kj植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)

專題復(fù)習(xí)專題2指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的原理和方法，通過某種工程學(xué)手段，在細(xì)胞整體水平或細(xì)胞器水平上，按照人們的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品的一門綜合科學(xué)技術(shù)。細(xì)胞工程細(xì)胞工程應(yīng)用的原理和方法細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)細(xì)胞整體水平或細(xì)胞器水平按照人們的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品概念分類植物細(xì)胞工程研究的目的研究的水平動物細(xì)胞工程前者是細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平上生物技術(shù),后者是分子水平上的生物技術(shù)?？寺《嗬蜓蚣夹g(shù)是

水平上的技術(shù)，培育抗蟲棉是

水平上的技術(shù)。細(xì)胞工程與基因工程相比：細(xì)胞分子思考:植物細(xì)胞工程的理論基礎(chǔ)是什么？通常采用的技術(shù)手段有哪些？一、植物細(xì)胞工程所采用技術(shù)的理論基礎(chǔ)植物細(xì)胞工程通常采用的技術(shù)手段植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交植物細(xì)胞的全能性（一）植物組織培養(yǎng)技術(shù)實驗：

胡蘿卜的組織培養(yǎng)試管苗大規(guī)模培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基定義：含有一定營養(yǎng)成分，供組織培養(yǎng)植物生長的基質(zhì)無機營養(yǎng)成分：C，H，O大量元素及部分微量元素有機營養(yǎng)成分①含N物質(zhì)：包括維生素和氨基酸②碳源：2%—5%的蔗糖③瓊脂：起支持作用④相關(guān)激素：生長素，細(xì)胞分裂素和赤霉素PH值：5.0－6.0比較脫分化再分化這兩個過程脫分化再分化是否有光結(jié)果無有形成愈傷組織形成根、芽【實驗胡蘿卜的組織培養(yǎng)討論】

1.在組織培養(yǎng)實驗中，為什么要強調(diào)所用器械的滅菌和實驗人員的無菌操作？提示：植物組織培養(yǎng)中用到的培養(yǎng)基含有豐富的營養(yǎng)成分，有利于培養(yǎng)物的生長，然而各種雜菌同樣也可以在上面迅速生長，所以植物組織培養(yǎng)過程中污染現(xiàn)象經(jīng)常發(fā)生。培養(yǎng)基一旦被污染，迅速生長的各種雜菌不但會和培養(yǎng)物爭奪營養(yǎng)，而且這些雜菌生長的過程中會生成大量對培養(yǎng)物有害的物質(zhì)，導(dǎo)致培養(yǎng)物迅速死亡。造成培養(yǎng)基污染的因素有很多，一般包括：外植體帶菌、培養(yǎng)瓶和各種器械滅菌不徹底、操作人員操作不規(guī)范等。所以在組織培養(yǎng)實驗中用到的植物材料和各種器械都要進行徹底地滅菌，實驗人員操作一定要規(guī)范，避免帶入雜菌。2.在本實驗中，切取胡蘿卜塊根時強調(diào)要切取含有形成層部分，原因是這部分容易誘導(dǎo)形成愈傷組織。請思考一下，胡蘿卜的其他部分（如莖、葉、花），是否也能培養(yǎng)成小植株，你能用實驗的方法進行驗證嗎？提示：胡蘿卜的其他部分（如莖、葉、花）也能培養(yǎng)再生形成小植株，只是誘導(dǎo)愈傷組織比較困難。3.請根據(jù)上面的實驗過程，概括出植物組織培養(yǎng)技術(shù)的流程簡圖。

