抗生素應(yīng)用專題知識講座

抗生素應(yīng)用專題知識講座抗生素應(yīng)用專題知識講座第1頁2一、劑量表示法1、單位（效價單位）⑴指定單位：人為指定(U)⑵活性質(zhì)量：1mg硫酸阿米卡星活性質(zhì)量阿米卡星585.6×1000硫酸阿米卡星781.75⑶多組分抗生素：749ug抗生素應(yīng)用專題知識講座第2頁3二、抗生素應(yīng)用1、醫(yī)療：感染、腫瘤、降血脂2、農(nóng)業(yè)：植物保護、除草、生長素3、畜牧業(yè)：感染、飼料添加劑4、食品保藏：保鮮、防腐5、工業(yè)：防霉、提升產(chǎn)量6、科研：標識、動物模型、抑菌抗生素應(yīng)用專題知識講座第3頁4(一)抗生素在醫(yī)療上應(yīng)用1控制細菌感染性疾?。杭膊〉玫娇刂扑劳雎氏陆?，人壽命延長。2抑制腫瘤生長：多柔比星，博來霉素，絲裂霉素3調(diào)整人體生理功效：洛伐他丁可降血脂。4器官移植：免疫抑制劑環(huán)孢素。5控制病毒型感染：核苷類，醌類及大環(huán)內(nèi)脂類?？股貞?yīng)用專題知識講座第4頁5(二)在農(nóng)業(yè)上應(yīng)用1用于植物保護：鏈霉素防治柑橘潰瘍病。2促進或抑制植物生長：赤霉素可做植物生長激素，選擇性除草作用有茴香霉素，東洋卡霉素?？股貞?yīng)用專題知識講座第5頁6(三)在畜牧業(yè)上應(yīng)用1用于禽畜感染性疾病控制：青霉素，鏈霉素，金霉素，土霉素，四環(huán)素，卡波霉素，多粘菌素等2用作飼料添加劑：可刺激禽畜生長如四環(huán)素與大環(huán)內(nèi)脂類等抗生素。為預(yù)防人畜交叉感染和耐藥性及殘留藥過高。禽用抗生素結(jié)構(gòu)與人用不一樣，作用機理相同。體內(nèi)不吸收，蛋，肉，奶內(nèi)無殘留。抗生素應(yīng)用專題知識講座第6頁7(四)在食品保藏中應(yīng)用用于肉，魚，蔬菜，水果等食品保鮮。用作保鮮劑與防腐劑條件為：

（1）非醫(yī)用抗生素

（2）易溶于水，對人體無毒

（3）不損害食品外觀與質(zhì)量?？股貞?yīng)用專題知識講座第7頁8(五)在工業(yè)上應(yīng)用

1工業(yè)制品防霉：預(yù)防紡織品，塑料，精密儀器，化裝品，圖書，藝術(shù)品等發(fā)霉變質(zhì)。

2提升特定發(fā)酵產(chǎn)品產(chǎn)量：向谷氨酸發(fā)酵液中，加入適量青霉素，可提升細菌細胞膜滲透性，有利于細胞內(nèi)谷氨酸滲出，提升谷氨酸發(fā)酵產(chǎn)酸水平。抗生素應(yīng)用專題知識講座第8頁9(六)在科學研究中應(yīng)用1用作生物化學與分子生物學研究主要工具：切斷RNA，DNA在特定階段合成。抑制特定酶系反應(yīng)等。2用于建立藥品篩選與評價模型：利用鏈佐星（鏈脲菌素）建立糖尿病動物試驗?zāi)Ｐ汀?其它試驗應(yīng)用：預(yù)防細胞，組織培養(yǎng)污染，用于動物精液，組織液等保留?？股貞?yīng)用專題知識講座第9頁10第四節(jié)抗生素工業(yè)生產(chǎn)工藝一、抗生素工業(yè)性質(zhì)：

1、理論產(chǎn)量難計算

2、生物學變量:菌種、條件

3、提取精制困難抗生素應(yīng)用專題知識講座第10頁11一抗生素工業(yè)生產(chǎn)及工藝1抗生素生產(chǎn)方法

2生物合成法生產(chǎn)抗生素工藝過程

3抗生素發(fā)酵生產(chǎn)特點抗生素應(yīng)用專題知識講座第11頁121抗生素生產(chǎn)方法（1）生物合成法（即微生物發(fā)酵法）（2）全化學合成法（即化學合成法）（3）半化學合成法（即半合成法）抗生素應(yīng)用專題知識講座第12頁13（1）生物合成法/微生物發(fā)酵法

