無菌藥品生產(chǎn)工藝驗證

無菌藥品生產(chǎn)工藝驗證第1頁/共61頁無菌藥品生產(chǎn)工藝驗證第2頁/共61頁概述最終滅菌的無菌藥品（大容量注射劑、小容量注射劑、部分口服液等）－－制品耐熱－－關(guān)鍵：最終有一個可靠的滅菌措施非最終滅菌的滅菌藥品（粉針、凍干粉針滴眼劑、分裝無菌原料）－－制品不耐熱－－制品無菌性依賴于整個生產(chǎn)過程的無菌控制無菌藥品分類第3頁/共61頁概述關(guān)鍵區(qū)域：無菌產(chǎn)品或容器/密封件（滅過菌的產(chǎn)品、容器和密封件）所暴露的環(huán)境區(qū)域。關(guān)鍵表面：與無菌產(chǎn)品或容器/密封件相接觸的表面無菌藥品生產(chǎn)的特殊要求第4頁/共61頁概述環(huán)境：1萬級＋局部百級或百級、不設(shè)水池及地漏，外部能監(jiān)控；（應(yīng)在組分和產(chǎn)品暴露區(qū)取樣，如配料區(qū)和制備區(qū)等。應(yīng)監(jiān)控?zé)o菌作業(yè)區(qū)的微生物學(xué)質(zhì)量，以確定灌封過程中無菌條件是否得到保持）無菌藥品生產(chǎn)的特殊要求第5頁/共61頁概述操作人員：潔凈工作服＋滅菌原料及內(nèi)包裝材料：除菌、滅菌、去熱原工藝用水、氮氣、壓縮空氣：除菌過濾生產(chǎn)設(shè)備：在線或離線清洗和滅菌清潔工具：清潔滅菌和消毒消毒劑：酒精要除菌過濾無菌藥品生產(chǎn)的特殊要求第6頁/共61頁潔凈（無菌）廠房確認優(yōu)秀的廠房和設(shè)備的設(shè)計實施帶來的是藥品生產(chǎn)簡潔的運行，安全高效的和具有相當(dāng)彈性空間的工藝流程設(shè)計確認（DQ）貫穿整個潔凈（無菌）廠房運行周期中的每一個環(huán)節(jié)第7頁/共61頁降低成本，減少潔凈區(qū)域（“全封閉”技術(shù)）98版GMP中空氣壓差數(shù)值對無菌藥品生產(chǎn)來說較低潔凈（無菌）廠房確認無菌藥品生產(chǎn)潔凈區(qū)域分區(qū)基本原則第8頁/共61頁關(guān)鍵：無菌區(qū)域和非無菌區(qū)域之間的工藝聯(lián)系和隔離措施，搞清無菌區(qū)域與潔凈區(qū)域的聯(lián)系和區(qū)別（萬級無菌/非無菌操作區(qū)）最終滅菌無菌藥品生產(chǎn)工藝使用的不同潔凈級別應(yīng)設(shè)相應(yīng)的潔具間，清潔用具不得跨區(qū)使用潔凈（無菌）廠房確認無菌藥品生產(chǎn)線廠房基本要求第9頁/共61頁非最終滅菌產(chǎn)品：萬級無菌操作區(qū)不應(yīng)設(shè)置清洗間和帶水池的潔具間，清潔用具送出該區(qū)清潔、消毒或滅菌；百級潔凈區(qū)不得設(shè)置地漏清潔用具：定期清洗、消毒，相關(guān)管理文件潔凈（無菌）廠房確認潔凈生產(chǎn)區(qū)域內(nèi)的衛(wèi)生設(shè)施第10頁/共61頁潔凈（無菌）廠房確認送、回風(fēng)過濾器框架不得采用脫屑、產(chǎn)塵、長菌材質(zhì)不得設(shè)置可開啟式窗戶檢查室應(yīng)按無菌操作區(qū)管理，不得與生物檢定、微生物限度檢查、污染菌鑒別和陽性對照試驗使用同一試驗室

