腦靜脈竇栓塞動物模型豬的建立

腦靜脈竇栓塞動物模型豬的建立第1頁/共57頁腦靜脈竇栓塞動物模型﹙豬﹚的建立第2頁/共57頁前言●腦靜脈竇栓塞引起的腦缺血梗死和腦出血是一種特殊類型的腦血管疾病，死亡率高?！癖静≈虏≌T因眾多，臨床表現(xiàn)多種多樣，缺乏特異性?！裉接懩X靜脈竇栓塞的發(fā)病機理，病生理的演變過程，影像學(xué)表現(xiàn)演化規(guī)律對臨床治療具有重要意義，這些研究有待動物實驗加以證實?！穸鄶?shù)學(xué)者報道試驗的動物以鼠，貓，兔等小型動物，我們選用更為理想的動物﹙豬﹚，設(shè)計制作一種新的靜脈竇栓塞動物模型，旨在評價其有效性，可行性和優(yōu)缺點。第3頁/共57頁實驗動物

山東農(nóng)科院配育的健康幼豬9頭，2-3月齡，體重30±2Kg，雌雄不限材料與方法第4頁/共57頁材料與方法實驗器材

器械：動脈穿刺針、動脈防漏套鞘、短導(dǎo)絲、4F多功能導(dǎo)管、4F導(dǎo)管鞘、0.038英寸導(dǎo)絲、超滑導(dǎo)絲COOK鉑金彈簧圈，明膠海綿,自體血凝塊第5頁/共57頁材料與方法實驗藥物鹽酸氯胺酮注射液3%戊巴比妥鈉溶液硫酸阿托品注射液76%泛影葡胺2%利多卡因注射液10%福爾馬林肝素鈉注射液生理鹽水地西泮針劑20%明膠包埋液第6頁/共57頁機器：LCV-PLUS大型DSA

MARK~Ⅳ型高壓注射器MagnetomSonatamaestroclass1.5T超導(dǎo)磁共振掃描儀

Sonatomsensationcardiac16排螺旋CT掃描儀材料與方法第7頁/共57頁材料與方法實驗步驟

實驗前準(zhǔn)備動靜脈插管

MR、CT檢查大體標(biāo)本病理學(xué)檢查統(tǒng)計學(xué)分析第8頁/共57頁材料與方法實驗前準(zhǔn)備

手術(shù)室溫度25℃左右常規(guī)介入手術(shù)準(zhǔn)備第9頁/共57頁材料與方法實驗前準(zhǔn)備及麻醉

實驗動物術(shù)前禁食12h，禁飲2h

麻醉，固定建立靜脈通道第10頁/共57頁材料與方法—實驗步驟動脈插管1：在隱動脈搏動處切開皮膚，逐層分離皮下組織、筋膜，暴露隱動脈鞘膜。2：分離出隱動脈，用血管鉗輕輕挑起，結(jié)扎隱動脈遠端。12第11頁/共57頁材料與方法—實驗步驟動脈插管3：在直視下用手術(shù)刀尖將隱動脈挑開小口，送入短導(dǎo)絲。4：沿短導(dǎo)絲送入動脈防漏套鞘，將動脈鞘和隱動脈血管壁固定在一起，防止動脈鞘脫落。34第12頁/共57頁1：觸摸股動脈搏動2：在股動脈內(nèi)側(cè)利用穿刺針直接穿刺股深靜脈3：拔出穿刺針針芯，見靜脈血流后送入導(dǎo)引導(dǎo)絲靜脈插管123第13頁/共57頁圖像分析材料與方法—實驗步驟

對照MRV與DSA圖像，比較栓塞后腦靜脈竇的栓塞情況及各組淺深腦靜脈的顯示情況。

第14頁/共57頁大體標(biāo)本的觀察與病理分析兩周后處死豬開顱取腦標(biāo)本固定、切割做HE

染色切片材料與方法—實驗步驟第15頁/共57頁結(jié)果

1.實驗動物的麻醉效果

2.實驗動物栓塞情況及相關(guān)表現(xiàn)

3.栓塞后2DTOFMRV表現(xiàn)

