生物利用與生物等效性評價

生物利用與生物等效性評價第1頁/共50頁一、生物利用度(bioavailability，BA)概念

藥物制劑中主藥被吸收進入血循環(huán)的程度和速度叫生物利用度。有絕對生物利用度與相對生物利用度之分。

速度：進入血循環(huán)的快慢，用達峰濃度和達峰時間來表示。

程度：進入血循環(huán)的多少(量)，一般是用血藥濃度-時間曲線下面積（AUC)計算吸收的數(shù)量。

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絕對生物利用度

(absolutebioavailability)

試驗制劑的AUC與靜脈注射劑的AUC比值為絕對生物利用度。

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相對生物利用度（ＲelativeBioavalability)

服用同一藥物的相同或不同劑型后，測定它們各自的AUC，并進行比較而得的比值為相對生物利用度。

參比標(biāo)準(zhǔn)品：藥物的溶液劑或混懸劑或同類制劑中質(zhì)量過硬的產(chǎn)品。檢品與參比品一般為相同的給藥途徑。

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若給藥劑量不同，則應(yīng)進行劑量標(biāo)準(zhǔn)化后再進行比較。第5頁/共50頁研究生物利用度的意義

藥物制劑包括不同的劑型和相同劑型不同生產(chǎn)廠家或同一廠家不同批號。即使用相同的給藥方式和劑量，它們的吸收速度與吸收數(shù)量可能不一樣。呈現(xiàn)的藥理效應(yīng)也可能大不相同。

研究制劑的生物利用度可以為確定制劑的劑量及給藥方法提供一條理論依據(jù)。

第6頁/共50頁什么情況下需做生物利用度

（1）治療嚴重疾病的藥物（2）治療指數(shù)窄的即量效曲線陡峭的藥物（3）水溶性差或在胃腸道能形成不溶解型的藥物

國內(nèi)新藥報批，均需做生物利用度。（有專家認為并無此必要）第7頁/共50頁二、生物利用度的研究方法

方法的選擇取決于研究目的、測定藥物的分析方法和藥物的藥動學(xué)特征。研究方法血藥濃度法尿藥濃度法藥理效應(yīng)法第8頁/共50頁1.血藥濃度法

本法是一種比較準(zhǔn)確，靈敏，重現(xiàn)性好的方法，可用于研究大多數(shù)口服劑型、栓劑以及一些吸入劑與粘膜用藥。第9頁/共50頁

例：某藥口服其溶液劑及片劑后，各時間點的血藥濃度(單位：μg/ml)如下，求Fr。

解:@找Cmax、Tp:Cmax=4.60Tp=1.5@確定消除相：后5點

@求K，同一藥物消除速度常數(shù)K一致，任取溶液劑或片劑的尾段作數(shù)據(jù)處理

t(hr)00.511.523456溶液劑01.003.864.603.602.000.990.700.30片劑00.903.464.083.321.650.830.390.21第10頁/共50頁t(hr)23456C(μg/ml)3.602.000.990.700.30lgC0.15560.13010.09950.08450.0477

線性回歸:lgC=-0.26143×t+2.081r=-0.9940K=-2.303×(-0.26143)=0.602(hr-1)第11頁/共50頁

@求片劑及溶液劑的AUC0→∞同理：AUC0→∞片劑=10.034(μg×h/ml)第12頁/共50頁2.尿藥濃度法

當(dāng)吸收入血液的藥量，按原形藥成比例地由尿排除，或吸收入血液的藥物主要由尿排泄時，均可采用尿藥濃度法測定其生物利用度。

方法：服藥→收集尿樣(每隔一定時間)→測定含量→計算累積排藥量→求Fr

注意：采尿期間應(yīng)飲水量相等，進相同飲食。

第13頁/共50頁例：呋喃妥英片：受試者空腹過夜后于早上服藥，按0～2、2～4、4～6、6～8、8～12小時與12～24小時收集尿液，各期尿樣分析結(jié)果為：

時間試驗片劑參比片劑

0～219.1714.100～435.3428.300～637.0132.800～837.5034.290～1237.8834.710～2437.8834.71第14頁/共50頁

如果藥物具有藥理效應(yīng)，其效應(yīng)強度又可分成等級數(shù)值，并有儀器可用來直接測量（如直接測量瞳孔大小、測眼內(nèi)壓、血壓、體溫等）可以考慮用藥理效應(yīng)法來測生物利用度。藥理效應(yīng)法一般是通過實驗，將觀察到的藥理效應(yīng)強度畫出劑量-效應(yīng)曲線，將劑量轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的生物相藥濃度，以生物相藥濃度對時間作圖，比較試驗制劑與參比制劑的曲線，估算生物利用度。

