高中生物選擇性必修3同步系列（新教材）講義匯總

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第1節(jié)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用一、發(fā)酵與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)1．發(fā)酵的歷史(1)約9000年前，我們的祖先就會利用微生物將谷物、水果等發(fā)酵成含酒精的飲料。(2)1857年，法國微生物學(xué)家巴斯德通過實驗，證明酒精發(fā)酵是由活的酵母菌引起的。2．發(fā)酵的概念發(fā)酵是指人們利用微生物，在適宜的條件下，將原料通過微生物的代謝轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過程。3．腐乳的制作(1)參與的微生物：多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如酵母、曲霉和毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。(2)腐乳的特點：豆腐中的蛋白質(zhì)被分解成小分子的肽和氨基酸，味道鮮美，易于消化吸收，便于保存。4．傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)(1)概念：直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次發(fā)酵保存下來的面團、鹵汁等發(fā)酵物中的微生物進行發(fā)酵、制作食品的技術(shù)。(2)類型：傳統(tǒng)發(fā)酵以混合菌種的固體發(fā)酵及半固體發(fā)酵為主，通常是家庭式或作坊式的。(3)發(fā)酵產(chǎn)品：利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作的食品有腐乳、醬、醬油、醋、泡菜和豆豉等。(1)我國具有悠久的釀酒文化和歷史，許多古老的釀酒工藝一直保留并延續(xù)至今()(2)腐乳是經(jīng)微生物發(fā)酵制作的豆制品()(3)傳統(tǒng)發(fā)酵以混合菌種的液體發(fā)酵為主()答案(1)√(2)√(3)×二、嘗試制作傳統(tǒng)發(fā)酵食品一、制作泡菜1．所需菌種——乳酸菌(1)分布廣泛：空氣、土壤、植物體表、人或動物的腸道內(nèi)都有分布。(2)代謝類型：異養(yǎng)厭氧型。(3)常見種類：乳酸鏈球菌和乳酸桿菌。2．制作原理(1)在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解為乳酸?？捎糜谌橹破返陌l(fā)酵、泡菜的腌制等。(2)反應(yīng)簡式：C6H12O6eq\o(→,\s\up7(酶))2C3H6O3(乳酸)＋能量。特別提醒(1)乳酸菌是在無氧條件下能將葡萄糖分解成乳酸的一類細菌的總稱。(2)乳酸菌是厭氧微生物，在有氧氣存在時，無氧呼吸受抑制。(3)抗生素能殺死乳酸菌或抑制乳酸菌的生長，所以含抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶。3．方法步驟二、制作果酒和果醋1．果酒制作的原理(1)發(fā)酵菌種①菌種來源：主要是附著在葡萄皮上的野生酵母菌。②代謝類型：異養(yǎng)、兼性厭氧型。③釀酒酵母的最適生長溫度約為28℃。④應(yīng)用：可用于釀酒、制作饅頭和面包等。(2)制作原理條件反應(yīng)簡式目的有氧C6H12O6＋6H2O＋6O2eq\o(→,\s\up7(酶))6CO2＋12H2O＋能量大量繁殖無氧C6H12O6eq\o(→,\s\up7(酶))2C2H5OH(酒精)＋2CO2＋能量酒精發(fā)酵特別提醒在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。2．果醋制作的原理(1)發(fā)酵菌種①菌種：醋酸菌。②代謝類型：異養(yǎng)需氧型，對氧氣的含量特別敏感。(2)制作原理①氧氣、糖源都充足：醋酸菌能將糖分解成醋酸。反應(yīng)簡式：C6H12O6＋2O2eq\o(→,\s\up7(酶))2CH3COOH＋2H2O＋2CO2＋能量。②氧氣充足、缺少糖源：醋酸菌將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛，再將乙醛變?yōu)榇姿帷７磻?yīng)簡式：C2H5OH＋O2eq\o(→,\s\up7(酶))CH3COOH＋H2O＋能量。(3)發(fā)酵所需條件①氧含量：保持氧氣充足。②溫度：控制在30～35℃。3．果酒和果醋制作步驟(1)制作傳統(tǒng)泡菜是利用植物體表面天然的乳酸菌來進行發(fā)酵的()(2)制作泡菜時，在蔬菜裝至半壇時將冷卻好的鹽水倒入壇中()(3)制作果醋的溫度比制作果酒的溫度高()(4)泡菜腌制時間越長越好，與室內(nèi)溫度無關(guān)()(5)制作果酒和果醋時需對水果進行煮熟以防止雜菌污染()答案(1)√(2)×(3)√(4)×(5)×1．泡菜發(fā)酵初期發(fā)酵壇的水槽內(nèi)會間歇性有氣泡冒出，氣泡產(chǎn)生的原因是酵母菌等微生物進行細胞呼吸產(chǎn)生CO2形成的。2．在四川，人們制作泡菜用的是一種壇口突起，壇口周圍有一圈凹形托盤，扣上扣碗可以密封的壇子。使用這種壇子的原因是什么？提示乳酸菌為厭氧菌，乳酸發(fā)酵需在無氧條件下進行。3．在果酒制作過程中往往會出現(xiàn)“先來水、后來酒”的現(xiàn)象，其原因是什么？提示前期通氧，酵母菌進行有氧呼吸產(chǎn)生了水，后期密閉，酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精。4．醋酸菌進行醋酸發(fā)酵時，無論是利用糖源還是酒精，都需要氧氣這一重要條件，請說明原因。提示醋酸菌是好氧菌，在生活過程中始終需要氧氣，如果氧氣中斷則會引起醋酸菌的死亡。特別提醒(1)制作泡菜的注意事項①用于制作泡菜的蔬菜應(yīng)新鮮，若放置時間過長，蔬菜中的亞硝酸鹽含量相對較高。②用清水和食鹽配制質(zhì)量百分比為5%～20%的鹽水。食鹽的用量過高，乳酸發(fā)酵受抑制，泡菜風味差；用量過低，雜菌易繁殖，導(dǎo)致泡菜變質(zhì)。鹽水要煮沸后冷卻，煮沸的作用：一是除去水中的氧氣，二是殺滅鹽水中的其他微生物。③控制嚴格的厭氧條件的措施a．選擇合理的發(fā)酵容器，如泡菜壇，這是一種既科學(xué)又簡單的厭氧發(fā)酵容器。b．鹽水煮沸后冷卻待用。c．裝壇時壓實，使鹽水沒過全部菜料。d．泡菜壇用水封口不讓空氣進入，創(chuàng)造一個封閉無氧的環(huán)境，發(fā)酵期間不宜開蓋，并注意在發(fā)酵過程中經(jīng)常向水槽中補充水。④控制適宜的發(fā)酵溫度：溫度過高易致雜菌滋生；溫度過低不利于乳酸發(fā)酵，會使發(fā)酵時間延長。⑤控制發(fā)酵時間：一般在腌制10天后，亞硝酸鹽含量開始下降。但泡菜發(fā)酵時間并不是越長越好，一方面發(fā)酵時間過長，可能會產(chǎn)生其他有害物質(zhì)，另一方面，發(fā)酵時間過長，乳酸含量過高，口味不佳。(2)果酒、果醋制作過程中防止雜菌污染的措施①榨汁機、發(fā)酵瓶等器具要清洗干凈并用體積分數(shù)為70%的酒精消毒，晾干。②清洗葡萄時要先沖洗后去除枝梗和腐爛的籽粒，以避免除去枝梗時引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機會。③用帶蓋的瓶子制作果酒時，每隔12h左右排氣時只需擰松瓶蓋，不要完全揭開瓶蓋。1．多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如酵母、曲霉和毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。2．傳統(tǒng)發(fā)酵以混合菌種的固體發(fā)酵及半固體發(fā)酵為主。3．制作泡菜的主要菌種是乳酸菌，為厭氧菌，在無氧條件下可將葡萄糖分解為乳酸。4．在發(fā)酵過程中要保證乳酸菌所需的無氧環(huán)境。5．用于果酒和果醋制作的菌種分別是酵母菌和醋酸菌。6．在葡萄酒的自然發(fā)酵中，菌種來源于附著在葡萄皮上的野生酵母菌。7．果酒制作中應(yīng)先通氣再密閉，而果醋的制作應(yīng)始終在有氧條件下進行。8．當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌可將糖分解成醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?．在腐乳制作中起主要作用的微生物是()A．酵母菌 B．曲霉C．毛霉 D．乳酸菌答案C2．(2020·山東東營月考)《舌尖上的中國》講述四川泡菜時曾強調(diào)“腌泡菜也有大講究”。下列有關(guān)泡菜制作的敘述，正確的是()A．泡菜制作過程應(yīng)控制適宜的溫度，30～35℃是乳酸菌的最適生長溫度B．制作泡菜時泡菜壇一般要密封，主要目的是避免外界雜菌的污染C．蔬菜應(yīng)新鮮，若放置時間過長，蔬菜中的亞硝酸鹽含量較高D．清水和食鹽配制的質(zhì)量百分比為5%～20%的鹽水，煮沸后要冷卻的目的是降低水中的氧氣含量答案C解析30～35℃是醋酸菌的最適生長溫度，不是乳酸菌的，A錯誤；泡菜壇密封的主要目的是為乳酸菌等微生物創(chuàng)造無氧的環(huán)境，B錯誤；新鮮蔬菜放置時間過長，亞硝酸鹽的含量會較高，C正確；煮沸后冷卻的目的是防止殺死乳酸菌等微生物，D錯誤。3．(2019·四川綿陽月考)某人利用乳酸菌制作泡菜，因操作不當導(dǎo)致泡菜腐爛，其原因可能是()①密閉缺氧的環(huán)境抑制了乳酸菌的生長繁殖②密封不嚴，氧氣抑制了乳酸菌的生長繁殖③密封不嚴，氧氣抑制了其他厭氧微生物的生長繁殖④密封不嚴，氧氣促進了好氧微生物的生長繁殖A．①③ B．②④C．②③ D．①④答案B解析缺氧環(huán)境有利于乳酸菌的生長繁殖，如果密封不嚴，則會抑制乳酸菌的生長繁殖，促進好氧微生物的生長繁殖，①③錯誤、②④正確。4．(2019·江蘇，9改編)下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用的敘述，正確的是()A．利用乳酸菌制作酸奶過程中，先通氣培養(yǎng)，后密封發(fā)酵B．家庭制作果酒、果醋通常都是純種發(fā)酵C．果醋制作過程中發(fā)酵液pH逐漸降低，果酒制作過程中情況相反D．