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文檔簡介
TORCH檢測
檢驗科李彩TORCH的檢測專題知識第1頁
一、TORCH定義
二、TORCH感染
三、TORCH檢測
TORCH的檢測專題知識第2頁一、TORCH定義TORCH是指可造成先天性宮內(nèi)感染及圍產(chǎn)期感染而引發(fā)圍產(chǎn)兒畸形病原體,它是一組病原體微生物英文名稱縮寫,其中TO:弓形蟲(TOX)R:風疹病毒(RV)C:巨細胞病毒(CMV)H:單純皰疹病毒(HSV)TORCH的檢測專題知識第3頁這組病原體感染有著共同特征,即可造成母嬰感染。孕婦因為內(nèi)分泌改變和免疫力下降易發(fā)生原發(fā)感染,既往感染孕婦體內(nèi)潛在病毒也輕易被激活而發(fā)生復發(fā)感染。孕婦發(fā)生病毒血癥時,病毒可經(jīng)過胎盤或產(chǎn)道傳輸感染胎兒,引發(fā)早產(chǎn)、流產(chǎn)、死胎或畸胎等。以及引發(fā)新生兒多個系統(tǒng)、多個器官損害,造成不一樣程度智力障礙等癥狀。尤其在懷孕初三個月胚胎處于器官形成期,此時受病毒感染,可破壞細胞或抑制細胞分裂和增殖。器官形成期以后感染病毒,可破壞組織和器官機構(gòu),并形成連續(xù)感染,出生后繼續(xù)排毒,能引發(fā)對應病變。TORCH的檢測專題知識第4頁TORCH檢測意義因為成人TORCH感染臨床癥狀不顯著,無法自我感覺到是否收到感染,所以孕前幾孕早期診療對優(yōu)生優(yōu)育十分主要。當前,國際上公認最方便、最先進早期診療方法是檢測人體血清中特異性IgM、IgG抗體,以判斷受到感染情況。世界上許多發(fā)達國家已經(jīng)將TORCH列為孕期常規(guī)檢驗項目,在優(yōu)生優(yōu)育方面發(fā)揮著主要作用。在國內(nèi),伴隨科學技術發(fā)展和人民生活水平提升,人們對優(yōu)生優(yōu)育認識逐步提升,TORCH檢測越來越受到重視。TORCH的檢測專題知識第5頁二、TORCH感染弓形蟲感染風疹病毒感染巨細胞病毒感染單純皰疹病毒感染TORCH的檢測專題知識第6頁弓形蟲感染弓形蟲感染主要是攝入被貓糞中卵囊污染食物和水,或攝入含有組織包囊未煮熟肉引發(fā)取得性感染。因為弓形蟲能夠經(jīng)過胎盤,胎兒在孕期經(jīng)胎盤傳輸感染,引發(fā)先天性弓形蟲病。TORCH的檢測專題知識第7頁
孕早期感染:多可造成死胎、流產(chǎn)、早產(chǎn)、畸胎和無腦兒、腦積水、小頭畸形等
孕中、晚期感染:出生嬰兒多呈隱性感染,以后可出現(xiàn)腦鈣化灶、視網(wǎng)膜脈絡膜炎、精神運動障礙等TORCH的檢測專題知識第8頁流行病學弓形蟲人群感染相當普遍,血清學調(diào)查國外人群抗體陽性率為25~50%,少數(shù)地域可達80%以上。我國較大規(guī)模調(diào)查顯示,人群血清抗體陽性率為0.329%~11.793%,平均5.3%。家畜陽性率可達10%~50%。TORCH的檢測專題知識第9頁風疹病毒感染風疹病毒主要經(jīng)過呼吸道感染引發(fā)風疹。風疹病毒易發(fā)生垂直感染。若孕婦妊娠早期感染風疹病毒,病毒可經(jīng)過胎盤感染胎兒,引發(fā)流產(chǎn)或死胎,還可造成胎兒發(fā)生先天性風疹綜合征(CRS),引發(fā)胎兒畸形。TORCH的檢測專題知識第10頁
畸形主要表現(xiàn)為先天性心臟病、白內(nèi)障、和耳聾。妊娠月份越小,CRS出現(xiàn)頻率越高。第1個月感染率為58%第2個月感染率為35%
第3個月感染率為15%