第16頁/共57頁實驗動物的麻醉效果結(jié)果1指標(biāo)戊巴比妥鈉復(fù)合麻醉

氯胺酮復(fù)合麻醉

戊巴比妥鈉

氯胺酮

氯胺酮安定給藥途徑腹腔注射靜脈注射

肌肉注射肌肉注射注射部位左上腹腔耳緣靜脈頸部肌肉頸部肌肉給藥劑量30mg/kg4mg/kg15mg/kg0.7mg/kg麻醉起效時間11min立即起效5min第17頁/共57頁實驗動物栓塞情況及相關(guān)表現(xiàn)

結(jié)果2動物編號栓塞部位栓塞材料DSA表現(xiàn)MRI表現(xiàn)PIG1右側(cè)乙狀竇自體血凝塊及人為靜脈夾層右側(cè)乙狀竇顯示局部靜脈夾層未見異常PIG2Rolandic靜脈前1~2cm明膠海綿SSS顯影毛躁未見異常PIG3Rolandic靜脈1個鉑金彈簧圈栓塞部分充盈缺損，栓塞后方SSS顯影不良，前方SSS顯影清晰栓塞4h后T2WI出現(xiàn)右頂葉腦回腫脹，信號增高PIG4Rolandic靜脈2個鉑金彈簧圈兩彈簧圈間及其后方SSS顯影中斷，不連續(xù)T1WI右頂葉腦回腫脹、硬膜下出血PIG7Rolandic靜脈1個鉑金彈簧圈+明膠海綿栓塞后方SSS顯影不連續(xù)，栓塞前SSS增粗，可見引流入海綿竇的側(cè)支血管未見異常PIG5Rolandic靜脈后1~2cm2個鉑金彈簧圈兩彈簧圈間及其后方部分SSS顯影不連續(xù)T1WI右頂葉腦回腫脹第18頁/共57頁結(jié)果2栓塞前DSA明膠海綿栓塞后DSAPIG2：Rolandic靜脈前方明膠海綿栓塞123第19頁/共57頁結(jié)果2PIG4：Rolandic靜脈2個鉑金彈簧圈栓塞栓塞前DSA導(dǎo)管位置栓塞后部分SSS不顯影231第20頁/共57頁結(jié)果2PIG7：Rolandic靜脈1個鉑金彈簧圈+明膠海綿栓塞栓塞前DSA栓塞后DSA第21頁/共57頁結(jié)果2PIG7：Rolandic靜脈1個鉑金彈簧圈+明膠海綿栓塞側(cè)枝血管第22頁/共57頁結(jié)果2Rlandic靜脈兩個彈簧圈栓塞第23頁/共57頁結(jié)果2Rlandic靜脈彈簧圈加明膠海綿栓塞，彈簧圈后方見條狀血栓形成。

第24頁/共57頁結(jié)果2Rlandic靜脈彈簧圈栓塞后腦表面明顯淤血

第25頁/共57頁結(jié)果2大體標(biāo)本左側(cè)觀大體標(biāo)本3mm層厚右面觀第26頁/共57頁結(jié)果2HE染色，10x40倍光鏡

第27頁/共57頁實驗動物栓塞情況及相關(guān)表現(xiàn)

結(jié)果2動物編號栓塞部位栓塞材料DSA表現(xiàn)MRI表現(xiàn)PIG6Rolandic靜脈后1~2cm2個鉑金彈簧+明膠海綿兩彈簧圈間及其后方SSS和部分橫竇不顯影T2WI右頂葉腦回腫脹信號增高，硬膜下出血PIG8直竇2個鉑金彈簧圈+明膠海綿直竇不顯影雙頂葉、左腦干水腫，雙頂葉出血PIG9直竇和竇匯2個鉑金彈簧圈+明膠海綿直竇不顯影，竇匯部分顯示雙頂葉腦水腫，腦出血第28頁/共57頁結(jié)果2PIG9第29頁/共57頁結(jié)果2Rolandic靜脈后方栓塞組

直竇栓塞組

第30頁/共57頁腦靜脈竇栓塞的MR表現(xiàn)

T1WI、T2WI、FLAIR圖像均無異常3例T1WI圖像有腦回腫脹，T2WI、FLAIR圖像無異常信號，無腦室擴大2例腦腫脹、腦室大小正常伴T2WI、FLAIR高信號1例腦腫脹、腦室輕度擴大伴T2WI、FLAIR高信號3例T2WI、FLAIR高信號伴腦出血2例硬膜下出血2例結(jié)果3.第31頁/共57頁結(jié)果3.腦腫脹T1WIT2WI第32頁/共57頁結(jié)果3.腦腫脹、腦室輕度擴大伴T2WI、FLAIR高信號T1WIFLAIRT2WI第33頁/共57頁結(jié)果3.