醋酸菌在缺乏糖源時，可以將酒精轉(zhuǎn)化為乙醛，再將乙醛變?yōu)榇姿岽鸢窪解析乳酸菌是厭氧細菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成乳酸，因此，利用乳酸菌制作酸奶的過程中，應(yīng)該密封發(fā)酵，A錯誤；家庭制作果酒、果醋過程中存在多種微生物，通常都不是純種發(fā)酵，B錯誤；醋酸菌在氧氣充足、糖源充足時，能將果汁中的糖分解成醋酸，在缺少糖源時，醋酸菌將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛，再將乙醛變?yōu)榇姿?，從而使發(fā)酵液中的pH逐漸降低；而在果酒制作過程中，酵母菌在細胞呼吸過程中會生成二氧化碳，二氧化碳溶于水生成碳酸，也會使發(fā)酵液中的pH逐漸降低，C錯誤、D正確。5．為釀制楊梅酒，小明將楊梅榨成汁后分別裝入甲、乙、丙三個發(fā)酵瓶中，如圖所示。下列有關(guān)說法不正確的是()A．應(yīng)將發(fā)酵瓶放在30～35℃環(huán)境中進行發(fā)酵B．甲瓶未夾住發(fā)酵瓶的充氣管，會導(dǎo)致沒有酒精生成C．乙瓶每隔一段時間需打開排氣管排氣，最終可以得到楊梅酒D．丙瓶中發(fā)酵液過多，會導(dǎo)致發(fā)酵液從排氣管流出答案A解析果酒發(fā)酵的最適溫度是18～30℃，A錯誤。6.如圖所示為用果酒制果醋的發(fā)酵裝置，請分析回答下列問題：(1)在果醋發(fā)酵過程中，要向發(fā)酵瓶中通入無菌空氣，原因是___________________________；制果醋過程中，需將溫度控制在__________。(2)乙中遺漏了一個裝置，請以文字形式加以補充：_________________________________。(3)在缺少糖源時，果酒制果醋的反應(yīng)簡式為________________________________________________________________________________________________________________。(4)在果醋發(fā)酵過程中，用____________________證明是否有醋酸生成；用______________來檢驗產(chǎn)生的果醋中是否有酒精。(5)如果將該裝置改為酒精的發(fā)酵裝置，則溫度應(yīng)該控制在________。此時裝置需要修改的地方是________________________________________________________________________。答案(1)醋酸菌是好氧細菌30～35℃(2)應(yīng)補充一個排氣裝置(3)C2H5OH＋O2eq\o(→,\s\up7(酶))CH3COOH＋H2O＋能量(4)pH試紙檢測發(fā)酵液的pH(酸性)重鉻酸鉀溶液(5)18～30℃不需要通入無菌空氣解析(1)醋酸菌是好氧細菌，故用醋酸菌制果醋時必須通入無菌空氣，否則會影響醋酸菌的生長繁殖，進而影響醋酸的產(chǎn)生。醋酸菌的最適生長溫度為30～35℃，故制作果醋時應(yīng)該將溫度控制在30～35℃。(4)產(chǎn)生醋酸后，發(fā)酵液的pH會降低，可用pH試紙檢測發(fā)酵液的pH來檢驗是否有醋酸產(chǎn)生?？梢杂弥劂t酸鉀溶液來檢驗是否有酒精產(chǎn)生，在酸性條件下，重鉻酸鉀溶液與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。(5)酵母菌為兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，不產(chǎn)生酒精；在無氧條件下，酵母菌進行酒精發(fā)酵。酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在18～30℃。A組基礎(chǔ)對點練題組一發(fā)酵與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)1．下列不屬于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作的食品的是()A．醬 B．泡菜C．豆豉 D．果汁答案D解析果汁不是發(fā)酵的產(chǎn)物。2．發(fā)酵是利用微生物生產(chǎn)所需代謝物的一種生產(chǎn)方式，通常說的乳酸菌發(fā)酵是()A．核苷酸發(fā)酵 B．氨基酸發(fā)酵C．厭氧發(fā)酵 D．需氧發(fā)酵答案C題組二制作泡菜3．制作泡菜所利用的乳酸菌是()A．人工加入到泡菜水中的B．所選蔬菜自身原有的C．腌制過程中自生的D．煮沸后鹽水中的答案B解析制作泡菜所利用的乳酸菌最初來自所選蔬菜自身。4．泡菜制作過程中，下列對不同時期泡菜壇中乳酸菌含量的敘述，正確的是()A．制作泡菜初期并無乳酸菌的存在B．腌制過程中乳酸菌含量會逐漸增多并達到最高峰，然后下降C．腌制后期乳酸菌含量會急劇下降D．腌制的全過程乳酸菌的含量不變，活性不同答案B解析泡菜的制作原理是在無氧環(huán)境下，利用蔬菜表面的乳酸菌的代謝，將葡萄糖轉(zhuǎn)化成乳酸。發(fā)酵初期就有乳酸菌存在，由于發(fā)酵條件的變化，乳酸菌大量繁殖，達到峰值后，由于酸度過大，乳酸菌數(shù)量會逐漸下降，但不是急劇下降。5．(2020·吉林梅河段考)下列有關(guān)泡菜發(fā)酵過程的敘述，正確的是()A．發(fā)酵時間越長，亞硝酸鹽的含量越高B．發(fā)酵過程中只有乳酸菌的發(fā)酵作用C．發(fā)酵過程需要有氧環(huán)境D．發(fā)酵過程中要經(jīng)常補充水槽中的水答案D解析隨著泡菜發(fā)酵過程的進行，亞硝酸鹽的含量先增加后減少；發(fā)酵過程中起主要作用的是乳酸菌，此外，還有酵母菌的發(fā)酵作用，酵母菌的發(fā)酵可改善產(chǎn)品風味。乳酸菌是厭氧菌，乳酸發(fā)酵需要無氧環(huán)境；發(fā)酵過程中要經(jīng)常補充水槽中的水，以保持壇內(nèi)無氧的環(huán)境。題組三制作果酒和果醋6．下列關(guān)于實驗室中果醋制作的敘述，錯誤的是()A．果醋的制作需要醋酸菌，醋酸菌是一種好氧細菌，所以在制作過程中需通入氧氣B．制作果醋的溫度比制作果酒的溫度高，一般為45℃C．醋酸菌能將果酒變成果醋D．果酒制成后，可將裝置轉(zhuǎn)移至溫度較高的環(huán)境中制作果醋答案B解析果醋制作的溫度一般為30～35℃，B錯誤；醋酸菌發(fā)酵的溫度比酵母菌高，D正確。7．(2019·福建廈門外國語學(xué)校高二上月考)近年來，蘋果醋正成為果醋市場的新貴，該產(chǎn)品由蘋果汁經(jīng)“兩次發(fā)酵”而成。以下關(guān)于“兩次發(fā)酵”的敘述正確的是()A．第一次發(fā)酵指乳酸發(fā)酵，第二次發(fā)酵指醋酸發(fā)酵B．第一次發(fā)酵指酒精發(fā)酵，第二次發(fā)酵指醋酸發(fā)酵C．兩次發(fā)酵均為真菌所為D．兩次發(fā)酵均為細菌所為答案B解析果醋制作過程中“兩次發(fā)酵”是指相繼發(fā)生的通過酵母菌把葡萄糖分解為酒精(和CO2)和通過醋酸菌把酒精氧化為醋酸兩個過程；酵母菌和醋酸菌分別屬于真菌和細菌，故本題選B。8．(2020·廣東中山紀念中學(xué)高二月考)如圖所示為制作果酒和果醋的流程，下列相關(guān)敘述中錯誤的是()A．①為沖洗，目的是去掉葡萄表面的污物，但不能沖洗次數(shù)過多B．②為果酒，酒精發(fā)酵過程中要嚴格控制氧氣和溫度C．③為果醋，醋酸發(fā)酵過程中要間斷通氣D．②的制作過程中既涉及有氧呼吸又涉及無氧呼吸答案C解析①為沖洗，目的是去掉葡萄表面的污物，但不能沖洗次數(shù)過多，否則會沖洗掉葡萄皮表面的野生酵母菌，A正確；酒精發(fā)酵的產(chǎn)物是果酒，氧氣和溫度是影響果酒制作的兩個重要因素，需要在發(fā)酵過程中嚴格控制，B正確；③為果醋，果醋制作所用微生物是醋酸菌，醋酸菌是好氧細菌，在發(fā)酵過程中如果中斷氧氣供應(yīng)會抑制醋酸菌的代謝，甚至引起醋酸菌的死亡，所以應(yīng)持續(xù)通入無菌空氣，C錯誤；果酒制作前期需要酵母菌的有氧呼吸以大量繁殖，后期需要通過無氧呼吸產(chǎn)生酒精，D正確。9．下圖簡單表示了葡萄酒的釀制過程，下列敘述錯誤的是()A．甲裝置一天攪拌2～3次主要是為了釋放產(chǎn)生的氣體B．白糖為甲裝置中酵母菌提供能源物質(zhì)C．甲裝置與乙裝置中放出的氣體主要是二氧化碳D．夏季，打開丙裝置中的塞子，可能會有醋酸產(chǎn)生答案A解析甲裝置一天攪拌2～3次主要是為了增加溶氧量，添加白糖主要是為酵母菌提供能源物質(zhì)，因此，甲裝置主要是讓酵母菌進行有氧呼吸從而大量繁殖，A錯誤、B正確；甲裝置中酵母菌主要進行有氧呼吸，乙裝置中酵母菌進行無氧呼吸，兩個裝置中放出的氣體主要是二氧化碳，C正確；夏季，打開丙裝置中的塞子，空氣中的醋酸菌可能進入容器中，在有氧條件下，將酒精發(fā)酵為醋酸，D正確。10．蘋果醋是以蘋果汁為原料經(jīng)發(fā)酵而成的?；卮鹣铝袉栴}：eq\x(H2O＋CO2)③↑eq\x(葡萄糖)eq\o(→,\s\up7(①))eq\x(丙酮酸)eq\o(→,\s\up7(②))eq\x(乙醇＋CO2)(1)酵母菌的呼吸代謝途徑如圖所示。圖中過程①和②是蘋果醋生產(chǎn)的第一階段，在酵母菌細胞的________________中進行，其產(chǎn)物乙醇(酒精)與____________試劑反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色，這一反應(yīng)可用于乙醇(酒精)的檢驗；過程③在酵母菌細胞的____________中進行，與無氧條件相比，在有氧條件下，酵母菌的增殖速度____________。(2)第二階段是在醋酸菌的作用下將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程，根據(jù)醋酸菌的呼吸作用類型，該過程需要在________條件下才能完成。(3)在生產(chǎn)過程中，第一階段和第二階段的發(fā)酵溫度不同，第一階段的溫度________(填“低于”或“高于”)第二階段。(4)醋酸菌屬于____________核生物，其細胞結(jié)構(gòu)中__________(填“含有”或“不含有”)線粒體。答案(1)細胞質(zhì)基質(zhì)重鉻酸鉀線粒體快(2)有氧(3)低于(4)原不含有解析(1)圖示中的過程①和②分別表示無氧呼吸的第一、第二階段，其場所均為細胞質(zhì)基質(zhì)；橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下與乙醇(酒精)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，變成灰綠色。過程③表示有氧呼吸的第二、第三階段，其場所分別為線粒體基質(zhì)和線粒體內(nèi)膜，即在酵母菌細胞的線粒體中進行。與無氧條件相比，在有氧條件下，酵母菌的增殖速度快。