白血病淋巴瘤免疫分型

白血病淋巴瘤免疫分型1目前一頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)2流式細(xì)胞術(shù)的基本概念流式細(xì)胞術(shù)（FlowCytometry,簡(jiǎn)稱FCM）是一種可以快速、準(zhǔn)確、客觀，并且同時(shí)檢測(cè)單個(gè)微粒（通常是細(xì)胞）的多項(xiàng)特性的技術(shù)，同時(shí)可以對(duì)特定群體加以分選研究對(duì)象為生物顆粒，如各種細(xì)胞、微生物及人工合成微球等研究的微粒特性包括多種物理及生物學(xué)特征，并加以定量目前二頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)3散射光信號(hào)和熒光信號(hào)前向角散射光（FSC,ForwardScatter） 入射激光的前向散射光信號(hào) 細(xì)胞相對(duì)大小及其表面積側(cè)向角散射光（SSC,SideScatter） 入射激光90角的散射光信號(hào) 細(xì)胞粒度及細(xì)胞內(nèi)相對(duì)復(fù)雜性熒光素與特異抗體結(jié)合，熒光抗體與細(xì)胞抗原結(jié)合越多，產(chǎn)生的熒光信號(hào)越強(qiáng)。目前三頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)4CD45/SS示意圖目前四頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)5抗原分布

表面,胞漿,核內(nèi)是共同檢測(cè)還是分別檢測(cè)?表面胞漿核內(nèi)CD3,CD4,CD8,tetramercytokinesDNACD3,4,8,tetramer+CytokinesCD3,4,8,tetramer+DNACytokines+DNACD3,4,8,tetramer+Cytokines+DNA目前五頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)6設(shè)門(mén)08-03307目前六頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)7設(shè)門(mén)全部細(xì)胞門(mén)內(nèi)細(xì)胞08-03307目前七頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)8目前八頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)9血液腫瘤分類(lèi)進(jìn)程目前九頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)10白血病免疫分型的理論基礎(chǔ)

白血病/淋巴瘤免疫分型采用的抗原標(biāo)志是表達(dá)于正常造血細(xì)胞不同分化發(fā)育階段的分化抗原。雖然是惡性腫瘤細(xì)胞，但仍能表達(dá)正常血細(xì)胞所具有的抗原，因而仍可依據(jù)其抗原的表達(dá)譜對(duì)白血病/淋巴瘤進(jìn)行免疫分型。為了正確分析白血病/淋巴瘤細(xì)胞，必須對(duì)正常造血細(xì)胞分化抗原的表達(dá)模式有充分的了解。只有熟悉正常細(xì)胞的抗原表達(dá)模式，才能辨認(rèn)白血病/淋巴瘤細(xì)胞的存在。目前十頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)11細(xì)胞類(lèi)型鑒定Borowitzetal(1993)AJCP100:534-40.Steltzeretal(1993)AnnNYAcadSci667:265-280目前十一頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)12CD45/SS示意圖正常骨髓細(xì)胞血液腫瘤細(xì)胞老化粒細(xì)胞、噬酸細(xì)胞早幼—成熟粒細(xì)胞M3、CML單核細(xì)胞M4、M5LGL淋巴細(xì)胞CLL、ALL、CLD正常前體細(xì)胞M0、M1、M2、嗜堿性粒細(xì)胞M4、M5、ALL成熟紅細(xì)胞、血小板M6、M7、MM細(xì)胞碎片Pre-B-ALL

