我國豬病發(fā)展變化及根治展望

30年來我國豬病發(fā)展改變

與根治展望何啟蓋教授，陳煥春院士華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院武漢，430070我國豬病發(fā)展變化及根治展望第1頁取得成績感激幾代獸醫(yī)科學(xué)家努力，提升了我國動物疾病控制水平疫苗：我國生物制品數(shù)量到達200各種，其中一些弱毒疫苗到達了世界先進水平。豬偽狂犬基因缺失疫苗，豬大腸桿菌病基因工程疫苗已開始推廣應(yīng)用。一批簡便適用診療試劑研制成功促進了養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展我國豬病發(fā)展變化及根治展望第2頁主要內(nèi)容1、近年來我國豬病發(fā)展改變多病原混合感染病原毒力增強疾病種類增加：老病沒有毀滅，新病增加

2、根治展望消費者原因；養(yǎng)豬企業(yè)本身需求；獸醫(yī)生物制品研發(fā)技術(shù)進步；國際交流；法律法規(guī)保障我國豬病發(fā)展變化及根治展望第3頁一、豬病發(fā)展改變1、單純感染向多病原混合感染發(fā)展細菌之間：波氏桿菌－產(chǎn)毒性巴氏桿菌病毒之間：豬瘟－偽狂犬病毒混合感染細菌－病毒：豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒+副豬嗜血桿菌/胸膜肺炎放線桿菌/鏈球菌豬呼吸道綜合癥(PRDC),豬高熱綜合癥？？？我國豬病發(fā)展變化及根治展望第4頁可能存在原因A.免疫抑制疾?。?/p>

偽狂犬病/藍耳病/圓環(huán)病毒....破壞淋巴細胞,降低免疫力，使繼發(fā)感染輕易發(fā)生B.病原之間相互作用

PRRSV+細菌毒素C.使用霉變飼料我國豬病發(fā)展變化及根治展望第5頁（2）病原毒力發(fā)生變異或增強圓環(huán)病毒:PCV2b毒力大于PCV2a

原因：在PCV2a基因組1042核甘酸發(fā)生胸苷激酶(Thymidine,T)缺失即為PCV2b。

豬呼吸與繁殖障礙綜合征病毒Nsp2基因部分缺失ORF5基因糖基化位點增加我國豬病發(fā)展變化及根治展望第6頁KegongTian1*，June，我國豬病發(fā)展變化及根治展望第7頁30個氨基酸缺失我國豬病發(fā)展變化及根治展望第8頁（3）疾病種類增加老病得到有效控制

豬瘟豬丹毒，黃白?。ù竽c桿菌）豬肺疫，仔豬副傷寒偽狂犬病新病增加

傳染性胸膜肺炎副豬嗜血桿菌病藍耳病，圓環(huán)病毒…..A.種豬流動頻繁B.診療技術(shù)更新水平提升明確疾病種類我國豬病發(fā)展變化及根治展望第9頁二、豬病根治展望(1)公眾原因:消費者食品安全需求對豬病控制提出了更高要求;

藥品殘留人獸共患病病原:鏈球菌2型;乙型腦炎(2)企業(yè)內(nèi)部原因:經(jīng)濟效益驅(qū)動，使豬病控制成為企業(yè)本身追求；我國豬病發(fā)展變化及根治展望第10頁(3)高效疫苗研發(fā)和使用常規(guī)疫苗改進

