醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷

HIV試驗(yàn)室診療廣州醫(yī)學(xué)院第一從屬醫(yī)院檢驗(yàn)科廖偉嬌醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第1頁一、HIV一些相關(guān)知識：1.HIV結(jié)構(gòu)2.HIV基因組成及結(jié)構(gòu)3.HIV感染免疫反應(yīng)二、HIV試驗(yàn)室檢驗(yàn)1.試驗(yàn)室、人員及設(shè)備要求2.試驗(yàn)室檢測3.職業(yè)暴露醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第2頁1.HIV結(jié)構(gòu)脂質(zhì)膜蛋白酶整合酶P18gp120gp41RNA反轉(zhuǎn)錄酶P24核蛋白核衣殼(由微粒組成)醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第3頁2、HIV基因分型HIV可分為兩個型：HIV-Ⅰ和HIV-Ⅱ。(1)基因組成：Ⅰ:LTR-gag-pol-vif-vpr-tat-rev-vpu-env-nef-LTR.Ⅱ:LTR-gag-pol-vif-vpx-vpr-tat-rev-env-nef-LTR.結(jié)構(gòu)基因：gag、pol、env調(diào)整基因：tat、rev、nef、vif、vpu從屬基因：vpr、vpx醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第4頁LTPgagLTPgagpolpolvprvifviftatvpurevenvrevrevrevtattattatenvLTPLTPvprvpxnetnet（2）基因結(jié)構(gòu)：醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第5頁(3)二者主要區(qū)分：

①

Ⅰ型含有vpu，而Ⅱ型含vpx。

②vpr和nef與其它基因關(guān)系也不一樣：AHIV-Ⅰvpr與vif相互重合，而nef與env不重合；BHIV-Ⅱvpr與vif不重合，而nef與env相互重合。醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第6頁(4)基因表示產(chǎn)物：HIV-ⅠHIV-Ⅱenv：gp160gp120gp41gp140gp105gp36gag：p55p24p18p56p26p16pol：p65p51p31p68p53p34醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第7頁3.HIV感染免疫反應(yīng)

抗-gp41抗-p24p24醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第8頁試驗(yàn)室要求：試驗(yàn)室分級：初篩試驗(yàn)室確證試驗(yàn)室粵衛(wèi)[]305號文要求：6月份前在縣級以上收治定點(diǎn)醫(yī)院建立初篩試驗(yàn)室。填寫申請、評審、同意

要求：HIV血清學(xué)試驗(yàn)：BSL-Ⅱ(P2)HIV病毒研究：BSL-ⅢP3)醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第9頁

初篩試驗(yàn)室設(shè)計和建造要求：

⑴有專用試驗(yàn)室（最少專用檢測臺），應(yīng)劃分清潔區(qū)和污染區(qū)，并有顯著標(biāo)識，有充分操作空間。(2)試驗(yàn)室墻面、地面、臺面材料應(yīng)來耐酸、堿、易清潔消毒、不滲漏液體；室內(nèi)應(yīng)有防蚊、防蠅、防鼠等設(shè)備醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第10頁⑶檢驗(yàn)臺上應(yīng)裝置紫外燈。⑷備有消毒藥品、消毒器材和消毒設(shè)備。⑸有感應(yīng)流水裝置，備有沖眼睛水，足夠一次性手套、口罩、隔離服和防護(hù)眼鏡。(6)試驗(yàn)室應(yīng)裝置恒溫設(shè)備,室溫為20~25℃。醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第11頁BSLⅡ試驗(yàn)室：設(shè)計和建造要求（

增加）：⑴應(yīng)有專門放置生物廢棄物容器臺(架)。⑵應(yīng)設(shè)置實(shí)施各種消毒方法設(shè)施，如高壓滅菌鍋、化學(xué)消毒裝置等對廢棄物進(jìn)行處理。⑶應(yīng)設(shè)置洗眼裝置。⑷試驗(yàn)室門宜帶鎖、可自動關(guān)閉。⑸試驗(yàn)室出口應(yīng)有發(fā)光指示標(biāo)志。醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第12頁BSLⅡ試驗(yàn)室：

