦膜炎球菌引起的彌漫性血管內(nèi)凝血、中毒性休克是由于細菌內(nèi)毒素刺激機體產(chǎn)生過量TNF-α，引起發(fā)熱，心臟、腎上腺嚴重損害，呼吸循環(huán)衰竭，甚至引起死亡，其TNF水平與病死率正相關(guān)。惡液質(zhì)：TNF-α又稱惡液素（cachectin)，可誘發(fā)機體發(fā)生惡液質(zhì)。TNF與病毒復(fù)制的關(guān)系：TNF還具有類似IFN抗病毒作用，阻止病毒早期蛋白質(zhì)的合成，從而抑制病毒的復(fù)制，并與TNF-α等協(xié)同抗病毒作用。另一方面，TNF誘導(dǎo)HIV-Ⅰ基因在T細胞中表達。TNF和HIV感染的CD4+細胞中活化或誘導(dǎo)NF-kB，NF-kB結(jié)合于HIV的長末端重復(fù)序列（LTR）的增強子部位，活化HIV基因，可能與艾滋病發(fā)病有關(guān)。艾滋病患者單核細胞TNF-α產(chǎn)生增加，血清中TNF-α水平升高。

第6頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五TNF與類風(fēng)濕疾病類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)是一種以關(guān)節(jié)疼痛、腫脹、僵直、變形為主要臨床表現(xiàn)的慢性全身性自身免疫性疾病。早期表現(xiàn)為關(guān)節(jié)游走性疼痛和功能障礙,晚期則表現(xiàn)為關(guān)節(jié)僵硬、畸形、廢而不用。第7頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五類風(fēng)濕的發(fā)生部位及機理第8頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五雷公藤：

消炎痛、布洛芬、阿司匹林、美舒寧等環(huán)氧化酶抑制劑柳氮磺吡啶、甲氨蝶呤（MTX）、氯喹及青霉胺、金制劑等糖皮質(zhì)激素腫瘤壞死因子(TNF)-α拮抗劑，包括依那西普單抗(etanercept)、英夫利西單抗(infliximab)和阿達木單抗(adalimumab)亦可使用雷公藤、白芍總苷、青藤堿等植物制劑緩解關(guān)節(jié)疼痛或采用手術(shù)第9頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五商品名類克Remicade修美樂Humira恩利Enbrel通用名Infliximab英夫利西單抗Adalimumab阿達木單抗Etanercept依那西普研發(fā)公司Johnson&JohnsonAbbott/CAT

Immunex來源人鼠嵌合IgG1單克隆抗體人源化單克隆抗全人源抗體上市時間199920021998半衰期8.0~9.5d16d4~5d對鼠蛋白質(zhì)產(chǎn)生過敏者禁用較低的免疫原性除了可與TNF-α結(jié)合外還可以與TNF-β高效結(jié)合第10頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五抗腫瘤壞死因子藥物重組細胞因子第11頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五牛奶中添加OMP，即造骨牛奶蛋白（OsteoblastsMilkProtein），一種微量存在于牛乳中的天然活性蛋白，在有效提高人體骨密度方面。OMP實際上是國外研究很多的一種生長因子IGF-1(insulin-likegrowthfactors-1,類胰島素生長因子)，不僅不能造骨，還有致癌風(fēng)險。鑒于目前我國未對OMP的安全性做出明確規(guī)定，IGF-1物質(zhì)不是傳統(tǒng)食品原料，也未列入食品添加劑使用標(biāo)準，如人為添加上述物質(zhì)，不符合現(xiàn)有法律法規(guī)的規(guī)定。

