細(xì)菌的生理生化實(shí)驗(yàn)

微生物生理生化反應(yīng)微生物細(xì)胞在酶催化下進(jìn)行各種各樣生理生化反應(yīng)把微生物細(xì)胞在一定條件下培養(yǎng)，經(jīng)過觀察生理現(xiàn)象和檢驗(yàn)代謝產(chǎn)物，能夠了解微生物代謝過程和代謝特點(diǎn)因?yàn)椴灰粯游⑸锟赡芎胁灰粯用?，代謝路徑和代謝產(chǎn)物可能也有不一樣，生理生化反應(yīng)是微生物分類判定主要指標(biāo)之一。細(xì)菌的生理生化實(shí)驗(yàn)第1頁淀粉水解試驗(yàn)淀粉培養(yǎng)基+淀粉培養(yǎng)基+接種+變色圈，水解圈培養(yǎng)24h加盧哥氏碘液I-KI細(xì)菌的生理生化實(shí)驗(yàn)第2頁結(jié)果：有水解圈—淀粉水解試驗(yàn)陽性，用+表示；無水解圈—淀粉水解試驗(yàn)陰性，用-表示；細(xì)菌的生理生化實(shí)驗(yàn)第3頁糖發(fā)酵試驗(yàn)原理：丙酮酸裂解生成乙酰CoA與甲酸，甲酸在酸性條件下在甲酸氫解酶作用下可深入裂解生成H2和CO2——產(chǎn)酸產(chǎn)氣缺乏甲酸氫解酶——產(chǎn)酸不產(chǎn)氣步驟：配制糖發(fā)酵培養(yǎng)基——接種——培養(yǎng)（約24h)——觀察結(jié)果結(jié)果：紫色無氣泡，既不產(chǎn)酸也不產(chǎn)氣用-表示；黃色無氣泡，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，用+表示；黃色且有氣泡，產(chǎn)酸產(chǎn)氣，用0表示。細(xì)菌的生理生化實(shí)驗(yàn)第4頁甲基紅試驗(yàn)（M.R試驗(yàn)）原理微生物進(jìn)行混合酸發(fā)酵，產(chǎn)生各種有機(jī)酸——pH下降——加入指示劑甲基紅——紅色步驟：配制蛋白胨水培養(yǎng)基——接種——培養(yǎng)（約24h)——加入指示劑甲基紅1~2滴——觀察結(jié)果結(jié)果：

紅色——M.R試驗(yàn)陽性，用+表示；不變色——M.R試驗(yàn)陰性，用-表示；

細(xì)菌的生理生化實(shí)驗(yàn)第5頁V.P試驗(yàn)細(xì)菌的生理生化實(shí)驗(yàn)第6頁V.P試驗(yàn)步驟：配制蛋白胨水培養(yǎng)基——接種——培養(yǎng)（約24h)——5~10d40%KOH,5~10d5%a-奈酚和少許肌醇，取出塞子，用力震蕩，保溫（37度15~30min）——觀察結(jié)果結(jié)果：紅色——V.P試驗(yàn)陽性，用+表示；不變色——V.P試驗(yàn)陰性，用-表示。細(xì)菌的生理生化實(shí)驗(yàn)第7頁試驗(yàn)內(nèi)容以組為單位進(jìn)行淀粉水解試驗(yàn)、糖發(fā)酵試驗(yàn)、V.P試驗(yàn)和M.R試驗(yàn)。試驗(yàn)菌種：淀粉水解試驗(yàn)、糖發(fā)酵試驗(yàn)：大腸桿菌、蘇云金芽孢桿菌V.P試驗(yàn)和M.R試驗(yàn)：大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌注意事項(xiàng)：試驗(yàn)匯報(bào)：1、列表統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)結(jié)果2、思索題：第4小題細(xì)菌的生理生化實(shí)驗(yàn)第8頁四大類細(xì)胞型微生物菌落判定初步判定確證：顯微鏡觀察細(xì)菌的生理生化實(shí)驗(yàn)第9頁微生物菌落特征統(tǒng)計(jì)和描述菌落形態(tài)：形狀，邊緣情況大小：表面情況：濕潤、粘稠或干燥，隆起或扁平，厚或薄，是否粉末狀質(zhì)地：致密或疏松蔓延程度：與培養(yǎng)基結(jié)合程度顏色（正面、反面、邊緣、中心）氣味細(xì)菌的生理生化實(shí)驗(yàn)第10頁示例將菌株在查氏瓊脂平板上25℃培養(yǎng)7d后菌落直徑18~19mm，圓形，邊緣齊整不蔓延，表面絲絨狀并具放射狀溝