無菌生產(chǎn)工藝質(zhì)量控制要點

無菌生產(chǎn)工藝質(zhì)量控制要點李茜2016.09目前一頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點人員管理物料管理潔凈區(qū)驗證與監(jiān)控培養(yǎng)基模擬灌裝1234ContentsPage目錄頁1目錄目前二頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點2023/4/2733無菌藥品生產(chǎn)管理原則

無菌藥品的生產(chǎn)須滿足其質(zhì)量和預(yù)定用途的要求，應(yīng)當(dāng)最大限度降低微生物、各種微粒和熱原的污染。生產(chǎn)人員的技能、所接受的培訓(xùn)及其工作態(tài)度是達到上述目標(biāo)的關(guān)鍵因素，無菌藥品的生產(chǎn)必須嚴(yán)格按照精心設(shè)計并經(jīng)驗證的方法及規(guī)程進行，產(chǎn)品的無菌或其它質(zhì)量特性絕不能只依賴于任何形式的最終處理或成品檢驗（包括無菌檢查）。目前三頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點人員管理人體攜帶很多的微生物在沒有消毒的情況下，手部大約有1000-6000個微生物/cm2一個噴嚏可以射出100,000-1,000,000個微生物健康人群也向環(huán)境中散布顆粒（例如人體的脫落物：）站著不動也可以每分鐘散布100,000個顆粒，移動時數(shù)量會猛增人是最大的污染源！目前四頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點潔凈區(qū)內(nèi)的人數(shù)應(yīng)當(dāng)嚴(yán)加控制定期培訓(xùn)穿戴適宜的潔凈工作服正確的更衣和洗手正確的潔凈室操作行為人員健康外來人員管理人員管理—基本要求目前五頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點所有從事無菌藥品生產(chǎn)的人員都應(yīng)經(jīng)過培訓(xùn)。所有在無菌藥品生產(chǎn)工序工作的人員都應(yīng)該深刻理解偏離經(jīng)驗證的規(guī)程可能對產(chǎn)品和病人帶來的風(fēng)險。從事無菌藥品生產(chǎn)的人員應(yīng)保持相對穩(wěn)定。人員管理——培訓(xùn)高風(fēng)險操作區(qū)進行關(guān)鍵操作的人員培訓(xùn)應(yīng)包括理論和現(xiàn)場的指導(dǎo)先進行非關(guān)鍵操作通過培養(yǎng)基模擬灌裝試驗對員工進行考核沒有經(jīng)過資質(zhì)確認的人員在有資質(zhì)的人員指導(dǎo)下更衣以及在無菌生產(chǎn)潔凈區(qū)內(nèi)的活動其退出潔凈區(qū)前對其進行取樣對其所經(jīng)過的區(qū)域進行必要的消毒目前六頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點盡量減少進入無菌生產(chǎn)潔凈區(qū)的人數(shù)和次數(shù)保持工作需要的最低人數(shù)QA監(jiān)控、檢查都要盡可能在無菌潔凈區(qū)外進行生產(chǎn)無關(guān)人員盡量不進入無菌生產(chǎn)潔凈區(qū)進入無菌生產(chǎn)潔凈區(qū)的人數(shù)應(yīng)通過驗證來確定人員在進入無菌生產(chǎn)潔凈區(qū)應(yīng)用無菌的消毒劑（一般為酒精）消毒雙手，待消毒劑揮發(fā)干后方可進入無菌生產(chǎn)潔凈區(qū)人員管理——良好的行為規(guī)范目前七頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點人員管理——良好的行為規(guī)范動作盡量平緩，雙手不得下垂、叉腰、夾在腋下或高舉超過肩部，應(yīng)放在胸前。盡量避免下蹲動作。保持整個身體在單向氣流通道之外，不得在產(chǎn)品上上游方向進行無菌操作。人員間應(yīng)保持一段距離，人員的著裝不可相互接觸。操作人員盡可能不說話。每次接觸物品應(yīng)對雙手進行消毒，晾干后進行下一步操作。即時沒有接觸任何物品，也應(yīng)定期對雙手進行再次消毒。任何時候，雙手都不能接觸地面。無菌生產(chǎn)潔凈區(qū)內(nèi)所有開、關(guān)門的操作，盡量避免用水直接接觸，宜使用肘部、前臂、背部等身體部分來完成，避免交叉污染。