利用抗生素產(chǎn)生菌，在一定條件（培養(yǎng)基、溫度、pH、通氣、攪拌等）下使之生長繁殖，并在代謝過程中產(chǎn)生抗生素。然后將抗生素從發(fā)酵液中提取、精制、最終取得抗生素成品?？股貞?yīng)用專題知識講座第13頁14

當前大多數(shù)抗生素品種，如青霉素、鏈霉素、卡那霉素等都采取生物合成法。其特點是成本較低、周期長、波動性較大等。

抗生素應(yīng)用專題知識講座第14頁15（2）全化學合成法/化學合成法

一些抗生素化學結(jié)構(gòu)已經(jīng)明確且結(jié)構(gòu)簡單時，可采取全化學方法進行合成制取抗生素。如氯霉素在1947年被發(fā)覺后，現(xiàn)已全化學合成取得成功。又如磷霉素，當前采取全化學合成法進行生產(chǎn)等?？股貞?yīng)用專題知識講座第15頁16（3）半化學合成法（即半合成法）

半合成法是利用化學方法改造生物合成抗生素，而取得性能良好新抗生素一個方法?？股貞?yīng)用專題知識講座第16頁17

普通分為兩個階段進行，第一階段是經(jīng)過生物合成法制取某種抗生素；第二階段經(jīng)過化學等方法改造原來化學結(jié)構(gòu)，從而取得一系列新抗生素，以到達擴充抗菌譜、提升療效、降低毒性副作用或填補其它缺點之目標?？股貞?yīng)用專題知識講座第17頁18半化學合成法-----舉例

比如生物合成法制得青霉素G鉀鹽，進行裂解反應(yīng)得到6－氨基青霉烷酸（6-APA），再用化學方法在母核6-APA6位碳原子位置上接上不一樣側(cè)鏈，即可得到一系列新型抗生素（即半合成青霉素）?？股貞?yīng)用專題知識講座第18頁19又如先制得頭孢菌素C，裂解反應(yīng)得7－氨基頭孢烯酸（7-ACA），再用化學方法在母核7-ACA第7位接上不一樣側(cè)鏈，即得一系列新型頭孢菌素（即半合成頭孢菌素）。

抗生素應(yīng)用專題知識講座第19頁202生物合成法生產(chǎn)抗生素工藝過程當代抗生素工業(yè)生產(chǎn)多采取生物合成法進行，其工藝過程大致相同，主要經(jīng)過以下過程來完成：生產(chǎn)菌種→孢子制備→種子制備→發(fā)酵→發(fā)酵液預(yù)處理及過濾→提取及精制→成品檢驗→成品包裝→出廠檢驗?？股貞?yīng)用專題知識講座第20頁21生產(chǎn)菌種用微生物發(fā)酵方法生產(chǎn)抗生素，首先要有一個性能良好菌種，從自然界分離到野生菌種因為生產(chǎn)能力低，往往不能滿足工業(yè)上需求。抗生素應(yīng)用專題知識講座第21頁22因為在正常生理條件下微生物代謝調(diào)整系統(tǒng)，趨向于快速生長和繁殖，不過生產(chǎn)菌種卻需要能夠大量積累所需代謝產(chǎn)物，為此常需采取各種辦法來打破微生物正常代謝，人為控制微生物代謝，從而大量積累所需代謝產(chǎn)物。所以工業(yè)上常見菌種都是經(jīng)過人工選育，具備工業(yè)生產(chǎn)要求?？股貞?yīng)用專題知識講座第22頁23性能優(yōu)良生產(chǎn)菌種應(yīng)具備條件生長繁殖快，發(fā)酵單位高；遺傳性能穩(wěn)定，在一定條件下保持持久、高產(chǎn)量抗生素生產(chǎn)能力；培養(yǎng)條件粗放，發(fā)酵過程易于控制；合成代謝副產(chǎn)物少，生產(chǎn)抗生素質(zhì)量好?？股貞?yīng)用專題知識講座第23頁24

