槐耳抗癌機(jī)制研究進(jìn)展

槐耳抗癌機(jī)制研究進(jìn)展

2內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬人民醫(yī)院（內(nèi)蒙古自治區(qū)腫瘤醫(yī)院）乳腺外科，呼和浩特

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3內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬人民醫(yī)院（內(nèi)蒙古自治區(qū)腫瘤醫(yī)院）乳腺外科，呼和浩特

010020Summary傳統(tǒng)中草藥在抗腫瘤治療中均具有靶點(diǎn)多、副作用小、療效好等特點(diǎn)。中藥方劑、中成藥、單味中藥和中藥單體化合物均表現(xiàn)出良好的抗腫瘤作用?；倍趪?guó)內(nèi)屬于臨床應(yīng)用較為成熟的中草藥，并且在臨床治療各類癌癥中均療效顯著。通過較多研究發(fā)現(xiàn)，槐耳的抗腫瘤作用主要可以分為對(duì)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生直接抑制作用、通過免疫系統(tǒng)間接發(fā)揮其抗腫瘤作用。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)證實(shí)，槐耳可以通過抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、干擾腫瘤血管生成等多種信號(hào)通路發(fā)揮抗癌作用。本文就槐耳的抗腫瘤作用機(jī)制及臨床應(yīng)用進(jìn)行談要和總結(jié)。前言全世界約五分之一的癌癥病例在中國(guó)。目前抗癌治療的療效均有所提高，但是抗癌治療所產(chǎn)生的副作用仍是一大困擾，可能會(huì)增加社會(huì)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，影響到抗癌治療患者的身心健康[1]。近年來(lái)，越來(lái)越多的研究人員關(guān)注到中醫(yī)藥的抗腫瘤作用。中藥屬于復(fù)雜的天然草藥，具有靶點(diǎn)多、副作用小、療效顯著等特點(diǎn)[2]。在中藥中含有許多抗病毒的活性化合物。有研究表明中醫(yī)聯(lián)合療法優(yōu)于單一的常規(guī)治療?；倍鳛橹兴帒?yīng)用至今已有1600年的歷史。1992年，槐耳顆粒被中國(guó)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)用于癌癥治療。有研究人員使用不同的溶劑提取槐耳，其中槐耳正丁醇提取物(Huaiern-butanolextractHBE)的抗癌活性最強(qiáng)?；倍挠行Щ钚猿煞质堑鞍锥嗵荹3]，其中多糖占41.53%，氨基酸占12.93%，水占8.72%。由于野生槐耳稀缺，槐耳的價(jià)格較為昂貴。研究人員對(duì)天然槐耳和人工養(yǎng)殖槐耳的代謝組學(xué)差異進(jìn)行研究后發(fā)現(xiàn)，由于化學(xué)成分的差異，天然槐耳的抗癌活性較人工養(yǎng)殖槐耳更突出[5]?；倍钤绨l(fā)表，稱可以治愈結(jié)腸癌風(fēng)毒。此外，大量研究表明，槐耳對(duì)于肝癌，乳腺癌，卵巢癌，前列腺癌等多種癌癥以及一些非實(shí)體腫瘤，如白血病等均有較好的療效?；倍鷧⑴c多種抗癌途徑，包括抑制腫瘤細(xì)胞增殖、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡、免疫調(diào)節(jié)作用、逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞耐藥性、抗腫瘤血管生成和誘導(dǎo)自噬[4]。本文將對(duì)槐耳的這些抗癌機(jī)制及臨床應(yīng)用研究進(jìn)展做一總結(jié)。1抗癌機(jī)制1.1誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡

