蛋白質(zhì)溶解度課件_第1頁
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文檔簡介

蛋白質(zhì)溶解度

在一定的氫氧化鉀溶液中溶解的蛋白質(zhì)質(zhì)量占試樣中總蛋白質(zhì)量的百分?jǐn)?shù)。通常采用氮溶解指數(shù)（NSI）和蛋白質(zhì)分散指數(shù)（(PDI)來表示。

原理用一定濃度的氫氧化鉀溶液提取試樣中的可溶性蛋白質(zhì)，在催化劑作用下用濃硫酸將提取液中可溶性蛋白質(zhì)的氮轉(zhuǎn)化為硫酸銨。加入強(qiáng)堿進(jìn)行蒸餾使氨逸出，用硼酸吸收后，再用鹽酸滴定測出試樣中可溶性蛋白質(zhì)含量；同時，測定原始試樣中粗蛋白質(zhì)含量，計算出試樣的蛋白溶解度。

儀器和設(shè)備

a)

感量為0.0001g分析天平；

b)

磁力攪拌器；

c)

離心機(jī)；

d)

樣品粉碎機(jī)；

e)

60目分析篩；

f)

電爐；

g)

100mL或250mL凱氏燒瓶；

h)

凱氏蒸餾裝置；

i)

250mL錐形瓶；

j)

1000mL容量瓶；

k)

微量滴定管。分析步驟1

0.042M氫氧化鉀溶液

稱取2.360g氫氧化鉀，加水溶解后，轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。

2

混合催化劑

稱取6g硫酸鉀和0.4g硫酸銅，磨碎混勻。

3

氫氧化鈉溶液

稱取400g氫氧化鈉，加水溶解后，轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。

4

硼酸溶液

稱取20g硼酸，加水溶解后，轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。

5

0.1M鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液

量取8.3mL濃鹽酸，注入1000mL水中混勻，按GB601-88要求進(jìn)行標(biāo)定即可。

6

混合指示劑

稱取1g甲基紅和5g溴甲酚綠，加入乙醇溶解后，轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，用乙醇定容至刻度。

試樣處理稱取試樣1.5g（準(zhǔn)確至0.0002g）置于250mL燒杯中，準(zhǔn)確移入0.042M氫氧化鉀溶液75mL，磁力攪拌20min，然后將試樣轉(zhuǎn)移至離心管中，以2700r/min的速度離心10min。

測定吸取上清液15mL,放入消化管中,按照GB/T6432-1994凱氏定氮法測定試樣中可溶性蛋白質(zhì)的含量。同時，按照GB/T6432-1994凱氏定氮法測定試樣中粗蛋白質(zhì)的含量。注意事項(xiàng)

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