孢子制備

生產(chǎn)用菌株須經(jīng)純化和生產(chǎn)能力檢驗，若符合要求，才能用來制備種子。制備孢子時，將保藏處于休眠狀態(tài)孢子，經(jīng)過嚴格無菌手續(xù)，將其接種到經(jīng)滅菌過固體斜面培養(yǎng)基上，在一定溫度下培養(yǎng)5-7日或7日以上，這么培養(yǎng)出來孢子數(shù)量還是有限?？股貞?yīng)用專題知識講座第24頁25為取得更多數(shù)量孢子供生產(chǎn)需要，必要時可深入用扁瓶在固體培養(yǎng)基(如小米、大米、玉米?；螓熎?上擴充培養(yǎng)。常采取較大表面積固體培養(yǎng)基進行擴充培養(yǎng)。培養(yǎng)時，需控制適宜濕度、溫度及通風量等條件。抗生素應(yīng)用專題知識講座第25頁26種子制備

其種子培養(yǎng)目標是使孢子發(fā)芽、繁殖以取得足夠數(shù)量菌絲，方便接種到發(fā)酵罐中。種子制備有是從搖瓶培養(yǎng)開始，再接入到種子罐進行逐層擴充培養(yǎng)；有直接將孢子接入種子罐后逐層放大培養(yǎng)?？股貞?yīng)用專題知識講座第26頁27搖瓶培養(yǎng)過程是否需要和種子擴充培養(yǎng)級數(shù)多少，決定于菌種性質(zhì)、生產(chǎn)規(guī)模大小和生產(chǎn)工藝特點。

普通情況下，種子制備是在種子罐中進行，擴充培養(yǎng)級數(shù)通常為二級?？股貞?yīng)用專題知識講座第27頁28先制備孢子懸浮液，經(jīng)過微孔差壓法或打開接種口在火焰保護下接種，將孢子懸浮液接入一級種子罐，也可采取菌絲接種，接種量普通相當于0.1%~2%（接種量％，系指種子罐內(nèi)培養(yǎng)基量而言）；從一級種子罐接入二級種子罐接種量普通為5%~20%。在培養(yǎng)過程中對菌絲形態(tài)和生化指標進行分析，確保種子質(zhì)量之后方可移種?？股貞?yīng)用專題知識講座第28頁29

發(fā)酵發(fā)酵過程目標是使微生物大量分泌抗生素。在發(fā)酵開始前，相關(guān)設(shè)備和培養(yǎng)基也必須先經(jīng)過滅菌后再接入種子。接種量普通為10%或10%以上，發(fā)酵期視抗生素品種和發(fā)酵工藝而定，在整個發(fā)酵過程中，需不停通無菌空氣和攪拌，以維持一定罐壓或溶氧?？股貞?yīng)用專題知識講座第29頁30在罐夾層或蛇管中需通冷卻水以維持一定罐溫。另外，還要加入消沫劑以控制泡沫，必要時還加入酸、堿以調(diào)整發(fā)酵液pH。對有品種在發(fā)酵過程中還需加入葡萄糖、銨鹽或前體，以促進抗生素產(chǎn)生?？股貞?yīng)用專題知識講座第30頁31對其中一些主要發(fā)酵參數(shù)能夠用電子計算機進行反饋控制。在發(fā)酵期間每隔一定時間應(yīng)取樣進行生化分析、鏡檢和無菌試驗。分析或控制參數(shù)有菌絲形態(tài)和濃度、殘?zhí)橇?、氨基氮、抗生素含量、溶解氧、pH、通氣量、攪拌轉(zhuǎn)速和液面控制等。其中有些項目能夠經(jīng)過在線控制?？股貞?yīng)用專題知識講座第31頁32發(fā)酵過程中主要控制罐溫、通氣量及攪拌轉(zhuǎn)速、補料、加酸堿、消泡劑、一些專用前體、促進劑或抑制劑用量?？股貞?yīng)用專題知識講座第32頁33抗生素應(yīng)用專題知識講座第33頁34發(fā)酵液預(yù)處理及過濾發(fā)酵液過濾和預(yù)處理其目標不但在于分離菌絲，還需將一些雜質(zhì)除去。盡管對多數(shù)抗生素品種在生產(chǎn)過程中，當發(fā)酵結(jié)束時，抗生素存在于發(fā)酵液中，但也有個別品種當發(fā)酵結(jié)束時抗生素大量殘余在菌絲之中，在此情況下，發(fā)酵液預(yù)處理應(yīng)該包含使抗生素從菌絲中析出，使其轉(zhuǎn)入發(fā)酵液?？股貞?yīng)用專題知識講座第34頁35（1）發(fā)酵液預(yù)處理發(fā)酵液中雜質(zhì)如高價無機離子(Ca+2、Mg+2、Fe+3)和蛋白質(zhì)在離子交換過程中對提煉影響甚大，不利于樹脂反抗生素吸附。如用溶媒萃取法提煉時，蛋白質(zhì)存在會產(chǎn)出乳化，使溶媒和水相分層困難。對高價離子去除，可采取草酸或磷酸。如加草酸則它與鈣離子生成草酸鈣，還能促使蛋白質(zhì)凝固以提升發(fā)酵濾液質(zhì)量。

