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標準曲線的制作與運用第1頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用一、標準蛋白質(zhì)溶液的配制實驗指導(dǎo):P160具體方法:精確稱取結(jié)晶牛血清蛋白10mg,加水溶解并定容至100ml,即為100μg/ml的標準蛋白質(zhì)溶液第2頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用二、不同濃度梯度的標準蛋白質(zhì)溶液的配制或5min或620nm第3頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用二、不同濃度梯度的標準蛋白質(zhì)溶液的配制注意:
1、各管振蕩程度盡量一致
2、振蕩后放置3~4min3、在595或620nm處比色,記錄吸光度(OD值)第4頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用三、標準曲線的制作(一)打開Excel第5頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用三、標準曲線的制作(二)進入Excel工作表狀態(tài)第6頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用三、標準曲線的制作(三)在Excel工作表輸入數(shù)據(jù)和說明文字第7頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用三、標準曲線的制作(四)作圖:1、用鼠標選中數(shù)據(jù)第8頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用三、標準曲線的制作(四)作圖:2、選中圖表類型第9頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用三、標準曲線的制作(四)作圖:3、點“圖表類型”對話框的“下一步”,出現(xiàn)如下對話框第10頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用三、標準曲線的制作(四)作圖:4、點對話框的“系列”選項第11頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用三、標準曲線的制作(四)作圖:5、嵌入系列(圖表)名稱第12頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用三、標準曲線的制作(四)作圖:6、點“下一步”操作,出現(xiàn):第13頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用三、標準曲線的制作(四)作圖:7、再點“下一步”操作,出現(xiàn):第14頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用三、標準曲線的制作(四)作圖:8、點“完成”操作,散點圖在工作表中出現(xiàn):第15頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用三、標準曲線的制作(四)作圖:9、用鼠標左鍵選中作圖點第16頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用三、標準曲線的制作(四)作圖:10、選定作圖點后,再點鼠標右鍵并選中“添加趨勢線”:第17頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用三、標準曲線的制作(四)作圖:11、單擊“添加趨勢線”第18頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用三、標準曲線的制作(四)作圖:12、確定第19頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用三、標準曲線的制作(五)求直線方程:1、選中趨勢線,點鼠標右鍵并選中“趨勢線格式”:第20頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用三、標準曲線的制作(五)求直線方程:2、點“趨勢線格式”,在下圖的“選項”中選“顯示公式”和“R的平均值”:第21頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用三、標準曲線的制作(五)求直線方程:3、確定注:R2至少要達到0.999以上第22頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用四、標準曲線的運用將所測得“吸光度”代入“直線方程”的y項,利用Excel的計算功能即可方便求出X項的“蛋白質(zhì)濃度”:換算公式:X=(Y-0.0005)/0.0075第23頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用四、標準曲線的運用如何用Excel求“蛋白質(zhì)濃度”第24頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用四、標準曲線的運用如何用Excel求“蛋白質(zhì)濃度”第25頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用四、標準曲線的運用如何用Excel求“蛋白質(zhì)濃度”第26頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用四、標準曲線的運用如何用Excel求“蛋白質(zhì)濃度”第27頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用四、標準曲線的運用如何用Excel求“蛋白質(zhì)濃度”第28頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用四、標準曲線的運用如何用Excel求樣本“蛋白質(zhì)濃度”的平均值第29頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用四、標準曲線的運用如何用Excel求樣本“蛋白質(zhì)濃度”的平均值第30頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用四、標準曲線的運用如何用Excel求樣本“蛋白質(zhì)濃度”的平均值第31頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用四、標準曲線的運用如何用Excel求樣本“蛋白質(zhì)濃度”的平均值第32頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用四、標準曲線的運用如何用Excel求樣本“蛋白質(zhì)濃度”的平均值第33頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制作與運用四、標準曲線的運用如何用Excel求樣本“蛋白質(zhì)濃度”的平均值第34頁,共37頁,2023年,2月20日,星期一標準曲線的制
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