國家質(zhì)檢總局第12頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五

細胞因子（cytokine）是由由免疫細胞（如單核、巨噬細胞、T細胞、B細胞、NK細胞等）和某些非免疫細胞（內(nèi)皮細胞、表皮細胞、纖維母細胞等）產(chǎn)生的一類調(diào)節(jié)細胞功能的高活性、多功能的多肽分子，不包括免疫球蛋白、補體和一般生理性的細胞產(chǎn)物。第13頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五細胞因子的特點：可溶性（soluble），胞外蛋白（extracellular）大小為150氨基酸左右可由許多細胞產(chǎn)生，主要由淋巴細胞、白細胞和上皮細胞產(chǎn)生細胞受傷害或感染時誘導(dǎo)靶細胞可為多種類型與靶細胞上的受體結(jié)合后起作用調(diào)控免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)細胞生長、分化、死亡以及血管生成第14頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五重組細胞因子是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)的細胞因子產(chǎn)品，作為藥物用于治療腫瘤、感染、造血障礙等，可收到良好的療效。近十多年來，重組細胞因子類藥物的研制有較快發(fā)展，相關(guān)的新藥陸續(xù)上市。第15頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五細胞因子根據(jù)功能可大致分為六大類：腫瘤壞死因子（tumornecrosisfactor,TNF）干擾素（interferon,IFN）

白細胞介素（interleukins，ILs）集落刺激因子(colony-stimulatingfactor，CSF)趨化因子（chemokines）生長因子（growthfactor，GF）第16頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五干擾素干擾素是由病毒和其他種類的干擾素誘導(dǎo)劑，刺激網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)（人體免疫系統(tǒng)的一種）、巨噬細胞、淋巴細胞以及體細胞所產(chǎn)生的一種糖蛋白。這種蛋白具有多種生物活性，包括抗增殖、免疫調(diào)節(jié)、抗病毒和誘導(dǎo)分化作用。干擾素種類繁多，分子量也不同，亦有不同的抗原性。目前了解由人的不同細胞產(chǎn)生的干擾素至少有三種不同的抗原成分：白細胞干擾素抗原(Le)---IFN-α人成纖維細胞干擾素抗原（F）---IFN-βT淋巴細胞干擾素抗原（T）---IFN-γ

第17頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五根據(jù)來源、基因序列和氨基酸組成分類

I型干擾素：IFNα、IFNβ、IFNτ、IFNω

來源：白細胞、成纖維細胞、病毒感染的組織細胞等功能：抗病毒感染、抗腫瘤生長

免疫調(diào)節(jié)(較弱）

其中IFN-α為多基因產(chǎn)物，有23種以上的亞型。

II型干擾素：干擾素γ（IFN)

來源：活化的T細胞和NK細胞產(chǎn)生功能：免疫調(diào)節(jié)第18頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五干擾素不能直接滅活病毒，而是通過誘導(dǎo)細胞合成抗病毒蛋白（AVP）發(fā)揮效應(yīng)，實現(xiàn)對病毒的抑制作用。免疫調(diào)節(jié)作用表現(xiàn)在對宿主免疫細胞活性的影響，如對巨噬細胞、T細胞、B細胞和NK細胞等均有一定作用。干擾素不殺死病毒，只是阻礙病毒合成第19頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五天然干擾素

人體淋巴母細胞樣多亞型天然干擾素（IFN-N1），葛蘭素威康公司（英國）生產(chǎn)，商品名為惠福仁。重組干擾素

IFNα1b：世界上第一個采用中國人干擾素基因克隆和表達的IFNα1b型干擾素，商品名為賽若金，深圳科興生物制品有限公司生產(chǎn)，有300萬U/支和500萬U/支兩種劑量。

IFN-α2a：羅氏公司（瑞士）生產(chǎn)的羅擾素，有300萬U/支和450萬U/支兩種劑量；沈陽三生公司生產(chǎn)的因特芬，每支300萬U；遼寧衛(wèi)星生物研究所生產(chǎn)的迪恩安，每支300萬U和500萬U兩種劑型。