(2)醋酸菌是一種好氧菌，在氧氣充足的條件下才能進行旺盛的生命活動，因此將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程，需要在有氧條件下才能完成。(3)第一階段即果酒的制作，所控制的溫度范圍是18～30℃，第二階段即果醋的制作，所控制的溫度范圍是30～35℃，所以第一階段的溫度低于第二階段。(4)醋酸菌屬于原核生物，其細胞結(jié)構(gòu)中不含線粒體等復(fù)雜的細胞器。B組綜合強化練11．(2020·吉林月考)下列與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)相關(guān)的敘述錯誤的是()A．醋酸菌在無氧條件下利用乙醇產(chǎn)生醋酸B．乳酸菌在無氧條件下利用葡萄糖產(chǎn)生乳酸C．泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸發(fā)酵D．腐乳制作利用了毛霉等微生物的蛋白酶答案A解析醋酸菌是好氧細菌，利用乙醇產(chǎn)生醋酸需在有氧條件下進行，A錯誤；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉，其屬于異養(yǎng)需氧型微生物，腐乳制作的原理是毛霉等微生物的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成易于吸收的小分子的肽和氨基酸，D正確。12．利用卷心菜發(fā)酵制作泡菜過程中，乳酸菌、酵母菌細胞數(shù)量(相對值)和pH的變化如圖所示，下列敘述不正確的是()A．酵母菌和乳酸菌均有以核膜為界限的細胞核B．發(fā)酵初期乳酸菌具有明顯的菌種優(yōu)勢C．發(fā)酵初期pH下降主要由乳酸菌代謝引起D．發(fā)酵中期酵母菌通過無氧呼吸進行增殖答案A解析乳酸菌是原核生物，細胞內(nèi)沒有以核膜為界限的細胞核，A錯誤；根據(jù)題圖中乳酸菌和酵母菌細胞的數(shù)量變化可知，發(fā)酵初期乳酸菌遠多于酵母菌，所以乳酸菌成為明顯的優(yōu)勢菌種，B正確；結(jié)合題圖分析，發(fā)酵初期，由于乳酸菌遠多于酵母菌，其產(chǎn)生的乳酸會降低培養(yǎng)液的pH，C正確；由于整個發(fā)酵過程都是在無氧環(huán)境下進行的，在發(fā)酵中期，酵母菌明顯增多，只能通過無氧呼吸進行增殖，D正確。13．(2020·安徽馬鞍山第二中學(xué)高二周測)從開始制作到泡菜品質(zhì)最佳這段時間內(nèi)，泡菜逐漸變酸，乳酸菌與雜菌數(shù)目發(fā)生變化，下列有關(guān)分析不正確的是()A．泡菜制作初期就有乳酸菌的存在B．密閉的發(fā)酵環(huán)境使乳酸菌在種間競爭中占據(jù)一定優(yōu)勢C．在發(fā)酵過程中，乳酸含量逐漸增多，可以抑制其他微生物的生長D．發(fā)酵過程中，雜菌數(shù)目的減少使乳酸菌與雜菌的種間競爭減弱，因此乳酸菌數(shù)目一直增多答案D解析泡菜制作初期多種微生物并存，也存在乳酸菌，A正確；乳酸菌是厭氧細菌，密閉的發(fā)酵環(huán)境使其在種間競爭中占據(jù)一定優(yōu)勢，B正確；發(fā)酵過程中，乳酸含量不斷增多，不僅可以抑制其他微生物的生長，也會影響乳酸菌的活性，因此乳酸菌數(shù)目不會一直增多，C正確、D錯誤。14．(2019·衡水中學(xué)高二月考)下列關(guān)于果酒和果醋制作原理的敘述中，正確的是()A．果酒和果醋制作分別需要醋酸菌和酵母菌B．無論是制作果酒還是果醋，都需要不斷充入氧氣C．果酒和果醋制作過程中都有氣體產(chǎn)生D．酵母菌和醋酸菌都可以利用糖源進行發(fā)酵答案D解析果酒制作需要的微生物是酵母菌，果醋制作需要的微生物是醋酸菌，A錯誤；由于酵母菌要在無氧狀態(tài)下才能產(chǎn)生酒精，所以在酒精發(fā)酵階段不能通入氧氣，B錯誤；酵母菌在發(fā)酵過程中始終有氣體產(chǎn)生，而醋酸菌在缺少糖源時的發(fā)酵過程無氣體產(chǎn)生，C錯誤；酵母菌可以通過無氧呼吸將葡萄糖轉(zhuǎn)化成酒精，醋酸菌可以在氧氣和糖源都充足的條件下將葡萄糖轉(zhuǎn)化為醋酸，D正確。15．下圖甲、乙分別為某同學(xué)設(shè)計的釀制蘋果醋的基本流程圖和發(fā)酵裝置示意圖。下列相關(guān)分析正確的是(不定項)()A．①過程要先清洗后切塊以減少雜菌的污染B．②過程發(fā)酵所用的酵母菌無具膜結(jié)構(gòu)的細胞器C．②過程中為保證無氧環(huán)境，應(yīng)將果汁裝滿發(fā)酵瓶D．③過程需要將發(fā)酵裝置中的充氣口開關(guān)打開答案AD解析①過程要先清洗蘋果后切塊以減少雜菌的污染，A正確；②過程為果酒發(fā)酵，利用的微生物是酵母菌，酵母菌屬于真核生物，有線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等具膜結(jié)構(gòu)的細胞器，B錯誤；蘋果汁裝瓶過程中，瓶中要留出大約1/3的空間，這樣有利于發(fā)酵初期酵母菌的大量繁殖，同時可以防止發(fā)酵旺盛時發(fā)酵液溢出，C錯誤；③過程為果醋發(fā)酵，利用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是好氧細菌，故發(fā)酵裝置中的充氣口開關(guān)應(yīng)開啟，D正確。16．某研究性學(xué)習小組以櫻桃番茄為材料進行果酒、果醋發(fā)酵實驗，下列相關(guān)敘述錯誤的是(不定項)()A．果酒和果醋的制作可用同一個裝置，但需控制不同發(fā)酵條件B．先供氧進行果醋發(fā)酵，然后隔絕空氣進行果酒發(fā)酵C．與人工接種的發(fā)酵相比，自然發(fā)酵獲得的產(chǎn)品品質(zhì)更好D．適當加大接種量可以提高發(fā)酵速率、抑制雜菌生長繁殖答案BC解析當缺少糖源時，醋酸菌先將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛，再將乙醛變?yōu)榇姿?，因此，?yīng)先隔絕空氣進行果酒發(fā)酵，然后供氧進行果醋發(fā)酵，B錯誤；與自然發(fā)酵相比，人工接種的發(fā)酵獲得的產(chǎn)品品質(zhì)更好，C錯誤。17．在泡菜制作期間，由于乳酸菌的發(fā)酵作用，發(fā)酵產(chǎn)物——乳酸不斷積累，因此可以根據(jù)微生物的活動情況和乳酸積累量，將泡菜發(fā)酵過程分為三個階段：發(fā)酵初期、發(fā)酵中期、發(fā)酵后期。請回答下列問題：(1)發(fā)酵初期：蔬菜剛?cè)雺瘯r，其表面帶入的微生物中大腸桿菌和酵母菌等較為活躍。其中酵母菌最初的細胞呼吸方式是______________________。(2)發(fā)酵中期：由于發(fā)酵初期乳酸菌的發(fā)酵作用，乳酸不斷積累，pH下降，厭氧環(huán)境形成，乳酸菌代謝活躍，并產(chǎn)生大量乳酸。分析此時期壇內(nèi)其他微生物的活動情況及原因：①由于pH的降低，大腸桿菌、酵母菌等的活動受到抑制；②________________________________________________________________________。(3)發(fā)酵后期：在此期間繼續(xù)進行乳酸發(fā)酵，乳酸含量繼續(xù)增加，當乳酸含量達到一定值后，發(fā)酵速度會逐漸變緩甚至停止，主要原因是________________________________________。此階段泡菜酸度過高，風味已不協(xié)調(diào)。(4)請在坐標圖中畫出泡菜腌制過程中乳酸菌數(shù)量和乳酸含量的變化趨勢。答案(1)有氧呼吸(2)②由于氧氣耗盡，需氧型微生物的活動受到抑制(3)pH過低，乳酸菌的代謝活動受到抑制(4)如圖所示解析(1)發(fā)酵初期，泡菜壇中有較多氧氣，酵母菌進行有氧呼吸。(2)發(fā)酵中期，pH降低，大腸桿菌、酵母菌等的活動受到抑制；氧氣缺乏，需氧型微生物的活動受到抑制。(3)發(fā)酵后期，pH過低，乳酸菌的代謝活動受到抑制。(4)隨著發(fā)酵過程的進行，乳酸不斷積累，最后維持穩(wěn)定；乳酸含量過高，會抑制乳酸菌的生長，故乳酸菌數(shù)量先增多后減少。18．下面是家庭釀造甜米酒的具體操作過程：先將米加熱煮至七成熟，待其冷卻至30℃左右，加少許的水和一定量的“酒藥”(實際是酵母菌菌種)，與米飯混合后置于一瓷壇內(nèi)，在米飯中央挖一小洞，加蓋后置于適當?shù)胤奖?約20℃)即可。請從以下幾個方面對此發(fā)酵過程作簡單的分析：(1)先將米煮一煮的目的主要是____________________________________________________。(2)為什么要冷卻到30℃左右后才能加入“酒藥”？________________________________________________________________________。(3)在米飯中央挖一小洞的原因是__________________________________________________________________________________________________________________________。(4)發(fā)酵壇并沒有完全密封，壇內(nèi)無氧發(fā)酵的環(huán)境是如何形成的？________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(5)家庭釀酒的關(guān)鍵是保溫和放“酒藥”，如果米的量很多而放的“酒藥”太少，常常導(dǎo)致甜米酒變質(zhì)而使釀造失敗，其主要原因是_____________________________________________________________________________________________________________________。答案(1)殺滅其他雜菌，并使淀粉易于利用(2)過高的溫度會抑制或殺死酵母菌(3)有利于透氣，保證酵母菌在開始生長時有足夠的氧氣，以便短時間內(nèi)能夠迅速繁殖(4)酵母菌有氧呼吸消耗了大量氧氣，同時產(chǎn)生一部分水，使容器中發(fā)酵液增多，淹沒米飯，從而形成無氧環(huán)境(5)加的“酒藥”太少，造成酵母菌起始密度過低，不能迅速增殖成為優(yōu)勢菌種，從而導(dǎo)致雜菌污染

