檢驗標本的采集與處理

檢驗標本的采集與處理第1頁/共115頁概要2檢驗標本的定義及種類1影響檢驗標本質(zhì)量的因素2靜脈抽血的注意事項3各種標本的采集要求45檢驗標本的采集與運送危急值的處理6第2頁/共115頁一、檢驗標本的定義及種類標本的定義：是指采取患者少許的血液、排泄物（糞、尿）、分泌物（痰、鼻分泌物）、嘔吐物、體液（胸腔積液、腹腔積液）和脫落細胞（食道、陰道）等樣品，經(jīng)過物理、化學和生物學的實驗室技術和方法對其進行檢驗，作為判斷患者有無異常存在的依據(jù)。3第3頁/共115頁檢驗標本的種類4血液檢驗標本血常規(guī)其他生化檢查血沉凝血免疫檢查第4頁/共115頁檢驗標本的種類5體液檢驗標本大便尿液痰液其他第5頁/共115頁檢驗標本的種類6其它特殊標本細胞穿剌毛發(fā)皮屑其它第6頁/共115頁臨床標本檢驗的過程7檢驗申請患者準備患者識別、采集標本樣品檢測結果分析與解釋樣品運送、保存與處理結果確認特殊患者回訪第7頁/共115頁二.影響檢驗標本質(zhì)量的因素8患者的狀態(tài)藥物的影響患者的飲食第8頁/共115頁影響檢驗標本質(zhì)量的因素

原則上患者應在平靜、休息狀態(tài)下采集標本，特別是血液標本。因為運動能影響許多項目的測定結果。 研究指出，患者處于激動、興奮、恐懼狀態(tài)時，可使血紅蛋白、白細胞增高。9患者的狀態(tài)第9頁/共115頁影響檢驗標本質(zhì)量的因素

多數(shù)檢查要求在采血前禁食12h，并注意檢 查前一天晚餐禁食高脂食品。研究表明：一頓標準餐后，可使血中甘油三酯增高50%、血糖增高15%。進食高脂肪食物，可引起血脂的大幅度增高。餐后采集的血液標本，其血清常出現(xiàn)乳糜狀，影響到許多檢驗測定的正確性。10患者的飲食第10頁/共115頁影響檢驗標本質(zhì)量的因素研究表明:多種常用鎮(zhèn)靜劑,多種常用抗生素,對多種檢測結果均有影響。輸血、輸液對電解質(zhì)，血糖等檢驗結果均有影響,一般不宜在輸血輸液側采集血液標本。通常在輸液對側采集血液標本，或輸液結束后1~2h后采血。11藥物的影響第11頁/共115頁影響檢驗標本質(zhì)量的因素運動的影響

與運動時間、強度有關。適度運動，血糖、尿酸、乳酸增加，ATP減少，血清AST、LDH、CK、ALP增加，運動員，血清Ch、TG減少，HDL-C增加。

年齡的影響

性別的影響

體形的影響

12第12頁/共115頁三.靜脈抽血的注意事項采血時，應統(tǒng)一采血姿勢(臥位、坐位、立位)；應盡量在使用止血帶1min內(nèi)采血，看到回血馬上解開止血帶；當需要重復使用止血帶時，應使用另一上臂；13采集過程是標本質(zhì)量的關鍵環(huán)節(jié)第13頁/共115頁三.靜脈抽血的注意事項膠塞穿刺針上的乳膠套能防止滴血，采血時不能取下;采血針軟管的容積為0.4ml，采血時可酌情提前拔出采血針;采血針刺入靜脈后，如穿破靜脈，回血撤回，可將采血針順原路緩慢退回，見回血即可;采血完畢后，先拔出采血針，待滴血停止后再拔出試管端穿刺針.14第14頁/共115頁三.靜脈抽血的注意事項血液標本常見溶血原因（1）注射器、針頭或容器不干燥；（2）壓脈帶捆扎時間太久，淤血過久；（3）穿剌不暢，損傷組織過多；（4）抽血速度太慢或太快；（5）血液注入容器時未取下針頭；15第15頁/共115頁三.靜脈抽血的注意事項（6）抗凝血混合時，振蕩力量過大；（7）血液存放時間過長；（8）靜脈采血時，為增加血流而擠壓采血部位；（9）血液標本在送檢或運輸過程中，擠壓或振動過大等。16第16頁/共115頁三.靜脈抽血的注意事項多管采血的順序：

