色譜分析法簡(jiǎn)述

色譜分析法簡(jiǎn)述第1頁(yè)，共10頁(yè)，2023年，2月20日，星期六一.色譜法的原理色譜法源自于對(duì)植物色素分離和提純，現(xiàn)代色譜法的原理如下：混合試樣中各組份在流動(dòng)相和固定相間的分配系數(shù)不同，隨著流動(dòng)相在色譜柱中運(yùn)行，各組份就在兩相間進(jìn)行反復(fù)多次分配。第2頁(yè)，共10頁(yè)，2023年，2月20日，星期六由于固定相對(duì)各組份的吸附或溶解能力不同，因此各組份在色譜柱中的運(yùn)行速度就不同，經(jīng)過(guò)一定的色譜柱后，便彼此分離，按順序離開(kāi)色譜柱進(jìn)入檢測(cè)器，產(chǎn)生的離子流訊號(hào)經(jīng)放大后，在記錄器上描繪出各組份的色譜峰。第3頁(yè)，共10頁(yè)，2023年，2月20日，星期六二.色譜法的分類(lèi)1.按兩相的狀態(tài)可以分為：（1）氣相色譜法：氣體為流動(dòng)相。以氣體或低沸點(diǎn)有機(jī)化合物為主要分析對(duì)象；（2）液相色譜法：液體為流動(dòng)相。以高沸點(diǎn)有機(jī)化合物為主要分析對(duì)象；第4頁(yè)，共10頁(yè)，2023年，2月20日，星期六2.其他常用色譜法：（1）離子色譜法：液體為流動(dòng)相，液相色譜法的特殊分離方式。以無(wú)機(jī)離子為主要分析對(duì)象；（2）超臨界色譜：流動(dòng)相處于超臨界狀態(tài)；（3）薄板層析色譜：液體通過(guò)毛細(xì)作用運(yùn)動(dòng)；（4）毛細(xì)管高效電泳：以電場(chǎng)為推動(dòng)力，對(duì)蛋白質(zhì)等生化試樣有很高的分離效率

。第5頁(yè)，共10頁(yè)，2023年，2月20日，星期六三.色譜法的特點(diǎn)1.高靈敏度：檢測(cè)器的發(fā)展，可檢出10-11-10-13克的物質(zhì)，可作超純氣體、高分子單體的痕跡量雜質(zhì)分析。2.高選擇性：可有效地分離性質(zhì)極為相近的各種同分異構(gòu)體和各種同位素。3.高效能：可分離沸點(diǎn)極為相似和及其復(fù)雜的多組分混合物。4.速度快：一般分析可在幾分鐘到幾十分鐘內(nèi)完成，特別是氣相色譜，分析速度較快。第6頁(yè)，共10頁(yè)，2023年，2月20日，星期六四.氣相色譜儀1.氣路系統(tǒng)

(1)氣源一般用氫、氮、氬等。多采用氮?dú)庾鳛檩d氣，作用主要是把樣品輸送到色譜柱和檢測(cè)器中。

(2)流量調(diào)節(jié)閥可以調(diào)節(jié)載氣的流速，常用的有穩(wěn)壓閥和針形閥。

(3)流量計(jì)常用的有轉(zhuǎn)子流量計(jì)和皂膜流速計(jì)等。2.進(jìn)樣器和汽化室(1)進(jìn)樣工具常有定量閥（六通閥）和注射器。(2)汽化室的作用是將液體或固體樣品瞬間汽化為蒸汽。第7頁(yè)，共10頁(yè)，2023年，2月20日，星期六3.色譜柱色譜柱至于柱室中，一般常用不銹鋼管或銅管，填充固定相構(gòu)成，管子成U型或螺旋形。柱管內(nèi)徑為2—8mm，還有內(nèi)徑更小的稱(chēng)為毛細(xì)管色譜柱，柱管長(zhǎng)度一般為1-4m或更長(zhǎng)。4.檢測(cè)器

檢測(cè)器用來(lái)檢測(cè)色譜柱后流出的組分，并以電壓或電流信號(hào)顯示出來(lái)，常用檢測(cè)器有熱導(dǎo)；氫焰檢測(cè)器；電子捕獲式和火焰光度式檢測(cè)器等。5.數(shù)據(jù)記錄和處理系統(tǒng)將檢測(cè)器輸出的信號(hào)記錄下來(lái)，進(jìn)行定性，定量分析。

第8頁(yè)，共10頁(yè)，2023年，2月20日，星期六五.氫焰檢測(cè)器(FID)

優(yōu)點(diǎn)：結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、性能優(yōu)異、穩(wěn)定可靠、操作方便

結(jié)構(gòu)：FID的電離室由金屬圓筒作外罩，底座中心有噴嘴;噴嘴附近有環(huán)狀金屬圈(極化極，又稱(chēng)發(fā)射極)，上端有一個(gè)金屬圓簡(jiǎn)(收集極)，兩者間加90～300V的直流電壓，形成靜電場(chǎng)。收集極捕集的離子流經(jīng)放大器的高阻產(chǎn)生電壓信號(hào)、放大后送至數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)；燃燒氣、輔助氣和色譜柱由底座引入；燃燒氣及水蒸氣由外罩上方小孔逸出。FID由電離室(a)和放大電路(b)組成第9頁(yè)，共10頁(yè)，2023年，2月20日，星期六原理由色譜柱流出的載氣（樣品）流經(jīng)溫度高達(dá)2100℃的氫火焰時(shí)，待測(cè)組分在火焰中發(fā)生離子化作用，使兩個(gè)電極之間出現(xiàn)一定量的正、負(fù)離子，在電場(chǎng)的作用下，正、負(fù)離子各被相應(yīng)電極所收集。當(dāng)載氣中不含待測(cè)物時(shí)，火焰中離子很少，即基流很小，約10-14A。當(dāng)待測(cè)物通過(guò)檢測(cè)器時(shí)，火焰中電離的離子增多，電流增大（但很微弱10-8～10-12A）。需經(jīng)高阻（108～l011歐）后得到較大的電壓信號(hào)，再由放大器放