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沙門菌檢驗(yàn)的學(xué)習(xí)課件第1頁/共47頁沙門菌概況沙門菌是1885年由Salmon氏等在豬霍亂流行時(shí),分離出的豬霍亂沙門菌,由于Salmon氏對(duì)本屬細(xì)菌的發(fā)現(xiàn)貢獻(xiàn)卓越,故定名為沙門菌屬。沙門菌屬是腸桿菌科中最重要的病原菌。它是一群抗原結(jié)構(gòu)、生化特性相似的革蘭氏陰性桿菌。血清型繁多,目前已發(fā)現(xiàn)的沙氏菌有2500多個(gè)血清型和變種。我國(guó)自1911年至90年代初已有255個(gè)血清型。第2頁/共47頁雖然沙門菌的血清型很多,但多數(shù)國(guó)家從人體、動(dòng)物和食品中分離出沙門菌僅約40~50個(gè)血清型。而在一個(gè)國(guó)家中的一定時(shí)期只約有10個(gè)血清型是比較常見的。分類:傷寒沙門菌(傷寒、副傷寒)-傳染病防治法中規(guī)定報(bào)告的乙類傳染病。非傷寒沙門菌-食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)的主要對(duì)象。 第3頁/共47頁沙門菌的生物學(xué)特性形態(tài)與染色性:革蘭氏陰性桿菌,無芽胞,一般無莢膜。除雞瘟沙門菌(S.pullorum)和雞沙門菌(S.gallinarum)外均有動(dòng)力。為周身鞭毛,并多數(shù)有菌毛。大?。?~3um×0.5~1um。第4頁/共47頁營(yíng)養(yǎng)需求不高,需氧或兼性厭氧。普通營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng),能夠利用檸檬酸鹽作為碳源。在普通腸道選擇性平板上基本上形成無色菌落。菌落中等大小,半透明,表面光滑,邊緣整齊或呈鋸齒狀。不分解乳糖,大部分菌株產(chǎn)H2S,發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。培養(yǎng)與生化特性第5頁/共47頁最適培養(yǎng)溫度為37℃,最適pH7.2~7.6。耐受膽鹽,在糞便、土壤、食品、水中可生存5個(gè)月至二年之久。第6頁/共47頁沙門菌的分布沙門菌廣泛存在于自然環(huán)境中。通過沙門菌病患者或健康帶菌的人和動(dòng)物的排泄物污染環(huán)境和食品。易于污染的高危食物:畜禽肉類、蛋、奶及其制品。沙門菌在肉類中不分解蛋白質(zhì),不產(chǎn)生靛基質(zhì),所以當(dāng)食品污染了沙門菌后,通常沒有感官性狀的改變。第7頁/共47頁修訂內(nèi)容前增菌:取消樣品分類,前增菌液統(tǒng)一為“緩沖蛋白胨水”。對(duì)所有樣品均進(jìn)行8~18h前增菌。原標(biāo)準(zhǔn)只對(duì)凍肉、蛋品、乳品等加工食品進(jìn)行前增菌。修改了樣品的處理方式:增加拍擊式均質(zhì)器,均質(zhì)袋可直接培養(yǎng)。樣品液增加調(diào)整pH值。選擇性增菌:使用“TTB、SC”,取消“MM”。分離培養(yǎng)基:使用BS、XLD、HE、科瑪嘉顯色培養(yǎng)基。取消DHL、SS。

第8頁/共47頁生化鑒定:

1.采納API20E或VitekGNI為傳統(tǒng)生化鑒定方法的選擇性替代方法。

2.生化鑒定項(xiàng)目進(jìn)行調(diào)整:原國(guó)標(biāo)中生化鑒定是將可疑菌落同時(shí)接種于三糖鐵(TSI)瓊脂、蛋白胨水(供做靛基質(zhì)試驗(yàn))、尿素瓊脂(pH7.2)、氰化鉀(KCN)培養(yǎng)基和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基;現(xiàn)修改為:在接種TSI瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基的同時(shí)增加一項(xiàng)營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA),經(jīng)TSI瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基的選擇后,可篩掉大部分非沙門氏菌株,大大減少了工作量,同時(shí)也滿足了API20E或