17血液培養(yǎng)無添加劑管

凝血實驗血常規(guī)其它防止凝血因子活化，或者血小板聚集而影響檢驗結果。第17頁/共115頁四.各種標本的采集要求18血液標本的采集01體液標本的采集0202003微生物標本的采集與送檢第18頁/共115頁一）、血液標本的采集

1、血常規(guī)標記：淺紫色瓶塞真空采血管（EDTA抗凝）采集要求：采集2ml靜脈血后，立即顛倒混勻，至少5次，但不能劇烈震蕩，如果血液有凝塊，一定要重新抽血。19第19頁/共115頁一）、

血液標本的采集

2、生化分析標記：綠色瓶塞真空采血管采集要求：采集3-5ml空腹血，避免溶血，避免強光照射。糖化血紅蛋白：淺紫色瓶塞真空采血管（EDTA抗凝）20第20頁/共115頁21一）、血液標本的采集

標本的正確采集與保存是生化檢驗結果是否可靠的前提，而這種差異往往不易被檢測者發(fā)現(xiàn)，因此，必須給予重視。

第21頁/共115頁一）、血液標本的采集3：紅細胞沉降率（血沉）標記：黑色瓶塞真空采血管（抗凝）采集要求：采集1.6ml空腹血（至2ml瓶簽刻度處），立即顛倒混勻，至少8次。22第22頁/共115頁一）、血液標本的采集4：免疫血清分析（如：肝炎系列、甲功、激素等）標記：紅色瓶塞真空采血管（不抗凝）采集要求：采集3—5ml空腹血，避免溶血，避免強光照射。23第23頁/共115頁一）、血液標本的采集5：凝血四項標記：淺藍色瓶塞真空采血管（枸櫞酸鈉抗凝）24檢驗凝血四項是為了證明有無出血性疾病。采集1.8ml空腹血（至2ml瓶簽刻度處），立即顛倒混勻，至少5次。避免溶血，避免凝固。第24頁/共115頁256、采集方法靜脈采血法：采血部位：最常用的是肘靜脈，此外，也可采用手背靜脈、外踝靜脈、頸外靜脈。取血容器：最好采用一次性注射器和試管。第25頁/共115頁26

注意事項：①如遇到病人采血發(fā)生眩暈，平臥休息，必要時嗅吸芳香氨酊，掐人中。

②防止溶血：造成溶血原因，穿刺不順利，局部組織損傷過多，取血容器有水，血液注入試管時不取下針頭，抗凝血的劇烈震蕩。第26頁/共115頁27

③避免充血和血液濃縮：止血帶壓迫時間不能過長，最好不超過半分鐘。

④抽血時，只能向外抽，不能向內(nèi)推。以免注人空氣。

⑤肢體進行靜脈輸液時不宜在同側靜脈采血。

第27頁/共115頁28

動脈采血法：一般多采用股動脈，其他部位如橈動脈，肱動脈也可采用，在博動明顯處，常規(guī)消毒，刺入動脈后，血液自行涌入注射器，達所需血量，用干棉球壓迫止血。第28頁/共115頁29

7、標本的處理抗凝劑阻止血液凝固的化學試劑，稱為抗凝劑，常用的有：

①草酸鉀與血液中鈣離子結合生成草酸鈣沉淀。通常配成100g/L水溶液，每支試管中加0.1ml,80℃以下烘干備用。

優(yōu)點：溶解度大，抗凝作用強（抗凝用量2mg/ml血），價格低

缺點：改變血液pH，不能用于酸堿平衡觀察，不能用于K+、Ca2+測定，抑制一些酶活性，LDH、ACP、ALT。第29頁/共115頁30②氟化鈉抗凝作用弱，常與草酸鉀混合使用，NaF4g,草酸鉀6g,溶解至100ml，每管加0.1ml,80℃以下烘干備用，可抗凝2~3ml血。