IFNα2b：先靈葆雅（美國）公司生產(chǎn)的干擾能300萬U/支和500萬U/支；天津華立達公司生產(chǎn)的安福隆，300萬U/支；安徽安科公司生產(chǎn)的安達芬，100萬U/支、300萬U/支、500萬U/支；合肥兆峰科大藥業(yè)有限公司，尤靖安，1.0*105IU/g。第20頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五干擾素在臨床上廣泛應(yīng)用于慢性乙型肝炎、丙型肝炎以及腎癌、表淺膀胱癌、黑色素瘤、尖銳濕疣、血液系統(tǒng)疾病、艾滋病相關(guān)的卡波濟肉瘤等的治療。在國內(nèi)重組人干擾素和重組人生長激素市場，呈現(xiàn)國產(chǎn)藥品和進口藥品并存的格局。進口重組人干擾素為長效干擾素，價格偏高，單價均在1000元左右。國產(chǎn)重組人干擾素為普通干擾素，最高劑量的單價只在100元左右，普通干擾素市場競爭也主要集中在國內(nèi)生產(chǎn)企業(yè)之間。

第21頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五1972年發(fā)現(xiàn)第一個成員IL-1。1983年發(fā)現(xiàn)IL-2，其在免疫系統(tǒng)中發(fā)揮核心調(diào)節(jié)作用。到2001年，已有23個成員，從IL-1到IL-23。只有IL-2和IL-11成功開發(fā)為基因工程藥物。IL-3、IL-6、IL-10、IL-12、IL-15正在研究開發(fā)，有的已進入臨床二期試驗。白細胞介素是由多種細胞產(chǎn)生并作用于多種細胞的一類細胞因子。由于最初是由白細胞產(chǎn)生又在白細胞間發(fā)揮作用，所以由此得名，現(xiàn)仍一直沿用。白細胞介素(interleukin)縮寫為IL。白細胞介素第22頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五白細胞介素－IL-2和IL-11IL-2IL-11位置4號19號基因產(chǎn)物大小133Aa199Aa主要產(chǎn)生細胞激活的T細胞、NK細胞成纖維細胞、骨髓基質(zhì)細胞別名T細胞生長因子脂肪細胞生長抑制因子對熱穩(wěn)定性對熱不穩(wěn)定對熱穩(wěn)定第23頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五白細胞介素－IL-2處于調(diào)節(jié)機體免疫應(yīng)答的細胞因子網(wǎng)絡(luò)的中心環(huán)節(jié)，誘導(dǎo)和激活免疫活性細胞通過自分泌活化T細胞，促細胞因子產(chǎn)生；刺激NK細胞增殖，增強NK殺傷活性及產(chǎn)生細胞因子，誘導(dǎo)LAK細胞產(chǎn)生；促B細胞增殖和分泌抗體。腫瘤治療，批準治療的有腎細胞癌、血管肉瘤和黑色素瘤；抗感染治療，對病毒性、細菌性和細胞內(nèi)寄生蟲等疾病具有療效；對先天性和后天性免疫缺陷癥有一定療效第24頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五白細胞介素－IL-11是造血微環(huán)境中一個多功能的調(diào)節(jié)因子。促進血小板生成；誘導(dǎo)T細胞、B細胞的發(fā)育、分化并對特異性抗原反應(yīng)產(chǎn)生免疫球蛋白；調(diào)節(jié)肝細胞血漿蛋白基因的表達，誘導(dǎo)急性期蛋白生成實體瘤、非髓性白血病化療后Ⅲ、Ⅳ度血小板減少癥的治療；骨髓造血功能障礙性血小板減少癥的治療，可縮短血小板減少的持續(xù)時間第25頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五集落刺激因子集落刺激因子(colonystimulatingfactor,CSF)可刺激骨髓未成熟細胞分化成熟并在體外刺激集落形成的細胞因子。用集落培養(yǎng)方法發(fā)現(xiàn)的造血細胞生長因子不同的CSF刺激生成由不同細胞系組成的細胞集落

第26頁，共30頁，2023年，2月20日，星期五根據(jù)細胞因子刺激不同造血細胞系或不同分化階段的細胞在半固體培養(yǎng)基中形成不同細胞集落，分別命名:粒細胞集落刺激因子（granulocyteCSF,G-CSF）粒細胞巨噬細胞集落刺激因子（granulocyte-macrophageCSF,GM-CS