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中藥鑒定的基本操作第1頁(yè),共22頁(yè),2023年,2月20日,星期日2第一節(jié)中藥顯微制片技術(shù)中藥顯微制片技術(shù)是根據(jù)藥材組織構(gòu)造、細(xì)胞形狀及內(nèi)含物的特征制作相應(yīng)制片,是顯微鑒定的重要環(huán)節(jié),包括粉末制片、表面制片、橫切片制作等。第2頁(yè),共22頁(yè),2023年,2月20日,星期日3一、中藥粉末制片中藥的粉末制片對(duì)完整的、破碎的、粉末狀的各類藥材、飲片及成藥均適用,是中藥顯微鑒定最常用的方法之一。第3頁(yè),共22頁(yè),2023年,2月20日,星期日4(一)水(稀甘油)裝片的制作操作方法:
1.取一干凈的載玻片和蓋玻片,置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上。
2.用鑷子或解剖針取少量藥材粉末置于載玻片中央。
3.滴加蒸餾水(或稀甘油)2~3滴,用解剖針攪拌均勻。
4.左手持載玻片,右手將蓋玻片邊緣與材料左邊水液的邊緣接觸,并緩緩放下蓋玻片,這樣可使蓋玻片下的空氣逐漸被水?dāng)D掉,以免產(chǎn)生氣泡。5.蓋玻片邊緣若有多余水液,用吸水紙吸去。第4頁(yè),共22頁(yè),2023年,2月20日,星期日5注意事項(xiàng):
裝片時(shí)粉末不可挑取太多,適量即可。
供試品粉末一般需過(guò)四號(hào)篩(65目)。若水液從蓋玻片邊緣溢出,用吸水紙吸去多余水液。
第5頁(yè),共22頁(yè),2023年,2月20日,星期日6(二)透化片的制作
操作方法:
1.取一干凈的載玻片和蓋玻片,置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上。
2.用鑷子或解剖針取少量藥材粉末置于載玻片中央。
3.滴加水合氯醛液3~4滴,用解剖針攪拌均勻,置于酒精燈上小火微微加熱(透化),用解剖針攪拌均勻,重復(fù)2~3次。4.待冷卻后,滴加稀甘油1~2滴(防止析出水合氯醛結(jié)晶),蓋上蓋玻片,用吸水紙吸去多余液體及粉末。第6頁(yè),共22頁(yè),2023年,2月20日,星期日7注意事項(xiàng):加熱透化時(shí),應(yīng)在火上來(lái)回移動(dòng)載玻片,以防加熱不勻而使玻片爆裂,但勿使其沸騰,否則產(chǎn)生氣泡,妨礙觀察。/play_8d0j8368uua3y185.html第7頁(yè),共22頁(yè),2023年,2月20日,星期日8二、表面制片可觀察表皮細(xì)胞、氣孔、毛茸等表面特征,適用于葉類、花類及全草類中藥的鑒定。操作方法:
1.取一干凈的載玻片和蓋玻片,置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上。
2.將供試品濕潤(rùn)軟化后,以左手持材料,然后右手持尖嘴鑷子,鑷子夾住材料表皮,向下撕取表皮,用刀片切取表皮面積約4mm2大小,一正一反置載玻片中央,滴加稀甘油2~3滴,蓋上蓋玻片直接觀察或透化處理后觀察。注意事項(xiàng):注意分清正、反面,最好分別封藏觀察。第8頁(yè),共22頁(yè),2023年,2月20日,星期日9三、橫切片制作
操作方法:1.取干凈的載玻片和蓋玻片,置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上。2.選取經(jīng)軟化處理后的藥材,切成3~5cm的小段。3.以左手的拇指、食指及中指夾住材料,使之固定不動(dòng)。為防止刀傷,拇指應(yīng)略低一些,并使材料上端高出手指2~3毫米。4.右手大拇指和食指捏住刀片一角,刀口向內(nèi),并與藥材垂直。左手保持不動(dòng),用右手使刀口向內(nèi)側(cè)右后方拉切,同時(shí)觀察切片的進(jìn)展情況。材料要一次切下,切好后,用毛筆將切片輕輕移入培養(yǎng)皿的清水中備用。第9頁(yè),共22頁(yè),2023年,2月20日,星期日105.挑選薄而平的切片,置于載玻片中央,滴加蒸餾水2~3滴,取蓋玻片,使蓋玻片一邊接觸液體邊緣,待液體沿邊緣擴(kuò)散后緩緩放下蓋玻片,以防止產(chǎn)生氣泡。裝片后,用吸水紙吸去流溢到蓋玻片以外的多余液體。注意事項(xiàng):