第4個月感染率為7%TORCH的檢測專題知識第11頁流行病學隱性感染或感染風疹病毒后機體可產(chǎn)生特異性IgM和IgG,IgG能連續(xù)多年,可取得持久免疫力。調(diào)查表明,我國育齡婦女血清中抗風疹病毒IgG陽性率為76%~98%。TORCH的檢測專題知識第12頁巨細胞病毒感染巨細胞病毒可由唾液、尿液及子宮頸分泌物中排出。親密接觸、飛沫、經(jīng)口、輸血等都能夠感染。巨細胞病毒是能引發(fā)先天性感染(胎兒宮內(nèi)感染)主要病毒之一。TORCH的檢測專題知識第13頁先天性感染妊娠早期原發(fā)感染可能垂直傳輸給胎兒,造成胎兒先天性感染:巨細胞包涵體?。–ID),表現(xiàn)為黃疸、肝脾腫大、血小板降低性紫癜、溶血性貧血和不一樣程度神經(jīng)系統(tǒng)損害,包含小兒畸形、智力低下、耳聾、脈絡膜視網(wǎng)膜炎等,重者可造成流產(chǎn)或死產(chǎn)。圍產(chǎn)期感染妊娠后期,產(chǎn)婦泌尿道和宮頸排出CMV,分娩時新生兒經(jīng)產(chǎn)道亦可受到感染。多數(shù)癥狀輕微或無臨床癥狀。若有為輕度呼吸障礙、肝功效損害,通常全身癥狀輕,無神經(jīng)損傷。TORCH的檢測專題知識第14頁流行病學巨細胞病毒在我國人群中感染極為普遍,初感染大多在2歲以下,通常呈隱性感染,少數(shù)人有臨床癥狀。90%以上成人已經(jīng)有巨細胞病毒抗體。TORCH的檢測專題知識第15頁單純皰疹病毒感染單純皰疹病毒所引發(fā)生殖系皰疹已成為一個常見性傳輸疾病。孕婦處于免疫抑制狀態(tài),易受感染,一旦感染,可引發(fā)垂直傳輸,使胎兒先天性感染,引發(fā)畸形、智力低下、流產(chǎn)等。TORCH的檢測專題知識第16頁HSV有兩種血清型:HSV-Ⅰ和HSV-ⅡHSV-Ⅰ主要經(jīng)過呼吸道、皮膚和粘膜親密接觸傳輸,感染腰以上部位皮膚粘膜和器官。HSV-Ⅱ主要經(jīng)過性行為傳輸和母嬰傳輸,感染腰部以下部位皮膚粘膜和器官,原發(fā)感染主要引發(fā)生殖器皰疹。ⅠTORCH的檢測專題知識第17頁流行病學人群中HSV感染非常普遍,其中:HSV-Ⅰ抗體陽性率為90%~100%HSV-Ⅱ抗體陽性率為3%~5%TORCH的檢測專題知識第18頁三、TORCH檢測當前,在我國最方便、最慣用早期篩查方法是采取ELISA方法。定量檢測采取化學發(fā)光法。TORCH的檢測專題知識第19頁TORCH檢測項目弓形蟲IgM抗體弓形蟲IgG抗體風疹病毒IgM抗體風疹病毒IgG抗體巨細胞病毒IgM抗體巨細胞病毒IgG抗體單純皰疹病毒Ⅱ型IgM抗體單純皰疹病毒Ⅱ型IgG抗體TORCH的檢測專題知識第20頁其中本科室對單純皰疹病毒Ⅱ型IgM抗體、單純皰疹病毒Ⅱ型IgG抗體檢測是采取ELISA方法,其余六項則是采取化學發(fā)光法定量檢測。TORCH的檢測專題知識第21頁全自動化學發(fā)光儀TORCH的檢測專題知識第22頁TORCH的檢測專題知識第23頁酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)HSV-Ⅱ型IgM抗體檢測原理:采取鼠抗人IgM抗體包被微孔板加入待測標本,捕捉標本中對應抗體,當存在該抗體,則與包被鼠抗人IgM抗體結(jié)合加入辣根過氧化物酶(HRP)標識HSV抗原,與之結(jié)合,形成鼠抗人IgM—抗HSVIgM抗體—HSV抗原-HRP復合物加入A、B底物顯色,顯色程度直接反應標本抗體量TORCH的檢測專題知識第24頁TORCH的檢測專題知識第25頁酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)HSV-Ⅱ型IgG抗體檢測原理:采取HSV-Ⅱ型重組抗原包被微孔板加入待測標本,當標本中存在HSV-Ⅱ型IgG抗體時,該抗體與包被HSV-Ⅱ型抗原結(jié)合加入辣根過氧化物酶(HRP)標識抗人IgG結(jié)合,形成HSVⅡ抗原—HSVⅡ抗體—HRP-抗人IgG復合物加入A、B底物顯色,顯色程度直接反應標本抗體量TORCH的檢測專題知識第26頁TORCH的檢測專題知識第27頁酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)操作步驟:加入樣品稀釋液100μL,待測標本5μL
37℃孵育30分鐘洗板,加酶100μL
37℃孵育30分鐘洗板,加顯色劑A、B各50μL顯色
37℃孵育10分鐘加終止劑50μL,450nm讀取吸光度值判定結(jié)果TORCH的檢測專題知識第28頁結(jié)果判定IgMIgG意義——易感人群,無感染史,體內(nèi)無抗體,需防護、監(jiān)控—+既往感染,體內(nèi)有抗體+—
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