抗生素應(yīng)用專題知識講座第35頁36

如加磷酸(或磷酸鹽)，則既能降低鈣離子濃度，也易于去除鎂離子。如加黃血鹽及硫酸鋅，則前者有利于去除鐵離子，后者有利于凝固蛋白質(zhì)。另外，這二者還有協(xié)同作用。它們所產(chǎn)生復(fù)鹽對蛋白質(zhì)有吸附作用。2K4Fe(CN)6+3ZnSO4→K2Zn3[Fe(CN)6]2↓+3K2SO4

抗生素應(yīng)用專題知識講座第36頁37對于蛋白質(zhì)，還可利用其在等電點時凝聚特點而將其去除（法1）。蛋白質(zhì)普通以膠體狀態(tài)存在于發(fā)酵液中，膠體粒子穩(wěn)定性和其所帶電荷相關(guān)。它屬于兩性物質(zhì)，在酸性溶液中帶正電電荷，在堿性溶液中帶負電荷，而在某一pH下，凈電荷為零，溶解度最小，稱為等電點；因其羧基電離度比氨基大，故很多蛋白質(zhì)等電點在酸性(pH4.0~5.5)范圍內(nèi)。抗生素應(yīng)用專題知識講座第37頁38一些對熱穩(wěn)定抗生素發(fā)酵液還可用加熱法（法2）。使蛋白質(zhì)變性而降低其溶解度。蛋白質(zhì)從有規(guī)律排列變成不規(guī)則結(jié)構(gòu)過程稱為變性。加熱還能使發(fā)酵液粘度降低、加緊濾速。比如在鏈霉素生產(chǎn)中就可用加入草酸或磷酸將發(fā)酵液調(diào)至pH3.0左右，加熱至70℃，維持約半小時，用此方法來去除蛋白質(zhì)，這么濾速可增大10~100倍。濾液粘度可降低至1/6。如抗生素對熱不穩(wěn)定，則不應(yīng)采取此法?？股貞?yīng)用專題知識講座第38頁39為了更有效地去除發(fā)酵液中蛋白質(zhì)，還能夠加入絮凝劑（法3）。它是一個能溶于水高分子化合物。含有很多離子化基團，如－NH2—COOH，—OH等。如上所述，膠體粒子穩(wěn)定性和它所帶電荷相關(guān)。因為同性電荷間靜電斥力而使膠體粒子不發(fā)生凝聚。絮凝劑分子中電荷密度很高，它加入使膠體溶液電荷性質(zhì)改變從而使溶液中蛋白質(zhì)絮凝?？股貞?yīng)用專題知識講座第39頁40對絮凝劑化學結(jié)構(gòu)普通有以下幾個要求：1)其分子中必須有相當多活性基團，能和懸浮顆粒表面相結(jié)合。2)必須含有長鏈線性結(jié)構(gòu)，但其相對分子質(zhì)量(分子量)不能超出一定程度，以使其有很好溶解度。在發(fā)酵濾液中多數(shù)膠體粒子帶負電荷，因而用陽離子絮凝劑功效較高。比如可用含有季胺基團聚苯乙烯衍生物，分子量在26000~55000范圍內(nèi)。加入絮凝劑后析出雜質(zhì)再經(jīng)過濾除去，以利于以后提取?？股貞?yīng)用專題知識講座第40頁41（2）發(fā)酵液過濾發(fā)酵液為非牛頓型液體、極難過濾。過濾難易與發(fā)酵培養(yǎng)基和工藝條件，以及是否染菌等原因相關(guān)。過濾如用板框壓濾則勞動強度大，影響衛(wèi)生，菌絲流入下水道時還影響污水處理。故以選取鼓式真空過濾機為宜，并在必要時在轉(zhuǎn)鼓表層涂以助濾劑硅藻土。當轉(zhuǎn)鼓旋轉(zhuǎn)時，以刮刀將助濾劑連同菌體薄薄刮去一層，以使過濾面不停更新。