細(xì)胞凋亡時(shí)可以表現(xiàn)為細(xì)胞腫脹、破裂、喪失完整細(xì)胞形態(tài)。越來(lái)越多地證據(jù)表明，槐耳具有抑制腫瘤細(xì)胞增殖的作用，可以導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯，并且誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡?；倍崛∥锟梢哉T導(dǎo)細(xì)胞凋亡，使細(xì)胞周期在G0/G1期發(fā)生停滯，證實(shí)槐耳的抗腫瘤作用可能是由細(xì)胞死亡受體通路和線粒體通路共同作用?；倍崛∥锾幚砣烁文讣?xì)胞瘤細(xì)胞，腫瘤細(xì)胞在S期發(fā)生阻滯，腫瘤細(xì)胞存活率顯著降低，并通過上調(diào)cyclinD1、cyclinD3表達(dá)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。[6]對(duì)于不能手術(shù)的肝細(xì)胞癌患者，首選治療方式就是化療，但由于化療藥物的耐藥性常會(huì)影響到治療效果，奧沙利鉑作為治療肝癌的關(guān)鍵化療藥物，其耐藥性對(duì)于化療治療效果的耐藥性成為一大困擾。研究人員將奧沙利鉑處理過的肝癌細(xì)胞Bel-7404和SMMC-7721進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞中的富含半胱氨酸61(Cysteine-rich61Cyr61)和相關(guān)蛋白(Yes-associatedproteinYAP)表達(dá)升高，奧沙利鉑主要時(shí)通過抑制YAP表達(dá)從而誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。通過一系列實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)經(jīng)槐耳處理過的肝癌細(xì)胞同樣可以抑制YAP表達(dá)，將兩種藥物聯(lián)合應(yīng)用時(shí)可以預(yù)防由于YAP過表達(dá)而導(dǎo)致奧沙利鉑化療效果降低[7]。在腫瘤細(xì)胞的發(fā)展進(jìn)程中，細(xì)胞得氧化應(yīng)激也會(huì)影響到其增殖，在治療腫瘤得過程中可以通過增加細(xì)胞氧化應(yīng)激水平達(dá)到抑制腫瘤細(xì)胞得作用。有研究證實(shí)，使用槐耳處理膽管癌細(xì)胞，槐耳可以通過降低TP73-AS1通路表達(dá)并且刺激腫瘤產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。[8]1.2抑制腫瘤細(xì)胞增殖在腫瘤發(fā)展過程中PI3K/Akt/mTOR通路起到關(guān)鍵作用，可以通過抑制該信號(hào)通路發(fā)揮抗腫瘤作用。腫瘤細(xì)胞常通過上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化而發(fā)生惡化。經(jīng)槐耳處理過的人腎癌786-O細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變并且隨著時(shí)間延長(zhǎng)，細(xì)胞的活力也得到抑制?；倍梢酝ㄟ^抑制PI3K/AKT/Mtor/P70S6K/4EBP1信號(hào)通路達(dá)到抗腫瘤作用。并且槐耳作用細(xì)胞時(shí)可以通過減低Twist的表達(dá)逆轉(zhuǎn)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EpithelialmesenchymaltransitionEMT)。[9]使用槐耳處理過的人類永久表皮化生細(xì)胞(Hacatcells)，Hacat細(xì)胞數(shù)量顯著減少細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變，在細(xì)胞周期G1時(shí)抑制顯著。[10]在肝細(xì)胞癌中YAP1表達(dá)升高會(huì)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖。使用槐耳處理肝癌細(xì)胞Bel-7404、Bel-7402、SMMC-7721，發(fā)現(xiàn)槐耳可以通過降低增殖細(xì)胞核抗原和核增殖相關(guān)抗原Ki-67與細(xì)胞周期蛋白D1抑制腫瘤細(xì)胞增殖，并且可以降低YAP1表達(dá)到發(fā)揮抑制作用。