目前八頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點人員管理——潔凈區(qū)著裝根據(jù)具體情況制定合理的更衣程序，建立完備的更衣SOP，并遵照執(zhí)行。1）潔凈服的式樣、材質(zhì)、清洗、整理以及滅菌方式要與所處的工作環(huán)境相適應(yīng)。2）更衣程序要適應(yīng)于潔凈車間的設(shè)計。3）無菌生產(chǎn)區(qū)域最外層的潔凈服是無菌的，且不能被“臟”衣物污染。人員進出生產(chǎn)區(qū)管理程序三更程序示意圖目前九頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點人員管理——潔凈區(qū)著裝制定更衣確認程序，評估操作人員按規(guī)程更衣后保持衣著要求的能力。確認的程序：頻率：每個初次受訓(xùn)者必須經(jīng)過3次更衣試驗達標(biāo)后才能進入無菌生產(chǎn)潔凈區(qū)。更衣已合格的人員每年需重復(fù)一次更衣試驗當(dāng)發(fā)現(xiàn)合格人員有違反更衣程序趨向時，需重復(fù)1~3次更衣試驗。培訓(xùn)更衣實踐會穿衣取樣確認目前十頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點物料的供應(yīng)對關(guān)鍵物料進行供應(yīng)商確認時，應(yīng)重點評估供應(yīng)/生產(chǎn)商的無菌保證體系，考察其生產(chǎn)過程對微生物污染、細菌內(nèi)毒素污染、產(chǎn)品混淆和交叉污染風(fēng)險的控制措施。物料的驗收、儲存和發(fā)放物料驗收時，特別關(guān)注包裝容器的完整性；退庫物料應(yīng)注意恢復(fù)原包裝形態(tài)，且要評估剩余物料質(zhì)量是否受到影響。物料的取樣檢驗取樣環(huán)境應(yīng)與物料使用的環(huán)境一致，取樣過程不得污染物料，取樣后注意恢復(fù)原包裝。注意增加微生物檢定項目。物料管理目前十一頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點物料的傳遞物料的無菌傳遞方式應(yīng)根據(jù)物料的特性和工藝要求進行選擇（傳遞方式對物料本身不能造成影響），常見的傳遞方式包括：1）雙扉濕熱滅菌器或干熱滅菌器；2）隧道烘箱；3）傳遞窗（風(fēng)淋、紫外、消毒劑擦拭）4）凈化車（層流車等）物料的傳遞方式應(yīng)經(jīng)過確認，證明可以有效去除物料內(nèi)包裝表面的微生物或顆粒。物料管理目前十二頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點雙扉濕熱滅菌器濕熱滅菌為最有效、用途最廣的一種滅菌方式，一般用于無菌衣、器具、膠塞、鋁蓋等遇高溫和濕熱不發(fā)生變化或損壞的物質(zhì)。對于無菌衣、器具、包裝材料等物質(zhì)，熱穩(wěn)定性好，一般采用過度殺滅的方式進行滅菌（121℃，30min)。對每一臺濕熱滅菌器要進行確認，對每一種滅菌工藝（裝載方式、裝載量、滅菌程序）均要進行驗證。物料管理目前十三頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點雙扉濕熱滅菌器——確認與驗證項目博維-狄克實驗（BD實驗）用于檢查高真空多孔物品本身及其滅菌器腔室內(nèi)的空氣是否成功排除。實驗過程：將測試包放置在滅菌腔內(nèi)，空載進行滅菌，不需要干燥。實驗結(jié)束后查看滅菌測試包中的指示卡。判定方法：蒸汽快速平穩(wěn)地滲入測試包，使內(nèi)部指示卡色條呈現(xiàn)均勻變色，符合要求。物料管理目前十四頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點雙扉濕熱滅菌器——確認與驗證項目氣密性實驗（真空狀態(tài)下泄漏試驗）用于驗證在排除空氣的過程中，滲入滅菌腔室的氣體量不應(yīng)干擾蒸汽的滲透，并且在干燥過程不會受到二次污染。一般的滅菌器自帶氣密性測試程序。測試時自動運行該程序可獲得測試數(shù)據(jù)和測試結(jié)果。物料管理目前十五頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點雙扉濕熱滅菌器——確認與驗證項目空載熱分布測試目的：確認滅菌室內(nèi)的溫度均勻性和滅菌介質(zhì)的穩(wěn)定性，測定滅菌腔內(nèi)不同位置的溫度狀況，確定可能存在的冷點。