提示：歸納：

１植物組織培養(yǎng)的概念在無菌和人工控制的條件下將離體的植物器官、組織、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織、芽叢，最終形成完整的植株。理解:它是植物細(xì)胞工程的主要技術(shù)理論基礎(chǔ)：細(xì)胞全能性細(xì)胞的全能性(1)、概念1）受精卵生殖細(xì)胞體細(xì)胞＞＞：生物體的細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整個體的潛能的特性，叫做細(xì)胞的全能性。(2)、原因(3)、全能性的比較：從理論上講，每個細(xì)胞都包含該物種的全部遺傳物質(zhì)（全部基因），所以每個活細(xì)胞都應(yīng)具有全能性。2）植物細(xì)胞全能性一般比動物細(xì)胞強過程離體的植物器官、組織或細(xì)胞愈傷組織根、芽植物體外植體脫分化植物激素：細(xì)胞分裂素、生長素再分化2、植物組織培養(yǎng)（1）、外植體：用于離體培養(yǎng)的植物器官或組織片段。（2）、愈傷組織：細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。（3）、脫分化：由高度分化的植物器官、組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程。（4）、再分化：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織重新分化成根或芽等器官的過程。植物組織培養(yǎng)關(guān)鍵詞：外植體、脫分化、再分化、愈傷組織無菌操作、細(xì)胞離體、一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件必要條件：思考:（1）離末體的器官能、組織或豪細(xì)胞如果味不進行脫核分化處理澡，能否培敘養(yǎng)成完整富植物體？（2）耍決定植活物細(xì)胞鎮(zhèn)脫分化膽、再分覽化的關(guān)爪鍵因素順是什么袖？激素誘矩導(dǎo)和營三養(yǎng)物質(zhì)不能（3）、笛激素用量限的比例影稠響實驗結(jié)突果：生長素用鍬量比細(xì)胞高分裂素用第量，比值非高時，有隱利于根的責(zé)分化、抑鏈制芽的形耍成；比值悄低時，有至利于芽的懲分化，抑針制根的形玩成；比值珠適中時，飼促進愈傷踏組織的生盜長。1、有關(guān)息全能性的析表述中，齡不正確的挽是（罷）Ａ．受精壘卵在自然肚條件下能虜使后代細(xì)干胞形成完整個體拋，因此些全能性臨最高Ｂ．生物憶體內(nèi)細(xì)胞晶由于分化巴全能性不目能表達Ｃ．卵細(xì)旦胞和受精鈔卵一樣，酷細(xì)胞未分起化，全能性很高Ｄ．植物梳細(xì)胞離體郵培養(yǎng)在一診定條件下級能表現(xiàn)出全能性自我評價C2、在疤一個生蜻物體內(nèi)賭，細(xì)胞番沒有表吐現(xiàn)出全沾能性，擱原因是擠（川）Ａ．細(xì)胞沃失去了全膚能性填Ｂ．陜細(xì)胞中的序基因部分騰丟失Ｃ．細(xì)胞巨中的基因過選擇性表處達視Ｄ潮．細(xì)胞中刪的基因變情異不同C番茄與根馬鈴薯唇同屬茄膊科植物役，但不早是同屬爪的植物禁。番茄望的果實壘和馬鈴律薯的塊局莖是我卸們經(jīng)常肝食用的肺蔬菜。人們曾經(jīng)狡有這樣一裝個夢想：氣讓一株植山株地上部圓分結(jié)番茄憐，地下部鄉(xiāng)豐分長土豆沈。這個夢節(jié)想可能實小現(xiàn)嗎？一個夢擾想?（二）約、植物衡體細(xì)胞擋雜交技轟術(shù)（1）距過程細(xì)胞壁匪的阻礙要想讓喊兩個來喪自不同災(zāi)植物的區(qū)體細(xì)胞削融合在紹一起，筍遇到的寄第一個夏障礙是涂什么？2有沒有一劑種溫和的朋去除細(xì)胞冰壁的方法撐？有,用酶纖維素桌酶和果證膠酶去胞除細(xì)胞階壁（3）已如果兩扎個來源抽不同的硬原生質(zhì)瓣體發(fā)生解融合形笛成了雜熟種細(xì)胞屢，下一歉步該對夢此細(xì)胞艇做何種些處理？植物組搖織培養(yǎng)培育成焰新的植催物體過程2誘駕導(dǎo)原生質(zhì)陳體融合是關(guān)鍵脾環(huán)節(jié)根據(jù)的撈原理是叮:細(xì)胞筒膜的流句動性方法:物怪理離心.振腥動.電激化學(xué):聚乙二牲醇(P竟EG)耽作誘導(dǎo)植劑成功標(biāo)榮志是:雜種細(xì)疼胞產(chǎn)生楊了新的固細(xì)胞壁植物A細(xì)胞植物B細(xì)胞去壁原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體融合融合體再生壁雜種細(xì)腦胞脫分化愈傷組織雜種植株去壁的碑常用方列法：酶解法（纖維素酶、果膠酶等）原生質(zhì)體希融合方法：物理法：離心、振動、電刺激等化學(xué)法：聚乙二醇（PEG）植物體蹤蝶細(xì)胞雜懷交過程示意殼圖再分化1、當(dāng)漠植物細(xì)被胞脫離動了原來姿所在植座物體的參器官或饑組織而搖處于離寬體狀態(tài)謊時，下豬列有可唯能使其榨表現(xiàn)出柜全能性林，發(fā)育丘成完整需的植株危的是（留）A、細(xì)適胞分裂漂素影B、紋生長素C、一定甜的營養(yǎng)物釘質(zhì)攪D、以垮上三者均淡是2、細(xì)戴胞工程籍是一門哄綜合科埋學(xué)技術(shù)除。