抗生素應(yīng)用專題知識講座第41頁42另一個設(shè)備是自動出渣離心機，但所排出菌絲濾渣中尚含有較大量發(fā)酵液，所以如要提升過濾收率，可將此濾渣以水洗后再次用一樣型號離心機分離。第一次和第二次離心分離液體合并后進入下一工序?？股貞?yīng)用專題知識講座第42頁43

再一個設(shè)備稱傾析器(Decanter)。它既可用于固、液相分離，也可用于固相、有機溶媒相和水相三者混合和分離，從而將過濾菌絲和溶媒萃取這兩步合并在這一設(shè)備中完成。這就簡化了發(fā)酵液后處理工藝，提升了收率，并縮短了生產(chǎn)周期，也節(jié)約了勞動力、廠房和成本?？股貞?yīng)用專題知識講座第43頁44

抗生素提取提取目標是在于從發(fā)酵液中制取高純度符合藥典要求抗生素成品。在發(fā)酵濾液中抗生素濃度很低，而雜質(zhì)濃度相對地較高。雜質(zhì)中有沒有機鹽、殘?zhí)?、脂肪、各種蛋白質(zhì)及其降解物、色素、熱原質(zhì)、或有毒性物質(zhì)等。另外，還可能有一些雜質(zhì)其性質(zhì)和抗生素很相同，這就增加了提取和精制困難?？股貞?yīng)用專題知識講座第44頁45因為多數(shù)抗生素不很穩(wěn)定，且發(fā)酵液易被污染，故整個提取過程要求：1)時間短；2)溫度低；3)pH宜選擇反抗生素較穩(wěn)定范圍；4)勤清洗消毒(包含廠房、設(shè)備、管路并注意毀滅死角)。常見抗生素提取方法包含有溶媒萃取法、離子交換法和沉淀法等?？股貞?yīng)用專題知識講座第45頁46

(1)溶媒萃取法這是利用抗生素在不一樣pH條件下以不一樣化學狀態(tài)(游離酸、堿或成鹽)存在時，在水及與水互不相溶溶媒中其溶解度不一樣特征，使抗生素從一個液相(如發(fā)酵濾液)轉(zhuǎn)移到另一個液相(如有機溶媒)中去，以到達濃縮和提純目標。利用此原理就可借助于調(diào)整pH方法使抗生素從一個液相中被提取到另一液相中去?？股貞?yīng)用專題知識講座第46頁47所選取溶媒與水應(yīng)是互不相溶或僅很小個別互溶，同時所選溶媒在一定pH下對于抗生素應(yīng)有較大溶解度和選擇性，方能用較少許溶媒使提取完全，并在一定程度上分離掉雜質(zhì)。當前一些主要抗生素，如青霉素、紅霉素和林可霉素等均采取此法進行提取?？股貞?yīng)用專題知識講座第47頁48(2)離子交換法這是利用一些抗生素能解離為陽離子或陰離子特征，使其與離子交換樹脂進行交換，將抗生素吸附在樹脂上，然后再以適當條件將抗生素從樹脂上洗脫下來，以到達濃縮和提純目標。應(yīng)選取反抗生素有特殊選擇性樹脂，使抗生素純度經(jīng)過離子交換有較大提升。因為此法含有成本低、設(shè)備簡單、操作方便，已成為提取抗生素主要方法之一。抗生素應(yīng)用專題知識講座第48頁49如鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、多粘菌素等均可采取離子交換法。此法也有其缺點，如生產(chǎn)周期長，對一些產(chǎn)品質(zhì)量不夠理想。另外，在生產(chǎn)過程中pH改變較大，故不適合用于在pH大幅度改變時穩(wěn)定性較差抗生素等?？股貞?yīng)用專題知識講座第49頁50(3)其它提取方法如直接沉淀法就是提取抗生素方法中最簡單一個。比如四環(huán)類抗生素提取即可用此法。發(fā)酵液在用草酸酸化后，加黃血鹽、硫酸鋅，過濾后得濾液，然后以脫色樹脂脫色后，直接將其pH調(diào)至等電點后使其游離堿折出。必要時將此堿轉(zhuǎn)化成鹽酸鹽?？股貞?yīng)用專題知識講座第50頁51