優(yōu)點：防止糖酵解，用于血糖測定。

③肝素是一種含硫酸基團的粘多糖，具有多方面抗凝作用。

優(yōu)點：抗凝作用強（抗凝用量0.1mg/ml血）不影響血細胞體積，不易溶血，配成1g/L水溶液，每管0.5ml,60℃烘干備用，久置而失效，價格貴。第30頁/共115頁二）、體液標本的采集1：尿常規(guī)晨尿標本：一般留取清晨第一次尿最佳。尿標本的送檢及保存：（1）一般需留取10ml左右．（2）尿標本收集后應及時送檢,以免有型成分破壞和有機物質(zhì)分解．31第31頁/共115頁二）、體液標本的采集2：大便標本（1）患者的準備:患者應于治療之前留取標本,留作隱血試驗的標本應于３日前禁食肉類及動物性食物,并禁服鐵劑及維生素Ｃ等藥物。（2）自然排便后，挑取有膿血、粘液部分糞便2-3g，若稀水樣便則應取約2ml，于糞便標本容器中送檢。32第32頁/共115頁二）、體液標本的采集（3）標本務必新鮮且不可混入尿液、消毒液及污水等，以免有型成分破壞。（4）標本采集后應于1-2小時內(nèi)檢查完畢，否則可因pH及消化酶等影響導致有型成分破壞分解。33第33頁/共115頁二）、體液標本的采集3：痰液標本（1）痰液要求新鮮，一般檢查以清晨第一口痰作標本最適宜。（2）咳痰：清水反復漱口后用力咳嗽，從肺深部咳新鮮痰液于無菌容器送檢。（3）對咳嗽乏力或昏迷病人，可用吸痰管經(jīng)鼻腔或口腔抵達氣管腔內(nèi)吸取痰液。

34第34頁/共115頁二）、體液標本的采集354：其它分泌物排泄物標本及特殊標本的采集主要由?？漆t(yī)生或檢驗人員進行：胃液標本 精液標本腦脊液標本 前列腺液標本胸腹水標本 陰道分泌物標本羊水標本 骨髓標本等細胞穿剌標本第35頁/共115頁36體液標本的處理收集24小時尿液時，為防止細菌生長而影響檢驗結果，應使用防腐劑，常用的有：

1、甲苯（或二甲苯）在尿液表面形成一薄膜，防止細菌繁殖，防腐能力較弱。用量10ml左右，適合作尿糖，尿蛋白、尿素、肌酸、肌酐、尿酸，鉀、鈉、氯測定。第36頁/共115頁37

2、濃鹽酸使尿液保持強酸性，阻止細菌繁殖，防止尿液中某些成分因尿酸堿化而分解，用量10ml左右，適合作尿17-羥、17-酮、兒茶酚胺、鈣測定。

3、麝香草酚可抑制尿中細菌生長，用量1g左右，也可用麝香草酚異丙醇溶液（10%），5ml左右，適合作尿鉀，鈉、鈣、AA、糖、尿膽原、膽紅素測定，不適合作尿蛋白測定。第37頁/共115頁38標本的分離和儲存

血液標本采集后，如需要血漿或血清者，應及時分離，以免紅細胞與血清或血漿之間物質(zhì)的轉移和紅細胞對血清中某些物質(zhì)的利用。

血漿的分離：取血后與抗凝劑充分混勻后，可立即離心分離，2500~3000轉/min，5min。

血清的分離：取血后將試管放37℃水浴放置30min左右，離心分離。

分離的血漿或血清不能及時檢測時，可放4~6℃冰箱保存，保存期限依待測成分穩(wěn)定性而定，一般3~5天。第38頁/共115頁三）、微生物檢驗的標本采集及送檢在醫(yī)學高度發(fā)展，新的抗菌藥物不斷涌現(xiàn)的今天，感染性疾病的發(fā)病率和病死率仍然居高不下。主要原因之一是當代的感染性疾病，在病原上發(fā)生了較大的變化，形成了現(xiàn)代感染性疾病在病原學上的新特點。39第39頁/共115頁現(xiàn)代感染性疾病的新特點以條件致病菌為主：很多低致病、弱毒的細菌，在外環(huán)境、人體體表以及與外界相通的腔道中廣泛存在的細菌，引起感染甚至造成嚴重后果的現(xiàn)象日益增多。病原菌的種類更為廣泛：包括需氧菌、厭氧菌、苛氧菌、分枝桿菌和真菌等。40第40頁/共115頁現(xiàn)代感染性疾病的新特點細菌的耐藥性不斷增強：同一種細菌對抗生素的耐藥性可以完全不同，甚至出現(xiàn)同時耐多種抗生素的“多重耐藥”細菌，往往使臨床醫(yī)師的“經(jīng)驗性”治療或所謂的常規(guī)治療根本無效。41第41頁/共115頁現(xiàn)代感染性疾病的新特點出現(xiàn)一些新的感染性病原：有人統(tǒng)計，20世紀后期，全世界一共出現(xiàn)種31種新的傳染病，其中病毒14種，細菌11種，寄生物6種，由于人們的認識不足，缺乏有效的預防、治療辦法，人群又無免疫力，這些新出現(xiàn)的病菌在不同的地區(qū)和范圍內(nèi)流行，來勢猛，傳播快，造成巨大的損失和社會恐慌。例如：瘋牛病、埃博拉出血熱、新型肝炎病毒、大腸桿菌O157、出血性腸炎、O139霍亂、艾滋病、萊姆病等。42第42頁/共115頁