豬瘟疫苗:細胞疫苗和脾淋苗,提升免疫劑量.口蹄疫雙價苗:傳染性胃腸炎-流行性腹瀉雙價苗

多血清型病原所致疾病

傳染性胸膜肺炎三價疫苗(血清型1,2,7)副豬嗜血桿菌雙價疫苗(血清4和5型)豬鏈球菌滅活疫苗我國豬病發(fā)展變化及根治展望第11頁基因(缺失)工程疫苗偽狂犬病基因缺失疫苗以該疫苗株為活載體構(gòu)建多價基因工程疫苗偽狂犬病+乙型腦炎細小病毒口蹄疫(VP1)藍耳病我國豬病發(fā)展變化及根治展望第12頁細菌基因工程疫苗胸膜肺炎放線桿菌弱毒疫苗以此疫苗株為載體呼吸道疾病多價基因工程疫苗沙門氏菌為載體預(yù)防腹瀉疾病多價疫苗我國豬病發(fā)展變化及根治展望第13頁(4)診療技術(shù)進展明確所發(fā)生疾病種類：傳染性原因：細菌、病毒、支原體、其它微生物；非傳染性原因單純感染/混合感染是否為人獸共患病利于制訂及時合理控制方案我國豬病發(fā)展變化及根治展望第14頁診療方法包含:流行病學(xué)方法病理組織觀察血清學(xué)檢測病原學(xué)檢測分子生物學(xué)檢測我國豬病發(fā)展變化及根治展望第15頁抗體檢測方法－血清學(xué)凝集性反應(yīng)沉淀性反應(yīng)標(biāo)識抗體技術(shù)有補體參加反應(yīng)中和反應(yīng)我國豬病發(fā)展變化及根治展望第16頁檢測目標(biāo)免疫情況評定：定性或定量測定免疫抗體水平診療疾?。簠^(qū)分疫苗免疫動物和自然感染動物；我國豬病發(fā)展變化及根治展望第17頁慣用診療方法快速診療：適合用于個體診療平板凝集試驗：乳膠凝集試驗：免疫膠體金技術(shù)大量樣品篩選：酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）

我國豬病發(fā)展變化及根治展望第18頁平板凝集試驗培養(yǎng)菌體滅活后直接與血清混合，觀察是否出現(xiàn)凝集顆粒，判定陰陽性。我國豬病發(fā)展變化及根治展望第19頁乳膠顆粒（不一樣直徑大小）www.hull.ac.uk/scg/binks/Desforges%20project.htm

/Default.aspx?tabid=65

我國豬病發(fā)展變化及根治展望第20頁乳膠凝集試驗病毒或蛋白致敏乳膠顆粒，制備成診療抗原現(xiàn)場圈舍旁邊檢測抗體，主要是檢測IgM，使用于感染早期診療偽狂犬病細小病毒乙型腦炎/.../COURSES/NANO/renzo/nano2.html

/.../modules.asp?testID=11

我國豬病發(fā)展變化及根治展望第21頁技術(shù)特點3-5分鐘出現(xiàn)結(jié)果試驗條件簡單，操作輕易，樣品處理量大。適合于動物偽狂犬病毒感染早期檢測

乳膠凝集陰性和陽性反應(yīng)陽性結(jié)果陰性結(jié)果顆粒聚于液體邊緣,透明呈原有均勻乳狀我國豬病發(fā)展變化及根治展望第22頁膠體金檢測技術(shù)我國豬病發(fā)展變化及根治展望第23頁酶聯(lián)免疫吸附試驗將病毒、純化蛋白質(zhì)等抗原包被在酶聯(lián)板上，經(jīng)過間接法、競爭法等程序檢測抗體。

我國豬病發(fā)展變化及根治展望第24頁用途免疫(感染)抗體檢測：偽狂犬病抗體檢測（gB-ELISA,PrV-ELISA,中和試驗,免疫熒光)豬呼吸與繁殖障礙綜合癥：ELISA和IFA區(qū)分疫苗免疫與自然感染豬偽狂犬病gE-ELISA判別診療盒傳染性胸膜肺炎ApxIV-ELISA判別診療口蹄疫3ABC-ELISA判別診療試劑盒我國豬病發(fā)展變化及根治展望第25頁判別診療原理偽狂犬病：

gE基因缺失后，gE抗體不能在gE基因缺失疫苗免疫動物中檢測，而野毒感染豬可產(chǎn)生此抗體；傳染性胸膜肺炎

毒素IV僅在感染動物體內(nèi)表示，并誘導(dǎo)動物產(chǎn)生抗體，滅活苗不含有毒素IV,所以免疫動物不能產(chǎn)生針對毒素IV抗體；口蹄疫:口蹄疫病毒NS1為非結(jié)構(gòu)蛋白，僅在病毒復(fù)制時產(chǎn)生；在滅活苗中不存在（或含量低），動物免疫后體內(nèi)不產(chǎn)生抗NS1抗體，但活病毒感染動物可產(chǎn)生這類抗體。我國豬病發(fā)展變化及根治展望第26頁抗原捕捉酶聯(lián)免疫吸附試驗－適合用于大規(guī)模樣本病毒抗原檢測肉品中偽狂犬病毒臨床樣本檢測結(jié)果/companynews.htm

我國豬病發(fā)展變化及根治展望第27頁

近年來分子生物學(xué)與微電子學(xué)等多學(xué)科交叉融合而成一項高新技術(shù)，用來快速、準確、高通量地檢測目標(biāo)基因;BetsyPierson發(fā)展高通量檢測技術(shù)基因芯片技術(shù)（DNAmicroarrays,DNAchips）我國豬病發(fā)展變化及根治展望第28頁雜交(病毒檢測)結(jié)果HZ-VP1-2A-3DSX-VP1-2A-3D