抗生素精制

產(chǎn)品精制、烘干和包裝階段要符合“藥品生產(chǎn)管理規(guī)范”(GMP)要求。比如其中要求產(chǎn)品質(zhì)量檢驗應(yīng)合格、技術(shù)文件應(yīng)齊全、生產(chǎn)和檢驗人員應(yīng)含有一定素質(zhì)；設(shè)備材質(zhì)不應(yīng)能與藥品起反應(yīng)、并易清洗，空調(diào)應(yīng)按要求等級要求，各項原始統(tǒng)計、批報和留樣應(yīng)妥為保留，對注射品應(yīng)嚴格按無菌操作要求等?？股貞?yīng)用專題知識講座第51頁52A脫色和去熱原質(zhì)脫色和去熱原質(zhì)是精制注射用抗生素中不可缺乏一步。它關(guān)系到成品色級及熱原試驗等質(zhì)量指標。色素往往是在發(fā)酵過程中所產(chǎn)生代謝產(chǎn)物，它與菌種和發(fā)酵條件相關(guān)。熱原質(zhì)是在生產(chǎn)過程中因為被污染后由雜菌所產(chǎn)生一個內(nèi)毒素。各種雜菌所產(chǎn)生熱原反應(yīng)有所不一樣。革蘭氏陰性菌產(chǎn)生熱原反應(yīng)普通比革蘭氏陽性菌為強?？股貞?yīng)用專題知識講座第52頁53熱原注入體內(nèi)引發(fā)惡寒高熱，嚴重引發(fā)休克。它是多糖磷類脂質(zhì)和蛋白質(zhì)結(jié)合體，為大分子有機物質(zhì)，能溶于水。在280℃加熱4h它能被破壞90%；180~200℃加熱半小時或150℃加熱2h能被徹底破壞。它亦能被強酸、強堿、氧化劑(如高錳酸酸鉀)等破壞。它能經(jīng)過普通濾器，但能被活性炭、石棉濾材等所吸附。

抗生素應(yīng)用專題知識講座第53頁54生產(chǎn)中常見活性炭脫色去除熱原，但須注意脫色時pH，溫度、炭用量及脫色時間等原因，還應(yīng)考慮它反抗生素吸附問題，不然會影響抗生素產(chǎn)量；另外，也可用脫色樹脂去除色素(如酚醛樹脂，即122樹脂)。對一些產(chǎn)品可用超微過濾方法去除熱原，還應(yīng)加強在生產(chǎn)過程中環(huán)境衛(wèi)生以預(yù)防熱原?？股貞?yīng)用專題知識講座第54頁55B結(jié)晶和重結(jié)晶常見幾個結(jié)晶方法以下：

(1)改變溫度結(jié)晶利用抗生素在溶劑中溶解度隨溫度改變而顯著改變這一特征來進行結(jié)晶。比如制霉菌素濃縮液在5℃條件下保持4h~6h后即結(jié)晶完全。分離掉母液、洗滌、干燥、磨粉后即得到制霉菌素成品?？股貞?yīng)用專題知識講座第55頁56

(2)利用等電點結(jié)晶當將某一抗生素溶液pH調(diào)到等電點時,它在水溶液中溶解度最小，則沉淀析出。如6-氨基青霉烷酸(6-APA)水溶液當pH調(diào)至等電點(4.3)時，6-APA即從水溶液中沉淀析出。

(3)加成鹽劑結(jié)晶在抗生素溶液中加成鹽劑(酸、堿或鹽類)使抗生素以鹽形式從溶液中沉淀結(jié)晶。比如在青霉素G或頭孢菌素C濃縮液中加入醋酸鉀、即生成鉀鹽析出。

抗生素應(yīng)用專題知識講座第56頁57

(4)加入不一樣溶劑結(jié)晶利用抗生素在不一樣溶劑中溶解度大小不一樣，在含抗生素某一溶劑中加入另一溶劑使抗生素析出。如巴龍霉素含有易溶于水而不溶于乙醇性質(zhì)。在其濃縮液中加入10~12倍體積95%乙醇，并調(diào)pH至7.2~7.3使其結(jié)晶析出。重結(jié)晶是深入精制以獲高純度抗生素有效方法．