VitekGNI鑒定的需要。第9頁/共47頁為保持與原標(biāo)準(zhǔn)的一致性,新標(biāo)準(zhǔn)也保留了可以同時(shí)直接接種蛋白胨水(供做靛基質(zhì)試驗(yàn))、尿素瓊脂(pH7.2)、KCN培養(yǎng)基的內(nèi)容。本部分還增加了對(duì)疑似菌落進(jìn)行留樣確認(rèn)的部分,以備必要時(shí)復(fù)查,這對(duì)生化鑒定不確定的菌落進(jìn)行進(jìn)一步驗(yàn)證是非常必要的。血清學(xué)鑒定中的菌體分群改為選擇性試驗(yàn)項(xiàng)目。報(bào)告:綜合以上生化試驗(yàn)和血清學(xué)鑒定的結(jié)果,報(bào)告25g樣品中檢出或未檢出沙門菌。第10頁/共47頁培養(yǎng)基的改變舊標(biāo)準(zhǔn)前增菌:BPW增菌:MM(或TTB)、SC分離培養(yǎng):BS、DHL(或HE、WS、SS)生化鑒定:生化管

新標(biāo)準(zhǔn)前增菌:BPW增菌:TTB、SC分離培養(yǎng):BS、XLD、顯色培養(yǎng)基生化鑒定:生化管、API20E生化鑒定試劑盒、VITEKGNI+生化鑒定卡第11頁/共47頁沙門菌的檢驗(yàn)程序檢樣前增菌法25g樣品+BPW225mL8~18h36±1℃1mL檢樣+TTB10mL1mL檢樣+SC10mLBSXLD(或HE、顯色培養(yǎng)基)36±1℃40~48h36±1℃18~24h挑取可疑菌落42±1℃,18~24h36±1℃,18~24h第12頁/共47頁沙門菌的檢驗(yàn)程序可疑菌落TSI(斜面、底層、產(chǎn)氣、H2S),蛋白胨水(靛基質(zhì)),尿素(pH7.2),KCN,賴氨酸、營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA)H2S+,靛基質(zhì)-尿素-,KCN-賴氨酸+H2S+,靛基質(zhì)+尿素-,KCN-賴氨酸+H2S-,靛基質(zhì)-尿素-,KCN-賴氨酸+/-非如左述的各種反應(yīng)結(jié)果甘露醇+,山梨醇+ONPG+非沙門菌血清學(xué)鑒定報(bào)告商品化生化鑒定系統(tǒng)第13頁/共47頁稱取25g(mL)樣品放入盛有225mLBPW的無菌均質(zhì)杯中,以8000r/min~10000r/min均質(zhì)1min~2min,或置于盛有225mLBPW的無菌均質(zhì)袋中,用拍擊式均質(zhì)器拍打1min~2min。若樣品為液態(tài),不需要均質(zhì),振蕩混勻。無菌操作將樣品轉(zhuǎn)至500mL錐形瓶中,如使用均質(zhì)袋,可直接進(jìn)行培養(yǎng),于36℃±1℃培養(yǎng)8h~18h。如為冷凍產(chǎn)品,應(yīng)在45℃以下不超過15min,或2℃~5℃不超過18h解凍。前增菌第14頁/共47頁輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)過的樣品混合物,移取1mL,轉(zhuǎn)種于10mLTTB內(nèi),于42℃±1℃培養(yǎng)18h~24h。同時(shí),另取1mL,轉(zhuǎn)種于10mLSC內(nèi),于36℃±1℃培養(yǎng)18h~24h。分別用接種環(huán)取增菌液1環(huán),劃線接種于一個(gè)BS瓊脂平板和一個(gè)XLD瓊脂平板(或HE瓊脂平板或顯色培養(yǎng)基平板)。于36℃±1℃分別培養(yǎng)18h~24h(XLD瓊脂平板、HE瓊脂平板、顯色培養(yǎng)基平板)或40h~48h(BS瓊脂平板),觀察各個(gè)平板上生長(zhǎng)的菌落。增菌與分離第15頁/共47頁沙門氏菌屬在不同選擇性瓊脂平板上的菌落特征