測試程序：選擇一定數(shù)量的探頭（一般不少于10個），編號后固定在水平向和垂直向有代表性的空間內(nèi)，幾何中心和角落應(yīng)有代表性點，另外在與溫度控制傳感器相連的冷凝水排放口（低溫點）放置探頭。連續(xù)重復(fù)3次測試應(yīng)符合要求。物料管理探頭號探頭位置探頭號探頭位置T11-E-aT97-E-eT21-A-aT105-C-cT31-A-eT119-E-aT41-E-eT129-A-aT51-C-cT139-A-eT63-E-aT149-E-eT77-A-aT159-C-cT83-A-eT168-E-c(排水口處)目前十六頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點雙扉濕熱滅菌器——確認與驗證項目滿載熱分布測試和熱穿透試驗溫度探頭應(yīng)放置于滅菌物品中。同一物品滅菌時探頭應(yīng)均一分布；多種物品混裝滅菌時探頭放置點應(yīng)有代表性。對于熱穿透探頭數(shù)量沒有硬性規(guī)定。過度殺滅方式滅菌F0值必須大于12分鐘。每一個循環(huán)從開始到滅菌的時間應(yīng)該一致，可重現(xiàn)。實施熱穿透試驗前，首先應(yīng)明確裝載布置圖。負載的冷點因待滅菌物品的包裝方式、結(jié)構(gòu)、滅菌物類型不同而不同。物料管理目前十七頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點雙扉濕熱滅菌器——確認與驗證項目微生物挑戰(zhàn)性試驗熱穿透數(shù)據(jù)只能確認溫度，不能確認真實殺滅微生物的能力，微生物挑戰(zhàn)試驗可以為負載各位置具有同樣的殺滅效率提供必要的證據(jù)，通常和熱穿透測試同時進行。過度殺滅生物指示劑一般使用嗜熱脂肪芽孢桿菌孢子(ATCC7953)生物指示劑一般放置在溫度探頭的測試點附近。物料管理目前十八頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點雙扉濕熱滅菌器——日常維護對每次滅菌過程的滅菌程序的關(guān)鍵滅菌參數(shù)進行評估，如：溫度、滅菌時間、F0、溫度壓力曲線、升溫、降溫過程等。適用性試驗，通常包括：BD試驗、真空泄漏試驗、指示劑試驗等，以證明滅菌器運行前相關(guān)性能符合要求。變更控制再驗證（通常為12個月進行一次）物料管理目前十九頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點物料管理——轉(zhuǎn)運控制區(qū)C級區(qū)B級區(qū)B+A級區(qū)1、傳遞窗外脫掉最外層包裝2、消毒擦拭3、傳遞窗內(nèi)自凈傳遞窗兩側(cè)門不能同時打開1、傳遞窗外脫掉第二層包裝2、消毒擦拭3、傳遞窗內(nèi)自凈1、A級區(qū)外的B級背景下脫掉最外層包裝2、消毒擦拭3、放入A級區(qū)消毒劑消毒效果需要進行驗證轉(zhuǎn)運過程需要進行驗證目前二十頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點物料管理——移動層流小車用于已滅菌物品的在B級區(qū)下的轉(zhuǎn)運用于尚未完全密封的無菌產(chǎn)品在B級區(qū)下轉(zhuǎn)運對層流小車的潔凈級別進行確認和日常監(jiān)測，保證為A級環(huán)境一般有垂直層流和水平層流需要進行轉(zhuǎn)載模式下的氣流試驗?zāi)壳岸豁揬總數(shù)七十六頁\編于十九點潔凈區(qū)驗證和監(jiān)測懸浮粒子的要求：附錄1<無菌藥品>第九、十條1、A級區(qū)確認時的采樣量不少于1m32、潔凈區(qū)的動態(tài)監(jiān)測懸浮粒子的動態(tài)監(jiān)測關(guān)鍵操作的全過程，對A級區(qū)進行粒子監(jiān)測A級區(qū)的監(jiān)測頻率、取樣量，及時發(fā)現(xiàn)人為干預(yù)、偶發(fā)事件及任何系統(tǒng)的破壞B級區(qū)：類似于A級區(qū)，采樣頻率、采樣量可以調(diào)整C級區(qū)：質(zhì)量風(fēng)險管理原則確定D級區(qū)：一般不作要求，（法規(guī)：必要時）對于C/D級區(qū)的自凈時間應(yīng)達到規(guī)定要求目前二十二頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點取樣量和取樣點ISO14644-1B.4.2節(jié)有明確的采樣量的計算公式：采樣量（升）=(20/級別中最大粒子限度）×1000，顯然對于A級，采樣量為(20/20)×1000=1米3