我們應該追求：

“準確的病原學診斷”

“針對性病原學治療”

正確的微生物標本采集和運送，是準確的病原學診斷的前提！

43微生物讓人類步步為營第43頁/共115頁檢驗誤差發(fā)生率哪個階段最高44？第44頁/共115頁60%以上實驗誤差發(fā)生在分析前

1997年，一位意大利著名檢驗專家就對急診檢驗誤差發(fā)生的種類和發(fā)生率進行了統(tǒng)計。結果顯示，約有68.2%的檢驗誤差發(fā)生在檢驗前期，而來自于檢驗中期和檢驗后期的誤差率分別為13.3%和18.5%。

2007年，這位檢驗專家又進行了類似統(tǒng)計，結果顯示，檢驗前期的誤差發(fā)生率仍高達61.9%。45第45頁/共115頁分析前質(zhì)量控制46獲得準確結果的重要環(huán)節(jié)第46頁/共115頁基本原則1.及時采集微生物標本作病原學檢查2.在抗菌藥物使用前采集標本3.采樣時嚴格執(zhí)行無菌操作4.采樣后立即送檢5.標本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑6.送檢標本應注明來源和檢驗目的47第47頁/共115頁如何提高細菌陽性檢出率？標本采集時機標本采集方法標本的質(zhì)與量標本的運送與保存鏡檢篩選合格標本（退檢制度）高質(zhì)量、多種分離培養(yǎng)基培養(yǎng)環(huán)境48第48頁/共115頁常見不合格標本主要有以下問題：

標本采集時間錯誤容器錯誤標本量不足標本采集延誤標本未及時正確運送以及暫存條件錯誤。。。。。。。

49第49頁/共115頁最有價值的細菌學檢測項目

血液培養(yǎng)腦脊液培養(yǎng)膽汁培養(yǎng)胸腹水培養(yǎng)關節(jié)液其他無菌體液或分泌液50第50頁/共115頁血培養(yǎng)標本采集與運送51第51頁/共115頁52血培養(yǎng)是進行血流感診斷的最佳手段第52頁/共115頁血培養(yǎng)概念:采集患者的血液或無菌體液標本,送至微生物實驗室培養(yǎng)檢測.檢測原本無菌的血液及體液中是否有細菌存在.如有細菌,則極有可能為致病的細菌.進一步進行鑒定/藥敏試驗.53第53頁/共115頁完整的血培養(yǎng)過程醫(yī)師開出醫(yī)囑護理人員收集送檢樣本實驗室檢測、分離并鑒定導致血流感染的微生物三級報告：為臨床醫(yī)生提供抗菌藥物敏感性試驗結果54第54頁/共115頁采血時機不合適采血套數(shù)不夠采血量不足只做需氧培養(yǎng)，不同時做厭氧培養(yǎng)采血前或采血時正在使用抗生素治療55目前血培養(yǎng)的問題：第55頁/共115頁血流感染與血培養(yǎng)的規(guī)范實踐56第56頁/共115頁“只有在發(fā)熱時，才需要進行血培養(yǎng)?！?7————關于血培養(yǎng)指征想采就采？第57頁/共115頁當懷疑血流感染或膿毒癥時，應常規(guī)行血培養(yǎng)懷疑患者有血流感染的癥狀有：不明原因的發(fā)燒(＞38℃)或體溫過低(＜36℃)白細胞增多（＞10,000/ul），粒細胞減少（＜1,000ul）休克，寒顫，僵直嚴重的局部感染(腦膜炎，心內(nèi)膜炎，肺炎，腎盂腎炎，腹部術后感染，…)心率異常加快低血壓或高血壓呼吸頻率加快58答案：血培養(yǎng)的指征第58頁/共115頁“何時采血進行血培養(yǎng)，無特殊時間要求?！?9———關于采血時機？第59頁/共115頁6003060時間(分鐘)體溫血培養(yǎng)采血時機細菌濃度第60頁/共115頁盡可能在患者寒戰(zhàn)或開始發(fā)熱時采血在患者接受抗生素治療前采血如患者已經(jīng)應用抗菌藥物進行治療，應在下一次用藥之前采血培養(yǎng)