選擇性瓊脂平板

沙門氏菌

BS瓊脂

菌落為黑色有金屬光澤、棕褐色或灰色,菌落周圍培養(yǎng)基可呈黑色或棕色;有些菌株形成灰綠色的菌落,周圍培養(yǎng)基不變

HE瓊脂

藍(lán)綠色或藍(lán)色,多數(shù)菌落中心黑色或幾乎全黑色;有些菌株為黃色,中心黑色或幾乎全黑色;

XLD瓊脂

菌落呈粉紅色,帶或不帶黑色中心,有些菌株可呈現(xiàn)大的帶光澤的黑色中心,或呈現(xiàn)全部黑色的菌落;有些菌株為黃色菌落,帶或不帶黑色中心

科瑪嘉顯色培養(yǎng)基

菌落為紫紅色

第16頁/共47頁接種三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基的同時(shí),可直接接種蛋白胨水

(供做靛基質(zhì)試驗(yàn))、尿素瓊脂

(pH7.2)、氰化鉀

(KCN)培養(yǎng)基,也可在初步判斷結(jié)果后從營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上挑取可疑菌落接種。于36℃±1℃培養(yǎng)18h~24h,必要時(shí)可延長(zhǎng)至48h。將已挑菌落的平板儲(chǔ)存于2℃~5℃或室溫至少保留24h,以備必要時(shí)復(fù)查。

第17頁/共47頁生化試驗(yàn)

自選擇性瓊脂平板上分別挑取2個(gè)以上典型或可疑菌落,分別接種三糖鐵(TSI)瓊脂、賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基和營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板;取菌落一部分于斜面劃線和底層穿刺。接種針在接種TSI后不要滅菌,直接接種賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基和營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板,于36℃±1℃培養(yǎng)18h~24h,必要時(shí)可延長(zhǎng)至48h。

第18頁/共47頁沙門氏菌屬在三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基內(nèi)的反應(yīng)結(jié)果

三糖鐵瓊脂

賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基

初步判斷

斜面

底層

產(chǎn)氣

硫化氫

-++(-)

+(-)

+可疑沙門氏菌屬

-++(-)

+(-)

-可疑沙門氏菌屬

+++(-)

+(-)

+可疑沙門氏菌屬

+++/-

+/-

-非沙門氏菌

注:+陽性,-陰性;+(-)多數(shù)陽性,少數(shù)陰性;+/-陽性或陰性。

該表顯示:只有在三糖鐵斜面產(chǎn)酸、底層產(chǎn)酸;同時(shí)賴氨酸陰性的菌株可排除。其他反應(yīng)結(jié)果均有沙門菌屬的可能,同時(shí)也均有不是沙門菌的可能。第19頁/共47頁沙門氏菌屬生化反應(yīng)初步鑒別表

反應(yīng)序號(hào)

硫化氫

(H2S)

靛基質(zhì)

pH7.2尿素

氰化鉀

(KCN)

賴氨酸脫羧酶

A1+

A2+

A3-

+/-

注:+陽性;-陰性;+/-陽性或陰性。

反應(yīng)序號(hào)A1:典型反應(yīng)判定為沙門氏菌屬。如尿素、KCN和賴氨酸脫羧酶3項(xiàng)中有1項(xiàng)異常,按下表可判定為沙門氏菌。

如有2項(xiàng)異常為非沙門氏菌。

第20頁/共47頁沙門氏菌屬生化反應(yīng)初步鑒別表

pH7.2尿素

氰化鉀(KCN)賴氨酸脫羧酶

結(jié)

甲型副傷寒沙門氏菌(要求血清學(xué)鑒定結(jié)果)-++沙門氏菌Ⅳ或Ⅴ(要求符合本群生化特性)+-+沙門氏菌個(gè)別變體(要求血清學(xué)鑒定結(jié)果)注:+表示陽性;+表示陰性。

