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第三節(jié)基因工程的應(yīng)用及前景第1頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一

遺傳工程(基因工程)研究的意義(1)說(shuō)明兩種能力

A.基因工程,它超越生物種屬界限,具有跨越天然物種屏障的能力.B.把來(lái)自任何一種生物的基因,放置在與其毫無(wú)親緣關(guān)系的新的寄主生物細(xì)胞中的能力。(2)表明一種創(chuàng)造性應(yīng)用這一技術(shù),有可能按照人們的主觀愿望,創(chuàng)造出自然界中原先并不存在的新的生物類型。(3)簡(jiǎn)化生物物種進(jìn)化程序,加快生物物種進(jìn)化速度.(4)強(qiáng)調(diào)了一種事實(shí):確定的DNA小片段在新寄主細(xì)胞中進(jìn)行擴(kuò)增的事實(shí)—可以制備到大量純化的DNA片段.(5)從而拓寬了分子生物學(xué)的研究領(lǐng)域。第2頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一第三節(jié)基因工程的應(yīng)用及前景第3頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一一、基因工程與遺傳育種傳統(tǒng)的育種方法:雜交育種、單倍體育種、誘變育種、多倍體育種缺點(diǎn):培育時(shí)間長(zhǎng),遠(yuǎn)緣親本難以雜交基因工程技術(shù)如何解決不同種生物之間優(yōu)良性狀的重組問(wèn)題?1、轉(zhuǎn)基因植物第4頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法:農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌:土壤中的細(xì)菌,在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物,當(dāng)植物體受到損傷時(shí),傷口處的細(xì)胞會(huì)分泌大量酚類物質(zhì),吸引農(nóng)桿菌移向植物細(xì)胞,農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上。侵染雙子葉植物農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒第5頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一切下的葉片重組的Ti質(zhì)粒重組的Ti質(zhì)粒大量擴(kuò)增第6頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一轉(zhuǎn)基因植物:抗除草劑抗蟲(chóng)抗植物病毒抗鹽堿抗旱耐貯存高營(yíng)養(yǎng)改變花色第7頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一2、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物傳統(tǒng)的動(dòng)物育種方法:雜交育種將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞(1)方法:顯微注射法(2)程序:

目的基因

已交配的受體動(dòng)物供體動(dòng)物受精卵輸卵管轉(zhuǎn)基因動(dòng)物取出移植顯微注射第8頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞第9頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一轉(zhuǎn)基因動(dòng)物提高生長(zhǎng)速度:外源生長(zhǎng)激素基因轉(zhuǎn)基因鯉魚(yú)轉(zhuǎn)基因綿羊:比一般生長(zhǎng)提高30%,體型大50%改善畜產(chǎn)品的品質(zhì):腸乳糖酶基因(分解乳糖)生產(chǎn)藥物:生物反應(yīng)器,生產(chǎn)價(jià)廉質(zhì)優(yōu)的蛋白質(zhì)藥物第10頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一第11頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一從轉(zhuǎn)基因羊中提取治療心臟病的tPA藥物第12頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一練習(xí):1下列轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的獲得,不需胚胎移植的是A轉(zhuǎn)基因羊B“超級(jí)鼠”C轉(zhuǎn)基因良種雞D轉(zhuǎn)基因兔2下列現(xiàn)代生物技術(shù)成果,必須通過(guò)胚胎移植的是A轉(zhuǎn)基因良種雞B重組酵母乙肝疫苗C單克隆抗體D試管嬰兒第13頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一二、基因工程與疾病治療胰島素:轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌(含人胰島素基因)干擾素:轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌及酵母菌(含人白細(xì)胞干擾素基因)乙肝疫苗轉(zhuǎn)基因藥物:大批量,低成本第14頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一資料干擾素:動(dòng)物或人體的淋巴細(xì)胞受到病毒侵染后產(chǎn)生的一種糖蛋白,幾乎能抵抗所有病毒引起的感染,如水痘、肝炎、狂犬病等病毒引起的感染,是一種抗病毒的特效藥。此外,干擾素對(duì)于癌癥也有一定療效。傳統(tǒng)干擾素的生產(chǎn)方法是從血液中的白細(xì)胞提取,1mg/300ml血液;1980-1982年,科學(xué)家用基因工程方法從大腸桿菌和酵母菌中獲得了干擾素,提取量約20~40mg/1000g培養(yǎng)液。第15頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一干擾素生產(chǎn)車間基因工程干擾素第16頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一將外源基因?qū)氲交蛉毕莸募?xì)胞中,以糾正或補(bǔ)償基因的缺陷。三、基因治療第17頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一SCID嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷癥患者細(xì)胞的腺苷酸脫氨酶(ADA)基因突變;治療方案:先克隆正常人的ada基因→與載體(逆轉(zhuǎn)錄病毒)結(jié)合→構(gòu)建重組載體→分離患者有免疫缺陷的T淋巴細(xì)胞→重組載體感染T淋巴細(xì)胞,使正常ada基因插入到T淋巴細(xì)胞的基因組中→檢測(cè)是否轉(zhuǎn)入→把重組T淋巴細(xì)胞注射入患者的骨髓中第18頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一第19頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一選擇治療基因治療基因與載體結(jié)合治療基因正常表達(dá)基因治療過(guò)程第20頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一基因治療對(duì)癌癥的治療方案

抑制癌細(xì)胞增生基因?qū)氚┘?xì)胞抑制癌細(xì)胞轉(zhuǎn)錄

DNA片斷導(dǎo)入癌細(xì)胞提高機(jī)體免疫力基因?qū)朊庖呦到y(tǒng)阻斷癌細(xì)胞繁殖提高免疫力第21頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一四基因工程與環(huán)境保護(hù)轉(zhuǎn)基因植物:聚羥基烷酯,可降解生物塑料的原料轉(zhuǎn)基因細(xì)菌:提高分解石油的能力轉(zhuǎn)基因微生物:吸收重金屬、降解有毒化合物、處理工業(yè)廢水第22頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一基因工程的發(fā)展前景第23頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一光合作用:改造二磷酸核酮糖羧化酶生物固氮:具有固氮能力的非豆科作物生物反應(yīng)器:轉(zhuǎn)基因植物和動(dòng)物生產(chǎn)藥物蛋白質(zhì)工程:通過(guò)基因修飾或基因合成,對(duì)現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造出新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。第24頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一蛋白質(zhì)工程的目標(biāo):根據(jù)對(duì)蛋白質(zhì)的特定需求,對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分子設(shè)計(jì)。由于基因決定蛋白質(zhì),所以最終必須通過(guò)改造基因結(jié)構(gòu)來(lái)改造蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。第25頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一蛋白質(zhì)工程與基因工程的區(qū)別:前者是通過(guò)對(duì)基因結(jié)構(gòu)的改造而改造或創(chuàng)造蛋白質(zhì);后者主要是把外源的基因插入到受體生物細(xì)胞中,并沒(méi)有改造蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。第26頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一第27頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一第28頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一3、將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞(1)原核生物特點(diǎn):繁殖快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)少(2)方法:用Ca2+處理細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子第29頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一(三)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞轉(zhuǎn)化——方法將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法——顯微注射法——感受態(tài)細(xì)胞目的基因進(jìn)入_________內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持_____和_____的過(guò)程受體細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)第30頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一基因槍法打一槍即可10000個(gè)整合細(xì)胞/槍火藥、氣壓等300-600米/秒DNA隨機(jī)插入,原理不明第31頁(yè),共33頁(yè),2023年,2月20日,星期一農(nóng)桿菌不易侵染單子葉植物根瘤農(nóng)桿菌具有趨化

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