61答案：采集血培養(yǎng)樣本的最佳時間第61頁/共115頁

“為減輕患者痛苦，只從一個穿刺部位采一份血液標本即可?！?2———關于采血套數(shù)及部位？第62頁/共115頁基本概念成人“一套”血培養(yǎng)應該包括需氧瓶和厭氧瓶各一個，也叫“一份”注意：一次穿刺采血，算“一套”，采集第二套應從另一個穿刺點獲得。兒童一般只做需氧培養(yǎng)，但仍需從多個部位采集多次。特殊患者才考慮厭氧培養(yǎng)。

63第63頁/共115頁采血套數(shù)64Weinsteinetal.DetectionofBloodstreamInfectionsinAdults:HowManyBloodCulturesAreNeededJClinMicrobiol.2007;45:3546-3548第64頁/共115頁表皮葡萄球菌的臨床意義2－3套血培養(yǎng)，有助于污染的判斷。Tokars,JI.ClinInfectDis2004;39:333污染菌致病菌？

采集1套無法判斷是病原菌還是污染菌。第65頁/共115頁每位患者每次采血最少2套，初發(fā)患者，絕不能只采1套標本多個穿刺部位采血。因多部位同時發(fā)生污染的幾率較小，便于對結果進判斷

66答案：關于血培養(yǎng)套數(shù)與采血部位第66頁/共115頁“兩套血培養(yǎng)采集間隔無特殊要求?！?7———關于采血間隔？第67頁/共115頁對于非持續(xù)性菌血癥，同時或短時間內(nèi)采集2－3套血培養(yǎng)，因為體內(nèi)巨噬細胞吞噬系統(tǒng)會在15～30min內(nèi)清除掉進入人體內(nèi)的細菌?？梢杉毙孕膬?nèi)膜炎患者要立即取血作血培養(yǎng)，30分鐘內(nèi)完成3套血培養(yǎng)的采集，采集后立即進行抗菌藥的經(jīng)驗治療。如果24小時內(nèi)報告陰性，則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)?？梢傻膩喖毙孕膬?nèi)膜炎患者每間隔30分鐘至1h采集1套，連續(xù)采集3套標本。如果24小時內(nèi)報告陰性，則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)。

68答案：關于標本采集間隔時間第68頁/共115頁“每瓶采集多少血液無特殊要求?！?9———關于采血量？第69頁/共115頁采血量(ml)與檢出率的關系70Overall血培養(yǎng)物每增加一毫升，真性菌血癥成年人微生物的檢出率增加3％但并非越多越好，超過一定數(shù)量的采血量會稀釋培養(yǎng)瓶內(nèi)的肉湯，使肉湯無法有效中和血中的抑制物質(zhì)（補體、抗體、抗生素）。所以血液與肉湯的最佳比例為1：4－1：10第70頁/共115頁采血量是影響靈敏度最關鍵因素成人一般應采2個培養(yǎng)瓶（需氧＋厭氧），每瓶5－10ml，共20ml。兒童一般只需采集需氧瓶，在保證采集血量＜1％總血量下，一般為1－3ml采血量不足時應優(yōu)先保證需氧瓶，因臨床90％以上的感染為需氧菌或兼性需氧菌感染

71答案：關于采集血液量第71頁/共115頁先采生化、凝血標本，再采血培養(yǎng)標本?！?2———關于各種血液標本的采集順序？第72頁/共115頁血培養(yǎng)對無菌操作的要求比注射、采集生化、凝血等其它標本要高。所以要最先采集血培養(yǎng)標本。污染率的指標是<3%

（100份標本里只能有不到3個標本出現(xiàn)污染。）73答案：采各種血液標本的先后順序第73頁/共115頁“消毒的重點是足夠量的消毒劑?！?4———關于皮膚及培養(yǎng)瓶消毒？第74頁/共115頁75皮膚消毒程序：

