肺癌的基因治療課件

肺癌的基因治療

白春學(xué)張新

復(fù)旦呼研所基因治療的定義

依靠遺傳物質(zhì)即基因（無(wú)論是人本身或外源的）來(lái)治療疾病,包括糾正人自身基因的結(jié)構(gòu)或功能上的錯(cuò)亂，阻止病變的進(jìn)展,殺滅病變的細(xì)胞，或抑制外源病源體遺傳物質(zhì)的復(fù)制，從而達(dá)到治病目的。肺癌分子發(fā)病機(jī)制通常觀察到的遺傳變化煙草致癌物對(duì)外界信號(hào)的異常反應(yīng)

丟失細(xì)胞周期控制丟失凋亡途徑丟失抑制轉(zhuǎn)移能力血管生成永生化自分泌生長(zhǎng)環(huán)非典型肺泡增生前惡變腺瘤肺癌原位癌發(fā)育不良支氣管花生正常上皮惡性腫瘤基因治療靶基因

（目的基因）的選擇（一）抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)1.抑癌基因

(1)．p53(2).pRB(3).p15,p16,p21

惡性腫瘤基因治療靶基因

（目的基因）的選擇2.癌基因——反義基因、RNAi

(1).N-rasKi-ras(2).IGFIR,IGFIIR(3).c-myc

惡性腫瘤基因治療靶基因

（目的基因）的選擇（二）自殺基因惡性腫瘤基因治療靶基因

（目的基因）的選擇（二）增強(qiáng)免疫反應(yīng)：Immuno-GeneTherapy腫瘤免疫：癌細(xì)胞免疫原性降低，機(jī)體免疫系統(tǒng)缺陷1.增強(qiáng)免疫原性

(1)B-7(2)腫瘤抗原基因(3)細(xì)胞因子IL-2,IL-3,GM-CSFetc.(4)B細(xì)胞融合

惡性腫瘤基因治療的其它策略抑制腫瘤血管生成（angiostatin,endostain)誘導(dǎo)正常組織產(chǎn)生抗腫瘤物質(zhì)（IL-2,INF)保護(hù)正常組織免受化療的影響（谷胱甘肽合成酶）癌癥基因治療(113trialscurrentlyopeninUSinimmunotherapyofcancer)54%ofimmunotherapytrialsdedicatedtomelanomaDeliveryofthetumour-suppressorgeneTP53accountsforthenextlargestgroup

SuicideGT基因治療對(duì)肺癌有效嗎？瘤內(nèi)注射rAd-Ｐ53試驗(yàn)病例：12例氣道阻塞而無(wú)法手術(shù)的肺癌患者劑量：1×106～1×1011pfu，28天注射1次，療效：6例氣道堵塞癥狀緩解

3例腫瘤部分緩解瘤內(nèi)注射rAd-Ｐ53聯(lián)合放療的Ⅱ期臨床試驗(yàn)NSCLC83％的患者局部組織病理活檢未見腫瘤組織16％的患者仍可觀察到腫瘤病灶單獨(dú)放療的有效率不到20％免疫基因治療臨床試驗(yàn)經(jīng)GM-CSF基因修飾的腫瘤疫苗治療進(jìn)展期NSCLC（I、II期）

83例中，有3例患者達(dá)到完全緩解抑制TGF-β表達(dá)

反義RNA轉(zhuǎn)染肺癌細(xì)胞株，然后將此細(xì)胞給59位IIIB或IV期的肺癌患者注射，結(jié)果有14例部分緩解，一年生存率達(dá)70％NotherapytotreatthisdiseaseuntilGTNormalADAgeneistransplantedintopatientRestartsimmsysBesttoattackdiseaseatsourcePutwildgeneinstemcellsthatproduceimmsysusingavirulentretrovirusAtransgeneintegrateswithbodycellsSCID:Non-CGTExampleNotherapytotreatthisdiseaseuntilGTNormalADAgeneistransplantedintopatientRestartsimmsysBesttoattackdiseaseatsourcePutwildgeneinstemcellsthatproduceimmsysusingavirulentretrovirusAtransgeneintegrateswithbodycellsSCID:Non-CGTExample基因治療所致首例死亡1999年9月，一例遺傳性鳥氨酸氨甲酰轉(zhuǎn)移酶(OTC)缺乏的患者，于接受以腺病毒為載體的OTC基因治療4天后死亡。JesseGelsinger他是5000多例臨床試驗(yàn)者中因基因治療副反應(yīng)發(fā)生死亡的唯一例。今又生臨床療效聯(lián)合放療