DQ-VP1-2A-3DLI-VP1-2A-3D我國豬病發(fā)展變化及根治展望第29頁

在PCR儀中熱穩(wěn)定DNA聚合酶可使短鏈雙股靶DNA很快地復(fù)制成千上萬倍，能夠使DNA數(shù)量急劇增加而到達檢測極限。理論上，可在2小時內(nèi)將一個DNA分子擴增到106-109倍，從而大大提升了對其進行分析研究速度。聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)：我國豬病發(fā)展變化及根治展望第30頁我國豬病發(fā)展變化及根治展望第31頁我國豬病發(fā)展變化及根治展望第32頁檢測豬呼吸道5種病原菌PCR方法引物設(shè)計菌株登錄號靶基因序列

位置

長度HPSAPPBbPmMhp211664866711473947513180268743235145716SrRNAapxIVFlatoxAP365’-GTGATGAGGAAGGGTGGTGT-3’5’-GGCTTCGTCACCCTCTGT-3’5’-GCTCACCAACGTTTGCTCAT-3’5’-GGGGACGTAACTCGGTGATT-3’5’-GCTCCCAAGAGAGAAAGGCT-3’5’-GGTGGCGCCTGCCCTATC-3’5’-GGTCTTAGATGAGCGACAAGG-3’5’-GCGCTATTACTTCCTTCGTTC-3’5’-CCGTTGAAGCCTTGCTGTAT-3’5’-CGGTTAGTGTCTCCCGTTATG-3’438-12397-38361-2951879-2324176-462821377235442287我國豬病發(fā)展變化及根治展望第33頁檢測豬呼吸道5種病原菌PCR方法BbMhpAppPmHps我國豬病發(fā)展變化及根治展望第34頁PRRSV-HCV-JEV多重PCR12345678910111213141516171819202122123456710184302885002501000750430100泳道1為Marker,泳道2為樣品2，泳道3為樣品3，泳道4為樣品4，泳道5為樣品9，6：PPRSV陽性對照；7：為陰性對照1：Marker2～7：CSFV8～13:PRRSV14～19:JEV20:positivecontrol21：negativecontrolCSFVPRRSVJEV我國豬病發(fā)展變化及根治展望第35頁6、7、9號血清樣品為PRSSV變異株單一感染；11，12號樣品為常規(guī)毒株和變異毒株混合感染；1，2，4，5，8，10，13，14，15號樣品為PRRSV常規(guī)毒株單一感染；3，16號樣品為陰性部分ORF-7RT-PCR陽性樣品中，變異毒株檢出情況我國豬病發(fā)展變化及根治展望第36頁PCV2-PCR404bp194bpPCV1-PCR我國豬病發(fā)展變化及根治展望第37頁多重PCR用途：單獨感染多病原混合感染胸膜肺炎－副豬嗜血桿菌－巴氏桿菌－支原體混合感染偽狂犬?。毿〔《荆瓐A環(huán)病毒感染豬瘟－藍耳?。倚湍X炎病毒感染

我國豬病發(fā)展變化及根治展望第38頁繁殖障礙多重PCR對流產(chǎn)死胎進行檢測對公豬精液進行實時監(jiān)控我國豬病發(fā)展變化及根治展望第39頁(5)加強國際交流，結(jié)合我國實際情況，消化吸收國際先進經(jīng)驗制訂長久防疫規(guī)劃

對一些危害嚴重畜禽傳染病制訂長久防疫規(guī)劃，到達最終毀滅目標(biāo)。如美國經(jīng)過制訂防疫規(guī)劃，自1962年至1976年經(jīng)過努力，終于毀滅豬瘟，就是一個成功經(jīng)驗。我國豬瘟偽狂犬病根除與凈化計劃已經(jīng)開啟我國豬病發(fā)展變化及根治展望第40頁（6）.法律法規(guī)保障8月30日第十屆全國人民代表大會常務(wù)委員會第二十九次會議修訂

新《中華人民共和國動物防疫法》將于1月1號實施，為動物疾?。òi?。╊A(yù)防提供了法律保障全國人大法律委員會副主任委員王以銘作關(guān)于《中華人民共和國動物防疫法（修訂草案）》審議結(jié)果匯報。中新社發(fā)廖文靜攝我國豬病發(fā)展變化及根治展望第41頁