推薦使用碘町、洗必泰或碘伏作為皮膚消毒劑。碘町作用1min碘伏作用1.5-2min洗必泰作用時間與碘町一樣（但不能用于少于2個月嬰兒皮膚消毒）第75頁/共115頁76培養(yǎng)瓶的消毒程序：去掉培養(yǎng)瓶口的塑料瓶蓋。75%酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞子60秒。自然待干。將標本注入培養(yǎng)瓶內(nèi)。5.顛倒混勻標本與肉湯，以避免血液凝集。第76頁/共115頁“培養(yǎng)瓶未使用時，需要冷藏或冷凍?！?7———關于培養(yǎng)瓶的儲存溫度？第77頁/共115頁78

不需冷藏，更不能冷凍。保存在15－25℃的室溫即可，溫度過低會導致對溫度敏感的耐瑟氏菌等死亡。答案：關于未用培養(yǎng)瓶的儲存溫度第78頁/共115頁79

“加入標本后的培養(yǎng)瓶夜班未能及時送到檢驗科，可以冷藏或放入35℃的溫箱?！薄P于夜班血培養(yǎng)的送檢？第79頁/共115頁

培養(yǎng)瓶夜班未能及時送到檢驗科，存在室溫即可，不能冷藏也不能放入35

℃的溫箱。過夜不會對檢測造成影響，但仍需盡快送檢。冷藏可能導致對溫度敏感的耐瑟氏菌等死亡。溫箱會導致細菌進入生長對數(shù)期，從而錯過檢測的最佳時期。80答案：關于夜班血培養(yǎng)的送檢第80頁/共115頁“患者靜脈中插有導管，可直接從導管采血?！?1———關于采血部位？第81頁/共115頁

不可以，常規(guī)血培養(yǎng)不宜從靜脈導管或靜脈留置裝置中采集，檢出污染或定植菌的可能性較大。除非懷疑導管相關性血流感染，請參照導管相關性血流感染的采血方法。82答案：關于從靜脈留置裝置直接采血第82頁/共115頁血培養(yǎng)標本的拒收瓶子上帖的標簽錯誤或未帖標簽。血培養(yǎng)瓶打破的、損壞的或滲漏。血液凝固。83第83頁/共115頁培養(yǎng)基的選擇推薦使用商品化的培養(yǎng)基使用添加抗菌藥物吸附劑的血培養(yǎng)瓶有助于提高已接受抗菌藥物治療患者血培養(yǎng)的檢出率，增加細菌的分離率和分離速度，但同時也會增加污染菌的檢出率。84第84頁/共115頁上呼吸道標本

85第85頁/共115頁上呼吸道感染：絕大部分呼吸道感染局限于口咽、鼻咽和鼻腔部位；導致咽痛、鼻涕、常常會發(fā)熱。感染喉部、中耳、鼻竇炎、結膜炎或角膜炎?？赡芘c嚴重疾病百日咳、流行性感冒、麻疹和傳染性單核細胞增多癥并存。86第86頁/共115頁87第87頁/共115頁不同的采樣拭子

對標本的檢測結果有影響嗎?88?第88頁/共115頁棉+木棍89抑菌區(qū)域的產(chǎn)生由于棉中所含的脂肪酸以及從木棒中滲出的樹脂和甲醛。第89頁/共115頁咽拭子運送培養(yǎng)基