潔凈廠房衛(wèi)生要求（無菌潔凈室）第11頁/共61頁潔凈（無菌）廠房確認重點：內(nèi)包完成后制品滅菌工藝過程完整性驗證配料：最好在萬級潔凈度下進行。也允許在10萬級潔凈度下進行，前提：工藝過程其他步驟有降低污染可能的手段。（如采用封閉配料罐，且罐的開口進料區(qū)應(yīng)在萬級保護下）無菌藥品灌裝必須在層流罩下工作，灌裝時空氣潔凈度等級為100級。最終滅菌無菌產(chǎn)品工藝平面檢查要點第12頁/共61頁潔凈（無菌）廠房確認保證產(chǎn)品無菌特性。國際認可標(biāo)準(zhǔn)：非最終滅菌產(chǎn)品的生產(chǎn)，產(chǎn)品直接暴露區(qū)域是百級背景下（B）的局部百級(A)保護歐美國家及世界衛(wèi)生組織要求動態(tài)測試我國制藥水平與國際標(biāo)準(zhǔn)尚有差距，必然導(dǎo)致萬級無菌及萬級非無菌的設(shè)置，強調(diào)無菌操作的特殊防范污染措施，無菌1萬級和非無菌1萬級劃分理由第13頁/共61頁潔凈（無菌）廠房確認未經(jīng)消毒滅菌的物料不能進入無菌室內(nèi)經(jīng)過消毒滅菌處理后的物料應(yīng)直接出現(xiàn)在無菌操作區(qū)內(nèi)清洗驗證和滅菌驗證需完整非最終滅菌無菌藥品工藝平面檢查關(guān)鍵第14頁/共61頁工藝與設(shè)備驗證確認最終滅菌產(chǎn)品：關(guān)鍵在于內(nèi)包完成后，制品滅菌工藝過程完整性驗證。非最終滅菌產(chǎn)品：生產(chǎn)過程的無菌控制器械滅菌，濕熱，干熱滅菌液體原料的除菌：0.22微米濾膜。關(guān)鍵在于過濾器完整性。滅菌工藝確認第15頁/共61頁工藝與設(shè)備驗證確認去除方法：超濾（液體原料）、高溫（大于180℃）、酸堿處理（重鉻酸鉀硫酸溶液等）、注射用水洗滌（膠塞處理）、活性炭吸附等無菌藥品細菌內(nèi)毒素控制第16頁/共61頁工藝與設(shè)備驗證確認洗瓶有強排風(fēng)除濕，預(yù)熱段有若排風(fēng)除濕，影響潔凈室壓差運行時潔凈區(qū)對滅菌機不宜有正壓（難以達到高溫）；關(guān)機時反之，以保持潔凈度洗滌與干熱滅菌驗證第17頁/共61頁工藝與設(shè)備驗證確認標(biāo)準(zhǔn)：溶液污染瓶的洗滌效率＝減少量>3（對數(shù)單位）洗滌內(nèi)包材的主要目標(biāo)為去除熱原玻璃瓶洗滌效果驗證第18頁/共61頁工藝與設(shè)備驗證確認原理：使微生物氧化分解除熱原工藝條件較殺孢子程序苛刻若干熱法除熱原工藝能使細菌內(nèi)毒素下降3個對數(shù)單位，則不必進行微生物的生物指示劑挑戰(zhàn)性試驗干熱滅菌工藝第19頁/共61頁工藝與設(shè)備驗證確認空載熱分布試驗負載熱穿透試驗試驗材料微生物－枯草桿菌黑色變種芽孢的制備內(nèi)毒素－大腸桿菌內(nèi)毒素的制備滅菌機冷卻段高效過濾器性能試驗與空氣潔凈度滅菌機熱量和風(fēng)量平衡確認干熱滅菌實例：隧道滅菌機驗證項目第20頁/共61頁工藝與設(shè)備驗證確認原理：使微生物中類蛋白質(zhì)及酶變性和凝固標(biāo)準(zhǔn)滅菌時間F0基本要求－－設(shè)備升溫、降溫速度符合要求－－應(yīng)有空載熱分布試驗、負載熱穿透試驗和細菌挑戰(zhàn)三個必要試驗濕熱滅菌第21頁/共61頁工藝與設(shè)備驗證確認方法：將熱電偶編號安置于滅菌機內(nèi)制定位置，按121℃，15分鐘的滅菌程序操作，連續(xù)進行3次，確定滅菌室內(nèi)冷點判斷標(biāo)準(zhǔn)：各測點溫度達到121℃，最冷點與各測點平均溫差不超過±2.5℃為合格空載熱分布試驗第22頁/共61頁工藝與設(shè)備驗證確認試驗方法：待滅菌物每一品種、每一規(guī)格中的每一種裝載組合方式中編號放置熱電偶，分別進行3次滅菌操作，還應(yīng)做最大與最小裝載方式試驗判斷標(biāo)準(zhǔn)：各種組合方式的被滅菌物中，各測點受熱溫度FH>=121℃（按冷點溫差校正后溫度），持續(xù)時間30分鐘以上，此時，應(yīng)有F0>6負載熱穿透試驗第23頁/共61頁工藝與設(shè)備驗證確認滅菌設(shè)備構(gòu)造、組成部分功能