從上式中可見，級別要求越低，取樣量就越小取樣點數(shù)由公式：取樣點數(shù)NL

=

A，A為潔凈區(qū)面積，例如10米×5米的區(qū)域，取樣點應(yīng)為8（取整數(shù)）取樣點均勻分布，位于工作面高度注意：這里僅指在潔凈區(qū)劃分時加以采用潔凈區(qū)驗證和監(jiān)測目前二十三頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點微生物的要求：附錄1<無菌藥品>第十一條監(jiān)測方法有：1)，空氣浮游菌監(jiān)測沉降菌法--被動法定量空氣浮游菌采樣法--主動法2)，環(huán)境表面監(jiān)測表面取樣法（如棉簽擦拭法和接觸碟法）3)，人員監(jiān)測表面取樣法（接觸碟法）24潔凈區(qū)驗證和監(jiān)測目前二十四頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點1)，空氣浮游菌監(jiān)測沉降菌法--被動法沉降碟在空氣中的暴露時間<4小時監(jiān)控整個灌裝過程只能給出定性和半定量的數(shù)據(jù)應(yīng)結(jié)合空氣浮游菌的數(shù)據(jù)，對沉降碟的結(jié)果進行評價定量空氣浮游菌采樣法--主動法撞擊式，離心式和膜過濾（明膠）取樣儀應(yīng)取一定體積的空氣（取樣體積應(yīng)有代表性）儀器應(yīng)經(jīng)過校驗25潔凈區(qū)驗證和監(jiān)測目前二十五頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點2)，環(huán)境表面監(jiān)測：表面取樣法應(yīng)對接觸產(chǎn)品表面、設(shè)備、地面、墻面等定期監(jiān)測接觸蝶法：適用于平整表面

取樣面積25cm2

培養(yǎng)基略有凸起，高于碟子邊緣，便于取樣

培養(yǎng)基中應(yīng)含有中和劑/保護劑棉簽擦拭法：適用于不規(guī)則表面

取樣面積~25cm2

定性或定量表面樣應(yīng)在無菌操作結(jié)束時取

以最大限度地降低無菌制造過程中關(guān)鍵表面污染的風(fēng)險26潔凈區(qū)驗證和監(jiān)測目前二十六頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點潔凈區(qū)的驗證和監(jiān)測3)，人員監(jiān)測表面取樣法（接觸碟法），取樣時間一般為：工作結(jié)束，離開潔凈區(qū)前取樣處理異常情況后（取樣后重新更衣或更換手套）生產(chǎn)過程中隨時監(jiān)測特別注意：不得在剛消毒過后取樣27目前二十七頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點28潔凈區(qū)驗證和監(jiān)測每個手套(5只手指)胸口處衣帽結(jié)合處帽兜額頭處靴子與工作褲接口處

前臂無菌區(qū)人員更衣確認和監(jiān)測目前二十八頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點環(huán)境監(jiān)測方案潔凈區(qū)應(yīng)制定系統(tǒng)的環(huán)境監(jiān)測方案，包括動態(tài)監(jiān)測和靜態(tài)監(jiān)測。關(guān)鍵項目：懸浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面微生物。取樣計劃的影響因素：產(chǎn)品類型、生產(chǎn)過程、設(shè)施/工藝設(shè)計、生產(chǎn)密度、人為干擾、環(huán)境監(jiān)測歷史數(shù)據(jù)等。取樣點的選擇主要取決于潔凈室的設(shè)計和生產(chǎn)要求。29目前二十九頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點環(huán)境監(jiān)控整體要求潔凈區(qū)監(jiān)測年度潔凈級別確認日常環(huán)境監(jiān)測動態(tài)監(jiān)測靜態(tài)監(jiān)測無菌生產(chǎn)區(qū)A/B最終滅菌C級的主要功能間C級區(qū)域D級區(qū)域30目前三十頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點環(huán)境監(jiān)測案例監(jiān)控區(qū)（潔凈度級別）監(jiān)控頻率監(jiān)控項目非最終滅菌產(chǎn)品