非血液來(lái)源細(xì)胞目前十二頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)13B淋巴細(xì)胞分化與抗原表達(dá)關(guān)系圖WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine目前十三頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)14T淋巴細(xì)胞分化與抗原表達(dá)關(guān)系圖WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine目前十四頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)15粒細(xì)胞分化與抗原表達(dá)關(guān)系圖WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine目前十五頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)16單核細(xì)胞分化與抗原表達(dá)關(guān)系圖WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine目前十六頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)17非腫瘤T淋巴細(xì)胞表型目前十七頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)18非腫瘤B淋巴細(xì)胞表型目前十八頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)19非腫瘤粒細(xì)胞、單核細(xì)胞表型目前十九頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)20非腫瘤粒細(xì)胞、單核細(xì)胞表型目前二十頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)21白血病免疫分型根據(jù)白血病細(xì)胞表達(dá)的系列相關(guān)抗原，確定其系列來(lái)源。如：淋系T/B、粒單系、紅系、巨核系等。根據(jù)白血病細(xì)胞表達(dá)的系列分化其相關(guān)抗原進(jìn)一步分型。如：早前B，前B，普通B…目前二十一頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)22初治急白分型AcuteLeukemia–BlastsPresent>20%MyeloidLineageCD13+and/orCD117+and/orCD33+CD7+and/orCD2+CD19+T-LineageB-LineageMyeloid,noorminimalmaturationCD34+/-CD117+/-HLADR+CD56+CD15-/+CD11b-,CD14-PromyeloidCD15+/-CD117+/-CD34-HLADR-CD11b-,CD14-CD14+CD4+/-HLADR+CD15+CD11b+Myelomonocytic&Monocytic紅系和巨核系的鑒定需要另外增加二線抗體。如:CD71、GPA、CD41、CD61目前二十二頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)23AML-M3目前二十三頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)24AML-M4目前二十四頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)25AML-M4目前二十五頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)26初治急淋分型AcuteLeukemia–BlastsPresent>20%CD7+and/orCD2+CD19+T-LineageB-LineageCommonThymocyteMatureThymocyteCD2+CD5+DualCD4+/CD8+sCD3-CD2+CD5+CD4+orCD8+sCD3+CD2-/+CD5-/+sCD3-CD4-CD8-TdT+CD10-clg-sig-Pre-BCD10+cig+TdT+sig-Bsig+CD10+/-clg+/-TdT-CommonTdT+CD10+clg-sig-EarlyThymocyteEarlyB-Precursor目前二十六頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)27B-ALL目前二十七頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)28Pre-BALL目前二十八頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)29

白血病免疫分型的價(jià)值確定ALL的細(xì)胞類(lèi)型（B細(xì)胞或T細(xì)胞）和ALL的分化階段。鑒定AML的特征。對(duì)形態(tài)學(xué)上未分化的急性白血病有助于鑒定細(xì)胞類(lèi)型。診斷一些少見(jiàn)類(lèi)型的白血病。如：M6、M7、M0等。目前二十九頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)30多發(fā)性骨髓瘤（MM）

多發(fā)性骨髓瘤是漿細(xì)胞異常增生性疾病。正常漿細(xì)胞為CD38+/CD45dim/-，使用CD38/CD45雙標(biāo)記檢測(cè)外周血和骨髓標(biāo)本，可以準(zhǔn)確劃定漿細(xì)胞群。通常使用CD38和CD45，結(jié)合輕鏈檢查，對(duì)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行分析。另外，正常漿細(xì)胞的表面標(biāo)記為CD19+/CD56-，而多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞通常為CD19-/CD56+。CD138目前認(rèn)為是漿細(xì)胞最特異的指標(biāo)。這樣，使用流式細(xì)胞儀對(duì)外周血或骨髓標(biāo)本進(jìn)行多參數(shù)分析，并計(jì)算異常漿細(xì)胞含量，對(duì)于多發(fā)性骨髓瘤的診斷和治療評(píng)估具有重要意義。

目前三十頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)31MM目前三十一頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)32流式免疫表型診斷血液腫瘤的劣勢(shì)1、纖維化、硬化的骨髓可能沒(méi)有足夠的細(xì)胞分析。2、細(xì)胞太多聚集或成團(tuán)也可能沒(méi)有足夠的分析細(xì)胞。3、硬化的組織也很難得到足夠的分析細(xì)胞。4、組織結(jié)構(gòu)關(guān)系、形態(tài)關(guān)系丟失。5、比例太低的單克隆B細(xì)胞很難檢測(cè)到。目前三十二頁(yè)\總數(shù)三十三頁(yè)\編于十二點(diǎn)33流式免疫表型診斷血液腫