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文檔簡介
微生物染色
染色的意義微生物細胞小而透明,在普通光學顯微鏡下不易觀察。染色后微生物細胞與背景形成明顯的色差,從而能清楚的觀察到其形態(tài);用于鑒別豬鏈球菌染色照片染色染料簡介主要有三大類:堿性染料、酸性染料、中性染料。堿性染料的離子帶正電荷,可與帶負電荷的物質(zhì)結(jié)合。微生物蛋白質(zhì)常帶負電荷,故堿性染料常用。常用堿性染料有:美藍、結(jié)晶紫、堿性復(fù)紅和孔雀綠。染色方法普通染色法:利用一種染料使微生物著色革蘭氏染色:細菌學中的鑒別性染色法芽孢染色法:區(qū)分芽孢和營養(yǎng)體的不同菌儀實驗材料種:大腸桿菌和四聯(lián)球菌混合液,殺螟桿菌染色液:石炭酸復(fù)紅液,結(jié)晶紫液,路哥爾碘液,芽孢染色液
器:顯微鏡,載玻片,接種環(huán),二甲苯,香柏油,擦鏡紙,吸水紙,煤氣燈實驗步驟1.涂片燒紅無菌環(huán),稍 冷后無菌操作取試管中 菌液于潔凈的玻片中央,涂成薄層。如為固體培養(yǎng)基上的菌種,先在潔凈的玻片中央放一滴蒸餾水,無菌操作取少許菌體與水滴混合,涂成薄層。干燥室溫中自然干燥,或在火焰高處烘干,但不能過燙,以手試不燙為宜固定手執(zhí)玻片一端,有菌膜的一面朝上,于火焰中通過3次。冷卻后再加染料。普通染色法(2)7.鏡檢用油鏡觀察所制標本片并繪出其形態(tài)圖革蘭氏染色(1)
初染:加草酸銨結(jié)晶紫染色液,染色,約一分鐘后自來水小心沖洗。媒染:加路哥爾碘液,約一分鐘水洗脫色:95%乙醇脫色20秒水洗復(fù)染:石炭酸復(fù)紅染色液染色30秒水洗芽孢染色(1)染色加5%孔雀綠水溶液于玻片上,微火加熱至冒氣,維持約5min,(期間需添加染色液,火焰要小。)冷卻后水洗。用石炭酸復(fù)紅染30秒水洗。干燥自然干燥或用吸水紙吸去水分。芽孢染色(2)鏡檢用油鏡觀察所制標本片并繪出其形態(tài)圖。注意芽孢和營養(yǎng)體各自的顏色注意事項1.涂片的無菌操作;2.火焰烘干及固定時的溫度控制;3.染色時間的掌握;4.水洗時水流不能急,不能沖有菌的一面;5.吸水時勿擦去菌體;6.革蘭氏染色
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