生產(chǎn)區(qū)域稱量配料、配液

（C/A級區(qū)）每周兩次空氣懸浮粒子[1]空氣浮游菌空氣沉降菌[1]表面微生物無菌灌封輔助區(qū)

（C級區(qū)）每周兩次空氣懸浮粒子[1]空氣浮游菌空氣沉降菌[1]表面微生物無菌灌封間

(B/A級區(qū))每班一次

每批一次空氣懸浮粒子空氣浮游菌空氣沉降菌表面微生物操作者手套和操作服表面微生物[1].每月一次31目前三十一頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點潔凈區(qū)監(jiān)測的位置取樣位置選擇時考慮因素：哪些部位的微生物污染最可能對產(chǎn)品質(zhì)量造成不良影響？在生產(chǎn)過程中，什么地點最容易長菌？哪些地方是清潔、消毒或滅菌時最難覆蓋/接觸或最難奏效的部位？什么活動會導(dǎo)致污染的擴散？在某一部位的取樣操作，足以導(dǎo)致測試數(shù)據(jù)的差錯或污染產(chǎn)品？取樣只應(yīng)在生產(chǎn)結(jié)尾換班時進行嗎？32目前三十二頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點33潔凈區(qū)監(jiān)測的位置應(yīng)符合“GB16292-2010”~“GB16294-2010”的要求基于風(fēng)險的設(shè)計監(jiān)測點設(shè)置在潛在風(fēng)險最大的位置藥品容器連接處人流和物流經(jīng)過的地方監(jiān)測點靠近“工作高度”目前三十三頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點系統(tǒng)取樣點環(huán)境空氣（灌裝線）接近敞開和/或者已灌裝的容器潔凈室空氣最接近工作區(qū)域水使用點表面（廠房）地面、門把手、墻、簾子表面（設(shè)備）灌裝線、控制面板、供膠塞的料斗壓縮空氣離開壓縮機最遠點無菌檢查系統(tǒng)最接近真空源的接口灌裝線操作人員至少要檢手指印單向流（例如，單向流罩）靠近活動最多的區(qū)域示例134潔凈區(qū)監(jiān)測的位置目前三十四頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點潔凈區(qū)監(jiān)測的位置示例2：無菌灌裝線取樣點應(yīng)在產(chǎn)品或組件暴露的區(qū)域周圍取樣，如：在灌裝針頭處將產(chǎn)品裝載入凍干腔室處膠塞供料桶無菌部件進行連接操作的部位操作人員頻繁活動處（不影響生產(chǎn)過程）靠近產(chǎn)品，但不接觸產(chǎn)品的位置35目前三十五頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點傳感器低于機器，采樣管伸入灌裝操作區(qū)內(nèi)粒子在線監(jiān)測布置圖例灌裝后凍干前監(jiān)測點位置：藥瓶是半封閉狀態(tài)（敞口）保證灌裝后，凍干前的環(huán)境區(qū)域是受控的。正確的取樣點位置：靠近傳送帶。36目前三十六頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點浮游菌、沉降菌取樣點沉降菌、浮游菌：監(jiān)控點位置，高度一般為離地80cm左右，或操作臺面。浮游菌、沉降菌監(jiān)控點的設(shè)置根據(jù)生產(chǎn)工藝及污染風(fēng)險綜合考慮。37目前三十七頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點潔凈區(qū)表面微生物取樣點C級區(qū)取樣點：一般為地面、墻面及操作人員十指手套。對C級下的局部A級區(qū)取樣宜在生產(chǎn)結(jié)束后進行，避免造成污染。地面取樣墻面取樣灌裝機（A級）產(chǎn)品轉(zhuǎn)移（A級）38目前三十八頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點潔凈區(qū)表面微生物取樣點B級區(qū)接觸碟取樣位置應(yīng)能及時發(fā)現(xiàn)潛在污染風(fēng)險，在受污染可能性較高的位置布點。無菌分裝設(shè)備門進出B級區(qū)門把手儀器、設(shè)備操作鍵、觸摸屏等傳遞窗門把手39目前三十九頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點沉降菌/浮游菌監(jiān)測直徑：90mm浮游菌監(jiān)測AirIDEAL3P100升/分懸浮粒子監(jiān)測PMSLasairⅡ28.3升/分表面微生物監(jiān)測直徑：55mm40環(huán)境監(jiān)測常用儀器/設(shè)備/培養(yǎng)基目前四十頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點2500模塊化控制器ModbusTCP/IP真空泵Airnet5104-20MA信號HUB6180XIO歐陸顯示器工作站41粒子在線監(jiān)測儀目前四十一頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點適用于圓弧表面取樣外蓋帶鎖扣表面帶有鎖扣，可以避免因取樣結(jié)束后平皿意外跌落等問題具有一定的韌性，可以進行適當(dāng)彎曲，適合不規(guī)則表面或圓弧取樣42預(yù)制培養(yǎng)基-特殊預(yù)制平板目前四十二頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點

