中藥制劑含量測(cè)定

中藥制劑含量測(cè)定中藥制劑含量測(cè)定第1頁(yè)樣品處理目標(biāo)第一節(jié)樣品處理1.釋放被測(cè)組分，制成穩(wěn)定試樣2.除去雜質(zhì)，純化3.濃縮或衍生化4.試樣形式符合測(cè)定要求——使其符合所選定分析方法要求中藥制劑含量測(cè)定第2頁(yè)一、樣品粉碎

目標(biāo)——取樣均勻，提取完全粉碎設(shè)備——粉碎機(jī)、研缽、勻漿機(jī)注意：粒度大小適當(dāng)預(yù)防污染或損失中藥制劑含量測(cè)定第3頁(yè)溶劑選擇水、酸水、堿水親水性有機(jī)溶劑：乙醇（酒精）、甲醇（木精）、丙酮親脂性有機(jī)溶劑：石油醚、苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、二氯乙烷二、樣品提取關(guān)鍵——提取完全中藥制劑含量測(cè)定第4頁(yè)1.浸泡提取法冷浸法優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單，適于熱不穩(wěn)定樣品，且提取雜質(zhì)少缺點(diǎn)：費(fèi)時(shí)（12-24h）、費(fèi)溶劑（10-50倍）放置或指定25℃溫浸（40℃~50℃）熱水浸泡（70℃~80℃）

個(gè)別測(cè)定法——等量測(cè)定法全部測(cè)定法——總量測(cè)定法靈寶護(hù)心丹（牛黃、麝香等）中膽酸含量測(cè)定

取本品適量，研細(xì)，取約0.5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，加石油醚（60-90℃）4ml，浸泡1小時(shí)，濾過(guò)，濾渣及濾紙揮去溶劑，放回錐形瓶中，精密加入冰醋酸無(wú)水乙醇溶液（1→10）15ml，搖勻，密塞，稱(chēng)定重量，浸泡12小時(shí)，再稱(chēng)定重量，用冰醋酸無(wú)水乙醇溶液（1→10）補(bǔ)足減失重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。1.浸泡提取法中藥制劑含量測(cè)定第5頁(yè)2.回流提取法加緊溶出速度，省時(shí)（每次提取時(shí)間0.5~2h，提取次數(shù)1~3次）適宜受熱穩(wěn)定藥品適宜較難溶出組分特點(diǎn)采取回流裝置，用單一溶劑或混合溶劑于水浴上加熱回流提取萬(wàn)應(yīng)膠囊（黃連等）中鹽酸小檗堿測(cè)定+HCl-70%乙醇溶液，加熱回流1h中藥制劑含量測(cè)定第6頁(yè)3.連續(xù)回流提取法特點(diǎn)樣品置于索氏提取器中，利用低沸點(diǎn)有機(jī)溶劑進(jìn)行連續(xù)回流提取保和丸（陳皮等）中橙皮甙測(cè)定+甲醇，加熱回流至提取液無(wú)色為止節(jié)約溶劑，提升提取效率適宜受熱穩(wěn)定藥品費(fèi)時(shí)中藥制劑含量測(cè)定第7頁(yè)4.超聲提取法利用超聲波助溶作用進(jìn)行提取。超聲波振蕩器（超聲波清洗器）簡(jiǎn)便

省時(shí)提取率高保濟(jì)丸（厚樸等）中厚樸酚測(cè)定+石油醚（30-60℃），超聲處理（功率500W，頻率33kHz）2次，每次30min中藥制劑含量測(cè)定第8頁(yè)5.超臨界流體萃取法（SFE）以超臨界流體（常見(jiàn)CO2）作溶劑樣品提取新技術(shù)。當(dāng)壓力和溫度超出氣體臨界點(diǎn)時(shí)所形成單一相態(tài)超臨界流體——特殊物質(zhì)狀態(tài)密度d~液體→溶解能力強(qiáng)粘度~氣體→傳質(zhì)快，有利于待測(cè)組分?jǐn)U散表面張力幾乎為0→浸潤(rùn)性能好密度受壓力、溫度影響大→改變對(duì)溶質(zhì)溶解能力，加入甲醇、氯仿、苯等改變極性→提取不一樣極性成份優(yōu)點(diǎn)：速度快、萃取效率高、方法準(zhǔn)確度高、選擇性較高中藥制劑含量測(cè)定第9頁(yè)1.沉淀法二、樣品分離凈化關(guān)鍵——保留有效成份復(fù)方益母草口服液中水蘇堿含量測(cè)定利用雷氏鹽（硫氰酸鉻銨）作沉淀劑，在酸性介質(zhì)中可與大部分有機(jī)堿生成難溶于水配合物與其它雜質(zhì)分離。

中藥制劑含量測(cè)定第10頁(yè)2.蒸餾法適合用于具揮發(fā)性待測(cè)組分，如揮發(fā)油、小分子生物堿、丹皮酚等中藥制劑含量測(cè)定第11頁(yè)3.液—液萃取法直接萃取法萃取劑選擇親脂性有機(jī)溶劑，如苯、氯仿或乙醚弱親脂性溶劑，如乙酸乙酯、正丁醇等屢次萃?。?-4次）調(diào)整水相酸度，提取有機(jī)酸、有機(jī)堿利用鹽析作用，提升提取率中藥制劑含量測(cè)定第12頁(yè)BH+（水相）+In-(水相)BH+·In-（水相）BH+·In-