下列誕哪項技桑術(shù)不屬耀于細(xì)胞姨工程（否）A、有沙性雜交桃B、體旅細(xì)胞雜封交C、組盡織培養(yǎng)圓D、細(xì)敏胞核移戚植鞏固練習(xí)DA3、在生層物體內(nèi)眾，細(xì)胞沒冶有表現(xiàn)出芝全能性，窩而是分化滅為不同的拍組織、器藍(lán)官，是因扮為（攀）稅A、細(xì)胞趙喪失了全雅能性B、基葛因的選汽擇性表革達弄C踩、不同濤的細(xì)胞陷內(nèi)基因很不完全告相同講D、屯在個體律發(fā)育的純不同時賢期，細(xì)仁胞內(nèi)的御基因發(fā)葬生了變煌化4、植缺物體細(xì)代胞雜交礙尚未解虹決的問享題是（除）破A、態(tài)去掉細(xì)震胞壁，蛙分離出患有活力糠的原生請質(zhì)體葵B、士讓雜種拉植物按斗照人們調(diào)的需要窗表現(xiàn)出私親代的灑優(yōu)良性緞狀尿C、爸將雜種它細(xì)胞培沉育成植葵株鳴D、南尚未培捐育出屬需間雜種須植物BB6、不稿能人工東誘導(dǎo)原蓮生質(zhì)體隸融合的津方法是合（頂）A、振爸動斷B、葬電剌激丈C、P獅EG試掙劑彩D、重訪壓D5、在生烈物體的所喝有細(xì)胞中給，全能性慕最高的是布（泊）A、卵細(xì)潮胞B戀、植物花哈粉C吉、體細(xì)胞電D爆、受精卵D植物體煉細(xì)胞雜冷交技術(shù)斧流程圖凡進行總窗結(jié)，重退點理解煤以下內(nèi)軋容。①流程唯圖中為了寇簡化，僅役畫了一個借馬鈴薯的柏原生質(zhì)體壇與一個番烤茄的原生牲質(zhì)體之間剃的融合，撲可真正在哲實際操作任過程中，政是把許多味馬鈴薯的市原生質(zhì)體永和許多番殲茄的原生挖質(zhì)體放在云一起，讓鋪它們自由槽融合，再途從中篩選聞出所需的野雜種細(xì)胞博。②由于宇不同種的兇細(xì)胞其細(xì)竿胞膜的特蜻點不一樣奶，如不作離任何處理其，把它們腳放在一起父，讓它們貸自然融合鐮是不可能科的，所以讀原生質(zhì)體臥間的融合松必須要人賀工誘導(dǎo)。（2）植政物體細(xì)胞鞭雜交技術(shù)捉的意義克服遠(yuǎn)源燥雜交不親和的障礙乞，培育任出自然焦界中沒春有的、掉具有優(yōu)厚良品質(zhì)子的新品竭種。成果（一）傍思考與探碧究1.為什蒙么“番茄擊—馬鈴薯億”超級雜族種植株沒律有如科學(xué)部家所想像醒的那樣，非地上長番歇茄、地下符結(jié)馬鈴薯狼？提示：1殖978年傷，梅爾徹扒斯（Me穗lche膠rs）等繪人首次獲軋得了馬鈴梯薯與番茄允的屬間體秒細(xì)胞雜種哪。他們將堅培育的二碌倍體馬鈴攏薯品系和敲番茄葉片檔細(xì)胞進行鮮融合，所釣產(chǎn)生的雜嚇交株被稱新為“馬鈴音薯番茄”寧。像大多墊數(shù)雜種一部樣，雜交掉株同時具健有馬鈴薯飲和番茄的答形態(tài)特征崖。其中一途些植株形曲成了“類汗似塊莖的燦生殖根”攝，但是沒稅有產(chǎn)生可間結(jié)實的花舅、果實以叨及真正意左義上的塊嚴(yán)莖。到目遷前為止“想馬鈴薯—糧番茄”一運類的體細(xì)咸胞雜交植嗎物還不能參產(chǎn)生經(jīng)濟捉效益，但揚是其研究扇價值不可椒忽視。至于馬鈴端薯—番茄沾沒有像人投們預(yù)想的詠那樣地上無長番茄、過地下結(jié)馬攏鈴薯，主紀(jì)要原因是較：生物基型因的表達商不是孤立竟的，它們年之間是相尤互調(diào)控、蜂相互影響嬸的，所以頁馬鈴薯—差番茄雜交搭植株的細(xì)測胞中雖然角具備兩個謹(jǐn)物種的遺史傳物質(zhì)，岡但這些遺愁傳物質(zhì)的撇表達受到單相互干擾鵲，不能再帝像馬鈴薯閥或番茄植奔株中的遺應(yīng)傳物質(zhì)一友樣有序表呈達，雜交深植株不能蔬地上長番因茄、地下條結(jié)馬鈴薯喜就是很自紀(jì)然的了。2.自然可界中有一譽種含有葉腦綠體的原服生動物─依─眼蟲，值說明植物票的細(xì)胞器消同樣可以皇在某些動泳物細(xì)胞中窗存活，請品探討：動腸物細(xì)胞與脊植物細(xì)胞犁之間可以互實現(xiàn)雜交濱嗎？如果研理論上可謝行，請設(shè)慈計出具體掏實驗方案倘。提示：虧根據(jù)眼私蟲的特劫點，動聾物細(xì)胞尊和植物仍細(xì)胞之眠間在理憑論上是悲可以實沾現(xiàn)雜交哨的。具宇體的實糊驗方案半可以設(shè)痛計如下有：1、關(guān)于弟愈傷組織輔形成過程妹的正確敘刪述是（打）A、愈傷蠻組織的形壩成是離體朗植物細(xì)胞斗分化的結(jié)艇果B、愈傷裙組織的形敏成是離體邪植物細(xì)胞飲分裂的結(jié)謹(jǐn)果C、愈傷組瀉織的形吉成是離切體動物貿(mào)細(xì)胞分鹽化的結(jié)醉果D、愈傷組織課的形成是誦離體植物社細(xì)胞脫分掘化的結(jié)果2、植撇物細(xì)胞墻融合完懲成的標(biāo)磨志的是覽（腦）A、產(chǎn)判生新的候細(xì)胞壁銜B、細(xì)沙胞膜發(fā)脂生融合C、細(xì)胞慌質(zhì)發(fā)生融塵合谷D盾、細(xì)胞核仇發(fā)生融合DA3、若半用“①連②員③④”表示植遠(yuǎn)物組織計培養(yǎng)的暫過程。彩請回答灣：（1）蚊①表滔示，被培養(yǎng)冶成為④的根本方原因是（2）顧②表座示，其細(xì)胞訂特點是。脫分化脫分化離體的植忙物組織器紡官、組織案或細(xì)胞植物細(xì)裹胞具有疼全能性具有分研生能力版的薄壁荷細(xì)胞愈傷組織復(fù)習(xí)題：4．植物勸細(xì)胞表現(xiàn)使出全能性吧的必要條腎件是（蟻）映A.給予邪適宜的營斜養(yǎng)和外界捕條件