反應(yīng)序號(hào)2:補(bǔ)做甘露醇和山梨醇試驗(yàn),沙門菌靛基質(zhì)陽性變體兩項(xiàng)結(jié)果均為陽性;反應(yīng)序號(hào)3:補(bǔ)做ONPG,ONPG陰性,同時(shí)賴氨酸脫羧酶陽性為沙門菌;但甲型副傷寒沙門菌賴氨酸脫羧酶為陰性。第21頁/共47頁沙門氏菌屬各生化群的鑒別

必要時(shí)按此表進(jìn)行沙門菌生化群鑒定

項(xiàng)

ⅠⅡⅢⅣⅤⅥ衛(wèi)矛醇

山梨醇+++++-水楊苷---+--ONPG--+-+-丙二酸鹽-++---KCN---++-注:+表示陽性;-表示陰性。

第22頁/共47頁沙門菌的增菌培養(yǎng)基緩沖蛋白胨水(BPW)肉湯:是基礎(chǔ)增菌培養(yǎng)基,不含任何抑制成分,有利于受損傷的沙門菌復(fù)蘇。使受損傷的沙門菌細(xì)胞恢復(fù)到穩(wěn)定的生理狀態(tài)。一般用于加工食品或冷凍食品的前增菌。第23頁/共47頁沙門菌的增菌液四硫磺酸鈉煌綠增菌液(TTB):含有膽鹽,抑制革蘭氏陽性球菌和部分大腸埃希氏菌的生長(zhǎng),而傷寒與付傷寒沙門菌仍能生長(zhǎng)。亞硒酸鹽胱氨酸增菌液(SC):可對(duì)傷寒及其他沙門菌作選擇性增菌,亞硒酸與蛋白胨中的含硫氨基酸結(jié)合,形成亞硒酸和硫的復(fù)合物,影響細(xì)菌硫代謝,從而抑制大腸埃希氏菌、腸球菌和變形桿菌的增殖。第24頁/共47頁沙門菌的分離培養(yǎng)基亞硫酸鉍瓊脂(BS):含有煌綠、亞硫酸鉍能抑制大腸桿菌、變形桿菌和革蘭氏陽性菌的生長(zhǎng),但對(duì)傷寒、副傷寒等沙門菌的生長(zhǎng)無影響。傷寒桿菌及其他沙門菌能利用葡萄糖將亞硫酸鉍還原成硫酸鉍,形成黑色菌落周圍繞有黑色和棕色的環(huán),對(duì)光觀察可見有金屬光澤。該培養(yǎng)基制備過程不宜過分加熱,以免降低其選擇性,應(yīng)在臨用時(shí)配制,超過48h不宜使用。第25頁/共47頁沙門菌的菌落形態(tài):產(chǎn)H2S的菌落為黑色有金屬光澤、棕褐色或灰色。菌落周圍培養(yǎng)基可呈黑色或棕色,有些不產(chǎn)H2S的菌落,形成灰綠的菌落,周圍培養(yǎng)基不變。注:此培養(yǎng)基在制作過程中過分加熱可使培養(yǎng)基的選擇性降低,與TTB或SC合用可獲得更高的檢出率。第26頁/共47頁沙門菌的分離培養(yǎng)基HE瓊脂:在保證細(xì)菌所需營(yíng)養(yǎng)的基礎(chǔ)上,加入了一些抑制劑,如:膽鹽、檸檬酸鹽、去氧膽酸鈉等,可抑制某些腸道致病菌和革蘭氏陽性菌的生長(zhǎng),但對(duì)革蘭氏陰性的腸道致病菌則無抑制作用。