（有機(jī)相）適合于高度電離有機(jī)酸、堿化合物萃取

水相酸度控制離子對(duì)試劑選擇離子對(duì)萃取法中藥制劑含量測(cè)定第13頁(yè)分離原理：吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠色譜按操作方式：柱色譜、薄層色譜、紙色譜裝柱方法：濕法裝柱、干法裝柱微柱色譜（固相萃?。┲笮。洪L(zhǎng)5～15cm，內(nèi)徑0.5～1cm柱填料：硅膠、氧化鋁、活性炭、聚酰胺、大孔樹(shù)脂、硅藻土、離子交換樹(shù)脂、鍵合相硅膠C8、C18等

4.色譜法（層析法）中藥制劑含量測(cè)定第14頁(yè)制劑中所選被測(cè)成份主要是：

化學(xué)結(jié)構(gòu)已經(jīng)明確有效成份；能大致明確某類(lèi)主要活性物質(zhì)；能反應(yīng)某味主要藥品特征指標(biāo)性成份；劇毒性成份或珍貴藥材成份。第二節(jié)常見(jiàn)含量測(cè)定方法中藥制劑含量測(cè)定第15頁(yè)常見(jiàn)方法：

高效液相色譜法；氣相色譜法；薄層色譜法；紫外可見(jiàn)分光光度法；化學(xué)分析法重量分析法容量分析法中藥制劑含量測(cè)定第16頁(yè)第三節(jié)含量測(cè)定方法驗(yàn)證分析方法驗(yàn)證目標(biāo)

是證實(shí)采取方法適合于對(duì)應(yīng)檢測(cè)要求。需驗(yàn)證分析項(xiàng)目

判別試驗(yàn)、雜質(zhì)檢驗(yàn)、原料藥及制劑中有效成份含量測(cè)定及其它成份測(cè)定驗(yàn)證內(nèi)容

準(zhǔn)確度、精密度、專(zhuān)屬性、檢測(cè)限、定量限、線(xiàn)性、范圍和耐用性中藥制劑含量測(cè)定第17頁(yè)

準(zhǔn)確度是指測(cè)得結(jié)果與真實(shí)值或參考值靠近程度，表示分析方法測(cè)量正確性。

準(zhǔn)確度（Ａccuracy）

因?yàn)椤罢鎸?shí)值”無(wú)法準(zhǔn)確知道，所以，通常采取回收率（%）來(lái)表示。

中藥制劑含量測(cè)定第18頁(yè)長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)要求最少測(cè)定高、中、低三個(gè)濃度，每個(gè)濃度測(cè)定三次，共提供9個(gè)數(shù)據(jù)進(jìn)行評(píng)價(jià)。中藥制劑含量回收率普通為95%~105%，RSD普通應(yīng)為2％以?xún)?nèi)。

用已知純度對(duì)照品做加樣回收測(cè)定，即于已知被測(cè)成份含量供試品中再加入已知純度被測(cè)成份對(duì)照品?；厥章视?jì)算公式為：回收率%=C-AB×100%A供試品所含被測(cè)成份量B加入對(duì)照品量C實(shí)測(cè)值中藥制劑含量測(cè)定第19頁(yè)長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)系指在要求測(cè)試條件下，同一均勻供試品，經(jīng)多樣取樣測(cè)定所結(jié)果之間靠近程度。精密度（precision）在藥品分析中，常見(jiàn)相對(duì)偏差(RD)、標(biāo)準(zhǔn)偏差（S）和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）表示。最少6次結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)精密度是考查分析方法在不一樣時(shí)間、操作人員、試驗(yàn)室，所取得結(jié)果之間重現(xiàn)性和重復(fù)性。中藥制劑含量測(cè)定第20頁(yè)長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)1.重復(fù)性在較短時(shí)間間隔內(nèi)，在相同操作條件下由同一分析人員測(cè)定所得結(jié)果精密度。精密度驗(yàn)證內(nèi)容包含重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性2.中間精密度在同一試驗(yàn)室，因?yàn)樵囼?yàn)室內(nèi)部條件改變，如不一樣時(shí)間由不一樣分析人員用不一樣設(shè)備測(cè)定所得結(jié)果精密度。3.重現(xiàn)性在不一樣試驗(yàn)室由不一樣分析人員測(cè)定結(jié)果精密度。中藥制劑含量測(cè)定第21頁(yè)長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)是指在樣品介質(zhì)中有其它組分（如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等）可能存在下，采取方法能準(zhǔn)確測(cè)定出被測(cè)物特征。專(zhuān)屬性（specificity）中藥制劑含量測(cè)定第22頁(yè)長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)檢測(cè)限（limitofdetection,LOD）試樣中被測(cè)物能被檢測(cè)出最低濃度或量。中藥制劑含量測(cè)定第23頁(yè)長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)定量限（limitofquantitation,LOQ）是指在確保含有一定準(zhǔn)確度和精密度前提下，分析方法能夠測(cè)定出樣品中藥品最低量。中藥制劑含量測(cè)定第24頁(yè)長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)線(xiàn)性