3.藥理效應(yīng)法第15頁/共50頁

三種方法中使用最多的、最普遍的是血藥濃度法；尿藥濃度法天熱時樣品不易保存;

藥理效應(yīng)法需要其效應(yīng)強度能分等級，并可用儀器直接測量。第16頁/共50頁三、生物利用度的實驗設(shè)計

實驗前準(zhǔn)備（查文獻）

藥物的理化性質(zhì)藥物的體內(nèi)過程藥物的藥動學(xué)特性樣品分析方法第17頁/共50頁理化性質(zhì)：穩(wěn)定性、溶解性、溶解度、紫外吸收等第18頁/共50頁體內(nèi)過程1)確定分析樣品（血、尿、組織液、唾液）

2)確定分析藥物還是代謝物3)確定給藥劑量第19頁/共50頁藥動學(xué)特征：

Ka、k、t1/2、Tp、Cmax

確定取樣時間及給藥間隔第20頁/共50頁樣品分析方法：

HPLC、GC、放射免疫法（RIA）、紫外分光光度法...第21頁/共50頁設(shè)計受試者的選擇標(biāo)準(zhǔn)參比制劑的選擇

試驗方法劑量的確定研究條件測定方法第22頁/共50頁

生物利用度試驗一般在健康正常人中進行，也可用實驗動物。用實驗動物研究生物利用度時，以狗、猴、豬較為接近人的消化道生理情況；大白鼠、小白鼠均不適用（體型太小，給藥困難、對完整劑型無法進行）；家兔也不適用，其消化道生理與人類相差較大，胃排空太慢。所以應(yīng)根據(jù)所研究的藥物的特性，盡量選擇吸收、分布、代謝和排泄與人接近的動物。第23頁/共50頁

志愿者的生物利用度數(shù)據(jù)最為可靠，但志愿者必須作嚴格的健康檢查，要求體內(nèi)各主要臟器功能正常，對年齡、性別和體重也有規(guī)定。第24頁/共50頁1）年齡、性別、體重

通常：年齡18～45，體重50～60Kg左右，男女各半（男性最好）。采樣期間(3～5個t1/2)不能吸煙、喝酒，以免對藥物的體內(nèi)代謝有影響。第25頁/共50頁2）例數(shù)

國內(nèi)：一般制劑8～10例；緩控釋制劑12～18例國外：一般制劑8～10例；緩控釋制劑18～24例第26頁/共50頁3）采樣次數(shù)

吸收相、平衡相各2～3次；消除相4～10次,總次數(shù)10～15次，一般11～12次（包括空白點）整個采樣時間：3～5個t1/2（從取空白樣開始計算時間）一般來說：最后一個點的血濃應(yīng)為Cmax/10～Cmax/20，所以為保險起見，應(yīng)延長取樣時間，如15或24小時加取一個點。第27頁/共50頁標(biāo)準(zhǔn)參比制劑

選用安全性、有效性都已證明合格者，最好是使用時間久的。若標(biāo)準(zhǔn)參比制劑（iv、po等）國內(nèi)外都沒有，也可以自制成液體制劑（溶液劑、混懸劑、注射劑），但要有檢驗部門出示的合格證明。通常肌肉注射劑用口服制劑作標(biāo)準(zhǔn)，求相對生物利用度；透皮吸收制劑也可以用口服制劑作參比，但最好還是透皮吸收制劑為標(biāo)準(zhǔn)品。第28頁/共50頁試驗方法

拉丁方交叉設(shè)計試驗方法（P334）受試者一般分為6組，間隔一周后再交換（清洗期），若時間太長，受試者對結(jié)果的影響大（身體狀況有改變等）所以，一次實驗樣品數(shù)不宜超過3。（樣品數(shù)為3，時間半個月）每一受試者服用了3種制劑，每人都作為自身對照，可以排除個體差異及用藥順序?qū)嶒灲Y(jié)果的可能影響。第29頁/共50頁劑量的確定