使用前

擦拭后SCD培養(yǎng)基頸部保護套拭子使用方法：1、拔除下端保護套，取出拭子用

無菌液體潤濕

2、擦拭取樣表面（一般為25cm2）

3、取樣結(jié)束后將拭子放回保護套

4、將擦拭棒頸部掰斷，上端SCD培養(yǎng)基流入保護套中并浸沒拭子5、將整個擦拭棒放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)SCD培養(yǎng)基43預(yù)制培養(yǎng)基-無菌擦拭棒目前四十三頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點預(yù)制培養(yǎng)平板包裝無菌區(qū)使用預(yù)制平板：一般采用三層包裝形式：55mm接觸平板90mm預(yù)制平板44目前四十四頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點預(yù)制平板進入潔凈區(qū)預(yù)制平板進入無菌區(qū)，須避免對監(jiān)控區(qū)域的污染去除最外層包裝

放入傳遞窗開啟紫外燈消毒外表面消毒處理45目前四十五頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點預(yù)制平板脫包裝經(jīng)傳遞窗進入潔凈區(qū)的預(yù)制培養(yǎng)平板繼續(xù)脫去外面兩層包裝就可以使用。脫出第二層包裝脫出第三層包裝脫包裝后單個平板46目前四十六頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點預(yù)制平板使用示意圖接觸碟表面取樣示意圖：1，取樣點采樣2，取樣位置消毒

3，用無塵布清潔4，標(biāo)明取樣點編號5，平板入無菌保管袋6，保管袋密封待培養(yǎng)47目前四十七頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點無菌工藝模擬試驗定義無菌工藝模擬試驗Process

Simulation

Testing（PST）培養(yǎng)基灌裝Media

Fill

采用培養(yǎng)基代替藥品進行無菌灌裝對無菌工藝進行驗證。此模擬工藝稱之為“培養(yǎng)基灌裝”。目前四十八頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點進行培養(yǎng)基灌裝的目的驗證一個無菌工藝

對無菌工藝過程無菌保證水平的綜合評估（包括設(shè)備、人員、操作、滅菌過程、生產(chǎn)環(huán)境等）對無菌操作人員進行資格確認確認進行重大變更后對無菌工藝的影響作為問題調(diào)查的手段綜合反映生產(chǎn)線整體的無菌保證情況，無法體現(xiàn)具體某批產(chǎn)品或某個產(chǎn)品的無菌性目前四十九頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點培養(yǎng)基灌裝試驗的頻率初始驗證：每班次連續(xù)進行3批合格試驗隨后每半年針對不同班次/工藝進行一次再驗證所有日常操作人員每年都必須參加至少一次培養(yǎng)基灌裝驗證空氣凈化系統(tǒng)、設(shè)備、生產(chǎn)工藝及人員重大變更后，應(yīng)當(dāng)重復(fù)進行培養(yǎng)基模擬灌裝試驗?zāi)壳拔迨揬總數(shù)七十六頁\編于十九點培養(yǎng)基灌裝測試的頻率影響無菌灌裝過程中無菌保證水平的重大變更需要進行培養(yǎng)基灌裝重大變更的判斷：灌裝層流改造膠塞進料裝置變更終端無菌過濾器改變位置滅菌程序變更目前五十一頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點培養(yǎng)基灌裝批量