抗生素應(yīng)用專題知識講座第57頁58C其它精制方法其它精制方法包含：

(1)共沸蒸餾法如青霉素可用丁醇或醋酸丁酯以共沸蒸

餾進行精制。

(2)柱層析法如絲裂霉素A、B、C三種組分能夠經(jīng)過氧

化鋁層析來分離。

(3)鹽析法如在頭孢噻吩水溶液中加入氯化鈉使其飽

和，其粗晶即被析出后深入精制?？股貞?yīng)用專題知識講座第58頁59

(4)中間鹽轉(zhuǎn)移法如四環(huán)素堿與尿素能形成復(fù)鹽沉淀后再將其分解，使四環(huán)素堿析出。用此法以除去4-差向四環(huán)素等異物，以提升四環(huán)素質(zhì)量和純度，又如紅霉素能與草酸或乳酸鹽或復(fù)鹽沉淀等。

(5)分子篩如青霉素粗品中常含聚合物等高分子雜質(zhì)，可用葡聚糖凝膠G-25(粒度20~80μm）將雜質(zhì)分離掉。此法僅用于小試驗。抗生素應(yīng)用專題知識講座第59頁60成品檢驗為了確保藥品質(zhì)量，用藥安全，反抗生素各種成品都必須進行檢驗。常規(guī)檢驗包含性狀及判別試驗、安全試驗、降壓試驗、熱原試驗、無菌試驗、酸堿度測定、效價測定、水分測定、混濁度測定、色澤顆粒細度測定等等。抗生素應(yīng)用專題知識講座第60頁61成品分包裝抗生素原料藥除進行成品大包裝外，還須由制劑廠（或制劑車間）再進行分包裝，假如是注射用抗生素，尚須在無菌條件下，進行小瓶分裝以供臨床應(yīng)用。抗生素應(yīng)用專題知識講座第61頁62

3抗生素發(fā)酵生產(chǎn)特征（1）抗生素發(fā)酵生產(chǎn)特點（2）抗生素發(fā)酵生產(chǎn)特殊問題抗生素應(yīng)用專題知識講座第62頁63（1）抗生素發(fā)酵生產(chǎn)特點菌體生長與產(chǎn)物形成不平行性理論產(chǎn)量難以用物料平衡來計算穩(wěn)定性差

抗生素應(yīng)用專題知識講座第63頁64菌體生長與產(chǎn)物形成不平行性（1）抗生素是其生產(chǎn)菌次級代謝產(chǎn)物，而不是初級代謝產(chǎn)物，所以抗生素并不是在生產(chǎn)菌體生長繁殖時大量形成，而是在菌體生長繁殖至一定階段后才大量合成。所以抗生素發(fā)酵步驟分為菌絲增加繁殖過程和抗生素分泌合成過程?？股貞?yīng)用專題知識講座第64頁65在發(fā)酵中，菌絲太少，當然抗生素產(chǎn)量低，不過菌絲生長繁殖太旺盛，菌體濃度過濃，抗生素產(chǎn)量并不是對應(yīng)最高，即生長與產(chǎn)物形成不平行性。要提升抗生素產(chǎn)量，普通都是讓菌體在發(fā)酵早期快速生長、繁殖，到達菌體濃度后，想盡方法延長第二階段時間，即抗生素合成份泌階段時間，合成份泌更多抗生素?？股貞?yīng)用專題知識講座第65頁66理論產(chǎn)量難以用物料平衡來計算（2）

普通工業(yè)發(fā)酵中，產(chǎn)物多為微生物利用碳源物質(zhì)后代謝產(chǎn)物，其理論產(chǎn)量能夠從物料平衡關(guān)系中計算出來?；瘜W合成藥品生產(chǎn)中，其理論產(chǎn)量更能夠經(jīng)過參加反應(yīng)物濃度消耗與生成產(chǎn)物濃度增加平衡中計算。抗生素應(yīng)用專題知識講座第66頁67不過抗生素是產(chǎn)生菌次級代謝產(chǎn)物。當前對微生物次級代謝過程和次級代謝改變了解不完全，故抗生素理論產(chǎn)量難以用物料平衡關(guān)系來計算?，F(xiàn)在生產(chǎn)中發(fā)酵前反抗生素理論產(chǎn)量預(yù)測都是靠經(jīng)驗，依據(jù)以前生產(chǎn)情況作出來?？股貞?yīng)用專題知識講座第67頁68穩(wěn)定性差（3）

因為生產(chǎn)菌種變異退化，發(fā)酵所用培養(yǎng)基成份以及原材料質(zhì)量，中間代謝控制，