、輔助系統(tǒng)概述、設(shè)備運行控制系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)所使用的滅菌方式（飽和蒸汽、水浴、水噴淋式等）滅菌的工藝參數(shù)和運行標(biāo)準(zhǔn)（溫度、壓力、時間等）蒸汽滅菌程序的驗證內(nèi)容第24頁/共61頁工藝與設(shè)備驗證確認待滅菌物裝載情況（裝載方式、容器大小、最大及最小裝載量）滅菌程序的監(jiān)控方法（如熱電偶、生物指示劑的數(shù)量、位置及合格/不合格標(biāo)準(zhǔn)）關(guān)鍵參數(shù)允許的變化范圍（最大及最?。┊a(chǎn)品所能承受的F0值限度對滅菌工藝波動情況所做統(tǒng)計分析的評估報告再驗證計劃蒸汽滅菌程序的驗證內(nèi)容第25頁/共61頁工藝與設(shè)備驗證確認禁止使用含石棉的過濾器材過濾裝置是否吸附藥物組分、釋放物質(zhì)除菌過濾設(shè)備的基本要求第26頁/共61頁工藝與設(shè)備驗證確認無泄露壓力、流速、溫度要求化學(xué)性質(zhì)、pH值溶劑溶出物生物性質(zhì)應(yīng)確認毒性試驗通過起泡點試驗，判斷確認孔徑大小符合工藝要求過濾系統(tǒng)要求第27頁/共61頁工藝與設(shè)備驗證確認便于操作和調(diào)節(jié)便于清潔處理與單向流（層流）系統(tǒng)具有最佳的配合狀態(tài)可重復(fù)重現(xiàn)工作狀態(tài)（驗證目的）高靈活性灌裝封口設(shè)備基本要求第28頁/共61頁工藝與設(shè)備驗證確認－－裝量準(zhǔn)確，精度好，裝量檢測方便－－速度滿足生產(chǎn)規(guī)模要求－－分裝部件可在線/離線清洗滅菌－－瓶轉(zhuǎn)送系統(tǒng)穩(wěn)定，對玻璃容器損害程度低－－灌藥時無外溢、帶藥等現(xiàn)象并有無藥止灌功能－－加塞位置準(zhǔn)確－－軋蓋松緊適中，產(chǎn)品密封性好灌裝封口設(shè)備基本要求（具體內(nèi)容）第29頁/共61頁工藝與設(shè)備驗證確認在設(shè)備最低速時進行靜態(tài)充填重量檢測100％生產(chǎn)能力控制：在生產(chǎn)速度下對所有產(chǎn)品進行重量控制（灌裝前后設(shè)置電子稱）人工檢測時應(yīng)盡量加大檢測頻率灌封重量監(jiān)測系統(tǒng)第30頁/共61頁工藝與設(shè)備驗證確認制品包裝的氣密性－－真空保持法（抽真空、全壓塞、軋蓋、注水試驗）－－真空泄露法（常壓壓塞、軋蓋、抽真空、注水試驗）－－電真空檢漏－－設(shè)備自動檢漏封口設(shè)備的驗證第31頁/共61頁工藝與設(shè)備驗證確認需密閉，進出料時應(yīng)盡量避免開口區(qū)暴露計量裝置準(zhǔn)確，不會對系統(tǒng)造成污染材質(zhì)化學(xué)穩(wěn)定性好，接觸藥液的表面光滑系統(tǒng)清洗、消毒功能好攪拌密封嚴(yán)密，不會對配料造成污染閥門、管路連接嚴(yán)密，裝卸方便系統(tǒng)應(yīng)方便進行在線清洗（CIP）、滅菌（吸吮）配制工藝設(shè)備與管道系統(tǒng)基本要求第32頁/共61頁工藝與設(shè)備驗證確認清洗介質(zhì)－水（溶解度較大物質(zhì)）－－化學(xué)清洗劑、重鉻酸鉀硫酸液清洗，然后用注射用水沖洗，測溶液殘留物。－－1～2％過氧化氫沖洗，然后再用注射用水沖洗，測內(nèi)毒素－－2%NaOH清洗后，用水沖后再用2％酸沖洗，最后用注射用水沖洗，測內(nèi)毒素清洗介質(zhì)－醇（溶解度小，難溶物質(zhì)）配制工藝設(shè)備與管道系統(tǒng)的清潔驗證第33頁/共61頁工藝與設(shè)備驗證確認殘留物：小等于10ppm重鉻酸鉀殘留物：小等于10ppmpH值：與原注射用水一致雜菌：小于25cfu/ml內(nèi)毒素：小于0.25EU/ml判斷標(biāo)準(zhǔn)第34頁/共61頁工藝與設(shè)備驗證確認