[11]1.3抑制腫瘤血管生成有2152肝細(xì)胞癌患者參與研究，傳統(tǒng)中草藥結(jié)合全身治療(SystemictherapyST)在臨床應(yīng)用和副作用方面進(jìn)行分析，結(jié)論表明槐耳顆粒是降低血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子藥物的最佳選擇。[12]腫瘤轉(zhuǎn)移時(shí)惡行腫瘤發(fā)展的重要指標(biāo)，抑制腫瘤轉(zhuǎn)移可以抑制腫瘤細(xì)胞向身體其他部位轉(zhuǎn)移，從而延緩腫瘤惡化。有研究證實(shí)，肺轉(zhuǎn)移肝細(xì)胞癌患者經(jīng)藥物洗脫微球動(dòng)脈化療栓塞術(shù)(Drug-elutingbeadstransarterialchemoembolizationDEB-TACE)后聯(lián)合服用槐耳顆粒，經(jīng)長(zhǎng)期隨訪發(fā)現(xiàn)腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和侵犯血管癥狀未復(fù)發(fā)。說(shuō)明槐耳在腫瘤聯(lián)合治療中所發(fā)揮的抗腫瘤作用是有效的。[13]槐耳對(duì)于乳腺癌細(xì)胞具有多靶點(diǎn)的抑制作用。一項(xiàng)深入研究表明，槐耳顆?？捎糜谡{(diào)節(jié)miRNAs，實(shí)現(xiàn)靶基因沉默。有研究使用微陣列技術(shù)檢測(cè)經(jīng)槐耳處理過得乳腺癌細(xì)胞的差異基因，在乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞中，槐耳可調(diào)控的基因多達(dá)387個(gè)，其中包括細(xì)胞增殖、凋亡、腫瘤轉(zhuǎn)移和血管生成的相關(guān)基因。p53屬于腫瘤抑癌基因的一種，不僅會(huì)干擾細(xì)胞周期停滯，還會(huì)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。[14]1.4抗腫瘤生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移研究人員使用斑馬魚胃癌模型，對(duì)槐耳是否可以影響腫瘤轉(zhuǎn)移進(jìn)行一系列實(shí)驗(yàn)，在機(jī)體發(fā)生轉(zhuǎn)移的腫瘤多與腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial–mesenchymaltransitionEMT)密不可分，Twist在多數(shù)胃癌轉(zhuǎn)移患者均為高表達(dá)。經(jīng)槐耳處理過的腫瘤細(xì)胞可以通過降低Twist表達(dá)調(diào)節(jié)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化標(biāo)志物含量顯著降低。[15]癌癥干細(xì)胞可能也和癌癥轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)有密切關(guān)系。有研究表明，槐耳可以抑制三陰性乳腺癌的腫瘤干細(xì)胞。通過抑制ERα-36介導(dǎo)的AKT/GSK3β-Catenin抑制腫瘤干細(xì)胞。[16]有研究對(duì)槐耳在胃癌細(xì)胞中是否具有抗腫瘤特性進(jìn)行了研究，建立動(dòng)物胃癌模型，使用槐耳進(jìn)行治療后，腫瘤體積與空白對(duì)照腫瘤體積相比縮小了52.92%，證明槐耳能有效抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。[17]1．5抗腫瘤免疫應(yīng)答有研究表明，槐耳可以通過調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能實(shí)現(xiàn)其抗腫瘤作用。研究人員使用乳腺癌4T1細(xì)胞建模進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，得出結(jié)論，槐耳通過抑制4T1腫瘤細(xì)胞使腫瘤細(xì)胞中CD4+T細(xì)胞、成熟樹突狀細(xì)胞明顯增多。[18]在免疫系統(tǒng)中具有關(guān)鍵作用的就是巨噬細(xì)胞，巨噬細(xì)胞可以釋放不同的細(xì)胞因子，例如一氧化氮、腫瘤壞死因子、白介素等，這些細(xì)胞因子共同組成抵抗腫瘤的關(guān)鍵。