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文檔簡介
———如何正確的選擇搖床振幅
什么是搖床的振幅?
搖床的振幅指托盤在做圓周運動時候的直徑,有時候我們也叫"振蕩直徑'或"軌道直徑'符號:?。作為標準,Infors提供振幅為3mm,25mm和50mm的搖床
什么是氧氣傳遞效率(OTR)?
氧氣傳遞效率是指,氧氣從大氣中傳入到液體中的效率。OTR數(shù)值越高,氧傳遞效率越高。
振幅和轉速的影響
這兩個因素都會影響培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基的混合?;旌闲Ч胶?,氧傳遞速率(OTR)就越好。遵循這些指導原則,可以選擇最適合的振幅和轉速。
一般來說,選擇25mm振幅可以作為萬能振幅應用于所有培養(yǎng)。
正因為如此,大多搖床的振幅都是25毫米。在一些應用中,如果對氧傳遞/細胞生長有特殊的限制,可能會選擇一些特殊的振幅。
細菌,酵母和真菌培養(yǎng):
搖瓶中的氧氣傳遞效率比生物反應器低得多。多數(shù)情況下氧傳遞可能是搖瓶培養(yǎng)的限制因素。振幅與錐形培養(yǎng)瓶的大小相關:大瓶使用大振幅。
建議:25mm振幅應用于從25毫升到2升的錐形培養(yǎng)瓶
50mm振幅應用于2升至5升的錐形培養(yǎng)瓶
細胞培養(yǎng):
然而,哺乳動物細胞培養(yǎng)對氧氣的需求相對較低,較低的功率輸入即可。
*對于250mL搖瓶,在較為寬廣的振幅和振速范圍(20-60mm振幅;100-300rpm)都可以提供足夠的氧氣傳遞。
*如果直徑較大的燒瓶(Fernbach燒瓶)推薦使用50毫米振幅
*使用一次性培養(yǎng)袋,推薦使用50mm振幅。
微孔板和深孔板:
對微孔板和深孔板有兩種不同的方法可以獲得最大的氧氣轉移!
*使用50mm振幅,轉速不低于250rpm
*使用3mm振幅,轉速在800-1000rpm
請注意以下幾點
在許多情況下即使選擇了合理的振幅,也未必能增加生物培養(yǎng)量,因為培養(yǎng)量的增加會受到多個因素影響。舉例:如果十個因素中有一兩個不理想,那么無論其他因素有多好,培養(yǎng)量的增長都是有限的,或者可以這樣說,如果培養(yǎng)量的受限因素只有氧傳遞時,振幅的正確選擇會得到明顯的培養(yǎng)箱增加。比如,碳源若是受限因素,無論氧傳遞效果多好,也不會達到理想的培養(yǎng)量。
振幅和轉速
振幅和轉速都會對氧傳遞造成影響。如果在轉速很低(比如100rpm)的細胞培養(yǎng)中,振幅的不同對氧傳遞幾乎沒有明顯影響。要達到最高的氧傳遞效果,首先是盡可能的提高轉速,托盤會適當?shù)钠胶廪D速。并不是所有的培養(yǎng)物都能夠在高速震蕩下良好生長,一些對剪切力敏感的培養(yǎng)物,高轉速會導致培養(yǎng)物死亡。
其他影響因素
其他因素對氧傳遞也會有影響:
*裝液量:錐形燒瓶的裝液量為不超過總體積的三分之一。如果要達到最大氧傳遞,裝液量不能超過10%。永遠不要將裝液量達到50%。
*擾流板:在所有類型的培養(yǎng)中,擾流板都有效提高氧傳遞。有些廠家推薦使用"超高產量'培養(yǎng)瓶。這種瓶的擾流板會增大液體摩擦力,搖床可能會達不到最大設定轉速。振幅和轉速的關聯(lián)關系
搖瓶中的離心力可以通過下面公式計算:FC=rpm2振幅
離心力和振幅間存在線性關系:如果使用25mm振幅到50mm振幅(轉速相同),離心力增加了2倍
離心力和轉速存在平方關系:如果轉速提高到2倍(振幅相同),離心力提高4倍。如果轉速提高到3倍,離心力則提高9倍!
如果用振幅25mm,在給定的速度下,進行培養(yǎng)。如果希望用振幅50mm,達到相同的離心力,轉速應該用1/2的平方根計算,因此您應該使用70%的轉速,達到形同的培養(yǎng)條件。
請注意上述只是理論上的計算離心力的方法?,F(xiàn)實應用中
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