腦腫脹、T2WI、FLAIR高信號、腦出血T1WIFLAIRT2WI第34頁/共57頁結(jié)果3.硬膜下出血T1WICT第35頁/共57頁結(jié)果3.上矢狀竇、直竇、竇匯完全栓塞組

ADCT2WI第36頁/共57頁栓塞后MRV表現(xiàn)結(jié)果4

2例MRV表現(xiàn)與栓塞前無明顯變化；

4例在栓塞部位表現(xiàn)為充盈缺損，栓塞后方上矢狀竇血流信號減弱，或血流信號不連續(xù)模糊。第37頁/共57頁栓塞后MRV表現(xiàn)結(jié)果4第38頁/共57頁栓塞后MRV表現(xiàn)結(jié)果43例完全栓塞組顯示栓塞部位及其后方的上矢狀竇、直竇和部分竇匯不顯影。第39頁/共57頁栓塞后MRV表現(xiàn)結(jié)果4第40頁/共57頁討

論

1.動物選擇2.豬入路血管及豬顱腦應(yīng)用解剖3.腦靜脈竇栓塞部位與方法4.實驗方法的優(yōu)缺點、有效性、可行性及臨床應(yīng)用價值第41頁/共57頁動物的選擇

討論1.

鼠

貓

兔

豬第42頁/共57頁豬入路血管及豬顱腦應(yīng)用解剖

動脈入路靜脈入路腦靜脈竇討論2第43頁/共57頁應(yīng)用解剖

一側(cè)隱動脈→一側(cè)股動脈→一側(cè)髂外動脈→腹主動脈→胸主動脈→升主動脈→主動脈弓→臂頭動脈→一側(cè)頸總動脈→頸內(nèi)動脈。討論2.第44頁/共57頁應(yīng)用解剖

一側(cè)股深靜脈→一側(cè)髂外靜脈→一側(cè)髂總靜脈→后腔靜脈→右心房→前腔靜脈→一側(cè)頸內(nèi)靜脈討論2.第45頁/共57頁應(yīng)用解剖

豬腦位于顱腔內(nèi)，分為延髓、腦橋、中腦、小腦、間腦和端腦6部分。

討論2.T2WI第46頁/共57頁應(yīng)用解剖

豬的顱內(nèi)靜脈竇解剖特點在某些方面與人非常相似，主要有矢狀竇、直竇、海綿竇、基底竇。

討論2.DSA第47頁/共57頁腦靜脈竇栓塞部位與方法栓塞部位栓塞方法

優(yōu)缺點討論3.第48頁/共57頁實驗方法的優(yōu)缺點優(yōu)點

不破壞動物的正常生理狀態(tài)

可以在DSA下準(zhǔn)確選擇栓塞部位可以通過不同的栓塞材料不同程度的閉塞腦靜脈竇可以用MRI各種常規(guī)和功能序列檢測腦實質(zhì)信號變化實驗重復(fù)性強討論4.第49頁/共57頁實驗方法的優(yōu)缺點缺點

對介入操作技術(shù)要求比較高需要非常清楚的了解豬的血管和神經(jīng)解剖鉑金彈簧圈等栓塞材料價格昂貴實驗周期比較長討論4.第50頁/共57頁實驗方法的有效性、可行性及臨床應(yīng)用價值9例實驗動物中栓塞材料放置到靜脈竇指定位置的成功率是100%種系和個體差異動物實驗與臨床差異臨床價值討論4.第51頁/共57頁經(jīng)皮穿刺靜脈插管腦靜脈竇內(nèi)彈簧圈、明膠海綿植入致腦靜脈竇急性栓塞動物模型的實驗方法有效可行，此方法不開顱，腦組織無人為損傷，更加接近實際發(fā)病狀況，而且可適用于MRI檢查。結(jié)論1.第52頁/共57頁單純明膠海綿栓塞腦靜脈竇可再通；單純彈簧圈栓塞只能達到靜脈竇部分栓塞的效果；彈簧圈加明膠海綿栓塞能達到靜脈竇完全栓塞的效果。結(jié)論2.第53頁/共57