治療中晚期頭頸部鱗癌患者，CR率達(dá)64％，是單純放療CR率的3.4倍

聯(lián)合常規(guī)放/化療

治療非頭頸部實(shí)體瘤（30種，包括主要實(shí)體瘤），CR32％；PR27％；NC41%。單藥治療

復(fù)發(fā)性晚期頭頸部鱗癌患者的治療結(jié)果：50％以上的病人腫瘤縮小，最大縮小率達(dá)95％。

今又生瘤內(nèi)注射重組人腺病毒治療晚期肺癌臨床試驗(yàn)觀察

例數(shù)：15用藥方式：經(jīng)皮肺穿刺劑量：1次/周X4/療程療效：縮小5例無(wú)變化7例增大3例H101H101復(fù)制型腺病毒治癌機(jī)制H101的E1B蛋白缺失,P53蛋白行使職能P53蛋白阻止腺病毒在細(xì)胞中復(fù)制繁殖正常細(xì)胞存活正常細(xì)胞H101感染P53功能失常的癌細(xì)胞H101在癌細(xì)胞中復(fù)制繁殖H101選擇性殺死P53功能失常的癌細(xì)胞P53缺失的癌細(xì)胞H101P53P53P53我們還能做些什么？更好的載體提高轉(zhuǎn)染效率治療基因ImmunoliposomesforactivetargetingAntibodyagainsttumorspecificmoleculeswilltargetthemtotumors更好的治療策略RNA干擾？RNAi現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)RNA干擾特點(diǎn)專一性高作用穩(wěn)定效率高操作較簡(jiǎn)便IRESSA治療肺癌療效NSCLC40-80%Prostate40-80%Gastric33-74%Headandneck90-100%Breast14-91%Colorectal25-77%Pancreatic30-50%Ovarian35-70%高表達(dá)EGFR的腫瘤熒光顯微鏡下觀察siRNA-EGFR的抑制效應(yīng)

（A549細(xì)胞）a空白對(duì)照bLF2000

c無(wú)關(guān)siRNAdsiRNA－EGFR生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)A549：85.0%SPC-A1：78.3%集落形成實(shí)驗(yàn)圖15

dsRNA-EGFR抑制A549（左）、SPC-A1（右）細(xì)胞集落形成。a：對(duì)照組，b：空白載體組，c：dsRNA-unrelated組，d：dsRNA-EGFR組63.3%66.8%化療敏感性分析

圖18RNAi抑制EGFR表達(dá)對(duì)A549（左）、SPC-A1（右）細(xì)胞化療敏感性的影響。A549對(duì)照組、空白載體組、dsRNA-unrelated組、dsRNA-EGFR組IC50依次為2.67μg/ml、2.30μg/ml、2.19μg/ml、0.50μg/ml。SPC-A1IC50依次為3.67μg/ml、3.11μg/ml、3.07μg/ml、0.43μg/ml化療增敏4～7倍腫瘤生長(zhǎng)抑制率圖3各實(shí)驗(yàn)組腫瘤生長(zhǎng)曲線圖。空白載體組、dsRNA-unrelated組、dsRNA-EGFR組腫瘤生長(zhǎng)抑制率依次為19.72%、13.59%、75.03%75.03%13.59%19.72%相關(guān)的課題及論文課題：基于RNAi技術(shù)抗腫瘤新藥研究04DZ19208；上海市科委重大項(xiàng)目用新方法提高肺癌化療敏感性的研究02JC14027；上海市科委重點(diǎn)項(xiàng)目論文：ActaPharmacolSin2004；25（1）：61注：本文已被CancerRes（IF7.69）、annualreviewofphysiology（IF16.67）等雜志引用。GenetVaccinesTher.2005；3:5中華內(nèi)科雜志2004；43（5）：345RNABiology2004；1（1）