1.切片時(shí)要注意拇指,以防刀傷。 2.切片時(shí)保持刀片與藥材垂直。 3.切片中途不要停頓,更不能用拉鋸方式進(jìn)行切片。第10頁(yè),共22頁(yè),2023年,2月20日,星期日11第二節(jié)顯微測(cè)微技術(shù)顯微測(cè)量尺是用來(lái)測(cè)量顯微鏡下所能見(jiàn)物體長(zhǎng)度和大小的標(biāo)尺,包括目鏡測(cè)微尺和載臺(tái)測(cè)微尺。目鏡測(cè)微尺載臺(tái)測(cè)微尺第11頁(yè),共22頁(yè),2023年,2月20日,星期日12儀器與設(shè)備:生物顯微鏡、測(cè)微尺。操作方法:一、目鏡測(cè)微尺的標(biāo)定:1.取下目鏡,旋下目鏡上的透鏡,將目鏡測(cè)微尺放入目鏡的中隔板上,使有刻度的一面朝下,再旋上透鏡,并裝入鏡筒內(nèi)。第12頁(yè),共22頁(yè),2023年,2月20日,星期日132.將物鏡測(cè)微尺置于顯微鏡的載物臺(tái)上,使有刻度的一面朝上,同觀察標(biāo)本一樣,使具有刻度的小圓圈位于視野中央;3.先用低倍鏡觀察,對(duì)準(zhǔn)焦距,待看清物鏡測(cè)微尺的刻度后,轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡,使目鏡測(cè)微尺的刻度與物鏡測(cè)微尺的刻度相平行,并使兩尺的左邊第一條線相重合,再向右尋找兩尺的另外一條重合線。第13頁(yè),共22頁(yè),2023年,2月20日,星期日144.記錄二條重合線間的目鏡測(cè)微尺的格數(shù)和物鏡測(cè)微尺的格數(shù),根據(jù)二條重合線間小格數(shù)的比值,計(jì)算目鏡測(cè)微尺在物鏡下每小格的數(shù)值(μm)。計(jì)算方式:目鏡測(cè)微尺每格長(zhǎng)度=兩個(gè)重疊刻度間物鏡測(cè)微尺格數(shù)×10/兩個(gè)重疊刻度間目鏡測(cè)微尺格數(shù)。測(cè)微尺的標(biāo)定第14頁(yè),共22頁(yè),2023年,2月20日,星期日15二、測(cè)量方法:將欲測(cè)量物體封于載玻片上,于顯微鏡下用已校正的目鏡測(cè)微尺,測(cè)量其長(zhǎng)度或直徑,然后乘以每小格的μm數(shù)即得。注意事項(xiàng):測(cè)微尺為易碎品,標(biāo)定時(shí)防止壓碎。第15頁(yè),共22頁(yè),2023年,2月20日,星期日16第三節(jié)顯微化學(xué)分析技術(shù)
顯微化學(xué)分析是將藥材的切片、粉末或浸出物等置于載玻片上,加特定化學(xué)試劑后產(chǎn)生沉淀或結(jié)晶,在顯微鏡下觀察其形狀和顏色進(jìn)行鑒別的一種方法。第16頁(yè),共22頁(yè),2023年,2月20日,星期日17操作方法:將切片、粉末或浸出物置于載玻片上,直接滴加特定化學(xué)試劑,加蓋玻片,置于顯微鏡下觀察。例如:黃連粉末滴加稀鹽酸,可見(jiàn)針狀、針簇狀鹽酸小檗堿結(jié)晶析出;丁香切片滴加堿液,油室內(nèi)有針狀丁香酚鈉結(jié)晶析出。第17頁(yè),共22頁(yè),2023年,2月20日,星期日18第四節(jié)常用的定性分析技術(shù)一、微量升華微量升華是利用中藥中所含的某些化學(xué)成分,在一定溫度下能升華的性質(zhì),獲得升華物,在顯微鏡下觀察其結(jié)晶形狀、色澤,或取升華物加化學(xué)試劑觀察其反應(yīng)作為鑒別特征。第18頁(yè),共22頁(yè),2023年,2月20日,星期日19操作方法:取金屬片放置在有圓孔(直徑約2cm)的石棉板上,金屬片上放一小金屬圈(高度約0.8cm),對(duì)準(zhǔn)石棉板上的圓孔,圈內(nèi)加入中藥粉末一薄層,圈上放一載玻片,在石棉板下圓孔處用酒精燈徐徐加熱數(shù)分鐘,至粉末開(kāi)始變焦,去火待冷后可見(jiàn)有升華物凝聚在載玻片上。將載玻片取下反轉(zhuǎn),在顯微鏡下觀察結(jié)晶形狀,并可加化學(xué)試劑觀察其反應(yīng)。注意事項(xiàng):酒精燈火焰距板4cm左右,不宜太靠近。第19頁(yè),共22頁(yè),2023年,2月20日,星期日20二、熒光分析熒光分析是利用中藥中所含的某些化學(xué)成分,在紫外光或自然光下能產(chǎn)生一定顏色的熒光的性質(zhì)進(jìn)行鑒別。除另有規(guī)定外,紫外光燈的波長(zhǎng)為365nm,如用短波(254~265nm)時(shí),應(yīng)加以說(shuō)明,因兩者熒光現(xiàn)象不同。第20頁(yè),共22頁(yè),2023年,2月20日,星期日21操作方法:將中藥材(或斷面)直接放到紫外光燈下觀察所產(chǎn)生的熒光;或?qū)⒅兴幉幕瘜W(xué)成分提取后,將提取液點(diǎn)于濾紙上在紫外燈下觀察所產(chǎn)生的熒光。必要時(shí)噴特殊顯色劑觀察熒光。注意事
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