沙門菌在HE瓊脂上的菌落形態(tài):藍(lán)綠色或藍(lán)色,多數(shù)菌株產(chǎn)H2S,中心呈黑色或幾乎全黑色。第27頁/共47頁沙門菌的分離培養(yǎng)基XLD瓊脂:培養(yǎng)基中含有去氧膽酸鈉作指示劑,在該濃度下的去氧膽酸鈉也同時(shí)作為大腸埃希氏菌的抑制劑,而不影響沙門菌屬和志賀菌屬的生長(zhǎng)。XLD培養(yǎng)基分離沙門菌和志賀菌的敏感性超過了傳統(tǒng)的培養(yǎng)基,如:EMB、SS、BS。因這些培養(yǎng)基尚有抑制志賀菌屬生長(zhǎng)的潛在因素,故本培養(yǎng)基是分離鑒定沙門菌及志賀菌屬的可靠培養(yǎng)基。在國(guó)外廣泛使用。第28頁/共47頁分離培養(yǎng)中的注意要點(diǎn)非典型的沙門氏菌菌落形態(tài):不存在典型的或可疑的沙門氏菌菌落時(shí),按如下步驟檢驗(yàn)非典型的沙門氏菌菌落。HE和XLD瓊脂:非典型的沙門氏菌在HE和XLD瓊脂上呈黃色菌落,帶或不帶黑色中心。HE和XLD平板經(jīng)24±2小時(shí)培養(yǎng)后,沒有典型的沙門氏菌菌落,則挑取2個(gè)或更多個(gè)非典型的沙門氏菌菌落。第29頁/共47頁BS瓊脂:某些非典型菌株產(chǎn)生綠色菌落,其周圍培養(yǎng)基稍微或不呈暗色。如果BS平板培養(yǎng)24±2小時(shí)后,沒有出現(xiàn)典型菌落,則不挑取任何菌落,讓平板繼續(xù)培養(yǎng)24±2小時(shí)。如果經(jīng)48±2小時(shí)培養(yǎng)后,仍沒有典型或可疑的菌落出現(xiàn),則挑取2個(gè)或更多個(gè)非典型的菌落。第30頁/共47頁沙門菌顯色培養(yǎng)基沙門菌顯色培養(yǎng)基主要用于快速篩選、分離沙門菌。其基本原理:利用沙門菌特異性酶與顯色基團(tuán)的特有反應(yīng),使色原游離出來,沙門菌在培養(yǎng)基上呈紫色或紫紅色。而大腸桿菌等其他腸道桿菌呈藍(lán)綠色。色原-特定結(jié)合物色原+特定結(jié)合物沙門菌辛酸脂酶無色顯色游離第31頁/共47頁可疑菌落的生化鑒定自選擇性瓊脂平板(至少2種選擇性平板)上直接挑取2個(gè)以上可疑菌落,分別接種三糖鐵瓊脂(TSI)。TSI的主要成分:蛋白胨、乳糖、蔗糖、葡萄糖、硫酸亞鐵銨、硫代硫酸鈉、酚紅、瓊脂。在TSI瓊脂中有2個(gè)指示劑體系:--酚紅:在堿性環(huán)境中呈紅色;在酸性環(huán)境中呈黃色。--硫酸亞鐵銨:是硫化氫的指示劑,可與硫化氫反應(yīng)生成硫化鐵呈黑色。硫代硫酸鈉可防止硫化氫氧化形成S-S基而影響反應(yīng)。第32頁/共47頁沙門菌在TSI瓊脂上的反應(yīng)斜面底層產(chǎn)氣H2S可能的菌屬和種–