可以運送需氧、厭氧、苛養(yǎng)菌

4℃或RT24或48小時90建議用于病原菌培養(yǎng)而不是涂片的標本送檢。第90頁/共115頁痰培養(yǎng)標本采集與運送91第91頁/共115頁病原體種類繁多而復雜使下呼吸道感染病原診斷成為難題92細菌（包括放線菌與奴卡菌，厭氧菌與分枝桿菌）真菌（包括肺孢子菌）病毒支原體、衣原體與立克次體原蟲寄生蟲第92頁/共115頁咳痰途經(jīng)口咽部唾液中口咽部定植菌的濃度可達108-109/ml。研究顯示，國內(nèi)常規(guī)痰標本中約半數(shù)存在唾液嚴重污染現(xiàn)象。93不可避免地受到污染第93頁/共115頁我國痰細菌培養(yǎng)現(xiàn)狀標本送檢率低苛養(yǎng)菌檢出率極低結果重復性差報告速度慢感染菌與污染菌不易區(qū)分藥敏結果與治療反應存在差距94第94頁/共115頁下呼吸道感染病原學診斷注意事項痰標本的正確采集（包括導痰）痰標本及時運送和處理的重要性痰標本的洗滌與勻化痰涂片：質(zhì)量評估和細菌、真菌初步報告接種平板：質(zhì)量與質(zhì)控，血、巧克力、麥康凱、沙保弱95第95頁/共115頁下呼吸道感染病原學診斷注意事項培養(yǎng)環(huán)境：CO2培養(yǎng)時間：24h，48h菌落觀察要點結果報告：所有菌種（群），包括半定量臨床意義判定其他病原體的檢測：結核、真菌、厭氧菌、非典型病原體96第96頁/共115頁咳痰標本的采集標本采集方法醫(yī)師或護士直視下采集標本病人先漱口，去除表面的菌群教育病人深咳，收集從下呼吸道咳出的痰液臨床上約半數(shù)咳痰標本不合格！97第97頁/共115頁關于咳痰標本在抗生素應用前采集痰標本;標本采集后1～2h內(nèi)必須立即進行實驗室處理咳痰標本應用最早且廣泛，但也是最受爭議的標本取標本前應摘去牙托，清潔口腔如刷牙和漱口深咳，采集標本過程中要有專業(yè)的醫(yī)務人員指導無痰可用3％～5％NaCl5ml霧吸約5min導痰也可用物理療法、體位引流、鼻導管抽吸等法取痰98第98頁/共115頁5種篩選標準判斷14001份痰標本合格率比較99

合格不合格不能歸類

標本數(shù)率％標本數(shù)率％標本數(shù)率％標準1474033.9925366.1*80.1標準2358325.611097.9*930966.5標準3483234.5916965.5－－標準4911565.1488634.9－－標準5637845.6762354.4－－注：標準2：衛(wèi)生部醫(yī)政局《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第99頁/共115頁咳痰標本不合格，退檢嗎？如果低倍視野下鱗狀上皮細胞大于25個，白細胞小于10個，應不做或僅在特殊要求時做培養(yǎng)。如做培養(yǎng)，報告中注明“鏡檢結果表明標本口咽分泌物污染明顯”。100第100頁/共115頁幾種下呼吸道直接采集的標本經(jīng)氣管穿刺吸引（transtrachealaspiration,TTA）經(jīng)胸壁針刺吸引（transthoracicneedleaspiration,TNA）經(jīng)支氣管鏡采樣支氣管肺泡灌洗（bronchoalveolarlavage,BAL）經(jīng)支氣管鏡直接吸引防污染樣本毛刷（protectivespecimenbrush,PSB）開胸肺活檢（open-lungbiopsy，OLB）經(jīng)人工氣道吸引分泌物（endotrachealaspirates，ETA）101第101頁/共115頁痰培養(yǎng)的送檢次數(shù)對于普通細菌性肺炎，痰標本送檢每天1次，連續(xù)2～3天。不建議24h內(nèi)多次采集，除非痰液外觀性狀出現(xiàn)改變；懷疑分枝桿菌感染者，應連續(xù)收集3天清晨痰液送檢；懷疑軍團菌或深部真菌感染，痰標本理想的送檢次數(shù)尚無定論。102第102頁/共115頁痰培養(yǎng)的運送和保存盡快（<2h）送至實驗室。如不能及時送達，應將標本暫存于4℃，但放置時間不可超過24h。厭氧培養(yǎng)標本的最佳運送時間取決于標本量。被口咽部菌群污染的標本如咳痰等不可用于厭氧菌培養(yǎng)。103第103頁/共115頁痰培養(yǎng)的拒收光學顯微鏡細胞學檢查發(fā)現(xiàn)口咽分泌物污染明顯。沒有標簽或貼錯標簽。運送容器選擇不當或有滲漏。標本采集不符合要求。同一天同一試驗重復送檢2次。延時送至實驗室的標本。104第104頁/共115頁尿培養(yǎng)標本采集與運送105第105頁/共115頁你知道嗎？尿液通常是無菌的或一過性有少量微生物，但是尿道內(nèi)或尿道周圍皮膚的菌群會污染尿液標本，從而可能導致錯誤的培養(yǎng)結果。診斷癥狀明顯的病人（如尿急、尿頻、尿痛），一份標本就已足夠，治療48-72小時后再采集第