采用重鉻酸鉀硫酸液為清潔劑時，因清潔能力極強，不再檢測產(chǎn)品的殘留量，而檢測控制重鉻酸鉀硫酸液的殘留量第35頁/共61頁衛(wèi)生管理系統(tǒng)的驗證檢查無菌區(qū)域內(nèi)的廠房清潔規(guī)程－－無菌區(qū)域的廠房滅菌介質(zhì)、方法和驗證文件－－無菌區(qū)域的滅菌后管理情況，無菌保證周期無菌廠房的清潔滅菌第36頁/共61頁衛(wèi)生管理系統(tǒng)的驗證無菌設(shè)備的清潔－－清潔完成后，應(yīng)將水排空－－采用飽和蒸汽滅菌時，應(yīng)在溫度較低的地方放置生物指示劑和溫度傳感器－－使用甲醛作為滅菌劑時，應(yīng)對設(shè)備、容器表面的甲醛殘留物檢測

無菌廠房的清潔滅菌第37頁/共61頁衛(wèi)生管理系統(tǒng)的驗證

檢查條款5204：100000級以上區(qū)域的潔凈工作服是否在潔凈室（區(qū)）內(nèi)洗滌、干燥、整理，必要時是否按照要求滅菌。按此條款理解，無菌操作區(qū)工作服可在十萬級，甚至三十萬級區(qū)清潔，經(jīng)滅菌后，裝在一個加蓋的容器中，然后作為一個無菌物料經(jīng)物料緩沖間送入無菌操作區(qū)，但在無菌藥品生產(chǎn)過程中，這種做法存在污染的風(fēng)險，應(yīng)盡量避免，除非有強有力的數(shù)據(jù)證明可行。潔凈（無菌）衣的洗滌與消毒滅菌確認第38頁/共61頁衛(wèi)生管理系統(tǒng)的驗證液體消毒劑滅菌－－室內(nèi)地面、墻面、天棚、門窗－－設(shè)備、用具、操作臺、桌椅表面－－設(shè)備搬入過程的消毒無菌1萬級區(qū)域滅菌方法第39頁/共61頁衛(wèi)生管理系統(tǒng)的驗證氣體消毒劑滅菌（無菌室內(nèi)空間）－－甲醛氣體－－石碳酸與乳酸混合氣體（1：1）－－戊二醛氣體－－氣化雙氧水－－臭氧－－紫外線無菌1萬級區(qū)域滅菌方法第40頁/共61頁衛(wèi)生管理系統(tǒng)的驗證107個枯草芽孢桿菌滅菌后含菌量應(yīng)減少3個對數(shù)單位無菌室滅菌標(biāo)準(zhǔn)第41頁/共61頁衛(wèi)生管理系統(tǒng)的驗證細菌挑戰(zhàn)試驗－－方法：每個試驗位置的培養(yǎng)皿內(nèi)有含107個枯草芽孢桿菌的試紙2張，設(shè)定滅菌程序熏蒸后取一張試紙做菌檢，如果無菌則試驗完成，若有菌用另一張試紙做含菌數(shù)試驗－－標(biāo)準(zhǔn)：滅菌后枯草桿菌殘留104為合格－－熏蒸無菌后室內(nèi)殘留量的測試應(yīng)有殘余濃度<1～2ppm無菌萬級區(qū)域消毒滅菌系統(tǒng)驗證第42頁/共61頁驗證管理生產(chǎn)環(huán)境（廠房）設(shè)備（洗瓶、滅菌、過濾、灌裝）材料（瓶、塞、鋁蓋）介質(zhì)（N2、壓縮空氣）人員（鞋、帽、衣、手套、口罩）工藝（灌裝作業(yè)要求）無菌藥品生產(chǎn)驗證主要內(nèi)容第43頁/共61頁驗證管理檢驗方法：無菌檢查濾器完整性檢查：數(shù)據(jù)匯總表（趨勢分析）無菌產(chǎn)品驗證應(yīng)檢查驗證試驗產(chǎn)品滅菌的所有文件，該批產(chǎn)品用水的檢驗結(jié)果無菌分裝或無菌灌裝線的培養(yǎng)基灌裝試驗，二年一次無菌藥品生產(chǎn)驗證主要內(nèi)容第44頁/共61頁驗證管理若為無菌操作產(chǎn)品，重點檢查以下驗證內(nèi)容和結(jié