++/–

+沙門菌屬、弗勞地氏檸檬酸桿菌、變形桿菌屬、緩慢愛德華氏菌+++/–

+沙門菌、弗勞地氏檸檬酸桿菌、普通變形桿菌–

+–

傷寒沙門菌、雞沙門菌、志賀菌屬、大腸埃希氏菌、蜂窩哈夫尼亞菌、摩根氏菌、普羅菲登斯菌屬–++–沙門菌屬、大腸埃希氏菌、蜂窩哈夫尼亞菌、摩根氏菌、普羅菲登斯菌屬+–+–+/––––非沙門菌第33頁/共47頁賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基:蛋白胨、酵母浸膏、葡萄糖、溴麝香草酚藍(lán)(紫)。原理:細(xì)菌使氨基酸脫羧,產(chǎn)生胺類,使培養(yǎng)基變堿,顏色不改變。沙門菌的反應(yīng):陽性。意義:檸檬酸桿菌、志賀菌均為陰性;埃希氏菌不定。注:本試驗(yàn)的陽性反應(yīng)為培養(yǎng)基不改變顏色,而培養(yǎng)基變黃色者為陰性反應(yīng)。本試驗(yàn)一定要設(shè)空白對(duì)照。培養(yǎng)基需用液體石蠟封蓋,阻止空氣的氧化作用。第34頁/共47頁靛基質(zhì)試驗(yàn)靛基質(zhì)試驗(yàn)的培養(yǎng)基:蛋白胨水。原理:細(xì)菌分解蛋白胨中色氨酸,生成靛基質(zhì),與對(duì)二氨基苯甲醛作用,形成玫瑰吲哚而呈紅色。沙門菌的反應(yīng):可以陽性或陰性反應(yīng)。第35頁/共47頁尿素酶試驗(yàn)?zāi)蛩嘏囵B(yǎng)基:蛋白胨、葡萄糖、酚紅、氯化鈉、磷酸二氫鉀、尿素,pH7.2。原理:含尿素酶細(xì)菌能分解尿素,產(chǎn)生大量的氨,使培養(yǎng)基呈堿性,指示劑變紅。沙門菌的反應(yīng):陰性。第36頁/共47頁氰化鉀試驗(yàn)氰化鉀試驗(yàn)培養(yǎng)基:蛋白胨、磷酸鹽緩沖對(duì)、氯化鈉、氰化鉀。原理:氰化鉀是劇毒藥物,可抑制某些細(xì)菌的呼吸酶系統(tǒng),使這些酶失去活性,細(xì)菌的生長(zhǎng)因此受到抑制。而某些細(xì)菌可對(duì)氰化鉀產(chǎn)生抗性,能在氰化鉀培養(yǎng)中生長(zhǎng)。本試驗(yàn)常用于沙門菌與檸檬酸桿菌的鑒定。沙門菌生長(zhǎng)情況:陰性(不生長(zhǎng))。注:本試驗(yàn)必需設(shè)置對(duì)照管(不加氰化鉀),若對(duì)照管細(xì)菌生長(zhǎng)良好,試驗(yàn)管細(xì)菌不生長(zhǎng),可判定為陰性。若對(duì)照管與試驗(yàn)管均無細(xì)菌生長(zhǎng),則應(yīng)重復(fù)試驗(yàn)。試驗(yàn)失敗的主要原因是封口不嚴(yán),氰化鉀逐漸分解,生成氫氰酸氣體逸出,以致藥物濃度降低細(xì)菌生長(zhǎng),呈假陽性反應(yīng)。第37頁/共47頁沙門菌生化鑒定培養(yǎng)基-

β-半乳糖苷酶(ONPG)試驗(yàn)β-半乳糖苷(ONPG)培養(yǎng)基:蛋白胨、ONPG。原理:大腸桿菌含有β-半乳糖苷酶,能分解ONPG,使培養(yǎng)基呈黃色。沙門菌的反應(yīng):陰性。注:本試驗(yàn)主要用于不產(chǎn)H2S的沙門菌與大腸桿菌的判定第38頁/共47頁沙門菌生化鑒定的主要試驗(yàn)項(xiàng)目糖發(fā)酵試驗(yàn):三糖鐵瓊脂(葡萄糖、乳糖、蔗糖)、甘露醇、山梨醇、衛(wèi)茅醇、水楊苷、ONPG。氨基酸和蛋白質(zhì)代謝試驗(yàn):靛基質(zhì)、賴氨酸脫羧酶、尿素酶。碳源和氮源利用試驗(yàn):丙二酸鹽。其他生化試驗(yàn):氰化鉀。第39頁/共47頁沙門菌在API20E的典型反應(yīng)第1位數(shù)第2位數(shù)第3位數(shù)第4位數(shù)第5位數(shù)第6位數(shù)第7位數(shù)結(jié)果判定ONPGADHLDCODCCITH2SURETDAINDVPGELGLUMANINOSORRGASACMELAMYARAOX124124124124124124124反應(yīng)結(jié)果-+++++-----+++++-+-+-沙門菌應(yīng)得樹枝024124000004124104020組合編碼6704752第40頁/共47頁應(yīng)用一系列小的多孔的聚苯乙烯卡片進(jìn)行測(cè)試,卡片含有干燥的抗菌藥物和生化基質(zhì)。先制備一定濃度的欲鑒定菌株的菌懸液,然后將

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