第2節(jié)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用第1課時微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)一、培養(yǎng)基的配制1．概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。2．種類eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(液體培養(yǎng)基,↓加入凝固劑如瓊脂,固體培養(yǎng)基))特別提醒(1)固體培養(yǎng)基中的瓊脂僅作為凝固劑，不能為微生物生長提供能量和碳源。(2)病毒為非細胞結(jié)構(gòu)生物，只能在活細胞中營寄生生活，目前不能利用人工培養(yǎng)基來培養(yǎng)。3．作用：用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。4．成分(1)主要成分：水、碳源、氮源、無機鹽。(2)其他成分：還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求。(3)牛肉膏和蛋白胨：來源于動物，含有糖、維生素和有機氮等營養(yǎng)物質(zhì)。(4)幾種微生物培養(yǎng)時的特殊需求：培養(yǎng)乳酸桿菌時，需要添加維生素；培養(yǎng)霉菌時，需要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性；培養(yǎng)細菌時，需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性；培養(yǎng)厭氧微生物時，需要提供無氧的條件。(1)所有的培養(yǎng)基中都要加入瓊脂()(2)培養(yǎng)不同微生物的培養(yǎng)基成分完全一樣()(3)培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基調(diào)至堿性()答案(1)×(2)×(3)×試從碳源和氮源的角度分析不同類型的微生物所需的培養(yǎng)基成分的特點。項目自養(yǎng)型微生物異養(yǎng)型微生物碳源CO2、NaHCO3等無機物糖類等有機物氮源NH3、硝酸鹽等無機物尿素、蛋白質(zhì)等有機物誤區(qū)警示(1)微生物最常用的碳源是糖類，尤其是葡萄糖；最常用的無機氮源是銨鹽和硝酸鹽。(2)對異養(yǎng)微生物來說，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源和能源。(3)某些微生物之所以需要補充生長因子，往往是由于缺乏合成作為生長因子的物質(zhì)所需要的酶或合成能力有限。二、無菌技術(shù)1．消毒(1)概念：指使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物。(2)適用對象：操作的空間、操作者的衣著和手等。(3)常用方法：煮沸消毒、巴氏消毒等。2．滅菌(1)概念：指使用強烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。(2)適用對象：用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等。(3)常用方法：濕熱滅菌、干熱滅菌和灼燒滅菌等。(1)獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染()(2)滅菌相比消毒對微生物的殺滅更徹底()(3)無菌操作的對象只要是沒有生物活性的材料(如培養(yǎng)基、接種環(huán)等)都可采用干熱滅菌法進行滅菌()答案(1)√(2)√(3)×消毒和滅菌的原理都是使微生物的蛋白質(zhì)變性，借此殺死微生物。無菌技術(shù)既要考慮效果，又要考慮操作對象的承受能力，例如，活體生物材料、操作者的雙手等只能消毒，而不能滅菌。關(guān)鍵點撥無菌操作中的5個注意事項(1)用體積分數(shù)為70%的酒精消毒效果最好，原因是濃度過高，菌體表面蛋白質(zhì)凝固形成一層保護膜，酒精不能滲入其中；濃度過低，殺菌力減弱。(2)接種室、接種箱和超凈工作臺在使用前，可以用紫外線照射30min，以殺死物體表面或空氣中的微生物。在照射前，適量噴灑石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以加強消毒效果。(3)芽孢是某些細菌生長到一定階段，在細胞內(nèi)形成的休眠體。孢子是某些微生物的繁殖體。(4)一般情況下，在實驗操作過程中，對能滅菌的對象進行滅菌處理，如培養(yǎng)皿及用到的各種器具；對無法滅菌的對象則進行消毒處理，如實驗操作者的衣著和雙手等。(5)與煮沸消毒法相比，巴氏消毒法的優(yōu)點是在達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少。(6)無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還能有效避免污染環(huán)境以及操作者自身被微生物感染。三、微生物的純培養(yǎng)1．概念：將接種于培養(yǎng)基內(nèi)，在合適條件下形成的含有特定種類微生物的群體稱為培養(yǎng)物。由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物，獲得純培養(yǎng)物的過程就是純培養(yǎng)。2．微生物的純培養(yǎng)步驟(以酵母菌的純培養(yǎng)為例)(1)微生物的純培養(yǎng)包括配制培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離和培養(yǎng)等步驟。(2)菌落的概念：分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞群體。(3)接種方法：最常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。(4)平板劃線法①原理：通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。經(jīng)數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離得到單個菌落。②操作(5)方法步驟方法指導(dǎo)倒平板(1)拔出錐形瓶的棉塞(如圖a所示)。(2)將瓶口迅速通過火焰(如圖b所示)。(3)用拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，將培養(yǎng)基(10～20mL)倒入培養(yǎng)皿，立即蓋上皿蓋(如圖c所示)。(4)等待培養(yǎng)基冷卻凝固后，將培養(yǎng)皿倒過來放置(如圖d所示)。(1)倒平板后，待平板冷凝之后需將其倒置()(2)若皿蓋和皿底之間濺上培養(yǎng)基，這個培養(yǎng)基不可再用()(3)平板劃線法接種時，每一次劃線前都要挑取菌種()(4)酵母菌的純培養(yǎng)接種方法只有平板劃線法()(5)培養(yǎng)微生物的溫度因菌種不同而稍有差異()答案(1)√(2)√(3)×(4)×(5)√1．平板劃線法接種菌種時，哪些操作可防止雜菌污染？提示(1)接種前將接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒。(2)劃線操作在酒精燈火焰旁進行。(3)接種環(huán)蘸取菌液時，要將試管口通過火焰。(4)劃線時將培養(yǎng)皿的皿蓋打開一條縫隙，用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面迅速劃線，劃線后及時蓋上皿蓋。2．在作第二次劃線以及其后的操作時，要從上一次劃線的末端開始劃線的原因是劃線末端含有的細菌數(shù)目較少，每次從上一次劃線的末端開始劃線能夠使細菌的數(shù)目隨劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終分散成單個的細菌。3．平板冷凝后，要將平板倒置的原因是平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。歸納總結(jié)平板劃線操作中三種灼燒的目的不同項目目的蘸取菌液前灼燒避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染菌種每次劃線前灼燒殺死上一次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時接種環(huán)上的菌種直接來源于上一次劃線的末端劃線操作結(jié)束后灼燒及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免菌種污染環(huán)境和感染操作者1．培養(yǎng)基用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。2．培養(yǎng)基中含有水、無機鹽、碳源、氮源等營養(yǎng)物質(zhì)，還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求。3．實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和濕熱滅菌等。4．消毒的目的是殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物，滅菌則是殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。5．平板劃線法和稀釋涂布平板法是微生物接種和分離的常用方法。1．關(guān)于微生物的營養(yǎng)，下列說法正確的是()A．同一種物質(zhì)不可能既作碳源又作氮源B．凡是碳源都能提供能量C．除水以外的無機物僅提供無機鹽D．無機氮源也可能提供能量答案D解析對一些微生物來說，含C、H、O、N的有機化合物既是碳源，又是氮源，A錯誤；CO2是光能自養(yǎng)型細菌的碳源，但不能提供能量，B錯誤；除水以外的無機物種類繁多、功能多樣，如CO2可作自養(yǎng)型微生物的碳源，C錯誤；硝化細菌所利用的氮源是無機氮源——氨，同時氨的氧化過程也為硝化細菌提供用以化能合成作用的能源，D正確。2．(2020·山西臨汾一中月考)將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量的蔗糖和瓊脂，用蒸餾水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基。下列有關(guān)敘述不正確的是()A．若在M培養(yǎng)基中加入青霉素，可用于真菌的篩選B．培養(yǎng)細菌時，需要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性C．M培養(yǎng)基中馬鈴薯浸出液可為微生物提供無機鹽D．