培養(yǎng)基灌裝容器的數(shù)量應(yīng)當(dāng)足以保證評價的有效性。批量較小的產(chǎn)品，培養(yǎng)基灌裝的數(shù)量應(yīng)當(dāng)至少等于產(chǎn)品的批量批次量<5000瓶，全批量批次量>5000瓶，通常5000~10000瓶手工灌裝VS隔離器無菌生產(chǎn)工藝跨班次生產(chǎn)，大批量生產(chǎn)目前五十二頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點生產(chǎn)線運行速度高速運行比較適用于評估需要頻繁干擾操作的生產(chǎn)工藝或手工操作多的生產(chǎn)工藝低速運行則一般適用于評估無菌產(chǎn)品、容器/膠塞在無菌區(qū)暴露時間比較長的工藝目前五十三頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點灌裝速度、瓶子尺寸、灌裝量原則速度慢，產(chǎn)品暴露時間長；速度快，有時造成較多的干擾瓶子大（包括敞口大?。?，灌裝速度慢盡量按產(chǎn)品實際灌裝體積，如不可行，體積應(yīng)能充分接觸所有表面、并足夠支持微生物生長舉例：多規(guī)格的瓶子共線生產(chǎn)：最慢的速度，最大的瓶子規(guī)格;最小的瓶子規(guī)格，最快的速度單一規(guī)格的瓶子–正?；蚵月俣饶壳拔迨捻揬總數(shù)七十六頁\編于十九點55最長允許的灌裝時間（如考察操作人員疲勞操作風(fēng)險）有代表性的正常性操作活動的數(shù)量、種類和復(fù)雜性，非常規(guī)的干擾和各類突發(fā)事件（如維修、灌裝中斷等）凍干過程生產(chǎn)線速度和模具的規(guī)格（換模具）最差條件挑戰(zhàn)目前五十五頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點56人員數(shù)量及其活動，換班，休息，更衣等具有代表性數(shù)量的無菌操作（如添加容器，密封件，無菌原料成分）或者轉(zhuǎn)移無菌連接和拆卸取樣操作各個工藝步驟的最長持續(xù)時間挑戰(zhàn)：過濾，滅菌后物品的儲存期最差條件挑戰(zhàn)目前五十六頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點57應(yīng)當(dāng)根據(jù)產(chǎn)品的劑型、培養(yǎng)基的選擇性、澄清度、濃度和滅菌的適用性選擇培養(yǎng)基TSB或FTM（澄清）某些情況下應(yīng)該考慮使用厭氧性培養(yǎng)基應(yīng)該進行促生長實驗標(biāo)準(zhǔn)菌株環(huán)境分離菌支持革蘭氏陽性、革蘭氏陰性、酵母菌和霉菌的生長培養(yǎng)基選擇目前五十七頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點58先在20-25℃下培養(yǎng)7天（培養(yǎng)真菌）然后30-35℃下培養(yǎng)7天（培養(yǎng)細菌）確保其內(nèi)壁和瓶塞充分接觸培養(yǎng)基無密封缺陷的瓶均應(yīng)該培養(yǎng)，任何不作培養(yǎng)的瓶子都應(yīng)說明不作培養(yǎng)的原因如果有書面規(guī)程規(guī)定，灌裝過程由于進行干擾操作而丟棄的培養(yǎng)基可以不培養(yǎng)灌裝過程丟棄程序必須與實際生產(chǎn)一致培養(yǎng)及讀數(shù)目前五十八頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點59培養(yǎng)后進行促生長試驗設(shè)計密封性微生物挑戰(zhàn)試驗應(yīng)由有資質(zhì)的人員進行檢查（QC參與）要進行物料平衡計算培養(yǎng)及讀數(shù)過程的丟棄應(yīng)有很明確的理由（應(yīng)盡量避免）培養(yǎng)及讀數(shù)目前五十九頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點培養(yǎng)基灌裝的先決條件潔凈室/設(shè)備的驗證狀態(tài)確認經(jīng)過重大維修或變更后進行了生產(chǎn)線的運行確認或性能確認參與培養(yǎng)基灌裝的人員接受了培訓(xùn)無菌操作潔凈室行為培養(yǎng)基灌裝方案明文規(guī)定的工藝過程及最差條件目前六十頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點培養(yǎng)基灌裝方案設(shè)計分析工藝流程，確定風(fēng)險因素繪制流程圖通過分析確定可能造成產(chǎn)品污染的風(fēng)險因素

