菌種的選育2課件

第三章工業(yè)菌種的選育工業(yè)菌種的育種：是運(yùn)用遺傳學(xué)原理和技術(shù)對(duì)某個(gè)用于特定生物技術(shù)目的的菌株進(jìn)行的多方位的改造

目的：強(qiáng)化現(xiàn)存的優(yōu)良性狀去除不良性質(zhì)增加新的性狀亞硝基胍誘變曲霉菌

N—甲基—N‘-硝基-N-亞硝基胍(NGN，MNNG或TG)對(duì)真核或原核微生物都有強(qiáng)烈的誘變作用。其精確的作用機(jī)制尚不很清楚，據(jù)認(rèn)為是伴隨著重氮甲烷的生成及在酸性條件下生成亞硝酸，直接作用于細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制系統(tǒng)，從而誘發(fā)了變異。MNNG的誘變作用隨pH的升高而增強(qiáng)。(二)操作步驟1．單孢子懸液制備取斜面，加入6ml0.1mol／LpH6.0的磷酸緩沖液，用接種環(huán)刮下孢子，振蕩試管，立即通過(guò)帶濾紙漏斗過(guò)濾，由此制得單孢子懸液，若孢子液渾濁狀，其孢子濃度可達(dá)l06個(gè)／ml，此為待處理孢子懸液。2．MNNG溶液的制備用分析天平稱取2mg，加入2ml0.1mol／LpH6.0磷酸緩沖液，于暗處振蕩溶解。第二節(jié)營(yíng)養(yǎng)缺陷型的選育營(yíng)養(yǎng)缺陷型是指通過(guò)誘變而產(chǎn)生的缺乏合成某些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)如氨基酸、維生素和堿基等的能力，必須在其基本培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)成分才能正常生長(zhǎng)的變異株。與營(yíng)養(yǎng)缺陷型對(duì)應(yīng)的是野生型。能滿足野生型菌株正常生長(zhǎng)的培養(yǎng)基稱基本培養(yǎng)基(MM)；在基本培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)成分的稱補(bǔ)充培養(yǎng)基(SM)；能滿足各種營(yíng)養(yǎng)缺陷型生長(zhǎng)的稱完全培養(yǎng)基(CM)，如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基等。營(yíng)養(yǎng)缺陷型的用途

營(yíng)養(yǎng)缺陷型在生產(chǎn)上和科學(xué)研究上用途很大。目前生產(chǎn)氨基酸、核苷酸的菌種都是各種類(lèi)型的缺陷型。要研究代謝途徑，育種技術(shù)都必須有營(yíng)養(yǎng)缺陷型的菌株為材料。在育種工作中，很多突變高產(chǎn)菌株是營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株。篩選營(yíng)養(yǎng)缺陷型的步驟誘變淘汰野生型檢出缺陷型確定生長(zhǎng)譜第四節(jié)篩選新的代謝產(chǎn)物

一、開(kāi)發(fā)新的代謝產(chǎn)物的途徑

(1)從自然界分離新的微生物菌株，或采用新的檢閱方法篩選新的代謝產(chǎn)物。(2)對(duì)已知微生物的代謝產(chǎn)物進(jìn)行化學(xué)修飾。(3)利用微生物轉(zhuǎn)化改造代謝產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)。(4)通過(guò)原生質(zhì)體融合獲得新的代謝產(chǎn)物。(5)DNA重組技術(shù)。突變型菌株的篩選

一、產(chǎn)量性狀突變株的篩選

三、篩選微生物代謝產(chǎn)物的目標(biāo)

篩選克服抗生素抗性菌株的活性物質(zhì)；篩選抗腫瘤、抗病毒的活性物質(zhì)；研究有藥理活性的酶抑制劑及免疫調(diào)節(jié)劑；尋找食品工業(yè)最好的酵母培養(yǎng)物；篩選降解有害物質(zhì)的微生物以及治療上具有低毒、長(zhǎng)效的化學(xué)藥物等。(二)間接方法篩選醫(yī)用抗生素，可用細(xì)茵、真菌、病毒或腫瘤模型，尋找抗細(xì)菌、抗真菌、抗病毒、抗腫瘤抗生素、酶抑制劑