倒平板時，應(yīng)將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙答案B解析青霉素能抑制細菌的繁殖，但對真菌不起作用，因此若M培養(yǎng)基中加入青霉素，可用于真菌的篩選，A正確；培養(yǎng)細菌時，需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性，B錯誤。3．下列選項中不含有微生物的是()A．洗干凈的臉上 B．洗完澡后的皮膚C．刷完牙后的口腔 D．灼燒之后的接種環(huán)答案D解析用清水洗臉、洗澡、刷牙只是起清潔作用，達不到滅菌效果，只有灼燒過的接種環(huán)才是真正無菌的。4．下列關(guān)于倒平板的敘述，錯誤的是()A．右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞，為避免污染需在酒精燈火焰附近進行B．倒平板整個過程應(yīng)在火焰旁進行C．完全打開培養(yǎng)皿皿蓋，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋D．為避免水滴滴入培養(yǎng)基，平板應(yīng)倒過來放置答案C解析C項應(yīng)是用拇指和食指將培養(yǎng)皿皿蓋打開一條稍大于瓶口的縫隙，而不是完全打開，目的是防止雜菌污染。5.(2020·江蘇蘇州月考)微生物接種的方法很多，平板劃線法是常用的一種。如圖是平板劃線示意圖，劃線的順序為①②③④。下列相關(guān)敘述錯誤的是()A．劃線操作時，將蘸有菌液的接種環(huán)插入培養(yǎng)基B．平板劃線后培養(yǎng)微生物時要倒置培養(yǎng)C．不能將第④次的劃線與第①次的劃線相連D．在第②～④次劃線前都要對接種環(huán)進行滅菌答案A解析劃線時不能將接種環(huán)插入培養(yǎng)基，而是在培養(yǎng)基表面劃線，A錯誤；用平板培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物時，為防止水蒸氣凝集滴入培養(yǎng)基造成干擾或污染，應(yīng)將平板倒置培養(yǎng)，B正確；劃線時要避免最后一次的劃線與第一次的劃線相連，如果連在一起則有可能影響單個菌落的分離效果，C正確；在第②～④次劃線前都要對接種環(huán)進行灼燒滅菌，保證每次劃線的菌種都來自上一次劃線的末端，D正確。6．如表是某種微生物培養(yǎng)基的配方，回答下列問題：牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂水0.5g1g0.5g2g定容至200mL(1)此培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分有四類，其中蛋白胨提供的營養(yǎng)物質(zhì)是______________________。(2)微生物培養(yǎng)最基本的要求是無菌操作。液體培養(yǎng)基應(yīng)選用的滅菌方法是_____________(填“濕熱滅菌”或“干熱滅菌”)；與煮沸消毒法相比，巴氏消毒法的優(yōu)點是_______________。(3)純化菌株時，通常使用的劃線工具是__________________。劃線的某個平板培養(yǎng)后，第一次的劃線上長滿了菌，第二次劃線的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有________________________________。答案(1)氮源和維生素等(2)濕熱滅菌達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少(3)接種環(huán)接種環(huán)灼燒后未冷卻，劃線未從第一次劃線的末端開始A組基礎(chǔ)對點練題組一培養(yǎng)基的配制1．下列有關(guān)培養(yǎng)基的敘述，正確的是()A．培養(yǎng)基只能是天然物質(zhì)B．微生物在固體培養(yǎng)基上生長時，可以形成肉眼可見的單個細菌C．固體培養(yǎng)基上可形成肉眼可見的菌落D．培養(yǎng)基只能培養(yǎng)細菌答案C解析培養(yǎng)基可以是天然物質(zhì)，也可以是人工合成的物質(zhì)，A錯誤；微生物在固體培養(yǎng)基上生長時，可以形成肉眼可見的單個菌落，肉眼不能觀察到單個細菌，B錯誤、C正確；培養(yǎng)基能培養(yǎng)細菌，也能培養(yǎng)真菌，D錯誤。2．(2019·北京期中)已知某種細菌以CO2為唯一碳源，下列相關(guān)敘述正確的是()A．可推測該細菌的代謝類型為自養(yǎng)需氧型B．無機鹽是該細菌不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)C．培養(yǎng)過程中碳源同時充當該細菌的能源物質(zhì)D．培養(yǎng)該細菌的培養(yǎng)基中不需要添加氮源答案B解析該細菌以CO2為唯一碳源，可推測該細菌的代謝類型為自養(yǎng)型，但不能確定是不是需氧型，A錯誤；微生物生長一般需要水、碳源、氮源和無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，B正確；CO2不能為微生物提供能量，C錯誤；氮源是微生物必需的營養(yǎng)物質(zhì)，培養(yǎng)該細菌的培養(yǎng)基中需添加氮源，D錯誤。3．(2020·四川成都月考)如表所示為某培養(yǎng)基的配方，下列敘述錯誤的是()成分NaNO3K2HPO4MgSO4·7H2O(CH2O)蒸餾水青霉素含量3g1g0.5g30g定容至1000mL0.1萬單位A.根據(jù)物理性質(zhì)劃分，該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基B．該培養(yǎng)基不能用于培養(yǎng)大腸桿菌C．根據(jù)培養(yǎng)基的配方可知，該培養(yǎng)基培養(yǎng)的微生物的同化作用類型是異養(yǎng)型D．固體培養(yǎng)基中加入少量水即可形成液體培養(yǎng)基答案D解析固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基的區(qū)別在于是否加入凝固劑(如瓊脂)，題表所示的培養(yǎng)基配方中沒有瓊脂，因此屬于液體培養(yǎng)基，A正確、D錯誤；加入青霉素會抑制細菌的生長繁殖，B正確；該培養(yǎng)基中的(CH2O)可作為有機碳源，因此其培養(yǎng)的微生物的同化作用類型是異養(yǎng)型，C正確。題組二無菌技術(shù)4．下列對于滅菌和消毒的理解，不正確的是()A．滅菌是指殺滅環(huán)境中一切微生物，包括芽孢和孢子B．消毒和滅菌的實質(zhì)是相同的C．接種環(huán)用灼燒法滅菌D．常用的滅菌方法有干熱滅菌、濕熱滅菌、灼燒滅菌答案B5．金黃色葡萄球菌有很強的致病力，常引起骨髓炎等，還可能引起食物中毒，實驗中下列做法錯誤的是()A．對接種環(huán)進行灼燒處理B．帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)濕熱滅菌后才能倒掉C．帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)加熱后才能倒掉D．接種后雙手必須經(jīng)肥皂洗凈，再用體積分數(shù)為70%的酒精棉球擦拭答案C解析帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)濕熱滅菌后才能倒掉，簡單的加熱達不到滅菌效果，C項錯誤。6．防止外來雜菌的入侵，獲得純凈的培養(yǎng)物，是研究和應(yīng)用微生物的前提。下列敘述錯誤的是()A．實驗室里可以用煮沸消毒法或巴氏消毒法進行消毒B．接種環(huán)、接種針等金屬用具，直接在酒精燈火焰的不充分燃燒層灼燒滅菌C．在實驗室中，切不可吃東西、喝水，離開實驗室時一定要洗手，以防止被微生物感染D．玻璃器皿和金屬用具等可以采用干熱滅菌答案B解析灼燒滅菌應(yīng)該在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，B錯誤。題組三微生物的純培養(yǎng)7．下列有關(guān)平板劃線操作的敘述錯誤的是()A．將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅B．接種環(huán)在平板上隨機劃線時不要劃破培養(yǎng)基C．在蘸取菌液前后均要將盛有菌液的試管口通過火焰D．平板冷卻后倒置，放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)答案B8.如圖是平板劃線示意圖，劃線的順序為1→2→3→4→5。下列操作方法正確的是()A．操作前不用進行任何處理B．劃線操作必須在火焰上進行C．在5區(qū)域中才可以得到所需菌落D．在1、2、3、4、5次劃線的前后都要對接種環(huán)滅菌答案D解析劃線之前應(yīng)對接種環(huán)灼燒滅菌；劃線操作在酒精燈火焰旁進行；從第1次劃線至第5次劃線菌落密度越來越小，因劃線所用菌種密度的不同，在第3、4、5次劃線中都可能得到所需菌落。9．在平板劃線法操作中，錯誤的是()A．將接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅B．將燒紅的接種環(huán)在酒精燈火焰旁邊冷卻C．接種環(huán)在平板上的劃線位置是隨機的D．在蘸取菌種前和接種完畢后均要將試管口通過火焰答案C解析接種環(huán)灼燒及接種前后試管口要通過火焰，其目的是為了防止雜菌污染，將接種環(huán)先冷卻再接種可以避免高溫燙死菌種，因此A、B、D都是正確的；在平板上劃線時，要劃三至五條平行線，而不是隨機劃線，因此C選項錯誤。10．請回答下列與酵母菌的純培養(yǎng)有關(guān)的問題：(1)制備培養(yǎng)基：培養(yǎng)基在接種前要進行______________滅菌。(2)接種和分離酵母菌：通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。經(jīng)數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離得到單菌落，這種方法稱為__________。(3)討論分析：①純化酵母菌時，__________(填“可以”或“不可以”)用加入抗生素的方法防止雜菌感染。②用該方法分離酵母菌時，從第二次劃線操作起，每次總是要從上一次劃線的末端開始劃線，并劃線數(shù)次，其原因是___________________________________________________________________________________________________________________________________。