B策.導(dǎo)入其捧他植物細(xì)催胞的基因刮C.脫晝離母體后鉗，給予適溉宜的營養(yǎng)脖和外界條煙件

D.廉將成熟篩棚管的細(xì)胞匠核移植到姻去核的卵端細(xì)胞內(nèi)5．細(xì)胞希具有全能厘性的原因插是偽（）場A.生板物體細(xì)胞冤具有使后遍代細(xì)胞形椅成完整個愉體的潛能貪B.生炒物體的每產(chǎn)一個細(xì)胞道都具有全警能性

C察.生物體應(yīng)的每一個始細(xì)胞都含爬有個體發(fā)竄育的全部余基因

D帶.生物體叼的每一個梅細(xì)胞都是宜由受精卵體發(fā)育來的6.下昆列植物塞細(xì)胞全歡能性最糾高的是某（剛）

A陽.形成屠層細(xì)胞嗽B.轟韌皮部告細(xì)胞C.木質(zhì)利部細(xì)胞拆D.葉肉最細(xì)胞CCA7．植令物組織琴培養(yǎng)過魂程中的俊脫分化像是指薯（婚）筆A.敬植物體粒的分生筍組織通協(xié)過細(xì)胞近分裂產(chǎn)鞏生新細(xì)濾胞

B調(diào).未成林熟的種程子經(jīng)過接處理培丟育出幼油苗的過和程衣C.植牙物的器誰官、組希織或細(xì)她胞，通屢過離體喪培養(yǎng)產(chǎn)畢生愈傷濱組織的樣過程速D.取駱植物的信枝芽培糖育成一揮株新植擴物的過擦程8．植秀物組織橫培養(yǎng)是印指探（峽）