)果－－器具、設(shè)備滅菌程序驗證的驗證報告－－容器干熱滅菌驗證數(shù)據(jù)－－生產(chǎn)人員無菌衣的清潔、滅菌記錄－－無菌生產(chǎn)環(huán)境的監(jiān)控數(shù)據(jù)生產(chǎn)工藝驗證第45頁/共61頁驗證管理為確保產(chǎn)品無菌，最為重要的是滅菌工藝和無菌灌封工藝的驗證－－無菌培養(yǎng)基灌裝試驗：灌裝過程中，模擬實際生產(chǎn)的暴露條件，將培養(yǎng)基暴露于操作者、設(shè)備、表面和環(huán)境，然后將裝有培養(yǎng)基的密閉容器進行培養(yǎng)以檢查微生物的生長，并對結(jié)果進行評價，借以確定實際灌封生產(chǎn)中單位產(chǎn)品的污染概率無菌分裝工藝驗證第46頁/共61頁驗證管理擔(dān)心培養(yǎng)基污染：模擬灌裝后對操作間、生產(chǎn)設(shè)備、器具進行徹底清潔、消毒灌裝頻率和批次：至少灌裝獨立的3批，每二年一次，連續(xù)兩批合格即為合格灌裝批量：批灌裝量應(yīng)足以確保對低污染率具有較高的檢測水平培養(yǎng)基：關(guān)鍵在于其促微生物生長能力環(huán)境條件：應(yīng)模擬實際生產(chǎn)條件且最好是在規(guī)定限度內(nèi)的最差條件下進行試驗培養(yǎng)基無菌灌裝的問題第47頁/共61頁驗證管理供試品：3％胰蛋白胨大豆肉湯，灌封，滅菌菌液：大腸桿菌，32℃培養(yǎng)48小時，標(biāo)定供試品浸入，32℃培養(yǎng)14天，淋洗，消毒檢查：供試品是否渾濁，有無破裂標(biāo)準(zhǔn)：不得渾濁，破裂者除外陽性對照無菌藥品密封性試驗第48頁/共61頁驗證管理

玻璃瓶、硬質(zhì)塑料瓶等無菌制品采用真空檢漏。第49頁/共61頁生產(chǎn)管理過程的確認無菌藥品生產(chǎn)直接接觸藥品包裝材料不得回收使用無菌藥品生產(chǎn)直接接觸藥品的包裝材料、設(shè)備和其他物品的清洗、干燥、滅菌到使用時間的間隔應(yīng)有規(guī)定無菌藥品的藥液從配制到滅菌或除菌過濾和灌裝完畢的時間間隔應(yīng)有規(guī)定第50頁/共61頁生產(chǎn)管理過程的確認無菌操作區(qū)不設(shè)置水池和地漏更衣室、物料緩沖間通常設(shè)連鎖裝置或報警裝置，防止污染空氣倒流關(guān)鍵操作間應(yīng)設(shè)壓差表，規(guī)定壓差范圍人員進入，必須穿無菌衣、鞋、手套及口罩無菌萬級區(qū)域的防污染要求第51頁/共61頁生產(chǎn)管理過程的確認所用消毒酒精須除菌過濾所用清潔工具須清潔、消毒、滅菌，無菌操作區(qū)清潔結(jié)束后，清潔工具應(yīng)立即從無菌區(qū)取出所用容器、工器具、過濾器均需滅菌或消毒膠塞必須洗滌除熱原和滅菌玻璃小瓶或安瓿瓶需經(jīng)干熱滅菌無菌萬級區(qū)域的防污染要求第52頁/共61頁生產(chǎn)管理過程的確認藥液經(jīng)除菌過濾進入無菌操作間若軋蓋工序設(shè)置在無菌萬級，則鋁蓋應(yīng)當(dāng)滅菌連續(xù)生產(chǎn)條件下的除菌過濾用過濾器通常使用串連方式（2只過濾器串連），確保除菌過濾全過程的安全可靠性無菌萬級區(qū)域的防污染要求第53頁/共61頁生產(chǎn)管理過程的確認每批產(chǎn)品均需進行環(huán)境監(jiān)測（生產(chǎn)環(huán)境、關(guān)鍵設(shè)備表面、人員手、工作服），且監(jiān)測報告納入批記錄每年通過模擬灌裝方式對無菌操作區(qū)的潔凈狀態(tài)進行再驗證無菌萬級區(qū)域的防污染要求第54頁/共61頁無菌檢測的確認白色念珠菌枯草芽孢桿菌黑曲霉菌銅綠假單胞菌金黃色