③大腸桿菌與酵母菌的最本質(zhì)區(qū)別是_______________________________________________________________________________________________________________________。答案(1)濕熱(2)平板劃線法(3)①可以②線條末端的細菌數(shù)量少，最終可得到單菌落③大腸桿菌無以核膜為界限的細胞核B組綜合強化練11．下列有關(guān)微生物培養(yǎng)與應(yīng)用的敘述，正確的是()A．同一種物質(zhì)可能既作為碳源又作為氮源，所有碳源都能提供能量B．接種前需對培養(yǎng)皿、接種環(huán)進行滅菌處理，對操作者的雙手等進行消毒處理C．培養(yǎng)不同的微生物，用同種成分的培養(yǎng)基即可D．微生物生長不可缺少的微量有機物有氨基酸、維生素和蛋白胨等答案B解析同一種物質(zhì)可能既作為碳源又作為氮源，但自養(yǎng)微生物利用的無機碳源不提供能量，A錯誤；培養(yǎng)不同的微生物，所用培養(yǎng)基的成分往往也有所不同，C錯誤；微生物生長不可缺少的微量有機物主要包括氨基酸、維生素等，D錯誤。12．高溫滅菌的原理是()A．每種微生物生長的最適溫度是一定的B．微生物對于高溫環(huán)境不適應(yīng)C．高溫破壞了微生物的蛋白質(zhì)等生物大分子，影響其生命活動D．高溫降低了環(huán)境中氧的濃度答案C解析高溫的致死作用主要是使微生物的蛋白質(zhì)等生物大分子物質(zhì)發(fā)生不可逆轉(zhuǎn)的變性。13．下列常用的無菌操作中，錯誤的是()A．無菌操作不要求殺死培養(yǎng)基中的一切細菌B．牛奶可用巴氏消毒法消毒C．實驗操作過程應(yīng)在酒精燈火焰附近進行D．玻璃器皿(如吸管、培養(yǎng)皿)可用酒精擦拭進行滅菌答案D解析玻璃器皿應(yīng)采用干熱滅菌。14．下列依次表示倒平板、接種的位置以及平板劃線法接種的路徑的示意圖，其中錯誤的是()答案D解析平板劃線法除第一次劃線外，以后的每一次劃線都從上一次劃線的末端開始。15．下列關(guān)于制備固體培養(yǎng)基時倒平板的敘述，正確的是(不定項)()A．倒好的培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要進行干熱滅菌B．應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C．為防止微生物侵入培養(yǎng)基，要在酒精燈火焰旁進行操作D．倒好培養(yǎng)基后，等培養(yǎng)基冷卻凝固后再將平板倒過來放置答案CD解析應(yīng)該在倒平板之前將培養(yǎng)基進行濕熱滅菌，將培養(yǎng)皿進行干熱滅菌，A錯誤；倒平板時，用拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，立即蓋上皿蓋，B錯誤；倒好培養(yǎng)基后，等培養(yǎng)基冷卻凝固后再將平板倒過來放置，D正確。16．將大腸桿菌接種到適宜的細菌培養(yǎng)基上，加蓋后，以不同的方式處理，并放置在不同溫度的環(huán)境中，培養(yǎng)24小時后，所得結(jié)果如表：編號abcdef處理方法接種大腸桿菌接種大腸桿菌，并覆一吸有抗生素X的圓紙片接種大腸桿菌，并覆一吸有抗生素Y的圓紙片接種大腸桿菌，表面全被醋覆蓋接種大腸桿菌無接種菌溫度40℃40℃40℃40℃0℃40℃觀察結(jié)果全表面呈渾濁紙片周圍呈現(xiàn)一片清晰區(qū)，其余表面呈渾濁全表面呈渾濁全表面清晰全表面清晰全表面清晰根據(jù)上述實驗結(jié)果所作出的判斷，正確的是(不定項)()A．編號a和f比較可知，有大腸桿菌培養(yǎng)基的表面會變渾濁B．根據(jù)編號b和c的觀察結(jié)果，可知抗生素Y比抗生素X的殺菌能力強C．將編號e和a的結(jié)果比較可知，0℃的環(huán)境不適合大腸桿菌生長D．若揭開編號f的蓋子，24小時后培養(yǎng)基表面會出現(xiàn)渾濁答案ACD解析a、f的區(qū)別在于是否接種了大腸桿菌，有大腸桿菌培養(yǎng)基的表面會變渾濁，A正確；將含有抗生素的紙片覆蓋在大腸桿菌的培養(yǎng)基上，可根據(jù)培養(yǎng)基表面的渾濁程度判定此種抗生素對大腸桿菌的殺菌能力，可知抗生素X的殺菌能力強于抗生素Y的殺菌能力，B錯誤；e、a形成對照，其變量是溫度，由觀察結(jié)果可知0℃的環(huán)境不適合大腸桿菌生長，C正確；f暴露在空氣中后，會自然接種菌種，形成菌落，使培養(yǎng)基表面出現(xiàn)渾濁，D正確。17．為了檢測飲用水中是否含有某種微生物，配制的培養(yǎng)基的配方如下，請分析回答下列問題(注：伊紅美藍是由兩種染色劑組成的細胞染料)：蛋白胨牛肉膏乳糖蔗糖K2HPO4伊紅美藍蒸餾水10g5g5g5g2g0.4g0.065g1000mL將培養(yǎng)基pH調(diào)至7.2(1)該培養(yǎng)基所含碳源有____________________________，其功能是__________________。(2)該培養(yǎng)基所含氮源有__________，其功能是________________________________。(3)該培養(yǎng)基除含碳源、氮源外，還有微生物需要的營養(yǎng)物質(zhì)是________________。(4)該細菌在同化作用上的代謝類型是__________型。(5)該培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)________(填“霉菌”或“細菌”)。答案(1)乳糖、蔗糖、牛肉膏主要用于構(gòu)成微生物的細胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物(2)蛋白胨主要用于合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物(3)水、無機鹽(或K2HPO4)(4)異養(yǎng)(5)細菌解析培養(yǎng)微生物需碳源、氮源、水和無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)。由該培養(yǎng)基的pH為7.2，呈弱堿性，可判斷該培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)細菌。18．在微生物連續(xù)培養(yǎng)時，一部分舊的液體培養(yǎng)基以一定的速度流出，同時不斷有等量的新鮮液體培養(yǎng)基流入以保證微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要。研究人員將大腸桿菌JA122菌株接種到葡萄糖含量受到限制的液體培養(yǎng)基中，連續(xù)培養(yǎng)多代，然后取樣分析其中存在的新菌株。請回答下列問題：(1)液體培養(yǎng)基中除了把葡萄糖作為________外，還應(yīng)該含有__________________________。(2)樣品中還發(fā)現(xiàn)了CV101、CV103新品種，對其菌株的代謝差異進行分析發(fā)現(xiàn)，CV103對葡萄糖吸收率最高，代謝終產(chǎn)物是醋酸鹽。進一步研究表明，CV101可以在過濾的培養(yǎng)過CV103的培養(yǎng)基中生長，據(jù)此作出的推測是_____________________________________________________________。請設(shè)計并完成下列實驗，來驗證你的觀點：①配制______________________的固體培養(yǎng)基(A組)和不含碳源的固體培養(yǎng)基(B組)；②將等量且適量稀釋的CV101菌液分別接種到A、B培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間，并觀察記錄菌株的生長情況。實驗過程應(yīng)在________________條件下進行。③預(yù)期實驗結(jié)果：___________________________________________。答案(1)碳源氮源、水和無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)(2)CV101菌株能以CV103菌株產(chǎn)生的醋酸鹽為碳源①以醋酸鹽為唯一碳源②無菌(或適宜的溫度等)③A組菌株生長(形成菌落)，B組菌株不能生長(無菌落)

第2課時微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)一、選擇培養(yǎng)基和微生物的選擇培養(yǎng)1．選擇培養(yǎng)基(1)概念：允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。(2)舉例：篩選土壤中分解尿素的細菌的選擇培養(yǎng)基是以尿素為唯一氮源，按物理性質(zhì)歸類為固體培養(yǎng)基。特別提醒原則上選擇培養(yǎng)基只能允許特定種類的微生物生長，但實際上，微生物的培養(yǎng)是一個非常復(fù)雜的問題，有些微生物可以利用其他微生物的代謝產(chǎn)物生長繁殖，因此能在選擇培養(yǎng)基上生長的微生物不一定都是所需的微生物，還需進一步驗證。2．微生物的選擇培養(yǎng)——稀釋涂布平板法(1)系列稀釋操作①編號為1×102～1×107試管中分別盛有9mL無菌水。②將10g土樣加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中，充分搖勻。③取1mL上清液加入盛有9mL無菌水的試管中，依次等比稀釋。(2)涂布平板操作取菌液：取0.1mL菌液，滴加到培養(yǎng)基表面↓涂布器消毒：將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中↓涂布器滅菌：將涂布器放在火焰上灼燒，待酒精燃盡、涂布器冷卻后，再進行涂布↓涂布平板：用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布時可轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿，使涂布均勻特別提醒取出涂布器時，應(yīng)避免酒精滴落；燃燒后的涂布器，應(yīng)冷卻后再進行涂布。待涂布的菌液被培養(yǎng)基吸收后，將平板倒置，放入30～37℃恒溫箱中培養(yǎng)1～2d。