灌裝時間干擾活動（時間、次數(shù)、種類包括停機、維修、調(diào)整）凍干過程設(shè)備裝配（如灌裝前的裝機）人員數(shù)量及其活動無菌操作（如各種無菌部件操作、產(chǎn)品轉(zhuǎn)移）不同班次輪換，著裝更換生產(chǎn)中出現(xiàn)的無菌管道連接無菌樣品取樣灌裝速度重量檢查容器密閉性（大小、種類、與設(shè)備匹配程度）某些特殊操作（如進行清潔前的操作）目前六十一頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點灌裝過程流程圖灌裝部件裝配管道排液正式灌裝灌裝量檢查添加膠塞處理倒瓶人員進出班次輪換設(shè)置灌裝參數(shù)停機維修環(huán)境監(jiān)測收集轉(zhuǎn)移凍干壓塞暫存壓蓋人員操作人員操作時間時間風(fēng)險因素灌裝速度灌裝時間長短干擾操作及次數(shù)人員數(shù)量停機操作……轉(zhuǎn)移操作時間暫存位置時間目前六十二頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點干擾操作任何進入A級區(qū)的操作都為干擾操作，應(yīng)包括所有類型的干擾操作常規(guī)的（灌裝線裝配，稱量調(diào)節(jié)，加膠塞，處理倒瓶，取樣，環(huán)境監(jiān)測）非常規(guī)的（設(shè)備故障，灌裝線堵塞，軌道調(diào)節(jié)，拆卸/替換破損的部件）數(shù)量：干擾的次數(shù)應(yīng)該不少于正常生產(chǎn)時發(fā)生的次數(shù)目前六十三頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點人員人數(shù)：模擬無菌區(qū)可能容納最多的人數(shù)無菌裝機/A級區(qū)內(nèi)干擾模擬，上崗前權(quán)限控制活動：最多換班次數(shù)，不同時間段（日班和中夜班），進行正常操作頻率：無菌區(qū)工作人員至少每年參與一次成功的培養(yǎng)基灌裝目前六十四頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點環(huán)境監(jiān)控和微生物限度控制制定環(huán)境監(jiān)測計劃，綜合形成書面方案如何制定環(huán)境監(jiān)測計劃其他一些因素的考慮方案的批準(zhǔn)制定培養(yǎng)基灌裝過程的微生物負荷的監(jiān)控計劃,便于偏差調(diào)查目前六十五頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點66文件記錄：過程控制檢測和實驗室檢測結(jié)果環(huán)境和人員監(jiān)測結(jié)果設(shè)備功能（批報警記錄，過濾器完整性測試）人員干擾操作、偏差、中斷等--發(fā)生時間和持續(xù)時間培養(yǎng)基報廢記錄生產(chǎn)線清場記錄培養(yǎng)基灌裝過程記錄目前六十六頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點67QA觀察：整個培養(yǎng)基灌裝過程建議有QA部門全程觀察所有培養(yǎng)基應(yīng)按時間順序進行標(biāo)記，便于一旦有污染時追逐發(fā)生時間段灌裝過程任何的干擾行為，QA觀察員需要進行詳細記錄，以便識別可能的污染來源培養(yǎng)基灌裝過程記錄目前六十七頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點68無菌生產(chǎn)區(qū)域管道系統(tǒng)凍干機過程中的培養(yǎng)基泄漏培養(yǎng)基的撤出和報廢培養(yǎng)基灌裝過程/灌裝前不得故意設(shè)計不具代表性的大清場，消毒應(yīng)當(dāng)采取措施保證驗證不能對生產(chǎn)造成不良影響培養(yǎng)基灌裝結(jié)束后的清場和清洗目前六十八頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點培養(yǎng)基灌裝方案設(shè)計總結(jié)

設(shè)計的方案需要具有代表性建立書面的規(guī)程，SOP指定如何進行方案設(shè)計必要時設(shè)計多次培養(yǎng)基灌裝可以考慮穿插在生產(chǎn)過程中進行，挑戰(zhàn)整個生產(chǎn)時限目前六十九頁\總數(shù)七十六頁\編于十九點培養(yǎng)基灌裝的接受標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基模擬試驗的目標(biāo)是不零污染，應(yīng)當(dāng)遵循以下要求：灌裝數(shù)量少于5000支時，不得檢出污染品；2.灌裝數(shù)量在5000至10000支時：(1)有1支污染，需調(diào)查，可考慮重復(fù)試驗；(2)有2支污染，需調(diào)查后，進行再驗證。3.灌裝數(shù)量超過10000支時：(1)有1支污染，需調(diào)查；(2)有2支污染，需調(diào)查后，進行再驗證。4.發(fā)生任何微生物污染時，均應(yīng)進行調(diào)查