安全設(shè)備：

Ⅱ生物安全柜或其它物理抑制設(shè)備醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第13頁HIV抗體初篩檢測程序：樣本選取初篩試劑初篩檢測陽性反應(yīng)陰性反應(yīng)原有試劑＋另一個原理初篩試劑重復(fù)檢測均呈陽性一陰一陽均呈陰性送確認(rèn)陰性匯報醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第14頁HIV抗體檢測：1.初篩試驗(yàn)方法及原理：（1）ELISA（2）明膠凝集試驗(yàn)（3）金標(biāo)法（4）自動化儀器測定醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第15頁2.確證試驗(yàn)：免疫印跡法、間接免疫熒光法、免疫沉淀法(1)方法原理(2)確證試驗(yàn)結(jié)果判斷：美國CDC：gp160/gp120或p24/gp41任意二條帶美國FDA：gp160/gp120或p24、gp41、p31三者組合WHO：最少二條以上env帶美國紅十字：gag、pol、env每組最少一條帶中國：最少二條以上env帶或一條env帶和一條(gag)p24帶。醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第16頁3注意事項(xiàng)(1)相關(guān)政策和要求(2)臨床操作中注意事項(xiàng)(3)初篩與確證結(jié)果差異及解釋(4)醫(yī)療糾紛醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第17頁醫(yī)務(wù)人員艾滋病病毒職業(yè)暴露防護(hù)工作指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)(試行)(.5.31)：第八條醫(yī)務(wù)人員發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露后，應(yīng)該馬上實(shí)施以下局部處理辦法：醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第18頁1用肥皂液和流動水清洗污染皮膚，用生理鹽水沖洗粘膜。2如有傷口，應(yīng)該在傷口旁輕輕擠壓，盡可能擠出損傷處血液，再用肥皂液和流動水進(jìn)行沖洗；禁止進(jìn)行傷口局部擠壓。3受傷部位傷口沖洗后，應(yīng)該用消毒液，如75％酒精或0.5％碘伏進(jìn)行消毒，并包扎傷口，被暴露粘膜，應(yīng)該重復(fù)用生理鹽水沖洗潔凈醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第19頁

第九條醫(yī)務(wù)人員發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露后，醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)該對其暴露級別和暴露源病毒量水平進(jìn)行評定和確定

第十條

艾滋病病毒職業(yè)暴露級別分為三級醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第20頁一、發(fā)生以下情形，確定為一級暴露：暴露源為體液、血液或者含有體液、血液醫(yī)療器械、物品。2

暴露類型為暴露源沾污了有損傷皮膚或者粘膜，暴露量小且暴露時間較短。醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第21頁二、發(fā)生以下情形，確定為二級暴露：暴露源為體液、血液或者含有體液、血液醫(yī)療器械、物品。2暴露類型為暴露源沾污了有損傷皮膚或者粘膜，暴露量大且暴露時間較長；或者暴露類型為暴露源刺傷或者割傷皮膚，但損傷程度較輕，為表皮擦傷或者針刺傷。醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第22頁三、發(fā)生以下情形，確定為三級暴露：暴露源為體液、血液或者含有體液、血液醫(yī)療器械、物品。2暴露類型為暴露源刺傷或者割傷皮膚，但損傷程度較重，為深部傷口或者割傷物有顯著可見血液。醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第23頁第十一條

暴露源病毒載量水平分為：

輕度、重度和暴露源不明三種類型。

醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第24頁暴露源不明：不能確定暴露源是否為HIV病毒陽性者輕度：經(jīng)檢驗(yàn)，暴露源為HIV病毒陽性，但滴度低，艾滋病病毒感染者無臨床癥狀、CD4計數(shù)正常者。重度：經(jīng)檢驗(yàn)，暴露源為HIV病毒陽性，但滴度高，艾滋病病毒感染者有臨床癥狀、CD4計數(shù)低者。醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第25頁第十二條：醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)應(yīng)該依據(jù)暴露級別和暴露源病毒載量水平對發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露醫(yī)務(wù)人員實(shí)施預(yù)防性用藥方按。醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第26頁第十三條預(yù)防性用藥方按分為基本用藥程序和強(qiáng)化用藥程序?；居盟幊绦颍簽閮煞N逆轉(zhuǎn)錄酶制劑，使用常規(guī)劑量，連續(xù)使用28天。強(qiáng)化用藥程序：是在基本用藥程序基礎(chǔ)上，同時增加一個蛋白酶抑制劑，使用常規(guī)治療劑量，連續(xù)使用28天。醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第27頁預(yù)防性用藥應(yīng)該在發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露后盡早開始，最好在4h內(nèi)實(shí)施，最遲不得超出24h；即使超出24h，也應(yīng)該實(shí)施預(yù)防性用藥方。（早、有）醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第28頁發(fā)生一級暴露且暴露源病毒載量水平為輕度時，能夠不使用預(yù)防性用藥；

（一級輕度不用藥）

發(fā)生一級暴露且暴露源病毒載量水平為重度或者發(fā)生二級暴露且暴露源病毒載量水平為輕度時，使用基本用藥程序。

（一級重度或二級輕度用基本）醫(yī)院HIV實(shí)驗(yàn)室診斷第29頁發(fā)生二級暴露且暴露源病毒載量水平為重度或者發(fā)生三級暴露且暴露源病毒載量水平為輕度或者重度時