多數(shù)情況下腫瘤相關(guān)的巨噬細(xì)胞(Tumor-associatedmacrophagesTAMs)會(huì)抑制腫瘤細(xì)胞，但是巨噬細(xì)胞分泌的個(gè)別因子也會(huì)刺激腫瘤生長(zhǎng)、腫瘤血管生成。在腫瘤相關(guān)的巨噬細(xì)胞中M2型巨噬細(xì)胞較多。有研究人員通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)槐耳處理后的乳腺癌細(xì)胞中腫瘤相關(guān)的巨噬細(xì)胞變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明槐耳可以通過降低M2極化增強(qiáng)RAW2647細(xì)胞的吞噬能力從而調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的作用。[19]趨化因子在機(jī)體免疫調(diào)節(jié)中屬于特殊的小分子蛋白質(zhì)，可以通過調(diào)節(jié)白細(xì)胞發(fā)揮作用。在癌癥機(jī)制研究中趨化因子達(dá)菲抗原受體(DuffyantigenreceptorforchemokinesDARC)起到負(fù)調(diào)控的作用。研究人員使用乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7細(xì)胞就槐耳是否影響DARC進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。經(jīng)槐耳處理過的乳腺癌細(xì)胞其DARC表達(dá)顯著增高，并且在乳腺癌MCF-7細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)槐耳可以使DARC配體表達(dá)水平降低。[20]1.6誘導(dǎo)鐵死亡鐵死亡是一種與鐵離子相關(guān)引起的細(xì)胞死亡，與其他形式的細(xì)胞凋亡、自噬等均不相同。是由脂質(zhì)氫過氧化物產(chǎn)生的鐵依賴性積累驅(qū)動(dòng)的程序性細(xì)胞死亡。谷胱甘肽-谷胱甘苷過氧化物酶4(Glutathione-glutathioneperoxidase4GPX4)途徑和NADPH鐵細(xì)胞凋亡抑制蛋白1-CoQ10(NADPH-ferroptosissuppressorprotein1FSP1-CoQ10)途徑是調(diào)節(jié)鐵細(xì)胞凋亡的主要途徑。[21]研究人員就槐耳是否會(huì)導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞鐵死亡進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。經(jīng)槐耳處理過的胰腺癌細(xì)胞，在細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)大量活性氧(ReactiveoxygenspeciesROS)，并且發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的線粒體和細(xì)胞膜被破壞，表明槐耳可以通過細(xì)胞自噬誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生鐵死亡。[22]2臨床應(yīng)用有研究人員篩選了284例乳腺癌患者對(duì)槐耳顆粒是否有療效進(jìn)行了長(zhǎng)期回訪，最終評(píng)價(jià)指標(biāo)中以無(wú)病生存期(Disease-freesurvivalDFS)為主。將患者分為服用槐耳顆粒和未服用兩組，結(jié)果表明服用槐耳顆粒的乳腺癌患者的DFS評(píng)分更優(yōu)。[23]在聯(lián)合用藥研究方面再一次證實(shí)了槐耳的抗腫瘤作用。紫杉醇屬于常用抗腫瘤藥物，作為化療藥物其耐藥性受到限制，從而會(huì)影響患者治療和預(yù)后?；倍哂械投拘裕透弊饔矛F(xiàn)廣泛應(yīng)用于臨床抗腫瘤。有研究人員將紫杉醇聯(lián)合槐耳對(duì)其抗腫瘤機(jī)制進(jìn)行研究，使用乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231作為研究對(duì)象，經(jīng)過一系列實(shí)驗(yàn)得出結(jié)論，槐耳可以降低腫瘤細(xì)胞p65和c-Met的表達(dá)提高I-B的表達(dá)，紫杉醇則相反。