A烤．離體堪的植物晶器官或技細(xì)胞培奏育成愈幕傷組織住B．冠愈傷組藏織培育紐奉成植株幕C．棄離體的噴植物器掏官、組嚼織或細(xì)護胞培養(yǎng)昨成完整震植物體帝D．哀愈傷組囑織形成射高度液株泡化組佛織CCCD9．植物愈體細(xì)胞雜茫交要先去膀除細(xì)胞壁貓的原因是提（頭）

A立.植物體棒細(xì)胞的結(jié)阻構(gòu)組成中探不包括細(xì)暖胞壁

B篩.細(xì)胞壁刊使原生質(zhì)主體失去活絡(luò)力

C.抄細(xì)胞壁阻牙礙了原生乖質(zhì)體的融底合

D墓.細(xì)胞壁煉不是原生撇質(zhì)的組成谷部分10．礦植物體艇細(xì)胞雜擇交的目桐的中錯射誤的是近（賞）總A.把染兩個植衣物體的包優(yōu)良性能狀集中諒在雜種羊植株上鹽B.販獲得雜頸種植株酸C.忍克服遠(yuǎn)意源雜交鹿不親和但的障礙強D.華實現(xiàn)原描生質(zhì)體孫的融合再見9、靜夜奪四無鄰春，荒居泡舊業(yè)貧側(cè)。。4月-2陡34月-2作3Wed司nes嶄day右,A爬pri抖l2星6,賓202忘310、雨中黃曉葉樹，燈麥下白頭人艇。。01:2縫2:0201:認(rèn)22:考0201:乞224/26障/202譜31:峰22:0猛2AM11、以我營獨沈久制，愧君猾相見頻鬼。。4月-2雀301:2捕2:0201:本22Apr熱-2326-迎Apr章-2312、故人江紅海別，幾辱度隔山川錢。。01:2每2:0201:2類2:0201:2窯2Wedn憤esda顧y,A恭pril械26,政202齊313、乍見胡翻疑夢環(huán)，相悲南各問年航。。4月-2恒34月-2侄301:尖22:逼0201:2澡2:02Apri宮l26棟,20婆2314、他鄉(xiāng)生愚白發(fā)，舊宅國見青山高。。26四衛(wèi)月20蠟231:2享2:0兆2上勤午01:怎22:斷024月-2供315、比不了良得就不比乏，得不到樓的就不要肆。。。四月2削31:2軌2上壟午4月-2勤301:晨22Apri毯l26私,20奸2316、行動出宵成果，工未作出財富萬。。202變3/4將/26濟1:紐奉22:蔑0201:2聽2:0226熄Apr柔il賠202炸317、做前，量能夠環(huán)視傘四周；做規(guī)時，你只渠能或者最忙好沿著以葉腳為起點莖的射線向金前。。1:22緞:02腫上午1:2流2上急午01:2麻2:024月-炭239、沒有失盒敗，只有夏暫時停止擾成功！。4月-2熊34月-附23Wed桂nes餡day摘,A益pri宏l2晝6,罷202噴310、很多該事情努紅力了未惕必有結(jié)辛果，但框是不努潤力卻什較么改變距也沒有尤。。01:秀22:粱0201:2太2:0201:益224/26乒/202穩(wěn)31:變22:0麗2AM11、成功憶就是日氣復(fù)一日前那一點越點小小市努力的母積累。屋。4月-2忽301:隔22:戀0201:感22Apr-院2326-枝Apr撓-2312、世間成巾事，不求孤其絕對圓安滿，留一勒份不足，盈可得無限厚完美。。01:臨22:汽0201:2材2:0201:2架2Wedn脖esda蜜y,A禽pril價26,籮202娘313、不知孝香積寺政，數(shù)里來入云峰拌。。4月-顧234月-2伍301:脹22:頌0201:汗22:賓02Apri篇l26疲,20輔2314、意志堅偽強的人能屋把世界放悄在手中像盼泥塊一樣火任意揉捏腫。26四葡月20斧231:2板2:0逐2上乞午01:兼22:遙024月-2慘315、楚塞纏三湘接第，荊門輝九派通您。。。四月先231:2宣2上快午4月-2膜301:2輸2Apri慰l26器,20掘2316、少年十湯五二十時添，步行奪牢得胡馬騎密。。202拐3/4巧/26毫1:何22:負(fù)0201:2筑2:0226驗Apr坑il浮202擾317、空山凱新雨后漿，天氣奮晚來秋往。。1:22歸:02乏上午1:2裹2上獻午01:2來2:024月-2洪39、楊柳散唉和風(fēng)，青紗山澹吾慮飾。。4月-捐234月-越23Wedn諒esda敏y,A挨pril帶26,給202海310、閱讀兵一切好如書如同案和過去宜最杰出麻的人談