(1)選擇培養(yǎng)基只允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他微生物的生長()(2)稀釋涂布平板法能分離細菌，也能計數(shù)()(3)平板劃線法不僅能純化細菌，也能計數(shù)()(4)以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基()(5)脲酶能催化尿素分解產(chǎn)生N2，N2可作為細菌生長的氮源()答案(1)√(2)√(3)×(4)√(5)×歸納提升兩種接種方法的比較項目平板劃線法稀釋涂布平板法用途一般用于菌種的純化一般用于篩選菌株優(yōu)點可對混合菌進行分離可以計數(shù)缺點不能計數(shù)操作復(fù)雜，若平板不干燥，則效果不好；若菌液濃度大，則長不出單菌落培養(yǎng)結(jié)果下面是篩選分解尿素的細菌培養(yǎng)基的配方，請分析：KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g瓊脂15.0g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容至1000mL(1)從物理性質(zhì)看，該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，從功能上看屬于選擇培養(yǎng)基。(2)該培養(yǎng)基是如何實現(xiàn)對分解尿素的細菌的篩選的？提示該培養(yǎng)基中唯一氮源為尿素，只有能合成脲酶的微生物才能夠分解尿素，而不能合成脲酶的微生物不能分解尿素，會因缺乏氮源而無法生長繁殖，所以用該培養(yǎng)基能夠篩選出分解尿素的細菌。(3)若要證明所用的選擇培養(yǎng)基沒有受到環(huán)境污染，可將未接種的上述培養(yǎng)基與接種的上述培養(yǎng)基同時培養(yǎng)，觀察是否有菌落的產(chǎn)生；若未接種的培養(yǎng)基無菌落產(chǎn)生，則證明培養(yǎng)基沒有受到環(huán)境污染。二、微生物的數(shù)量測定1．統(tǒng)計菌落數(shù)目方法：稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數(shù)法。常用來統(tǒng)計活菌數(shù)目的方法是稀釋涂布平板法。2．稀釋涂布平板法(1)統(tǒng)計依據(jù)：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個單菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。(2)操作①同一稀釋度下，應(yīng)至少對3個平板進行重復(fù)計數(shù)，然后求出平均值。②為保證結(jié)果準確，一般選擇菌落數(shù)為30～300的平板進行計數(shù)。③統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌實際數(shù)目低。3．顯微鏡直接計數(shù)法：利用特定的細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下觀察、計數(shù)，然后再計算一定體積的樣品中微生物的數(shù)量，缺點是不能區(qū)分死菌與活菌。4．土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)Ⅰ.實驗設(shè)計(1)土壤取樣①土壤要求：酸堿度接近中性且潮濕。②取樣部位：距地表約3～8_cm的土壤層。(2)樣品的稀釋測定土壤中細菌的數(shù)量，一般選用1×104、1×105和1×106倍稀釋的稀釋液進行平板培養(yǎng)，當?shù)谝淮巫鲞@個實驗時可以將稀釋的范圍放寬一點。(3)微生物的培養(yǎng)與觀察①培養(yǎng)：根據(jù)不同微生物的需要，控制適宜的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間。細菌一般在30～37℃的溫度下培養(yǎng)1～2d。②觀察a．觀察方法：每隔24h統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果。b．記錄菌落的特征：包括菌落的形狀、大小和顏色等。Ⅱ.操作提示(1)無菌操作①取土樣的用具在使用前都需要滅菌。②實驗操作均應(yīng)在火焰旁進行。(2)做好標記：本實驗使用的平板和試管比較多，為避免混淆，最好在使用前做好標記。例如，在標記培養(yǎng)皿時應(yīng)該注明組別、培養(yǎng)日期和平板上培養(yǎng)樣品的稀釋度等。(3)制定計劃：對于耗時較長的生物實驗，需要事先規(guī)劃時間，以便提高實驗效率，在操作時有條不紊。(1)從土壤中取樣時，土層越淺越好()(2)來自土壤的微生物稀釋倍數(shù)越大越好()(3)測定不同微生物數(shù)量時，接種的土壤懸浮液的稀釋度相同()(4)菌落特征是鑒別菌種的重要依據(jù)()(5)利用顯微鏡直接計數(shù)法統(tǒng)計的細菌數(shù)量就是活菌的數(shù)量()答案(1)×(2)×(3)×(4)√(5)×甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù)。在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下兩種統(tǒng)計結(jié)果。(1)甲同學(xué)在該濃度下涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)為230，該同學(xué)的統(tǒng)計結(jié)果不可靠(填“可靠”或“不可靠”)，若不可靠，應(yīng)如何改進？提示為增加實驗的說服力與準確性，應(yīng)設(shè)置重復(fù)實驗，在同一稀釋度下至少涂布3個平板，統(tǒng)計結(jié)果后計算平均值。(2)乙同學(xué)在該濃度下涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別為21、212、256，該同學(xué)將21舍去，然后取平均值。該同學(xué)對實驗結(jié)果的處理不合理(填“合理”或“不合理”)。微生物計數(shù)時，如果實驗中出現(xiàn)重復(fù)實驗的結(jié)果差別很大的情況，應(yīng)分析實驗過程中可能的影響因素，找出差異的原因，而不能簡單地將結(jié)果舍棄后進行計數(shù)。(3)某同學(xué)在三種稀釋度下吸取0.1mL的菌液涂布平板，統(tǒng)計菌落數(shù)，得到以下的數(shù)據(jù)，試計算1g樣品的活菌數(shù)。平板菌落數(shù)稀釋度平板1平板2平板3104320360356105212234287106212318提示105的稀釋度下取0.1mL的菌液涂布的三個平板上的菌落數(shù)在30～300之間，計算其平均值為(212＋234＋287)/3≈244。進一步可以換算出1g樣品中活菌數(shù)為(244÷0.1)×105＝2.44×108(個)。(4)為什么統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低？提示當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。特別提醒分離尿素分解菌操作中的注意事項(1)在實驗操作中，每個步驟都要注意無菌操作，以防培養(yǎng)基被污染，影響實驗效果。(2)樣品稀釋液的最佳濃度為培養(yǎng)后每個平板上有30～300個菌落的濃度。細菌一般選用1×104、1×105、1×106倍稀釋的稀釋液進行平板培養(yǎng)，放線菌一般選用1×103、1×104、1×105倍稀釋的稀釋液進行平板培養(yǎng)，真菌一般選用1×102、1×103、1×104倍稀釋的稀釋液進行平板培養(yǎng)。(3)為排除非測試因素(培養(yǎng)基)的干擾，實驗需設(shè)置不接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進行空白對照。(4)每一稀釋倍數(shù)的菌液都至少要涂布3個平板，作為重復(fù)實驗，求其平均值，若其中有菌落數(shù)與其他平板差別很大的，則需要重新實驗。1．實驗室中微生物篩選的原理：人為提供有利于目的菌生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度和pH等)，同時抑制或阻止其他微生物的生長。2．在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基。3．只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，因此可用尿素作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基分離能分解尿素的細菌。4．測定微生物數(shù)量的常用方法有活菌計數(shù)法和顯微鏡直接計數(shù)法。稀釋涂布平板法常用來統(tǒng)計活菌的數(shù)目，但統(tǒng)計結(jié)果往往比活菌的實際數(shù)目低。1．在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基稱為()A．鑒別培養(yǎng)基 B．加富培養(yǎng)基C．選擇培養(yǎng)基 D．基礎(chǔ)培養(yǎng)基答案C2．(2020·四川廣安月考)為了判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染和選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，需要設(shè)置的對照組的培養(yǎng)基分別是()A．未接種的選擇培養(yǎng)基，未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基B．未接種的培養(yǎng)基，接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C．接種了的選擇培養(yǎng)基，接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基D．接種了的培養(yǎng)基，未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基答案B解析若要判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染，可將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，一段時間后若有菌落產(chǎn)生，說明培養(yǎng)基被污染，若無菌落產(chǎn)生，說明培養(yǎng)基沒有被污染。