以臨床用劑量為準(zhǔn)。

第30頁/共50頁研究條件

受試者的飲食：統(tǒng)一飲食制劑：包括標(biāo)準(zhǔn)品和樣品分析方法：專屬性強、靈敏度高、誤差小第31頁/共50頁測定方法

血藥濃度法、尿藥濃度法、藥理效應(yīng)法。

第32頁/共50頁

影響藥物吸收、分布、代謝和排泄的各種因素都可影響生物利用度。如藥物在胃腸道分解；肝臟的首過作用；年齡；疾??；種族等。

三、影響生物利用度的因素第33頁/共50頁

多劑量給藥，通常是待體內(nèi)血藥濃度達穩(wěn)態(tài)后，在一個給藥間隔內(nèi)取樣，按單劑量給藥處理，此時C0≠0，C0=C穩(wěn)態(tài)。因是在一個給藥間隔內(nèi)取樣，所以沒有Ct/K這一項，直接用梯形法即可求出AUC。四、多劑量給藥的生物利用度第34頁/共50頁五、緩釋控釋制劑的生物利用度研究

緩釋控釋制劑的生物利用度研究目的是證明研制的緩釋控釋制劑與普通制劑的生物利用度相等，或與被仿制的緩釋控釋制劑生物等效；考察緩控釋特點，檢查藥物的釋放有無突釋現(xiàn)象。緩釋控釋制劑的生物利用度研究需要進行單劑量試驗與多劑量試驗。第35頁/共50頁1.單劑量試驗

單劑量試驗的設(shè)計與普通制劑相同。單劑量試驗考察緩釋控釋制劑體內(nèi)藥物釋放行為，評價與參比制劑比較的吸收速率與吸收程度的差異，確認受試制劑的緩、控釋藥動學(xué)特征。第36頁/共50頁2.多劑量和穩(wěn)態(tài)研究

多劑量穩(wěn)態(tài)研究用于考察在連續(xù)給藥的條件下，受試藥物吸收速率、吸收程度及血藥濃度波動情況，并與參比制劑進行比較。

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受試制劑采用擬訂的用藥劑量與方案。每日給藥一次的制劑應(yīng)禁食過夜（空腹10小時后）服藥，服藥后繼續(xù)禁食2小時；每日服用二次的制劑，早晨一次服藥應(yīng)在禁食過夜后服用，服藥后繼續(xù)禁食2小時，晚上一次應(yīng)在餐后2小時服藥，每次用150～200ml水送服。連續(xù)給藥，在達到穩(wěn)態(tài)后的最后一次給藥前，應(yīng)至少連續(xù)測定三次谷濃度，以證明受試者血藥濃度是否達到穩(wěn)態(tài)。連續(xù)三次谷濃度的采樣時間應(yīng)固定在每天的同一時間，一般為每天早晨給藥前。第38頁/共50頁

達穩(wěn)態(tài)后，在一個給藥間隔內(nèi)采足夠的血樣，使能充分表達生物利用度參數(shù)，測定血藥濃度，進行參數(shù)計算與數(shù)據(jù)分析，并計算各個受試者血藥濃度的波動度（DF）。第39頁/共50頁

3.高脂飲食影響試驗

高脂飲食影響試驗用于考察餐后服用試驗制劑與參比制劑后，吸收速度與程度是否等效，評價食物對生物利用度的影響。FDA高脂早餐：兩個白脫煎雞蛋、兩片咸肉、兩盎司土豆泥和240ml全脂奶。第40頁/共50頁

受試者隨機分成六組，每個受試者都受到3種食物/藥物形式的處理：A、空腹服用受試制劑；B、高脂飲食+受試制劑；C、高脂飲食+參比制劑。給藥時受試者至少禁食10小時，食用高脂早餐，然后立即用250ml水送服受試藥品，空腹組及其它試驗要求同普通制劑的生物利用度試驗。

第41頁/共50頁六、生物等效性與生物等效性評價方法

在臨床上常有這樣的現(xiàn)象，兩種制劑其實驗測得的生物利用度相同，但治療效果卻大不一樣。

例:某兩種制劑其C-t曲線如圖：ctabAUCa=AUCbMEC

但從曲線可以看出：制劑a的療效比制劑b好，因為MEC以下的藥濃無療效，所以單純用AUC來比較結(jié)果不準(zhǔn)確，因此提出了生物等效性的概念。第42頁/共50頁

藥劑等效性：相同劑量的同一藥物制成同一劑型，其質(zhì)量指標(biāo)符合同一規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)時所具有的質(zhì)量性質(zhì)。藥劑等效性是藥物制劑生產(chǎn)、流通與使用時的最低質(zhì)量要求。第43頁/共50頁

生物等效性：是指藥物制劑的臨床療效、不良反應(yīng)與毒性的一致性。即同一種藥物的不同制劑在相同的實驗條件下，給予相同劑量，其吸收速度和程度沒