使用槐耳聯(lián)合紫杉醇對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用更加明顯。[24]乳腺癌的常規(guī)治療方式包括手術(shù)、激素治療、放化療和靶向用藥。放射治療在局部區(qū)域治療方面效果較好，但時(shí)常會(huì)因?yàn)閭€(gè)別腫瘤細(xì)胞的抗輻射性受到影響。因此，需要合適的放射增敏藥物成為重中之重。鑒于槐耳的抗腫瘤機(jī)制，有研究人員對(duì)槐耳是否作為放射增敏劑進(jìn)行了研究，研究人員利用轉(zhuǎn)錄芯片分析發(fā)現(xiàn)經(jīng)槐耳處理的腫瘤細(xì)胞-H2AX蛋白病灶放療后作用持續(xù)時(shí)間延長(zhǎng)，并且槐耳可以下調(diào)RAD51。證明槐耳增強(qiáng)乳腺癌細(xì)胞的放射增敏性是通過調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期和DNA修復(fù)途徑實(shí)現(xiàn)的。[25]肝細(xì)胞癌治療中肝移植可以增加患者生存時(shí)間，但是肝移植后可能發(fā)生的肝細(xì)胞癌復(fù)發(fā)成為一大困擾。研究人員選擇了36名肝移植術(shù)后患者，分為兩組，一組是以西羅莫司為主的胸腺蛋白酶聯(lián)合槐耳顆粒，另外一組以他克莫司為基礎(chǔ)分別進(jìn)行治療。隨訪得出結(jié)論聯(lián)合治療的CD8+/CD3+T細(xì)胞顯著增多并且甲胎蛋白降低。在肝細(xì)胞癌復(fù)發(fā)時(shí)甲胎蛋白是升高的，由此推斷槐耳顆粒聯(lián)合治療對(duì)于預(yù)防肝細(xì)胞癌復(fù)發(fā)是有效的。[26]槐耳聯(lián)合治療是否可以提高胃腸道腫瘤患者生存率進(jìn)行隨訪實(shí)驗(yàn)，對(duì)于槐耳可能產(chǎn)生得副作用、是否提高患者免疫功能重點(diǎn)分析。共組織2884名患者參與實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明在使用經(jīng)動(dòng)脈化療栓塞治療和125碘粒子植入治療患者中槐耳效果較為理想，尤其是123碘粒子植入患者，并且在使用槐耳治療過程中由于化療產(chǎn)生得不良反應(yīng)相對(duì)降低。[27]3討論經(jīng)過多種實(shí)驗(yàn)論證表明，槐耳具有多靶點(diǎn)抗腫瘤作用，包括抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤血管生成、干擾腫瘤相關(guān)免疫功能、增強(qiáng)化療藥物耐藥性等。并且可以通過調(diào)節(jié)不同腫瘤特定的相關(guān)信號(hào)通路、抑癌基因等間接或直接發(fā)揮其抗腫瘤作用?；倍鳛橛行У目鼓[瘤藥物，未來(lái)還有較大的研究潛力。就目前多數(shù)研究均圍繞槐耳多糖蛋白進(jìn)行，對(duì)于其他成分的作用機(jī)制仍有待研究?，F(xiàn)在槐耳被廣泛應(yīng)用于臨床輔助用藥的抗腫瘤治療中，但是如果需要規(guī)范應(yīng)用于臨床，就需要進(jìn)行大規(guī)模的臨床實(shí)驗(yàn)對(duì)其藥理機(jī)制進(jìn)行深度研究。[1]FitzmauriceC,AbateD,AbbasiN,etal.Global,regional,andnationalcancerincidence,mortality,yearsoflifelost,yearslivedwithdisability,anddisability-adjustedlife-yearsfor29CancerGroups,1990to2017:asystematicanalysisfortheGlobalBurdenofDiseaseStudy.JAMAOncol.2019;5:1749-1768.doi:10.1001/jamaoncol.2019.2996[2]WangKailong,ChenQian,ShaoYingying,YinShuangshuang,LiuCaiyan,LiuYiman,WangRui,WangTao,QiuYuling,YuHaiyang.AnticanceractivitiesofTCMandtheiractivecomponentsagainsttumormetastasis[