要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，接種了的選擇培養(yǎng)基是實驗組，將等量的稀釋相同倍數(shù)的菌液接種到牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上，作為對照組，在相同的條件下進行培養(yǎng)，觀察比較對照組和實驗組中的菌落數(shù)，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目，綜上所述，B正確。3．微生物接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。下列關(guān)于這兩種接種方法的敘述中，不正確的是()A．都只能用于固體培養(yǎng)基接種B．都需要對菌液進行梯度稀釋C．接種培養(yǎng)后均可獲得單菌落D．接種工具使用后均需要滅菌答案B解析平板劃線法和稀釋涂布平板法都只能用于固體培養(yǎng)基接種，A正確；平板劃線法通過增加劃線數(shù)量，達到稀釋菌種的目的，B錯誤；用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后均可獲得單菌落，C正確；為防止微生物污染環(huán)境和感染操作者，接種工具使用后均需要滅菌，D正確。4．圖甲所示是稀釋涂布平板法中的部分操作，圖乙所示是平板劃線法的操作結(jié)果。下列相關(guān)敘述錯誤的是()A．圖甲中涂布前要將涂布器灼燒，冷卻后才能涂布菌液B．對于濃度較高的菌液，若圖甲中的最高稀釋倍數(shù)僅為102，則所得到的菌落不一定是由單一的細胞繁殖而成的C．圖乙所示培養(yǎng)皿中每個劃線區(qū)域都可得到符合要求的菌落D．圖乙中連續(xù)劃線的起點是上一次劃線的末端(除第一次劃線外)答案C解析平板劃線法中多次劃線的目的是降低菌種濃度，經(jīng)過連續(xù)劃線才有可能得到由單一的細胞繁殖而成的菌落，這種菌落才符合要求，C錯誤。5．(2019·福建泉州月考)用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中尿素分解菌的數(shù)目，為了提高實驗結(jié)果的可信度，往往要設(shè)置對照實驗，對于對照組的要求不包括()A．對照組培養(yǎng)基也嚴格滅菌，且不接種任何微生物B．培養(yǎng)基的量與實驗組必須絕對相同C．所用培養(yǎng)基成分及pH大小與實驗組完全一致D．對照組和實驗組培養(yǎng)基放在相同且適宜的條件下培養(yǎng)答案B解析對照組培養(yǎng)基也要嚴格滅菌，且不接種任何微生物，為空白對照，A不符合題意；倒平板時對照組培養(yǎng)基用量與實驗組不一定絕對相同，B符合題意；培養(yǎng)基的成分、pH為無關(guān)變量，因此對照組所用培養(yǎng)基的成分及pH應(yīng)與實驗組完全一致，C不符合題意；對照組和實驗組的培養(yǎng)基都要置于相同且適宜的條件下培養(yǎng)，以保證單一變量，D不符合題意。6．(2020·黃岡重點中學(xué)調(diào)考)尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類、數(shù)量繁多，某生物小組試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設(shè)計了以下實驗，并成功篩選到能高效降解尿素的細菌(目的菌)。實驗步驟如圖所示，培養(yǎng)基成分如下表所示。請分析回答下列問題：成分KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂含量1.4g2.1g0.2g10g1g15g(1)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選________，這種培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。(2)目的菌生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的__________和__________，實驗中需要振蕩培養(yǎng)，目的是__________________________________________。(3)轉(zhuǎn)到固體培養(yǎng)基上時，常采用__________________法接種，獲得單個菌落后繼續(xù)篩選。(4)下列材料或用具中，需要滅菌的是________；需要消毒的是________(填序號)。①培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿②玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管③實驗操作者的雙手(5)在做分解尿素的細菌的分離與計數(shù)實驗時，A同學(xué)從對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學(xué)只篩選出大約50個菌落。A同學(xué)的實驗結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有________(填字母)。①土樣不同②培養(yǎng)基被污染③操作失誤④沒有設(shè)置對照A．①②③ B．②③④C．①③④ D．①②④答案(1)目的菌選擇(2)尿素葡萄糖為目的菌提供氧氣(3)稀釋涂布平板(或平板劃線)(4)①②③(5)A解析(1)培養(yǎng)基中加入尿素作為唯一氮源能夠篩選出能分解尿素的細菌，此培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(2)尿素為目的菌提供氮源，葡萄糖為目的菌提供碳源。振蕩培養(yǎng)可為培養(yǎng)的目的菌提供必需的氧氣。(5)A同學(xué)比其他同學(xué)得到的實驗結(jié)果數(shù)據(jù)大，可能是由于選取的土樣不同，培養(yǎng)基滅菌不徹底或操作過程中受到雜菌污染，也可能是由操作失誤引起的，如稀釋不夠準確等。培養(yǎng)基上篩選出的細菌數(shù)量與是否設(shè)置對照無關(guān)。A組基礎(chǔ)對點練題組一選擇培養(yǎng)基和微生物的選擇培養(yǎng)1．(2020·山西大同月考)分離土壤中分解尿素的細菌，對培養(yǎng)基的要求是()選項尿素瓊脂葡萄糖硝酸鹽A＋＋＋＋B－－－－C＋＋＋－D＋－－＋注：“＋”表示加入，“－”表示不加。答案C解析分離土壤中分解尿素的細菌，應(yīng)在固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)基中要有碳源，且尿素作為唯一的氮源，故不能添加硝酸鹽。2．尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制選擇培養(yǎng)基時()A．葡萄糖在培養(yǎng)基中越多越好B．尿素分解菌有固氮能力，故培養(yǎng)基中只需無機氮C．尿素在培養(yǎng)基中越少越好D．尿素分解菌無固氮能力，故培養(yǎng)基中的尿素為化合態(tài)氮答案D解析尿素既可以作為尿素分解菌的氮源，也可以作為其碳源，葡萄糖在培養(yǎng)基中并不是越多越好，葡萄糖過多會使培養(yǎng)基的滲透壓過高，不利于尿素分解菌的生長繁殖，A錯誤；尿素分解菌沒有固氮能力，故培養(yǎng)基中需要添加尿素作為氮源，B錯誤；添加尿素的目的是篩選尿素分解菌，其他微生物不能很好地生活在該培養(yǎng)基上，尿素在培養(yǎng)基中不是越少越好，過少就會失去選擇作用，過多又會使細胞失水死亡，C錯誤。3．通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上，大部分微生物無法生長；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細菌和放線菌生長；在培養(yǎng)基中加入10%的酚可以抑制細菌和霉菌生長。利用上述方法能從混雜的微生物群體中分離出()①大腸桿菌②霉菌③放線菌④固氮細菌A．①②③ B．④②③C．①③ D．①②④答案B解析在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長，但固氮細菌能生長；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細菌和放線菌生長，從而分離出霉菌；10%的酚可以抑制細菌和霉菌的生長，從而分離出放線菌。4．平板劃線法和稀釋涂布平板法是接種微生物的兩種常用方法，下列描述正確的是()A．采用稀釋涂布平板法獲得的菌落數(shù)往往多于實際的活菌數(shù)B．平板劃線法是將不同稀釋度的菌液通過接種環(huán)連續(xù)劃在固體培養(yǎng)基表面C．稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液倒入液體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)D．與平板劃線法相比，稀釋涂布平板法形成單菌落的效果更好答案D解析由于兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，所以利用稀釋涂布平板法獲得的菌落數(shù)往往少于實際的活菌數(shù)，A錯誤；平板劃線法不需要稀釋菌液，是將菌液通過接種環(huán)連續(xù)劃在固體培養(yǎng)基表面，B錯誤；稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液涂布到固體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，C錯誤。5．(2019·四川資陽期中)平板劃線法和稀釋涂布平板法是常用的兩種接種方法。下列相關(guān)敘述中錯誤的是()A．平板劃線法要求在培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線，且除第一次劃線外，每一次劃線的起點都是上一次劃線的終點B．除第一次劃線前需要將接種環(huán)灼燒滅菌外，以后的劃線可以不用滅菌C．如果菌液本來濃度不高，則可以適當降低稀釋倍數(shù)D．“充分稀釋”和“連續(xù)劃線”的目的都是獲得由單一細胞繁殖而成的菌落答案B解析將接種環(huán)灼燒滅菌并冷卻后蘸取菌液進行第一次劃線，以后的每一次劃線前都要將接種環(huán)進行灼燒滅菌，B錯誤。題組二微生物的數(shù)量測定6．如圖為“土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)”實驗